用头孢西丁三相试验检测大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的质粒AmpC酶

目的：检测质粒介导的持续高产AmpC酶在大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中的携带率，为临床治疗提供指导。方法：采用头孢西丁纸片药敏试验（K-B法）作AmpC酶的初筛试验，头孢西丁三相试验间接法作AmpC酶的确证试验。结果：在检测的86株菌中，有9株菌K-B法初筛结果为阳性。在这9株菌中经头孢西丁三相试验确证有5株产AmpC酶，阳性率为5.8%。其中大肠埃希菌3株，肺炎克雷伯菌2株。结论：头孢西丁K-B法筛选试验结合头孢西丁三相试验可准确检出质粒介导的AmpC酶，可用于临床常规检测。     

超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的耐药性

目的了解超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性、耐药特点，指导临床用药。方法采用纸片确证法检测65株产ESBLs菌并对其体外抗生素耐药性作初步研究。结果ESBLs总阳性率为37．4％，大肠埃希菌的ESBLs的阳性率为44．1％，肺炎克雷伯菌的ESBLs的阳性率为31．1％。产ESBLs菌株对三代头孢的耐药率明显高于不产酶株。大肠埃希菌对阿米卡星的耐药率较肺炎克雷伯菌低，肺炎克雷伯菌对头孢西丁、头孢吡肟的耐药率较大肠埃希菌低。结论治疗ESBLs菌引起感染，应用亚胺培南、含β-内酶胺酶抑制剂类抗生素及其药敏试验显示敏感的有效药物。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及药敏结果分析

目的:了解本院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和耐药情况。方法:用确证试验对从临床分离的219株大肠埃希菌和73株肺炎克雷伯菌做ESBLs检测,ATB自动细菌分析仪做药敏试验。结果:219株大肠埃希菌检出产ESBLs94株,检出率为42.9%。73株肺炎克雷伯菌检出产ESBLs30株,检出率为41%。产ESBLs与非产ESBLs菌株的耐药率差异有显著性。结论:本院分出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs严重,产酶菌株耐药率很高,应引起临床高度重视。     

三种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β—内酰胺酶的效果比较

用纸片扩散初筛试验从384株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出73株超广谱β-内酰胺酶（ESBL）可疑株,同时用纸片扩散确证试验、双纸片协同试验和VITEK全自动微生物分析仪进行ESBL测定比较,结果 经确证32株大肠埃杀菌和19株肺炎克雷伯菌为ESBL阳性株,其阳性率分别为12.5%和22.7%。双纸片协同试验与纸片扩散确证试验对ESBL检测结果较一致,而VITEK全自动微生物分析仪则有一定的漏检率。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率及其耐药率，为临床合理使用抗生素提供依据。方法收集2007年1～12月海口市人民医院临床各类标本中分离出（非重复）的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，采用CLSI推荐的K—B法和表型确证试验分别对其进行药敏试验和ESBLs检测。采用WHO推荐的Whonct5．4软件进行耐药率统计分析。结果2007年海口市人民医院共分离出278株大肠埃希菌和220株肺炎克雷伯菌，其中产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为69．1％（192／278）和45．9％（101／220），ESBLs阳性的菌株对同一类抗生素的耐药率均高于ESBLs阴性的菌株（P〈0．05），其中产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢噻肟的耐药率分别为81．7％和64．4％，对头孢西丁的耐药率分别为39．6％和31．8％，未发现对碳青酶烯类药物（亚胺培南、美洛培南）耐药的菌株。结论开展检出菌产ESBLs的检测，以便临床根据药敏试验结果合理使用抗生素，对预防和控制ESBk的产生及传播十分重要。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性观察

目的：调查大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况，观察其耐药性，指导用药。方法：应用复合纸片表型确证试验及双纸片协同试验，检测105株大肠埃希菌和47株肺炎克雷伯菌的ESBLs。体外抗生素敏感性试验应用肉汤数量稀释法。结果：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率为17.1%和31.9％。确证试验检测 阳性率为21.7％，双纸片协同法阳性率为19.1%。产酶菌株对青霉素类、头孢菌素类及氨曲南的耐药率达66.7%-100.0%,明显高于非产酶菌株5.7％-59.8％。阳性菌株对氨基甙类、氟喹诺酮类、磺胺类的交叉耐药率达44.4％-93.3%。对头孢西丁和氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为33.3％-38.9％和61.1％-73.3%。所有受试菌对亚妥培南敏感。头孢噻肟为本地检测ESBLs最适底物。结论：及时、准确地检测ESBLs，合理使用抗菌药物，显得十分迫切和必要。     

从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检测超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产酶情况及耐药模式,并对9种抗生素做药敏试验,比较产酶菌与非产酶菌对9种抗生素的耐药率,为临床治疗产酶菌感染提供理论依据。方法应用头孢西丁三相试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测ESBLs菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验。结果在110株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,6株(5.45%)产AmpC酶,20株(18.2%)产ESBLs,1株(0.90%)同时产AmpC酶和ESBLs。产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低。结论产AmpC酶和产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一。     

从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检测超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产酶及耐药模式,并对9种抗菌药做药敏试验,比较产酶菌与非产酶菌对9种抗菌药的耐药率,为临床治疗产酶菌感染提供理论依据.方法菌株来源于2005年1月～2007年5月我院呼吸科住院患者送检合格痰标本中分离的大肠埃希菌43株、肺炎克雷伯菌67株.应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测ESBLs菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验.结果在110株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,6株(5.45%)产AmpC酶,20株(18.2%)产 ESBLs,1株(0.90%)同时产AmpC酶和ESBLs.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶检出率分别为6.98%、5.97%,ESBLs检出率分别为16.3%、20.9%.产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低.结论产AmpC酶和产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一.     

产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的基因分型研究

目的了解广东省中医院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的流行、耐药基因型分布。方法对广东省中医院2001年7月至2003年8月间临床分离保存的208株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，用Vitek-32细菌鉴定仪进行细菌鉴定，用双纸片法进行ESBLs初筛，用NCCLS 1999年推荐的确证方法进行ESBLs确证。并采用PCR扩增和PCR产物测序方法对产ESBLs菌株进行基因分型。结果分离到产ESBLs细菌76株，总检出率为36．5％，其中肺炎克雷伯菌阳性率为41．9％（39／93）、大肠埃希菌阳性率为32．2％（37／115），PCR初步分型结果表明：TEM型42株（55．3％），均为TEM-1型、CTX-M型27株（35．5％），SHV型33株（43．4％）。结论CTX-M型和SHV型是我院产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型。     

微生物检验中革兰氏阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测结果分析

目的 通过对骨创伤患者分泌物所分离的克雷伯菌属、大肠埃希菌和其他肠杆菌科超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的临床微生物检验,研究该酶介导的耐药性能及其在临床上的应用.方法 收集骨创伤患者分泌物分离的耐氨苄西林的克雷伯菌属、大肠埃希菌40株,以NCCLs推荐的初筛,Etest法操作,表型确证试验.结果 其中有14株即35%的细菌被确认产出ESBLs,其中9株确认试验与Etest均阳性,产ESBLs的克雷伯菌属检出率为50%,大肠埃希菌的检出率为30.4%,其他肠杆菌科细菌检出率为33.3%.结论 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌属于产出超广谱β-内酰胺酶的重要菌株,但是其他肠杆菌科细菌的检出率也在上升,尤其是不能忽略检测阴沟杆菌.头孢噻肟(CTX)是本地区超广谱β-内酰胺酶筛选的最佳底物.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶基因型及流行病学分析

目的：研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产质粒型AmpC酶株的比率、酶的基因型及其流行病学状况。方法：收集本院、福建省立医院两家医院2004年9月至2005年3月的67株耐头孢西丁不重复大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，用酶提取物三维试验检测高产AmpC酶；抽提高产AmpC酶株质粒。用聚合酶链式反应（PCR）及产物序列分析确定质粒AmpC酶和β内酰胺酶的基因型；质粒转化试验定位耐药基因；ERIC—PCR指纹图确定产酶株间的同源关系。结果：福州两家医院耐头孢西丁菌中产质粒型AmpC酶的发生率，大肠埃希菌分别为16．7％和10．5％。肺炎克雷伯菌则分别为8％和0。2株肺炎克雷伯菌产DHA-1型、4株大肠埃希菌产CMY-2型、1株大肠埃希菌产CMY-22型质粒Am—pC酶；5株产CMY型AmpC酶的大肠埃希菌还分别同时产CTX—M-14、CTX—M-27、TEM-144和TEM-1型β内酰胺酶。7株菌中，1株肺炎克雷伯菌和3株大肠埃希菌可将头孢西丁耐药性转移给受体菌。7株产酶菌ERIC—PCR指纹图显示，2株肺炎克雷伯菌来自相同克隆，其余菌株来自不同克隆。结论：福州地区发现产DHA-1型AmpC酶肺炎克雷伯菌和产CMY-2型及CMY-22型AmtpC酶大肠埃希菌。CMY-22型AmpC酶和TEM-144型B内酰胺酶是国内外首次报道，GenBank登陆号为DQ256079和DQ256080。     

产生ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的分布及耐药性分析

目的:了解本医院培养病原菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生情况,为临床有效地选用抗生素提供依据。方法:采用双纸片扩散法对2010~2013年临床分离的2783株大肠埃希菌和1510株肺炎克雷伯菌进行ESBLs筛选,并用确证试验加以确认。结果:ESBLs总检出率为41.99%,其中大肠埃希菌为40.57%,肺炎克雷伯菌为43.18%。经χ2检验,不同年度大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的总检出率差异有显著性。2010~2013年,不同年度大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs的阳性率呈逐年上升的趋势。确证试验中,头孢他啶、头孢他啶/棒酸检测出ESBLs的总阳性率为30.65%,使用头孢噻肟、头孢噻肟/棒酸检测出ESBLs的总阳性率为37.66%。经χ2检验,两组不同底物检出率之间存在显著性差异。结论:对临床分离的肠杆菌科细菌进行ESBLs检测是非常必要的,在首选头孢类抗生素的同时,要考虑产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的可能性。     

医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamase,ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检出率及其耐药特征,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:对我院2003年1月～2005年12月住院病人分离的肺炎克雷伯菌122株、大肠埃希菌313株,采用NCCLs推荐的纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测,用K-B法做药敏试验。结果:435株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中检出产ESBLs菌139株,总检出率31.95%,其中肺炎克雷伯菌检出率33.61%、大肠埃希菌检出率31.31%;ESBLs检出率有逐年上升趋势;呼吸道标本ESBLs检出率最高,占59.71%;产ESBLs菌对抗生素的耐药率显著高于不产ESBLs菌(P<0.005),并对氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素呈多重耐药,对含β-内酰胺酶抑制剂的复合抗生素耐药率有增高趋势,均对亚胺培南敏感。结论:肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的ESBLs检出率逐年增加,应及时对ESBLs菌进行检测,以指导临床用药。亚胺培南可作为ESBLs菌治疗的首选药。     

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的:了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率和耐药现状。方法:产ESBLs菌用VITEK-32全自动细菌分析系统检测,药敏试验采用K-B琼脂扩散法。结果:218株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌63株(28.9%)。其中大肠埃希菌38株(17.4%),肺炎克雷伯菌25株(11.4%);它们对多种抗菌药显示耐药,仅亚胺培南敏感率为100%。结论:产ESBLs菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率较高,且存在较高的多重耐药性,应引起足够重视。     

产ESBLs分离株耐药基因初步分型

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和克雷伯菌的主要基因型分布特点。方法用表型确证试验筛选出临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌114株。应用PCR方法扩增产酶株的TEM、SHV和CTX-M基因。结果PCR结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的总阳性率分别为40.4%、20.7%和83.3%,其中大肠埃希菌分别为48.1%、1.3%和93.5%,肺炎克雷伯菌分别为24.3%、81.1%和62.2%。46.8%的大肠埃希菌和51.4%的肺炎克雷伯菌同时携带多个基因。结论产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型为CTX-M,肺炎克雷伯菌主要基因型为SHV。大多数菌株同时携带多个基因。     

医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性

目的：了解我院产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamase,ESBLs）肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检出率及其耐药特征，为临床合理使用抗生素提供依据。方法：对我院2003年1月～2005年12月住院病人分离的肺炎克雷伯菌122株、大肠埃希菌313株，采用NCCLs推荐的纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测,用K—B法做药敏试验。结果：435株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中检出产ESBLs菌139株，总检出率31．95％，其中肺炎克雷伯菌检出率33．61％、大肠埃希菌检出率31．31％；ESBLs检出率有逐年上升趋势；呼吸道标本ESBLs检出率最高，占59．71％；产ESBLs菌对抗生素的耐药率显著高于不产ESBLs菌（P〈0．005），并对氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素呈多重耐药，对含β-内酰胺酶抑制剂的复合抗生素耐药率有增高趋势，均对亚胺培南敏感。结论：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的ESBLs检出率逐年增加，应及时对ESBLs菌进行检测，以指导临床用药。亚胺培南可作为ESBLs菌治疗的首选药。     

从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中检测超广谱β内酰胺酶和AmpC酶

目的:研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的产酶及耐药模式,并对9种抗菌药做药敏试验,比较产酶菌与非产酶菌对9种抗菌药的耐药率,为临床治疗产酶菌感染提供理论依据。方法:菌株来源于2005年1月~2007年5月我院呼吸科住院患者送检合格痰标本中分离的大肠埃希菌43株、肺炎克雷伯菌67株。应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)表型筛选和确认试验检测ESBLs菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验。结果:在110株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,6株(5.45%)产AmpC酶,20株(18.2%)产ESBLs,1株(0.90%)同时产AmpC酶和ESBLs。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶检出率分别为6.98%、5.97%,ESBLs检出率分别为16.3%、20.9%。产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低。结论:产AmpC酶和产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一。     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的感染率,为临床合理选用抗生素提供依据.方法:从本院住院患者痰、血、尿、脓液等标本中分离的66株大肠埃希菌和28株肺炎克雷伯菌,先用纸片扩散初筛法选出产ESBLs可疑株后,再用纸片扩散确证法确证为产ESBLs株.结果:产ESBLs菌株占全部测试菌的24.5%,肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌检出率分别为42.9%、16.7%,以呼吸科、重症监护病区为主.产酶菌对头孢菌素多重耐药,亚胺培南耐药率为0 %,头孢西丁耐药率为13.0%.结论:早期检测产ESBLs菌株,可指导合理使用抗生素,有效治疗此类细菌引起的感染,减少产ESBLs菌株的产生.     

下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌的耐药性基因型分析

目的:观察下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌耐药菌株耐药基因分型,并探讨耐药菌株的流行状况及发生耐药的机制。方法:按常规方法进行细菌分离、培养和菌种鉴定。采用微量液体稀释与K-B法,分别对常用抗生素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药性进行检测。采用纸片法确证产超广谱β-内酰胺酶菌株,并应用PCR技术进一步扩增TEM型、SHV型β-内酰胺酶的基因型。结果:产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对AMP、AMP/SB、PIP、CF、CFZ、CRM、CPD、CAX、CAZ、CTX、CPE和AZT的耐药率高达90%以上。产ESBLs肺炎克雷伯菌中产TEM型、SHV型、TEM和SHV型β-内酰胺酶基因的百分率分别为26.92%、30.76%、7.69%,大肠埃希菌百分率分别为46.15%、5.12%、10.25%。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对多种不同种类抗生素耐药,且具有多重耐药的特点。产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌携带TEM或SHV型β-内酰胺酶基因,其中肺炎克雷伯菌以产SHV型β-内酰胺酶为主,大肠埃希菌则以产TEM型β-内酰胺酶为主。     

产ESBLs与AmpC大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与AmoC酶大肠埃希菌(escherichia coli,ECO)和肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae,KPN)的基因型特征.方法 用表型确证试验从临床分离的74株ECO和KPN中筛选出16株产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)、4株产AmpC酶及25株产ESBLs AmpC菌株.应用多重聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),扩增菌株的TEM,SHV和CTX-M-G1型超广谱β-内酰胺酶基因和DHA-1,ACT-1型AmpC酶基因,并对PCR产物经凝胶电泳后进行初步的分析.结果 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带TEM,SHV,CTX-M-G1,DHA-1和ACT-1基因的检出率分别为54.2%,50.0%,62.5%,57.1%,35.7%;29.4%,52.9%,41.2%,66.7%,46.7%.相当一部分菌株同时携带2种或2种以上的基因型.结论 产ESBLs与AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为多重耐药菌株,存在多种耐药基因.应采取积极的措施防止产酶菌株的流行.