茵陈承气汤对大鼠重症急性胰腺炎NF-κB活性及炎症介质表达的影响

摘要：目的探讨NF-κB在重症急性胰腺炎各器官中的表达及其介导的细胞因子TNF-a、IL-10表达的变化，并研究茵陈承气汤对NF-κB活性及炎症介质表达的影响。方法采用十二指肠乳头逆行插管注射牛磺胆酸钠法建立大鼠重症急性胰腺炎模型，60只健康SD大鼠随机分为对照组、模型组和中药治疗组，每组20只。采用免疫组织化学法检测胰腺、肺和空肠组织NF-κB的活性和放免法检测TNF-a、IL-10的表达，并取胰腺、肺和空肠组织甲醛固定，石蜡包埋切片，苏木精-依红染色后光学显微镜下观测组织形态学变化。结果NF-κB的活性及TNF-a、IL-10的表达3组中差异明显；中药治疗组与模型组比较，胰腺、肺和空肠组织NF-κB的活性和TNF-a、IL-10的表达水平均明显降低（P〈O．05）；病理观察：胰腺、肺和空肠组织损伤对照组无明显形态学变化，模型组较重，中药治疗组明显改善。结论NF-κB在重症急性胰腺炎的胰腺病变、肺损伤、空肠损害中起重要作用；茵陈承气汤能有效改善病情，可能与抑制NF-κB的活性有关。     

重症急性胰腺炎大鼠白介素-8和白介素-10及核因子-kB的表达

目的探讨IL-8、IL-10和NF-κB在重症急性胰腺炎发生、发展中的作用。方法将40只大鼠随机分为正常对照组（假手术组）和重症急性胰腺炎组（模型组）,各20只。造模后24h测定两组大鼠血清淀粉酶、IL-8及IL-10水平;切取相同部位的胰腺组织观察组织病理学改变,并进行NF-κB的免疫组织化学染色。结果两组大鼠血清淀粉酶、IL-8、IL-10及NF-κB水平间差别有统计学意义（P〈0.05）。假手术组大鼠胰腺组织光镜下各时段无明显改变,胰腺腺泡细胞排列紧密,可见胰岛,无中性粒细胞浸润;模型组大鼠则见胰腺间质水肿,大片腺泡细胞变性坏死,伴有大量中性粒细胞浸润。结论IL-8、IL-10及NF-κB在重症急性胰腺炎的发生、发展中起重要作用,重症急性胰腺炎的早期即有胰腺组织NF-κB的活化。     

经空肠注入大承气汤对急性胰腺炎大鼠细胞因子和胰腺细胞凋亡的影响

目的观察空肠内注人大承气汤对急性胰腺炎大鼠细胞因子、胰腺腺泡细胞凋亡的影响。方法将90只大鼠随机分为假手术组、模型组和对照组。建立急性胰腺炎模型,术后第2天检测各组外周血中自介素113（IL-1β）、白介素18（IL-18）、肿瘤坏死因子（TNF—α）浓度,胰腺组织病理学积分和胰腺腺泡细胞凋亡指数的差异。结果急性胰腺炎大鼠模型应用大承气汤后,血清IL-1β、IL-18、TNF—α浓度水平均较模型组减低,胰腺组织病理学积分较模型组明显减低,胰腺腺泡细胞凋亡指数明显升高。结论空肠内注入大承气汤具有抑制急性胰腺炎大鼠炎症反应、促进胰腺腺泡细胞凋亡的作用。     

重症急性胰腺炎大鼠白介素-8和白介素-10及核因子-κB的表达

目的探讨IL-8、IL-10和NF-κB在重症急性胰腺炎发生、发展中的作用。方法将40只大鼠随机分为正常对照组(假手术组)和重症急性胰腺炎组(模型组),各20只。造模后24h测定两组大鼠血清淀粉酶、IL-8及IL-10水平;切取相同部位的胰腺组织观察组织病理学改变,并进行NF-κB的免疫组织化学染色。结果两组大鼠血清淀粉酶、IL-8、IL-10及NF-κB水平间差别有统计学意义(P<0.05)。假手术组大鼠胰腺组织光镜下各时段无明显改变,胰腺腺泡细胞排列紧密,可见胰岛,无中性粒细胞浸润;模型组大鼠则见胰腺间质水肿,大片腺泡细胞变性坏死,伴有大量中性粒细胞浸润。结论IL-8、IL-10及NF-κB在重症急性胰腺炎的发生、发展中起重要作用,重症急性胰腺炎的早期即有胰腺组织NF-κB的活化。     

细胞因子在重症急性胰腺炎相关性腹水致急性肺损伤中的作用机制研究

目的：探讨细胞因子在重症急性胰腺炎相关性腹水致急性肺损伤中的表达及意义。方法：成年wistar大鼠45只,随机分为3组：①阴性对照组（C组）：开腹后仅翻动胰腺组织;②重症急性胰腺炎组（S组）：3.5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制造重症急性胰腺炎模型;③腹腔注射组（E组）：取S组大鼠胰腺匀浆及腹水,于正常大鼠腹腔内注射。于造模后3、6、12小时分批处死大鼠,取胰腺及肺组织行病理检查。以PCR法检测肺组织NF-κBmRNA的表达,免疫组化法检测TNF-α、IL-1β的表达。结果：S组及E组肺泡间质水肿、出血,并有中性粒细胞、巨噬细胞浸润。在不同时间点,S组和E组肺组织NF-κB、TNF-α、IL-1β表达均高于C组（P〈0.01）。结论：重症急性胰腺炎相关性腹水可以导致急性肺损伤,肺组织中NF-κB、TNF-а、IL-1β表达升高,提示其参与了急性肺损伤的发生过程,其原因可能与相关性腹水激活了粒细胞有关。     

白细胞介素17／23与重症急性胰腺炎的关系研究及意义

目的通过建立大鼠重症急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis,SAP）模型,观察白介素-17（IL-17）、白介素-23（IL-23）与重症胰腺炎的关系及地塞米松对IL-17表达的影响,探讨IL-17／23在sAP发病机制中的作用。方法SD大鼠,共45只,随机分为三组（,2=15）。对照组（A组）：正常组;模型组（B组）：重症急性胰腺炎组;干预组（C组）：重症急性胰腺炎＋地塞米松组。每组按3h、6h、12h又随机分成三小组（n=5）。重症胰腺炎的制作通过于胰胆管逆行注射5％的牛黄胆酸钠造成。三组大鼠分别于造模后3h、6h、12h经下腔静脉取血测定血淀粉酶的水平,同时,严格按照酶联免疫实验的要求,检测血清IL-17、IL-23的水平。观察胰腺标本大体改变并取胰腺组织HE染色,做胰腺病理学评分。结果B组血清IL-17、IL-23水平明显高于A、C二组（P〈0．01）,且随时间变化,差异越显著;C组血清IL-17、IL-23水平明显高于A组（P〈0．01）,而随时间变化,C组各时间点相比差异无统计学意义;胰腺大体观及病理评分：B组胰腺病理评分结果明显高于A、C二组（P〈0．01）,且随时间变化,差异越显著;C组病理评分结果明显高于A组（P〈0．01）,而随时间变化,C组各时间点相比差异无统计学意义。结论IL-17／IL-23表达水平与胰腺炎的严重程度相关,地塞米松可抑制IL-17表达,改善SAP的严重程度。     

TNFα在重症急性胰腺炎致病机制中的作用

目的探讨重症急性胰腺炎病情加重机制中TNFα的作用.方法将40只SD大鼠,随机分成4组.A组,PMN-弹力蛋白酶处理组;B组,单纯诱模组;C组,MDL27324治疗组;D组,假手术组.各组动物6h后处死.取胰腺标本观察病理变化.采用酶联免疫法测定血浆PMN-弹力蛋白酶含量的变化.RT-PCR方法测定外周白细胞中TNFαmRNA的表达水平.结果A、B、C组胰腺组织有不同程度的胰腺腺泡坏死,炎性细胞浸润和间质出血.外源性PMN-弹力蛋白酶组胰腺病变加重,TNFα表达上调水平较高,胰腺坏死、出血和炎性细胞浸润的积分显著升高.MDL27324PMN-弹力蛋白酶剂组胰腺病变减轻,TNFα表达的水平相对较低,胰腺坏死、出血和炎性细胞浸润的积分明显降低.结论说明TNFα在重症急性胰腺炎的加重机制中起了重要作用,它通过诱导炎症反应加重局部的损伤.     

大承气汤治疗重症急性胰腺炎大鼠的实验研究

目的 探讨大承气汤治疗重症急性胰腺炎(SAP)的作用机制.方法 健康Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为:假手术组(A组),SAP模型组(B组),SAP+乌司他丁治疗组(C组),SAP+大承气汤治疗组(D组),SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组(E组).采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠法建立SAP大鼠模型,于制模后24 h收集样本,检测大鼠肺组织、回肠和血浆中促炎因子白细胞介素-6(IL-6)、内毒素(ET)和抑炎因子白细胞介素-10(IL-10)的含量变化.结果 SAP+乌司他丁治疗组、SAP+大承气汤治疗组、SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组与SAP模型组比较血浆及组织ET、IL-6含量明显降低(P<0.05),IL-10含量明显升高(P<0.05);SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组与SAP+乌司他丁治疗组、SAP+大承气汤治疗组比较血浆及组织ET、IL-6含量明显降低(P<0.05),IL-10含量明显升高(P<0.05).结论 大承气汤可能通过减少致炎因子ET、IL-6和增加抑炎因子IL-10来影响SAP的炎症反应,大承气汤和乌司他丁对大鼠SAP具有相加或协同的抗炎作用.     

大鼠急性重症胰腺炎模型制备的技术改进

目的 探讨大鼠重症急性胰腺炎模型制备技术的改进。方法60只健康SD大鼠随机分为改进组（A组,n=30）和对照组（B组,n=30）。A组采用一次性BD胰岛素注射器以5～10°角（针头与肠胰平面夹角）、B组采用一次性1ml注射器以10～150角,分别经十二指肠乳头逆行胰胆管穿刺注射5％牛磺胆酸钠诱导大鼠重症急性胰腺炎模型。各组大鼠分别于术后24h处死,观察胰腺大体及光镜下病理改变,计算诱导成功率、24h存活率及肠坏死率,并进行统计学比较。结果两组大鼠胰腺均呈出血坏死性改变,光镜下均可见炎性细胞浸润。与对照组相比,改进组肠坏死率降低（P＜0．05）。结论应用此方法对逆行胰胆管穿刺注射法制作大鼠急性重症胰腺炎模型加以改进,具有创伤小,操作简单,模型肠坏死率低等优点,是一种较理想的制模方法。     

白细胞介素-1受体拮抗剂在急性胰腺炎中作用及机制探讨

目的 从胰腺腺泡细胞凋亡的角度探讨白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1Ra）在急性胰腺炎中的作用及机制。方法 用牛磺胆酸钠建立大鼠急性坏死性胰腺炎模型,IL-1Ra腹腔注射诱导胰腺腺泡细胞凋亡,并应用细胞凋亡原位标记检测(TUNEL) 染色、免疫组化等技术检测胰腺细胞凋亡及Fas/FasL的蛋白表达。结果 干预组1、2、6、12 h胰腺细胞凋亡指数显著高于胰腺炎组相应时间点(均P <0.01);对照组见较弱的Fas的表达,干预组各时间点胰腺细胞Fas染色阳性率明显高于胰腺炎组(均P < 0.01) ;胰腺炎组、干预组中均没有见到胰腺腺泡细胞中FasL 表达,但是在间质中均可见浸润的炎性细胞FasL免疫组化染色阳性。结论 IL-1Ra减轻急性胰腺炎的机制可能不仅限于对炎症反应的抑制,它可能是通过上调凋亡调控基因Fas/ FasL系统的表达,诱导胰腺腺泡细胞的凋亡从而减轻胰腺炎的严重程度。     

急性胰腺炎患者血清TNF-α、IL-6及hs-CRP水平变化及临床意义

目的研究急性胰腺炎（AP）患者血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平变化及临床意义。方法74例AP患者中,重症AP（SAP）组32例,轻症AP（MAP）组42例。分别对其血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平进行检测,并与正常对照组40例健康受试对象进行比较分析。结果MAP组、SAP组患者血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均高于正常对照组（P〈0．01）;SAP组患者血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均高于MAP组（P〈0．01）;且MAP组、SAP组患者血清TNF-α、IL-6、hs．CRP两两之间均呈正相关（P〈0．01）。结论检测AP患者血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平对患者疾病诊断及治疗具有重要的临床意义。     

外源性白细胞介素-10对重症急性胰腺炎的肠屏障功能保护作用

目的:探讨外源性白细胞介素-10(IL-10)对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肠屏障功能的影响。方法:90只SD大鼠随机分为假手术组、SAP组I、L-10治疗组,制模12 h后,检测各组血生化指标、血浆内毒素水平、脏器细菌易位率、小肠黏膜细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及观察各组胰腺、小肠病理形态学改变。结果:制模12 h后,SAP组血浆内毒素为(144.682±9.584)EU/L、脏器组织细菌易位率为64.6%、小肠黏膜ICAM-1 5.842±0.706、胰腺病理评分10.62±0.60、小肠病损严重。IL-10治疗组上述指标测定值分别为:(103.112±8.124)EU/L(P<0.05),30.6%(P<0.01),4.102±0.668(P<0.05),4.46±0.52(P<0.01)、小肠病损明显减轻。结论:小肠黏膜黏附分子异常表达及炎性介质平衡紊乱,参与SAP鼠肠屏障功能受损。早期应用外源性IL-10能降低小肠黏膜黏附分子表达,抑制炎性介质过度释放,减少肠源性细菌易位,对SAP鼠肠屏障功能有保护作用。     

冠心病患者血清Cys C、IL-18水平及临床意义探讨

目的探讨胱抑素C(Cys C)和白介素18(IL-18)检测在冠心病(CHD)患者中的临床意义。方法选择2009年1月-2010年12月在阳江市人民医院就诊的130例CHD患者,分为急性心肌梗死(AMI)组、稳定型心绞痛(SA)组、不稳定型心绞痛(UA)组,检测其Cys C和IL-18水平,并与40例正常对照组进行对照。结果 CHD患者血清Cys C和IL-18水平明显高于正常对照组(P<0.01),并与CHD的类型有关,呈AMI组>UAP组>SAP组(P<0.01)的改变。结论 Cys C和IL-18可能与CHD的发生发展有关,联合联合检测血清Cys C和IL-18可能对判断CHD病变程度有重要意义。     

冠心病患者血浆脂联素和白介素-1β变化及相关性研究

目的：探讨冠心病患者血浆脂联素和白介素-1β（IL-1β）水平的变化及其关系。方法：冠心病患者60例,其中,稳定型心绞痛（SAP）30例,不稳定型心绞痛（UA）30例;选择年龄、性别、体重与其匹配的30例作为健康对照。用酶联免疫吸附（ELISA）法测定两组血浆脂联素及IL-1β浓度,分析两者在冠心病患者血浆中的变化及相互关系。结果：SAP组和UA组脂联素水平均显著低于对照组（均P〈0.001）;UA组血清IL-1β明显高于对照组（P〈0.001）。UA组及SAP组血清脂联素与IL-1β呈负相关（r1=-0.27,P〈0.01;r2=-0.31,P〈0.01）。结论：脂联素水平降低和IL-1β水平升高可能是冠心病发生及发展的重要因素;IL-1β的改变与脂联素水平呈负相关,提示脂联素的代谢可能影响IL-1β的表达。     

不同海拔重症急性胰腺炎患者血清IL-1β、IL-6含量变化

目的观察不同海拔高度重症急性胰腺炎（SAP）患者外周血IL-1β、IL-6的血清水平,探讨细胞因子网络（CK）与胰腺炎患者在不同海拔高度的适应性及相关性。方法将居住不同海拔高度重症急性胰腺炎患者分为三组作为研究对象,用ELISA法检测外周血IL-1β、IL–6的血清水平。结果居住于海拔4 050 m的重症急性胰腺炎患者IL-1β和IL-6含量均高于3 100、2 300 m组（P〈0.05）。结论在不同海拔高度下,以IL-1β、IL-6为代表的细胞因子网络发生了变化,这种改变可能参与了不同海拔高度下重症急性胰腺炎患者适应性的改变和疾病的致病过程。＊     

肿瘤坏死因子与白细胞介素-8在不同类型冠心病患者中的表达水平

目的探讨不同类型冠心病患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-8（IL-8）的表达水平及临床意义。方法选取冠心病患者120例为研究对象,根据临床诊断类型分为稳定型心绞痛组43例、不稳定型心绞痛组37例和急性心肌梗死组40例,另选取健康体检者40例为对照组,对比各组TNF-α、IL-8的表达水平。结果冠心病患者血清TNF-α和IL-8水平高于对照组（P〈0.01）,其中急性心肌梗死组最高,其次为不稳定型心绞痛组和稳定型心绞痛组（P〈0.01）;多支病变组TNF-α和IL-8水平高于双支病变组和单支病变组（P〈0.01）,而双支病变组高于单支病变组（P〈0.01）;中度狭窄组TNF-α和IL-8水平高于轻度狭窄组（P〈0.01）,重度狭窄组TNF-α和IL-8水平高于中度狭窄组和轻度狭窄组（P〈0.01）。结论冠心病患者血清TNF-α和IL-8水平显著升高,且疾病严重程度越重,其水平越高,可作为临床评估疾病程度的标志之一。     

急性胰腺炎患者血清IL-18水平的变化及临床意义

目的观察急性胰腺炎（AP）患者血清IL-18水平的变化及其临床意义。方法选择AP患者58例,以正常健康人32例为正常对照组。所有AP患者均于起病后24h内入院,并根据Ransons＇11项指标进行轻重分型,其中轻型（MAP）35例,重型（SAP）23例。所有入选者分别于入院后第1、3、7和14d检测血清IL-18水平。结果 AP患者入院后第1、3、7d,SAP和MAP患者的血清IL-18明显高于正常对照组（P〈0.05）,并且以第1d升高最为明显,第14d时则无明显差别;而SAP患者第1、3d的血清IL-18水平显著高于MAP患者（P〈0.05）,第7、14d时则无明显差别。入院后第1d SAP患者的Ransons＇11评分为4.08±1.02,明显高于MAP患者的2.45±0.76（P〈0.05）。所有AP患者入院后第1d的血清IL-18与Ransons＇11评分有良好的正相关（r=0.289,P〈0.05）。结论 IL-18参与了AP的发病,并与AP的严重程度相关,可以作为AP早期诊断和病情严重性评判的临床实验室指标。     

急性胰腺炎患者P-选择素、IL-6、D-二聚体及疾病严重程度的关系研究

目的检测急性胰腺炎（AP）患者P-选择素、IL-6和D-二聚体水平变化及疾病严重程度的相关性,帮助提示疾病的严重程度和治疗选择。方法收集56例胰腺炎患者：轻型胰腺炎（MAP）22例及重症胰腺炎组（SAP）34例;其中SIRS组36例与非SIRS组20例,应用酶联免疫吸附法检测患者P-选择素、IL-6和D-二聚体水平及分析D-二聚体与P-选择素和IL-6的相关性。结果用方差分析、Pearson相关和ROC曲线分析。结果 SAP组和SIRS组P-选择素、IL-6、D-二聚体浓度明显高于MAP组及非SIRS组（P均〈0.05）;D-二聚体与P-选择素（γ=0.463,P〈0.001）、与IL-6（γ=0.276,P=0.013）皆相关。ROC的曲线显示D-二聚体诊断SAP曲线下面积更大。结论 P-选择素、IL-6和D-二聚体在SAP组比MAP组升高更明显,P-选择素、IL-6与D-二聚体相关。D-二聚体明显升高提示诊断SAP。