雌激素和维生素K对大鼠血清IL-6含量的影响

目的通过检测雌激素和维生素K对IL-6、BGP、IGF-1表达的影响情况,以反映骨转换,探讨雌激素和维生素K防治骨质疏松（OP）的机理。方法以去卵巢雌性SD大鼠作为绝经早期OP模型。将50只大鼠随机分为5组：假手术组（Sham组）、卵巢去势组（OVX组）、卵巢去势＋雌激素组（OVX＋E组）、卵巢去势＋维生素K组（OVX＋Vitk组）和卵巢去势＋雌激素＋维生素K组（OVX＋E＋Vitk组）。卵巢去势1月后分组给药,8周后集中统一处死。取左侧股骨检测骨密度,取右心室血清检测白介素-6（IL-6）含量。结果 OVX组与Sham组比较,雌激素（BMD）显著下降,血清IL-6测量值明显升高,表明造模成功。OVX＋E组与OVX组比较,血清IL-6差别有显著性;OVX＋Vitk组与OVX组比较,血清IL-6测量值低,差别有显著性;OVX＋E＋Vitk组血清IL-6含量与Sham组最为接近。结论去卵巢大鼠BMD下降,骨吸收指标IL-6升高,表明绝经早期骨代谢处于骨吸收大于骨形成的高转换状态,导致骨质疏松。雌激素水平下降是OP的一个重要致病因素。骨密度及血清IL-6含量检测表明,维生素K和雌激素防治OP均有效,二者联合用药的作用明显高于单一用药。     

去卵巢骨质疏松大鼠血浆1H-NMR代谢组学分析

目的 通过检测去卵巢骨质疏松大鼠血浆内源性代谢产物的变化,探讨代谢组学在骨质疏松研究中的应用.方法 选取20只6月龄雌性未生育SD大鼠,随机分为假手术(Sham)组和模型(OVX)组.去卵巢5个月后,收集血浆.采用核磁共振氢谱(1H-NMR)仪检测血浆代谢谱,并进行主成分分析(PCA)及偏最小二乘法判别分析(PLS-DA),以鉴别血浆代谢产物的变化.结果 Sham组和OVX组代谢产物有明显不同,两组代谢产物各自聚集,分布区域明显分开.与Sham组比较,OVX组大鼠代谢产物乳酸、丙酮和乙醇水平升高,而胆碱/磷脂酰胆碱、丙氨酸、VLDL/LDL、HDL/LDL、血糖及脂肪酸水平降低.结论 去卵巢骨质疏松大鼠血浆代谢组学发生明显变化.     

活体质子磁共振波谱法检测听觉剥夺大鼠下丘脑组织代谢变化的初步研究

目的运用活体质子磁共振波谱法研究听觉剥夺大鼠下丘脑组织代谢变化,探讨听觉中枢可塑性的可能分子机制。方法选取8只雄性sD大鼠,应用高场强MRI（7．0T）微磁共振波谱仪行1H磁共振波谱（1H—MRS）分析,每只大鼠做2次MRS扫描：第1次对正常大鼠扫描作为自身对照,第2次在听觉剥夺（双侧耳蜗切除）后第4d进行。采集感兴趣区（ROI）左侧下丘脑内波谱,分析该区N-乙酰天冬氨酸／肌酸（NAA／Cr）和胆碱／肌酸（Cho／Cr）值的变化。结果听觉剥夺大鼠左侧下丘脑组织Cho／Cr值（0．637±0．044）显著低于听觉剥夺前（0．764±0．062,t=4．800,P〈0．01）。听觉剥夺前后NAA／Cr值（分别为1．192±0．057,1．235±0．082）差异无统计学意义（t=1．265,P〉0．05）。结论’H—MRS可以在活体状态下用于研究听觉中枢系统的组织代谢变化,Cho／Cr比值下降可能是听觉剥夺后下丘脑神经元损伤的早期标志。     

手术双侧卵巢去势法建立骨质疏松树鼩模型

［摘要］目的　采用手术双侧卵巢去势法建立骨质疏松树鼩模型． 方法　60只健康 6 月龄雌性树鼩随机分成手术组（OVX,n＝30）与假手术组（SHAM,n＝30）．OVX 组切除双侧卵巢,SHAM 组切除与卵巢等体积的大网膜．2组分别于术前1 d及术后 1个月、2 个月、3 个月、4 个月、5个月、6 个月各随机抽取6只进行全身骨密度（BMD）检测;术前及术后 OVX 组与 SHAM 组比较 BMD 值有差异（P＜0.05）,各组分别取6只树鼩安乐死,取其第2腰椎制成骨切片,行骨组织形态学观察． 结果 （1）实验过程中未出现死亡动物;（2）SHAM 组动物各时相点全身 BMD 值无差异（P≥0.05）;第2腰椎骨小梁完整,排列紧密、规则, 小梁之间连接多见;骨髓细胞丰富,脂肪空泡少;（3）去势手术后 3 个月 时,OVX 组全身 BMD 值明显低于 SHAM 组（P＜0.05）;骨小梁断裂、稀疏、变细,小梁间距增宽,排列不规则, 小梁之间连接变少;骨髓细胞减少,出现较多的脂肪空泡;（4）术后 4 个月 时,OVX 组全身 BMD 值显著低于 SHAM 组（P＜0.01）;骨小梁较 3 个月 时更为稀疏,数量减少,小梁连接罕见,骨髓细胞进一步减少,脂肪空泡体积变大;（5）术后 6 个月 时 OVX 组 全身 BMD 值继续下降,下降幅度达到造模前的31%,与同时相点 SHAM 组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）;骨小梁显著减少,骨髓细胞少见,脂肪空泡密集． 结论　 6月龄雌性树鼩行手术双侧卵巢去势法造模 4 M 可建立稳定的骨质疏松树鼩模型．     

1H磁共振波谱无创检测手术创伤前后新西兰兔后肢肌肉谷氨酰胺、谷氨酸的总含量

目的评价1H磁共振波谱(MRS)无创检测手术创伤引起的骨骼肌内谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)代谢改变的可行性。方法建立新西兰兔手术创伤模型15只,在术前和术后第2天应用1HMRS扫描后肢肌肉,同时采集血样和肌肉活检标本待测。MRS数据采集包括Gln、Glu混合物(Glx)和总肌酸(TCr)的峰高和峰下面积值,比较二者稳定性;选择较稳定者,以Glx/TCr比值作为反映新西兰兔后肢肌肉内Glx含量的指标;观察该指标在手术前后的变化,并与传统氨基酸分析方法反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测血浆、肌肉组织内游离Gln、Glu浓度变化相比较,评价MRS无创检测手段的可行性。结果MRS检测时峰高比峰下面积稳定;Glx/TCr峰高比值的变异系数为(15·62±9·87)%;Glx/TCr峰高比值术后第2天比术前显著下降(P<0·05,P<0·01);术后第2天血浆和肌肉组织内游离Glx浓度与术前相比,差异均无显著性。结论MRS检测指标与RP-HPLC测定指标在反映手术创伤对骨骼肌内Glx代谢的影响时具有一致的结果;MRS用于骨骼肌内Gln、Glu代谢研究是可行的。     

不同剂量左旋精氨酸对骨质疏松大鼠骨代谢的作用

目的探讨不同剂量左旋精氨酸（L-Arg）对骨质疏松大鼠血清一氧化氮和骨显微结构变化的作用。方法将50只3月龄雌性大鼠随机分为假手术组（Sham组）10只和模型组（OVX）40只,对模型组进行去势制造骨质疏松模型,12周后随机抽取10只进行骨密度测量,证实骨质疏松模型建立成功后,再随机4组：OP组,LL-Arg组、ML-Arg组和HL-Arg组,每组10只,OP组正常喂养,其他三组分别以不同剂量的L-Arg皮下注射。12周后测量各组大鼠腰椎骨密度,下腔静脉取血测量血清NO水平,右侧股骨组织形态学观察。结果三组不同剂量L-Arg治疗12周后：①OP组大鼠血清NO水平比Sham组明显降低（P〈0.05）;LL-Arg组、ML-Arg组和HL-Arg组大鼠均明显高于OP组（P〈0.05,P〈0.01,P〈0.01）;②OP组BMD相比Sham组明显降低（P〈0.05）;LL-Arg组、ML-Arg组大鼠明显高于OP组（P〈0.05）;HL-Arg组大鼠与OP组相比差异无显著性（P〉0.05）;③光学显微镜观察LL-Arg、ML-Arg组和Sham组在骨小梁数量、连续性等方面均明显优于OP组,而HL-Arg组则与OP组相当。结论切除双侧卵巢可诱导绝经后骨质疏松模型;外源性精氨酸可提高血清NO水平;适当浓度NO可提高绝经后骨质疏松大鼠骨密度,增加骨小梁数量、连续性,防治绝经后骨质疏松;高浓度NO虽可提高血清NO水平,但不能提高骨密度,不能阻止去卵巢大鼠骨质退化,骨量丢失。提示临床上应用低、中剂量L-Arg防治绝经后骨质疏松症。     

前交叉韧带切断对卵巢切除大鼠股骨远段骨密度和骨组织结构的影响

目的采用大鼠切除双侧卵巢(Ovariectomy,OVX)制作骨质疏松症(Osteoporosis,OP)模型,切断右膝前交叉韧带制作骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)模型,同时行双侧卵巢切除和右膝前交叉韧带切断制作OVX+OA模型。通过骨密度测量和骨组织形态计量学方法来研究OP与OA的关系。方法3月龄Sprague-Dawley大鼠50只,分成基础对照组(BL,G1),手术对照组(Sham,G2),双侧卵巢切除组(OVX,G3),G4为单纯OA组,G5为OVX+OA组。每组10只动物。所有的实验动物在处死前10天和4天分别皮下注射盐酸四环素和钙黄绿素行荧光双标记。BL组在实验开始时杀死,其余4组在术后6个月后杀死。取大鼠右股骨。用双能X线骨密度仪(DEXA,NORLANDXR-36)测量股骨整体骨密度(total Bone Mineral Density,tBMD)和远段骨密度(distal BMD,dBMD)。取股骨远段进行硬组织包埋、切片,用半自动图象分析仪分析及松质骨骨形态计量学软件处理。结果OVX组与Sham组比较,dBMD和骨量BV/TV显著减少,提示造模成功。OVX+OA组与OVX组比较,dBMD和骨量BV/TV显著增加,骨形成和骨吸收指标均显著降低。OVX+OA组与OA组比较,dB-MD和骨量BV/TV显著减少,骨形成和骨吸收指标均显著升高。结论在本研究SD大鼠切除双侧卵巢制作OP模型,切断右膝前交叉韧带制作OA模型,饲养6个月,提示在OVX+OA模型的股骨远段部位,骨性关节炎可延缓骨质疏松症的发生。     

去卵巢对骨质疏松大鼠皮肤衰老的影响

目的 用去卵巢大鼠构建的骨质疏松症模型是研究绝经后骨质疏松疾病的最适模型，然而大鼠卵巢去除后对皮肤的影响如何，这方面的研究甚少。本研究旨在观察去卵巢对大鼠皮肤衰老指标的影响。方法 3月龄健康SD雌性大鼠20只，随机分为假手术组（Sham组）和去卵巢组（OVX组），卵巢去除后3个月，测定血清雌二醇，以及皮肤组织中与衰老相关的生化指标如过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及丙二醛（MDA）、羟脯氨酸（HYP）、脂褐质（LF）含量，并观察皮肤组织病理学变化，用计算机图像分析系统定量分析。结果 OVX组大鼠血清雌二醇水平显著降低；组织病理学观察显示OVX组表皮、真皮厚度较Sham组显著变薄（P<0.01），皮肤胶原纤维减少，排列疏松；与Sham组相比，OVX组大鼠皮肤CAT、GSH-Px和SOD活性显著降低（P<0.01），MDA含量较Sham组明显增加（P<0.01），皮肤组织中HYP含量明显减少，LF含量显著增多（P<0.01）。结论 3月龄大鼠卵巢去除后3个月可导致皮肤衰老，可能是研究绝经后皮肤衰老的适宜模型。     

MRS前列腺胆碱峰值与前列腺癌的对应研究

目的分析前列腺癌(prostatecancer,PCa)的磁共振波谱成像(Magnetic Resonance Spectroscopy,MRS)胆碱峰值代谢特征,探讨其对PCa诊断与鉴别诊断的价值。方法对37例临床高度疑似PCa的患者进行前列腺常规MR扫描并同时MRS扫描分析,测定Cho峰峰值,并经手术病理证实。所测代谢产物包括枸橼酸盐(Cit)、胆碱复合物(Cho)及肌酸(Cre)的峰值[1]。结果 37例检测者均接受了多体素波谱扫描,其中前列腺癌13例、前列腺增生24例,进行回顾性分析各组病例在MRS中分别测量感兴趣区胆碱峰值的检查结果。前列腺增生症组Cho峰峰值1.25土0.44与前列腺癌组Cho峰峰值3.22士0.72,之间存在显著性差异(P0.05)。结论 MRS前列腺胆碱峰值越高,PCa的越大,MRS对PCa的诊断及鉴别诊断具有极高的敏感度。     

葛根素通过BMP-2调节去卵巢大鼠骨代谢

目的：研究葛根素对去卵巢雌鼠骨代谢的作用以及其对骨形态发生蛋白2（BMP-2）的影响。方法：将30只4月龄sD雌鼠随机分成空白组（Sham组）、模型组（OVX组）和葛根素组（Puerarin组）,每组10只。OVX组和Puerarin组行双侧卵巢切除术,4周后,Puerarin组给予葛根素标准品[20mg（kg·d）]灌胃12周,OVX组和Sham组给予等量的生理盐水。干预结束后用双能X线检测骨密度,EusA法检测血中雌二醇、骨钙素、骨保护素、碱性磷酸酶含量,Western blotting检测骨组织中BMP-2蛋白的表达。结果：给药结束后,OVX组和Puerarin组大鼠腰椎、左右股骨的骨密度较Sham组均显著下降（P〈0．05）,Puer—arin组高于OVX组;Puerarin组大鼠血清雌二醇、骨钙素、骨保护素、碱性磷酸酶水平均高于OVX组（P〈0．05）。Puerarin组和Sham组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。Puerarin组BMP-2的表达水平显著高于OVX组（P〈0．05）。结论：葛根素上调BMP-2的表达是其调控去卵巢雌鼠体内的骨代谢的途径之一。