肺动脉高压时腺泡内肺动脉壁胶原相对含量的改变

以野百合碱引起的大鼠肺动脉高压作为模型，应用免疫组化和形态定量的方法，并结合超微结构的变化，动态观察肺动脉高压时腺泡内肺动脉壁Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的改变。结果表明，在肺动脉高压发生过程中，腺泡内肺动脉壁Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多。其机制可能与血管平滑肌细胞发生表型变化以及平滑肌前体细胞在向平滑肌转变过程中胶原的合成分泌增多有关。     

细胞因子诱导的子宫平滑肌细胞生物学特性变化

目的观察人正常子宫平滑肌细胞经细胞因子刺激后生物学特性变化,探讨细胞因子在子宫肌瘤发病中的作用。方法分离培养健康育龄妇女外周血单个核细胞,经十二蔻佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)联合刺激获取富含细胞因子的条件培养液,后者与人正常子宫平滑肌细胞建立共培养体系。采用免疫荧光观察雌激素受体α(ER-α)表达,MTT法检测细胞增殖能力,RT-PCR法检测纤连蛋白(Fibronectin,FN)和胶原蛋白Ⅰ(Collagen-Ⅰ)mRNA表达量,比较刺激前后细胞的生物学特性变化。结果细胞因子刺激组ER-α及细胞外基质FN和Collagen-ⅠmRNA表达水平增多,与未刺激人正常子宫平滑肌细胞组比较差异有显著性(P<0.05),与子宫肌瘤细胞组比较差异无显著性(P>0.05);细胞增殖能力三组细胞间差异无显著性(P>0.05)。结论细胞因子诱导人正常子宫平滑肌细胞生物学特性发生肌瘤细胞样改变;子宫腔局部细胞因子水平在子宫肌瘤发病中起重要作用。     

Calponin-1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响

目的 研究抑制calponin-1表达对人子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡和细胞骨架的影响,探讨妊娠时人子宫平滑肌细胞中calponin-1蛋白表达上调存分娩发动中的作用机制.方法 构建腺病毒siRNA-calponin-1质粒,转染原代培养的人子宫平滑肌细胞,分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell侵袭实验和流式细胞术(AnnexinV/PI双染法)检测转染siRNA-calponin-1前后对子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响;同时用Rhodamine-Phailoidin标记子宫平滑肌细胞骨架蛋白(F-actin),荧光显微镜观察其变化并进行荧光定量检测.结果 实验组与空载体组、空白对照组比较,子官平滑肌细胞的运动能力明显下降(P<0.05),细胞增殖能力及凋亡率无明显差异(P>0.05);空载体组与空白对照组比较,差异无统计学意义P>0.05).实验组子宫平滑肌细胞中F-actin的含量减少,排列松散、不规则、微丝较细;空载体组、空白对照组子宫平滑肌细胞中F-actin微丝明显增多增粗、呈束状平行排列.结论 体外实验表明抑制calponin-1的表达可以抑制子宫平滑肌细胞的运动而不影响其增殖和凋亡,并可引起子宫平滑肌细胞F-actin的形态变化与重排.此结果提示:妊娠时子宫平滑肌细胞迁移能力的改变及F-actin的重排,可能是导致分娩发动的重要机制之一.     

狗肝外胆道的肌肉分布和粘膜上皮细胞及腺体对爱先兰PAS染色反应的观察

我们观察了六支成年狗肝外胆道,平滑肌的分布和其粘膜上皮细胞及腺体粘多糖的分布情况。肝外胆道的平滑肌自肝管开始即有少量出现,多数不形成肌层,至胆总管下端时,肌纤维逐渐增多,形成平滑肌层。十二指肠壁内的胆总管有两层肌肉围绕。环肌形成的隔向下延伸较远,几乎达到近胆总管开口处。肝管、胆总管、胆囊管等管壁外的外膜中神经纤维非常丰富,神经节较多。肝外胆道粘膜上皮及腺体细胞。Ab—PAS染色反应有一定规律,阳性物质位于核上区的胞质中。文中对上皮细胞分泌物性质作了讨论。     

EP1在不明原因复发性自然流产中的作用研究

目的研究前列腺素E2受体亚型EP1在不明原因复发性自然流产(URSA)中表达水平变化,分离鉴定子宫平滑肌细胞,并用特异性siRNA抑制EP1的表达,观察其对子宫平滑肌收缩率的影响,为抗RSA药物研究提供新的理论依据。方法用荧光定量PCR检测两组子宫平滑肌细胞膜上EP1的表达分布情况;应用图像分析系统测量正常组和URSA组病人子宫平滑肌细胞收缩率;用特异性siRNA抑制URSA组子宫平滑肌细胞EP1的表达,分析其对在子宫平滑肌细胞收缩率的影响。结果 URSA组子宫平滑肌细胞中EP1的表达水平显著高于正常组(P<0.01),同时URSA组中子宫平滑肌细胞的收缩率显著高于正常组(P<0.01);EP1特异性siRNA和阴性对照siRNA处理URSA组子宫平滑肌细胞后,EP1特异性siRNA处理子宫平滑肌细胞收缩率较阴性对照siRNA处理组显著下降(P<0.05)。结论在RSA病人中,外在刺激或内在因素导致EP1表达上调可能是促使子宫的异常收缩而发生流产的一个重要原因。因而PGE2/EP1系统可作为治疗RSA的一个潜在靶点。     

棉酚对人子宫肌瘤及子宫壁平滑肌细胞超微结构的影响

棉酚治疗某些妇科疾患的疗效已经肯定。子宫肌瘤合并月经量增多患者经棉酚治疗后肌瘤明显缩小,其机理尚无报道。本文电镜观察棉酚对子宫肌瘤和子宫壁平滑肌细胞超微结构均有影响,服用棉酚治疗后,肌细胞核周间隙加宽;线粒体肿胀;粗面内质网扩张和胞质内出现脂滴。通过这种改变进一步探讨棉酚的作用机理。     

妊娠和分娩中子宫平滑肌及胎盘内皮素受体A表达的初步探讨

目的探讨临产前、后子宫平滑肌细胞及胎盘滋养细胞内皮素受体A(ETA)的表达变化.方法应用免疫组化方法结合计算机图像分析技术分析60例足月妊娠剖宫产产妇子宫下段平滑肌细胞及胎盘滋养细胞ETA的表达,观察临产前、后两组的表达强度.结果临产组子宫平滑肌细胞及胎盘滋养细胞ETA的表达显著强于未临产组,差异有显著意义(P＜0.01).结论ETA可能通过参与调节子宫平滑肌收缩和局部前列腺素的合成参与分娩发动.     

子宫平滑肌肿瘤的病理组织学观察

目的 探讨子宫平滑肌肿瘤的病理诊断标准及其预后。方法 对病例进行病理组织学观察,并用ｄｅｓｍｉｎ,ａｃｔｉｎ免疫组织化学染色。结果 多数子宫平滑肌内瘤核分裂像增多同时伴细胞特异性及凝固性坏死,子宫平滑肌瘤则无以上病理变化。子宫平滑肌肉瘤的ｄｅｓｍｉｎ和ａｃｔｉｎ阳性细胞显著低于子宫平滑肌瘤。结论 尽管核分裂诊断是子宫平滑肌肉瘤的重要指标,但不是唯一指标,应综合细胞异型,边界浸润,凝固性坏死这些改变     

子宫平滑肌瘤和平滑肌肉瘤核仁组成区相关蛋白的比较研究

对31例经病理组织学证实的手术切除子宫平滑肌瘤(13例)、平滑肌肉瘤(8例)及正常子宫肌壁(10例)AgNOR 作了研究。常规石蜡包埋,AgNOR 染色。观测了每例AgNOR 的数目及最大和最小直径,以及变动范围。结果发现三组中子宫平滑肌肉瘤组AgNOR 数目、平均直径及其变动范围等均明显高于子宫平滑肌瘤及正常子宫肌壁(P<0.01),而后两者间无显著性差异。结果提示AgNOR 作为一种新的客观指标,在区别子宫平滑肌良恶性肿瘤中有一定的实用价值.     

猪卵泡壁扫描电镜观察

本文观察了猪卵泡壁扫描电镜的超微结构。猪卵泡壁由颗粒细胞层和卵泡膜构成。卵泡膜中包括3种细胞;分泌细胞、成纤维细胞和平滑肌细咆。本文对卵泡膜外层平滑肌细胞以及神经纤维的超微结构和功能进行了描述和讨论。     

从超微结构探讨子宫平滑肌瘤的组织学发生

为进一步研究子宫平滑肌瘤的组织发生，本文对４例肌瘤组织，孕５、６、７、８个月胎儿子宫肌组织的腔周细胞及１例肌瘤患者子宫肌组织进行了电镜观察，结果是：①肌瘤患者子宫肌组织主要为典型的平滑肌细胞构成。②肌瘤组织中腔周细胞：腔内层为成熟或不成熟内皮细胞，其外可见无特征分化细胞、成熟和不成熟平滑肌样细胞、肌成纤维样细胞，以及成纤维样细胞。③胎儿肌组织中腔周细胞与肌瘤组织腔周细胞相类似，但主要由成熟和未成熟平滑肌细胞及无特征性分化细胞构成。     

调宁蛋白基因siRNA重组腺病毒载体构建及其对体外子宫平滑肌细胞的作用

目的：构建siRNA重组腺病毒载体,为研究Calponin-1基因在分娩发动中的作用机制提供实验基础。方法：采用消化酶法对足月妊娠人子宫平滑肌细胞原代培养,并用免疫细胞化学方法进行鉴定。构建腺病毒siRNA-Calponin-1质粒转染原代培养的子宫平滑肌细胞,采用RT-PCR和Western印迹检测Calponin-1的表达。结果：构建的Calponin-1siRNA腺病毒载体可以显著抑制子宫平滑肌细胞中Calpo-nin-1mRNA和蛋白的表达。实验组、空白对照组、空载体组的Calponin-1mRNA表达的灰度值分别为316.3±39.2,1048.5±126.4,1027.2±127.5,Calponin-1蛋白表达的灰度值分别为323.3±43.2,1021.5±143.4,1019.2±144.5,实验组与空白对照组、空载体组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,空白对照组与空载体组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：构建的pAdEasy-pShuttle-U6-Calponin-1siRNA质粒能抑制体外子宫平滑肌细胞Calponin-1的表达,为研究Calponin-1在分娩发动中的作用提供了实验基础。     

子宫肌瘤中抑癌基因p53和Rb的表达

目的：探讨抑癌基因p53和Rb在子宫肌瘤发生发展中的作用。方法：用NorthernBlot方法检测14例子宫肌瘤和3例子宫平滑肌肉瘤中p53和Rb基因的mRNA表达。结果：p53和Rb基因在分泌期子宫肌肉中的表达水平明显高于增殖期，在子宫肌瘤中的表达水平明显低于分泌期子宫肌肉组织，在子宫肉瘤中的表达水平低于子宫肌瘤。结论：在子宫肌肉组织中，性激素对p53和Rb基因的表达可能有调节作用。推测性激素促使子宫平滑肌细胞增生的作用途径之一是影响p53和Rb基因的表达。     

调宁蛋白基因siRNA重组腺病毒载体构建 及其对体外子宫平滑肌细胞的作用

目的：构建siRNA重组腺病毒载体,为研究Calponin-1基因在分娩发动中的作用机制提供实验基础。方法：采用消化酶法对足月妊娠人子宫平滑肌细胞原代培养,并用免疫细胞化学方法进行鉴定。构建腺病毒siRNA-Calponin-1质粒转染原代培养的子宫平滑肌细胞,采用RT-PCR和Western印迹检测Calponin-1的表达。结果：构建的Calponin-1 siRNA腺病毒载体可以显著抑制子宫平滑肌细胞中Calponin-1mRNA和蛋白的表达。实验组、空白对照组、空载体组的Calponin-1 mRNA表达的灰度值分别为316.3±39.2,1048.5±126.4,1027.2±127.5,Calponin-1蛋白表达的灰度值分别为323.3±43.2,1021.5±143.4,1019.2±144.5,实验组与空白对照组、空载体组比较,差异有统计学意义（P<0.05）,空白对照组与空载体组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：构建的pAdEasy-pShuttle-U6-Calponin-1 siRNA质粒能抑制体外子宫平滑肌细胞Calponin-1的表达,为研究Calponin-1在分娩发动中的作用提供了实验基础。     

同型半胱氨酸对体外培养的大鼠动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 :观察同型半胱氨酸 (HCY)对大鼠动脉平滑肌细胞 (ASMCS)增殖的影响。方法 :利用体外细胞培养技术 ,通过 MTT比色测定、细胞计数及流式细胞仪对细胞周期的测定 ,观察同型半胱氨酸对大鼠动脉平滑肌细胞增殖的影响。结果 :同型半胱氨酸能促进大鼠动脉平滑肌细胞的增殖 ,呈明显的剂量依赖关系。药物作用两天后 ,0 .2 m M· L-1HCY组与对照组相比 ,细胞数目增加 4 6 .4 8%,MTT比色OD值增加 4 5 .6 9%(P<0 .0 1) ;经细胞周期的测定 ,结果表明 HCY作用后 G0 ～ G1期细胞数由对照组的 87.2 2 %降低至 76 .6 5 %,减少了 12 .12 %;S期的细胞数由对照组的 0 .0 0 %增加到 6 .6 6 %,处于DNA合成期的细胞数明显增加。结论 :同型半胱氨酸能促进大鼠动脉平滑肌细胞的增殖 ,呈明显的剂量依赖关系。推测 HCY可能通过促进平滑肌细胞的增殖导致动脉粥样硬化的发生。     

雌激素受体-α在子宫腺肌病子宫内膜肌层交界区中的表达

目的 分析雌激素受体(ER)-α在子宫腺肌病(ADS)内膜肌层交界区(EMI)子宫肌层中的表达情况及相关性.方法 收集北京妇产医院2009年5月至11月行全子宫切除术的子宫标本共41例,分为ADS组20例和子宫肌瘤组(对照组)21例,结合组织解剖和免疫组化定位并获取EMI肌层,对其EMI平滑肌细胞进行分离及原代培养;分别应用RT-PCR和Western印迹方法 ,检测Erα在两组EMI肌层组织中的表达.结果 (1)EMI平滑肌细胞于培养后48～72 h即贴壁生长,细胞群呈长梭形、束状或栅栏状排列,细胞生存力良好;(2)Erα在ADS组EMI肌层中的表达无明显周期性变化,在对照组EMI肌层中的表达存在周期性变化,其中在子宫内膜的增生期高于分泌期(P<0.05);(3)Erα在增生期ADS组(0.180±0.023)与对照组(0.190±0.024)的表达差异无统计学意义,在分泌期ADS组(0.17±0.032)的表达高于对照组(0.12±0.015),但差异无统计学意义(P>0.05).结论 Erα在ADS子宫的EMI中失去周期性表达,与ADS的雌激素调节异常有关.     

混合性子宫内膜间质和平滑肌肿瘤2例临床病理分析

目的探讨混合性子宫内膜间质和平滑肌肿瘤（MESSMT）的临床病理特征及诊断和鉴别诊断。方法对2例MESSMT患者进行苏木精-伊红和免疫组化SP法染色光镜观察,结合临床资料进行分析并复习相关文献。结果肉眼观：2例均为子宫全切标本,肿物呈结节状,位于肌壁间,与肌壁分界尚清,1例伴有显著的黏液变及囊性变;光镜：肿瘤由梭形和圆形两种细胞构成,弥漫密集或不规则束状排列,两种成分均超过30%。肿瘤间质有明显的玻璃样变,形成网格状和类似花环或＂星爆样＂结构。肿瘤与子宫肌壁大部分分界清楚,局部舌状浸润。免疫组化：内膜间质成分细胞表达vimentin、CD10阳性,平滑肌成分表达vimentin、SMA、Desmin、h-caldesmon阳性。结论 MESSMT是一种非常罕见的子宫间叶性肿瘤类型,应与富于细胞性平滑肌瘤等肿瘤鉴别,免疫组化具有重要辅助作用。     

细胞凋亡与高血压脑出血患者血管破裂的相关性

目的：探讨高血压脑内出血患者血管破裂的发生机理。方法：正常脑血管,高血压脑出血患者出血部位的脑动脉分别进行TUNEL染色,计数血管平滑肌细胞凋亡比例。结果：高血压脑出血患者血管平滑肌细胞凋亡百分比为70.00±2.60,正常脑血管平滑肌细胞凋亡百分比为14.29±2.60。结论：血管平滑肌细胞凋亡与高血压脑内出血患者相关。     

关于单离大白鼠输精管平滑肌细胞收缩机制的研究

在去甲肾上腺素的作用下,单离的大白鼠输精管平滑肌细胞可以发生收缩,细胞收缩的长度与时间成正比例。本研究还发现,在肌细胞收缩的同时,C-K使胞内的40K蛋白质磷酸化,肌细胞的收缩可能是通过蛋白质磷酸化而实现的。     

乐息平防治肺动脉高压与肺血管平滑肌表达ET_A-R mRNA的关系

目的:观察乐息平(Lacidipine)对SD大鼠缺氧性肺动脉(HPH)的防治效果,以及内皮素A型受体(ETA-R)mRNA在SD大鼠肺血管平滑肌中的表达情况,进而探讨乐息平防治HPH的作用机制与内皮素(ET)由ETA-R介导的生物学效应之间的关系。方法:实验动物分为4组:正常对照组(N)、缺氧组(H)、正常+乐息平组(N+La)、缺氧+乐息平组(H+La);用常压低氧法(氧浓度:10+0.5%)制作HPH动物模型;用插管法测定肺动脉压;用组织切片内原位杂交法检测ETA-RmRNA的表达情况。结果:缺氧组(H)平均肺动脉压(mPAP)及ETA-RmRNA的表达均高于正常组(N)(P<0.01);缺氧加乐息平组(H+La)mPAP及ETA-RmRNA的表达均无明显增高(与H组比较P<0.01;与N组比较,P>0.05)。结论:乐息平可以防止缺氧诱导的SD大鼠肺动脉压升高,同时可以抑制ETA-RmRNA在缺氧性SD大鼠肺血管平滑肌中的表达。