AMD3100对裸鼠结直肠癌肝转移模型中ICAM-1表达的影响

目的探讨CXCR4特异性抑制剂AMD3100对裸鼠结直肠癌肝转移模型中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法取对数生长期的Lovo细胞接种于BALB/C裸鼠脾脏,建立结直肠癌肝转移模型。将18只模型裸鼠随机分入3组:对照组、低剂量治疗组、高剂量治疗组。对照组每天给予0.1 mL生理盐水腹腔注射,治疗组予0.1 mL AMD3100腹腔注射,低剂量治疗组0.1 mmol/L、高剂量治疗组0.15 mmol/L,1次/d,持续6周。处死实验鼠,制作肝脏转移瘤病理切片,用免疫组织化学方法检测各组I-CAM-1蛋白的表达情况。结果免疫组织化学显示,治疗组裸鼠结直肠癌肝转移模型中,ICAM-1蛋白表达较对照组降低。结论AMD3100可致裸鼠结直肠癌肝转移模型中ICAM-1蛋白的表达水平降低。     

裸鼠人异位移植胃癌肝转移和腹膜转移模型的实验研究

目的：建立稳定的人裸鼠异位移植胃癌肝转移和腹膜转移模型。方法采用异位移植技术,将MKN-45和TMK-1胃癌细胞接种于裸鼠脾脏被膜和腹腔内,建立肝转移模型及腹膜转移模型。制模3周或6周分别观察异位移植转移模型的成瘤率、侵袭与转移程度、组织形态学特征。结果 MKN-45和TMK-1胃癌细胞建立的异位移植模型成瘤率皆为100％（40/40）。异位移植胃癌肝转移模型中,发现区域淋巴结肿大或转移（2/20;10％）,血性腹水（3/20;15％）;异位移植胃癌腹膜转移模型中,发现血性腹水（4/20;20％）,肺转移（5/20;25％）;MKN-45和TMK-1胃癌细胞经脾肝转移制模3周组肝转移评分明显低于制模6周组,差异有显著性意义（均为P＜0．01）;MKN-45和TMK-1胃癌细胞注入腹腔制模3周组腹膜转移结节数明显少于制模6周组（均为P＜0．01）;两组模型的不同种类胃癌细胞株之间的局部和远处转移率无明显相关性（r＝0．251,P＞0．05）。组织病理学观察结果证实转移癌细胞形态特征与原发胃癌细胞相似。结论裸鼠胃癌异位移植模型为研究胃癌肝转移和腹膜转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的实验动物模型。     

结直肠癌肝转移临床与实验的防治研究

目的 :降低结直肠癌根治术后肝转移发生率 ,提高结直肠癌根治术的疗效。方法 :(1)实验研究 :经脾脏注入 L s174 t细胞株脾切除法 ,建立人结肠腺癌 L s174 t细胞株接种裸鼠肝转移模型 ;检测实验组和对照组裸鼠肝转移癌灶数目、癌重及癌重 /肝重和肝转移组织中 nm 2 3- H1 表达。 (2 )临床研究观察组为结直肠癌根治术 +门静脉插管化疗4 8例 ,其中长期服用中药 5例 ;对照组为结直肠癌根治术 4 6例 ,比较术后肝转移发生率和生存率。结果 :(1)观察组裸鼠实验前后体重增长值 (4 .12± 0 .5 3g)明显高于对照组 (3.2 1± 0 .5 9g) ,P<0 .0 5。实验组裸鼠肝转移癌结节的数目 (2 .4 2± 0 .99个 )、癌重 (6 3.6 7± 2 1.2 9m g)及癌重 /肝重 (8.9%± 3.1% )均明显低于对照组 (4 .17± 1.99个 ) ,(94 .32± 37.86 m g)及 (13.2 %± 5 .3% ) ,P<0 .0 5。观察组裸鼠肝转移 nm2 3- H1 - NDPK阳性表达率为 6 6 .6 7%明显高于对照组16 .6 7% ,P<0 .0 5。 (2 )观察组结直肠癌根治术后肝转移发生率 12 .5 0 % ,明显低于对照组 34.78% (P<0 .0 5 )。观察组结肠癌根治术后 3、5年生存率分别为 87.5 0 %和 79.17% ,明显高于对照组的 6 7.39% ,5 2 .17% (P<0 .0 5 )。结论 :根治性切除结直肠癌是主要的防治方法 ;门静脉插管化     

18F-FDG对于乳腺癌模型小鼠治疗作用的研究

[目的] 探讨18氟-氟代脱氧葡萄糖（ 18F-FDG）诱导乳腺癌细胞的凋亡作用及分子机制。[方法] 使用0～7.4×10 6  Bq/mL 18F-FDG作用于体外培养乳腺癌细胞MCF-7,应用γ高能计数仪测定细胞摄取射线量;接种MCF-7细胞至24只雌性裸鼠腋下构建小鼠乳腺癌模型,成瘤后分别由尾静脉注射生理盐水、3.7 MBq、11.1 MBq和37 MBq 18F-FDG,观察肿瘤生长情况,Micro-animal PET进行瘤体显像;Western Blot方法检测肿瘤瘤体凋亡相关蛋白BCL-2及cleaved CASPASE-3表达情况。[结果] 体外MCF-7细胞摄取实验表明,在一定剂量范围内,随着射线剂量的增加,对数生长期的MCF-7细胞摄取射线剂量基本呈线性增长;治疗后,各治疗组小鼠肿瘤体积增长速度明显放缓,而高剂量组（11.1 MBq与37 MBq）较低剂量组（3.7 MBq）显示出更低的增长速度。Micro-animal PET显示荷瘤裸鼠的肿瘤部位可见 18F-FDG浓聚,治疗组浓聚程度低于对照组,且随着治疗剂量增加,浓聚程度亦随之降低。Western Blot结果显示注射 18F-FDG后,荷瘤裸鼠瘤体cleaved CASPASE-3相对表达量各治疗组（37 MBq、11.1 MBq、3.7 MBq 18F-FDG）分别为4.935±1.521、5.560±1.459及2.138±0.844,均高于对照组的0.019±0.049（P<0.05或P<0.01）,尽管在11.1 MBq剂量组与37 MBq剂量组间表达差异无显著性意义（P>0.05）,但两组均高于3.7 MBq剂量组（P<0.05）;BCL-2蛋白相对表达量分别为1.489±0.691、1.929±0.949、3.421±1.554,均低于对照组的5.143±1.813（P<0.05或P<0.01）,尽管11.1 MBq剂量组与37 MBq剂量组间差异无显著性意义（P>0.05）,但两组均低于3.7 MBq剂量组（P<0.05）。[结论] 18F-FDG在适量情况下,能下调肿瘤BCL-2蛋白的表达和激活CASPASE-3表达诱导乳腺癌细胞凋亡。     

c-Kit+Lin-细胞体外扩增及体内分化的实验研究

目的　研究移植刚分选及扩增后雄性小鼠的骨髓c-Kit+Lin-细胞到酒精性肝纤维化雌性模型小鼠体内后,模型小鼠的肝脏形态改变、肝功能变化和移植细胞的分布、分化及归巢情况。　方法　　采用酒精灌胃法建立酒精性肝纤维化雌性小鼠模型,造模成功后随机选取8只模型小鼠（模型组）与正常小鼠8只（对照组）比较两组肝功能变化。剩余模型小鼠再随机选取32只,分为4组处理,并再随机选取8只正常小鼠（第1组）与其对照。模型小鼠的4组分别为：移植前取血处死组（第2组）,移植新鲜分选的c-Kit+ Lin-细胞组（第3组）,移植扩增后的c-Kit+ Lin-细胞组（第4组）,仅予以注射Buffer组（第5组）。采用免疫磁珠法分选雄性小鼠骨髓c-Kit+Lin-细胞;利用SCF+ HGF+ FL+LIF +TPO+ IL-3因子组合对其进行体外扩增;将刚分选及扩增后c-Kit+Lin-细胞移植入酒精性肝纤维化雌性模型小鼠体内,检测两组肝功能改变、肝脏纤维化改善、含雄性小鼠Y染色体性别决定基因cDNA(Sry)的移植细胞在受体肝内定居分化情况。　结果　　（1） 两移植组在移植30天后,较移植前肝脏纤维化改善明显;（2） 两移植组在移植30天后AST、ALT、ALB与移植前比较差异有显著性意义（P<0.05）;（3）两移植组均可见含雄性小鼠Y染色体性别决定基因cDNA(Sry)的移植细胞,并同时表达ALB mRNA,计数细胞比例,比较差异无显著性意义（P>0.05）。　结论　　移植c-Kit+ Lin-细胞后能在受体肝内定居并转化成有功能新生肝细胞;移植c-Kit+ Lin-细胞后能明显改善肝损伤小鼠的肝功能及肝脏纤维化;扩增对c-Kit+Lin-细胞的归巢、在体内分化没有明显影响。     

冬凌草甲素诱导结直肠癌细胞SW-1116凋亡与衰老的体内外实验研究

目的 探讨冬凌草甲素(Ori)在体内外抑制结直肠癌细胞的作用及机制.方法 应用不同浓度Ori(0、6.25、12.5、25、50和100 μmol/L)处理结直肠癌细胞SW-1116及其建立的裸鼠移植瘤模型,CCK-8法检测Ori对SW-1116细胞的抗增殖效应;流式细胞仪检测Ori处理SW-1116后细胞周期的改变及细胞的凋亡;β-半乳糖苷酶染色检测Ori诱导SW-1116细胞衰老;软琼脂细胞克隆形成实验检测Ori对SW-1116细胞克隆形成的影响;观察Ori对SW-1116细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.结果 Ori可诱导结直肠癌细胞SW-1116生长抑制、细胞周期阻滞、凋亡、衰老和克隆形成能力.Ori还显著抑制SW-1116裸鼠移植瘤的生长,随着Ori剂量的增加裸鼠移植瘤中的细胞凋亡与衰老增加.结论 体内外实验研究表明,Ori具有抗结直肠癌的活性,可能成为治疗结直肠癌的一个新的候选化合物.     

HOXB6在裸鼠大肠癌肝转移模型抑癌机制的实验研究

目的 研究HOXB6在裸鼠大肠癌肝转移模型抑癌机制及其前临床意义.方法 采用基因重组质粒pcDNA6-HOXB6转染的HT29大肠癌细胞株建立裸鼠肝转移模型,随机分为两组,即HOXB6组和对照组.制模30 d后观察两组间转移瘤形成情况及生存情况.结果 HOXB6组平均体质量、肝质量、肝转移评分及血性腹水生成率明显低于对照组,差异均有统计学意义(分别为20.04 g与23.08 g,P<0.01;1.54 g与2.22 g,P<0.01;0.60与3.80,P<0.01;0与80.0%,P<0.05);两组生存曲线分析显示,HOXB6组生存率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 HOXB6可抑制裸鼠大肠癌肝转移的形成,且可作为肿瘤转移的评判指标.     

结肠癌肝转移裸鼠模型的建立

目的构建一种转移率高、操作简便、结果可靠的结肠癌肝转移模型,用于结肠癌转移防治的实验研究。方法 15只Balb/c裸鼠平均分为3组(A组、B组、C组),5只Balb/c小鼠单独为D组,以细胞浓度2.5×10~7/mL的HCT116、CT26细胞悬液0.2 mL分别行脾种植保脾法及切脾法构建结肠癌肝转移模型,对比四组动物模型造模成功率及肝转移灶大小、数目及腹腔内转移情况。结果 A组裸鼠造模成功率100%(5/5),肝及脾均成瘤,肝转移瘤数目较少,较分散,多分布于肝右叶,生存时间平均为(26.6±3.4) d;B组裸鼠造模成功率40%(2/5),转移瘤分散于肝表面,体积较A组大,生存时间平均为(36.8±4.2) d;C组裸鼠造模成功率100%(5/5),肝及脾均成瘤,肝转移瘤数目较多,多个转移瘤融合成团,占据整个肝右叶,生存时间平均为(20.2±2.6) d;D组肝未发现转移灶。三组裸鼠部分出现腹腔转移(A组2只,C组3只),均未出现心、肺、脑、肾转移灶。3组裸鼠肝转移瘤组织细胞学形态符合腺癌的特征。结论保脾法能获得较高的造模成功率,能有效模拟人类结肠癌细胞经血行转移至肝的途径和过程。     

裸鼠脾脏移植瘤模型在NGX6抗结肠癌转移作用研究中的应用

目的:建立结肠癌肝转移模型,为抑瘤基因NGX6功能研究提供体内试验平台.方法:将低分化结肠癌细胞系HT-29组(HT-29)、空白质粒转染组[pcDNA3.1( )/HT-29]、NGX6转染组[(pcDNA3.1( )/NGX6/HT-29)]细胞分别接种于裸鼠脾脏下极包膜内,每天称量裸鼠体质量并观察裸鼠摄食、活动及精神情况,45 d后处死裸鼠,分别从大体水平以及镜下观察肝、脾、肺、肾、脑等器官肿瘤转移情况.结果:pcDNA3.1( )/NGX6/HT-29组裸鼠较其他两组裸鼠肝脏转移灶数目明显减少、脾脏上种植瘤形成明显减少.结论:抑瘤基因NGX6抑制结肠癌HT-29细胞的转移,裸鼠脾内种植转移模型可作为新基因体内功能研究的理想模型.     

BRMS1基因对人直肠癌裸鼠成瘤性及转移能力的影响

目的 探讨转移抑制BRMS1基因对人直肠癌裸鼠成瘤性以及抑制肿瘤细胞远处转移的影响。方法 通过将BRMS1基因导入人直肠癌细胞株LOVO中,建立裸鼠实验性转移模型和自发性转移模型,观察转染组（A组）、空载体组（B组）、未转染组（C组）裸鼠的生长状态和肿瘤远处转移状况。结果 自发性转移模型： A1组转染组细胞、B1组转染空载体组细胞和C1组转染组癌细胞接种后裸鼠的体质量及肿瘤平均直径无统计学差异（P>0.05）。实验性转移模型：转染空载体组B2和未转染组C2的裸鼠肺脏转移率为100％;转染组A2组肺脏和肝脏转移灶的病理分级标准较B2组和C2组降低, A2组肺转移分级以II级为主,B2组、C2组以II级、III级为主;A2组未见肝转移灶,而B2组、C2组肝转移分级以I级、II级为主。结论 BRMS1基因能够明显抑制直肠癌LOVO细胞的远处转移的能力,但并不影响肿瘤细胞本身的生长,提示BRMS1基因可能成为抑制直肠癌远处转移的新靶点。