Ezrin介导骨肉瘤转移机制的相关研究

骨肉瘤是一种主要侵犯儿童和青少年的恶性骨肿瘤。在骨肉瘤患者中肿瘤局限性患者的5年生存率为70%,而发生了肿瘤转移的患者的5年生存率却只有20%～30%[1]。超过90%的肿瘤患者的死亡都归因于肿瘤转移[2]。肿瘤转移是一个复杂的过程,而每一个过程都可以成为一个治疗的靶点。在过去的10年间,对于骨肉瘤的转移机制已经做了很多深入的研究,而近来发现Ezrin与骨肉瘤转移及预后有密切的关系,所以深入研究Ezrin在骨肉瘤中的作用及机制对骨肉瘤的防治有重大意义。     

Ezrin蛋白与妇科恶性肿瘤相关性的研究进展

<正>Ezrin蛋白于1981年首次被发现[1],于1983年得以分离纯化。在其被发现之后的10多年里一直被认为只是细胞骨架的一个组成成分而不受重视。2004年分别被Khanna和Yu等证实其与骨肉瘤和横纹肌肉瘤的转移有关[2-3]。近年来越来越多的研究表明,Ezrin蛋白与多种肿瘤的发生、发展、转移及预后有关[4-5]。笔者对Ezrin蛋白的特点及其与妇科恶性肿瘤相关性的研究进展进行综述。     

Ezrin蛋白与肿瘤转移关系

Ezrin蛋白是EgM(Ezrin/Radixin/Moesin)家族的重要成员,是细胞骨架与细胞膜之间的连接蛋白.对细胞膜区域的整合和稳定性起到结构和功能调控的作用.Ezrin蛋白参与了微绒毛的形成及细胞形态的维持、细胞运动及黏附、细胞骨架的重塑及细胞信号转导过程,且可以作为膜的有机体和连接体连接细胞膜与细胞骨架,如:与细胞膜分子CD_43、CD_44、E-cadherin、ICAM-1等及细胞骨架成员F-型肌动蛋白(F-actin)的连接,并且有令人注目的 临床证据显示:Ezrin蛋白家族和黏附分子在控制癌细胞具有的如黏附性的细胞功能及浸润转移的生物学特性上显得尤为重要.目前许多研究表明Ezrin蛋白与多种肿瘤的发生、转移和预后相关.Ezrin蛋白在肿瘤细胞中的表达异常,提示其在肿瘤的浸润、转移机制中发挥重要作用.有研究显示:Ezrin蛋白的异常表达可赋予肿瘤细胞高转移活性,影响并参与到肿瘤转移的多个环节,如:从原发灶脱落并具有运动性、侵入周围组织及脉管系统、穿透基底膜、选择性的在靶器官增殖形成转移灶等.对Ezrin蛋白在肿瘤中的全面研究,可以为肿瘤的诊断、治疗和预后评价提供新的思路和标准.     

Ezrin基因shRNA表达载体的构建及鉴定

目的:设计并构建能有效下调Ezrin蛋白表达的短发夹状RNA(Small hairpin RNA,shRNA)表达载体,探讨载体介导的RNA干扰技术用于预防性治疗骨肉瘤肺转移的可行性.方法:依据小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)靶序列的设计原则,以Ezrin蛋白编码基因Villin2为靶基因,合成两对编码短发卡结构的两条DNA序列,经退火合成DNA双链,再克隆至shRNA表达载体pGenesil-1质粒中,转化后进行酶切鉴定和DNA序列测定.将构建的载体用脂质体介导转染大鼠骨肉瘤UMR106细胞株,采用RT-PCR和Western blot法检测细胞Ezrin蛋白在mRNA和蛋白水平的表达.结果:成功构建2个针对Ezrin蛋白的shRNA表达载体;其转染大鼠骨肉瘤UMR106细胞后,细胞Ezrin蛋白表达在mRNA及蛋白水平上的表达均显著下降.结论:Ezrin蛋白的shRNA表达载体能显著抑制大鼠骨肉瘤UMR106细胞Ezrin蛋白的表达,本研究为预防性治疗骨肉瘤肺转移的实验奠定基础.     

食管鳞状细胞癌中Ezrin和Paxillin的表达及其临床病理学意义研究

目的研究肿瘤相关基因Ezrin和Paxillin在食管鳞状细胞癌中的表达及意义。方法应用免疫组化S-P法检测食管鳞状细胞癌患者84例,观察肿瘤相关基因Ezrin、Paxillin的表达,同时回顾性研究了表达与食管鳞状细胞癌发生、浸润及转移等临床病理学参数的关系。结果（1）食管癌组织中,Ezrin、Paxillin蛋白的阳性表达率分别为59.5%（50/84）、61.9%（52/84）。（2）Ezrin蛋白的阳性检出率在高分化与中-低分化的比较和有、无淋巴结转移时的比较,P〈0.05,统计学差异有显著性。侵及粘膜下层与肌层的Ezrin蛋白的阳性检出率两者比较,P〉0.05,统计学差异无显著性。（3）paxillin蛋白的阳性检出率在高分化与中-低分化的比较、侵及粘膜下层与肌层的比较、有无淋巴结转移比较,P〈0.05,统计学差异有显著性。结论（1）Ezrin、Paxillin的表达在食管癌发生中起重要的作用。（2）Ezrin蛋白与肿瘤的转移密切相关。（3）paxillin蛋白是预后的标志物。     

Ezrin蛋白在头颈部肿瘤中的研究进展

Ezrin蛋白是ERM蛋白家族(Ezrin,Radixin和Moesin)中的重要成员,在介导肿瘤细胞分化、增殖、侵袭及转移等恶性行为中发挥重要作用,是多系统恶性肿瘤发生、发展的一个关键因素。目前许多研究表明:头颈部恶性肿瘤中Ezrin蛋白的表达均显著增加,并且与其临床TNM分期及其病理分级呈正相关。这提示Ezrin蛋白对头颈部恶性肿瘤的诊断、判断预后具有重要的临床价值。     

十二指肠乳头癌中埃兹蛋白和钙黏蛋白的表达与预后关系研究

目的探讨埃兹蛋白(Ezrin)、钙黏蛋白(E-cadherin)的表达与十二指肠乳头癌的临床预后关系。方法收集十二指肠乳头腺瘤28例患者和腺癌46例患者的组织标本,应用免疫组化方法对Ezrin、E-cadherin在十二指肠乳头腺瘤和腺癌组织中的表达水平进行测定。结果在十二指肠乳头癌组织中Ezrin、E-cadherin的表达阳性率分别为73.91%(34/46)和21.74%(10/46),腺瘤组织中分别为46.23%(13/28)和85.71%(24/28),两种组织中Ezrin、E-cadherin表达阳性率差异均有统计学意义(P<0.05),Ezrin和E-cadherin在十二指肠乳头癌组织中表达呈负相关且与肿瘤分化程度、临床分期及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。单因素分析发现,两种蛋白的表达、肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移与术后生存密切相关。多因素分析发现,两种蛋白的表达、肿瘤分化程度、淋巴结转移是影响预后的独立因素。结论 Ezrin和E-cadherin对十二指肠乳头癌的发生、发展及预后起重要作用,可能成为十二指肠乳头癌的分子标记物或治疗的潜在靶点。     

靶蛋白Ezrin和Lamin A/C与卵巢癌的表达及意义相关研究

目的 探讨并分析埃滋蛋白(Ezrin)和核纤层蛋白A/C抗体(Lamin A/C)在卵巢癌组织中的表达变化及其与患者临床病理特征的关系。 方法 选取2011年5月-2016年5月在湖北中医药大学黄家湖医院病理科收集的30例正常卵巢组织标本(正常组)、手术后切除经病理学证实的卵巢癌标本65例(卵巢癌组)及卵巢良性肿瘤组织40例(良性组),采用免疫组织化法检测3组标本中的Ezrin和Lamin A/C蛋白的表达情况,并分析其与患者的临床病理特征的关系。 结果 正常组、良性组的卵巢组织标本中Ezrin和Lamin A/C蛋白表达阳性率分别为93.33%、87.50%、93.33%、90.00%,显著高于卵巢癌组的49.23%、52.31%,差异均有统计学意义(P<0.05);卵巢组织标本中Ⅰ+Ⅱ期、高+中分化、未发生淋巴结转移的患者Ezrin和Lamin A/C蛋白表达阳性率显著高于Ⅲ+Ⅳ期、低分化、发生淋巴结转移的卵巢癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 Ezrin和Lamin A/C蛋白的表达与卵巢癌转移密切相关,Ezrin和Lamin A/C蛋白在卵巢癌组织中表达下调,并且与患者的临床病理特征具有一定的关系,同时提示了Lamin A/C以及Ezrin可以作为潜在的卵巢癌患者病情评估以及临床预后的指标。      

Ezrin蛋白在口腔鳞癌中的表达及意义

目的:检测Ezrin蛋白在口腔鳞癌中的表达,探讨其在评估口腔鳞癌的肿瘤分化程度和侵袭转移中的意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测Ezrin蛋白在39例口腔鳞癌和28例正常口腔粘膜组织中的表达。结果:Ezrin蛋白在正常口腔粘膜组织中的阳性表达率为14.29%,其在口腔鳞癌中的阳性表达率为76.92%,Ezrin蛋白在口腔鳞癌中表达水平显著高于正常口腔粘膜组织(P<0.01);Ezrin蛋白的表达随口腔鳞癌病理分级增高而增高(P<0.01);Ezrin蛋白在伴淋巴结转移的口腔鳞癌中的表达水平高于无淋巴结转移组(P<0.01)。结论:Ezrin蛋白与口腔鳞癌的病理分化和淋巴结转移密切相关,其表达水平可作为评估口腔鳞癌转移和预后的指标。     

Ezrin蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

[目的]利用胃癌组织芯片研究Ezrin蛋白的表达及其在胃癌的发展及转移中的作用.[方法]应用免疫组织化学方法(ABC法)检测121例胃癌和39例正常胃组织标本中Ezrin蛋白的表达情况.[结果]Ezrin蛋白在胃癌中的阳性表达率为82.6%,而在正常胃组织中的阳性表达率为38.5%,两组间差异有统计学意义(P<0.001).在病理学分级中Ⅱ级和Ⅲ级与Ⅰ级相比较差异均有统计学意义(P<0.05),在有淋巴结转移和远处转移的胃癌组织中Ezrin蛋白阳性表达率分别为92.4%,97.7%,均明显高于无淋巴结转移组51.7%与无远处转移组74.0%(P<0.001).[结论]Ezrin蛋白的高表达在胃癌的发生发展过程中起重要作用,并与胃癌的病理学分级、淋巴结转移及远处转移密切相关,可做为胃癌的诊断及预后判定指标.     

Ezrin蛋白与E-cadherin在食管鳞癌中的联合检测及其意义

目的：探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中Ezrin蛋白与E-cadherin的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系.方法：以30例癌旁正常黏膜组织作对照,应用免疫组织化学SP法检测76例ESCC组织标本中Ezrin蛋白与E-cadherin的表达.结果：ESCC组织中Ezrin蛋白与E-cadherin的异常表达率分别为78.95％和59.21％;而癌旁正常黏膜组织中异常表达率分别为26.67％和6.67％,两项指标差异均有统计学意义（P＜0.01）.Ezrin蛋白异常表达在ESCC淋巴结转移和组织分化程度间差异有统计学意义（P ＜0.05和P＜0.01）,E-cadherin异常表达在ESCC组织的浸润深度、ESCC细胞的分化程度和淋巴结转移间差异均有统计学意义（P ＜0.05 ～P ＜0.01）.Ezrin蛋白与E-cadherin在ESCC中的异常表达呈正相关关系（P＜0.05）.E-cadherin异常表达组Ezrin蛋白表达阳性率显著高于E-cadherin正常表达患者（P＜0.05）.两者同时异常表达的40例中淋巴结转移高达70％,而两者同时正常表达的11例均无淋巴结转移,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论：Ezrin蛋白与E-cadherin在ESCC组织中均异常表达,且呈正相关.联合检测Ezrin蛋白和E-cadherin的表达有助于综合判断ESCC的浸润、转移及预后.     

CD44v6及Ezrin在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨CD44v6、Ezrin蛋白在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化S—P法,检测47例结肠癌、20例正常结肠组织中CD44v6、Ezrin蛋白的表达。结果CD44v6及Ezrin蛋白在结肠癌组织中的阳性率分别为68．09％（32／47）、74．47％（35／47）,CD44v6及Ezrin蛋白在正常结肠组织阳性表达率为25．00％（5／20）、100．00％（20／20）,有淋巴转移患者的Ezrin蛋白、CD44v6阳性率高于无淋巴转移患者（P〈0．05）;Ezrin蛋白在结肠癌组织中主要表达于胞浆,在正常肠组织主要表达于胞膜。结论Ezrin蛋白、CD44v6的表达有助于综合判断结肠癌的恶性程度和转移潜能。Ezrin蛋白有望成为判断预后的新指标。     

Ezrin功能特点及其与肺癌关系的研究进展

Ezrin(埃兹蛋白)是ERM蛋白家族(Ezrin-Radxin-Moesin)的一员,是近年来新发现的一种膜细胞骨架连接蛋白。Ezrin参与控制细胞的形态、黏附、运动及细胞的增殖和生存转换生长信号等过程,同时与肺癌及其他多种肿瘤的侵袭力、转移、临床预后有密切关系。现就PTEN在肺癌中的研究进展做简要综述。     

Ezrin在食管鳞癌表达的临床意义

目的 探讨食管鳞癌组织中Ezrin mRNA和蛋白的表达及其与食管癌临床病理特征的关系.方法 收集53例食管鳞癌组织及其相应癌旁正常食管黏膜上皮组织,应用RT-PCR检测Ezrin mRANA的表达情况,应用免疫组织化学技术(SP) 检测Ezrin的表达.结果 食管鳞癌组织中Ezrin mRNA的阳性表达率为73.6%,显著高于其在正常食管黏膜上皮组织阳性表达率20.8%(P＜0.05);Ezrin蛋白的表达定位于细胞质;Ezrin的阳性表达与食管鳞癌的分化程度与是否发生淋巴结转移相关(P＜0.05),而与食管鳞癌的患者的性别,肿瘤的长度、位置和浸润深度无关(P＞0.05).结论 Ezrin可能参与了食管鳞癌的发生、发展和转移,检测Ezrin的表达可作为食管鳞癌生物学行为的一项评估指标.     

宫颈鳞癌组织MMP-9和Ezrin的表达与微血管密度的相关性

目的探讨金属蛋白酶-9（MMP-9）、埃兹蛋白（Ezrin）在宫颈上皮内瘤样病变（CIN）和宫颈鳞癌（SCC）中的表达及其相关性。方法选择手术切除的SCC组织标本47份、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）标本35份,正常宫颈组织（NCE）21份,采用免疫组化SP法检测各组MMP-9、Ezrin的表达和微血管密度（MVD）（CD44标记）。结果SCC、CIN组中MMP-9、Ezrin阳性率和MVD值均明显高于NCE组（P〈0.05）,SCC组明显高于CIN组（P〈0.05）;MMP-9、Ezrin阳性表达均与SCC组的临床分期、组织分化程度、有无淋巴结转移相关,并且在SCC组中两者表达呈正相关;SCC组中MMP-9、Ezrin阳性者的MVD值明显高于其阴性者（P〈0.01）,在有无淋巴结转移者中MMP-9、Ezrin阳性者的MVD值差异有统计学意义（P〈0.05）,MMP-9阳性者的MVD值与分化程度有关（P〈0.05）。结论 MMP-9、Ezrin在SCC发生、发展中可能起重要作用,MMP-9、Ezrin及MVD值与SCC的浸润转移密切相关,可作为预后的判断指标。     

食管鳞癌中Ezrin及E—Cadherin蛋白的表达与浸润转移的关系

目的探讨Ezrin和E—Cadherin蛋白在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌浸润转移之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测55例食管鳞癌组织中Ezrin和E—Cadherin蛋白的表达。结果Ezrin高表达与食管鳞癌淋巴结转移、浸润深度关系密切（P〈0．05）;E—Cadherin表达下调与食管鳞癌淋巴结转移、浸润深度关系密切（P〈0．05）;食管鳞癌中Ezrin和E—Cadherin蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论Ezrin蛋白高表达和E—Cadherin蛋白低表达在食管鳞癌的浸润转移过程中起着重要作用,提示二者在该过程中可能起着协同作用。     

Ezrin和c-Met在胃癌组织中的表达及意义

目的研究Ezrin和c-Met在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法检测45例胃癌、25例胃腺瘤、20例正常胃黏膜组织中Ezrin和c-Met的表达水平,分析Ezrin和c-Met的表达与各临床病理因素的关系。结果胃癌组织中Ezrin和c-Met的表达水平明显高于胃腺瘤组织及正常胃黏膜组织(P<0.05)。Ezrin和c-Met的表达水平与肿瘤的浸润深度、分化程度及有无淋巴结转移/远处转移有关(P<0.05),与性别、年龄及肿瘤大小无关(P>0.05),两者在胃癌组织中的表达呈正相关关系(r=0.603,P<0.001)。结论 Ezrin和c-Met与胃癌的发生、侵袭、转移密切相关,二者在胃癌发生、发展过程中可能具有协同作用,联合检测Ezrin和c-Met的表达水平可能为胃癌预后判断提供依据。