人皮下和髌下脂肪垫干细胞治疗大鼠骨关节炎的疗效比较

 目的 比较人皮下和髌下脂肪垫干细胞体外增殖、成软骨分化潜能以及体内治疗大鼠骨关节炎的疗效差异。方法 获取上海市东方医院未患代谢性相关疾病患者的皮下和髌下脂肪垫组织,从髌下脂肪垫中分离原代脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ASCs）,体外诱导成脂、成骨、成软骨方向分化。EdU检测人皮下脂肪干细胞（subcutaneous ASCs,Sc-ASCs）和髌下脂肪垫干细胞（infrapatellar fat pad derived stem cells,IPFP-ASCs）体外增殖能力,流式细胞术检测干细胞表面标记蛋白CD34、血管相关标记蛋白CD31的表达。阿尔新蓝染色及Western blot检测Sc-ASCs和IPFP-ASCs体外成软骨潜能。体内实验采用8周SD大鼠随机分为对照（control,CON）组、内侧半月板不稳术（destabilisation of the medial meniscus,DMM）组和DMM手术后Sc-ASCs治疗组,DMM手术后IPFP-ASCs治疗组,通过大体观察、番红固绿染色及OARSI评分比较体内治疗效果。结果 人髌下脂肪垫组织中分离获得ASCs,形态呈长梭形,在体外具有成脂、成骨、成软骨分化潜能。Sc-ASCs和IPFP-ASCs表面标记蛋白CD34和血管相关标记蛋白CD31表达无显著性差异,但人IPFP-ASCs体外增殖能力较强。阿尔新蓝染色及Western blot显示IPFP-ASCs体外成软骨能力较强。体内大鼠实验大体形态学观察显示DMM组骨赘增多,软骨表面缺损,Sc-ASCs治疗组骨赘减少,IPFP-ASCs治疗组表面较光滑,无明显骨赘生成;番红固绿染色显示DMM组软骨层出现垂直裂缝且到达钙化软骨,Sc-ASCs治疗组关节面纤维化且软骨浅表层存在垂直裂隙,IPFP-ASCs治疗组软骨层较为连续,仅存在轻微纤维化;OARSI评分显示IPFP-ASCs治疗骨关节炎疗效更好。结论 人IPFP-ASCs体外增殖能力、成软骨分化潜能以及体内治疗大鼠骨关节炎的效果优于Sc-ASCs。     

张应力作用下小鼠脂肪间充质干细胞骨向分化过程中成骨相关微小RNA表达模式

目的 探讨张应力下小鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)骨向分化中成骨相关微小RNA (miRNA)的表达模式。方法 将第3代小鼠ADSCs分为实验组和对照组,实验组应用四点弯曲加力仪对ADSCs进行加力,对照组不加力;采用实时定量聚合酶链反应检测成骨细胞转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)及Ⅰ型胶原蛋白(Col1)mRNA在不同时间点的表达;采用基因芯片技术筛选成骨相关miRNA,并检测其在加力进程中的相对表达强度。结果 实验组成骨相关基因mRNA水平相对较高;共筛选出5个上调、6个下调的miRNA;张应力刺激的第3天所有miRNA即出现差异性变化,多数miRNA在加力过程中呈持续上调或下调趋势,在第5天时差异性最显著。结论 张应力可促进ADSCs骨向分化,成骨相关的miRNA在这一过程中起重要作用。     

骨髓间质干细胞移植治疗DKO鼠后肌组织的超微结构改变

目的 观察Duchenne型肌营养不良症模型DKO小鼠经骨髓间质干细胞(MSC)移植治疗后肌组织的超微结构改变情况。方法 用体外培养纯化的第五代SD大鼠MSC经尾静脉移植治疗DKO鼠,在移植后15 w取鼠后肢腓肠肌组织进行透射电镜超微结构的观察。结果 传5代后的MSC均一性好,免疫源性低;移植治疗后DKO鼠的运动功能有所改善,生存时间也有延长。肌组织的超微结构观察发现,肌细胞膜断裂、膜下组织分离水肿、核中移、局部肌原纤维松散、炎症细胞浸润和结缔组织增生等病变情况较对照鼠有改善,并出现肌膜下多个幼稚核融合现象。结论 MSC具有强大的可塑性,通过血循环可趋向病变肌组织并参与鼠肌萎缩组织的修复与再生作用。     

脂肪源性干细胞对内源性皮肤老化的治疗作用

目的 研究脂肪源性干细胞(ADSCs)对内源性皮肤老化的抗衰老作用及机制。 方法 分离培养小鼠皮肤成纤维细胞(MSFCs)及人ADSCs。将MSFCs 分为对照组、模型组、ADSCs条件培养基组。D-半乳糖(D-gal)制备MSFCs衰老模型,ADSCs条件培养基培养。镜下及流式检测ROS、β-半乳糖苷酶活性的变化,RT-PCR 检测caspase3、p53、sirt1基因的表达情况,Western blotting检测Sirt1蛋白表达。 结果 模型组较对照组ROS水平上升(P<0.001)、β-半乳糖苷酶着色增深,而ADSCs条件培养基组较模型组ROS水平降低(P<0.001)、β-半乳糖苷酶着色变浅。RT-PCR检测结果显示模型组较对照组caspase3(P<0.001)、p53(P=0.001)表达升高,sirt1表达下降(P<0.001);而ADSCs条件培养基组较模型组caspase3(P<0.001)、p53(P=0.001)表达下降,sirt1表达升高(P<0.001)。 Western blotting结果显示模型组较对照组Sirt1表达下降(P<0.001),而ADSCs条件培养基组较模型组Sirt1表达升高(P=0.006)。 结论 ADSCs可通过Sirt1通路改善D-gal引起的内源性皮肤老化。     

鞘磷脂合酶抑制剂对血管紧张素Ⅱ诱导的高血压小鼠心肌纤维化的影响

目的 研究鞘磷脂合酶抑制剂D609对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）诱导的心肌纤维化的影响。方法 将雄性野生型C57BL/6J小鼠28只,采用随机数字表区组分组法分为对照组、D609组、AngⅡ组和AngⅡ+D609组,每组7只。通过持续皮下灌注AngⅡ建立高血压模型,2周后观察小鼠的血压变化,行心脏超声评估心脏结构和功能。采用HE与Masson染色观察心肌纤维化。使用ELISA方法测定小鼠血浆中炎性反应因子、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及白细胞介素（interleukin-6,IL-6）的浓度。结果 与对照组小鼠比较,AngⅡ组小鼠血压出现显著升高和心肌肥厚,而且心肌纤维化明显增加,血浆中TNF-α及IL-6的浓度显著增加。与AngⅡ组比较,AngⅡ+D609组小鼠血压降低,心肌肥厚明显减轻,心肌及血管组织的胶原纤维沉积显著减少,且血浆TNF-α及IL-6的浓度显著降低。结论 鞘磷脂合酶在高血压导致的心肌纤维化中可能发挥重要作用。     

重组腺病毒Ad-DDAH2转染大鼠脂肪干细胞的可行性

目的 探讨腺病毒载体(Ad-DDAH2)转染大鼠脂肪干细胞(ADSCs)的可行性。方法 构建Ad-DDAH2-GFP质粒。原代培养大鼠ADSCs,流式细胞术检测免疫表型CD29、CD45、CD90表达情况。以不同滴度的Ad-DDAH2-GFP转染ADSCs,用荧光显微镜计数转染效率及细胞形态。通过RT-PCR及Western Blot检测DDAH2在ADSCs中的表达情况。结果 Ad-DDAH2-GFP重组腺病毒载体构建、包装成功,且病毒滴度达到2E+10PFU/ML。第4代ADSCs生长曲线呈现“S”形。细胞免疫表型CD29、CD90阳性率分别为(95.83±0.53)%、(91.32±0.27)%, CD45阳性率为(1.59±0.06)%,符合ADSCs免疫表型特征。当病毒感染复数值为80、100时,转染效率均可达到90%以上。但病毒感染复数值为100时,ADSCs出现明显细胞病理现象,因此病毒感染复数值为80被视为最佳感染复数,RT-PCR及Western Blot鉴定可见阳性扩增条带。结论 Ad-DDAH2-GFP重组腺病毒载体构建成功,可以高效转染大鼠ADSCs。DDAH2在mRNA及蛋白稳定长期表达,为后续体内实验奠定了实验基础。     

血管紧张素Ⅳ型受体过表达对早期动脉粥样硬化斑块形成的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅳ型受体(AT4R)过表达对早期动脉粥样硬化斑块形成的影响及可能机制。 方法 ApoE^-/-小鼠60只高脂饮食喂养4周后,随机分为AT4R过表达组(Ad-AT4R组)、空载体组(Ad-EGFP组)和PBS空白对照组,每组20只。分别通过尾静脉注射携带有AT4R的腺病毒、腺病毒空载体及PBS溶液。继续高脂饮食4周后处死小鼠,留取血样及血管组织。检测血糖及血脂各项指标;采用苏木精-伊红染色法及油红O染色检测主动脉根部斑块面积百分比。 结果 与空白对照组和Ad-EGFP组相比,Ad-AT4R组体质量、血糖及血脂无显著性差异(P>0.05),苏木精-伊红染色及油红O染色斑块面积百分比显著降低(P<0.05)。 结论 AT4R过表达可抑制早期动脉粥样硬化斑块的形成,且不依赖于对血糖、血脂水平的调节。因此,AT4R可能存在潜在抗动脉粥样硬化的作用。     

人胎盘间充质干细胞治疗小鼠流产的效果研究

目的 探索人胎盘间充质干细胞对复发性流产小鼠的治疗作用。方法 建立CBA/J雌性×DBA/2J雄性复发性流产小鼠模型,分为注射人胎盘间充质干细胞（placenta-derived mesenchymal stem cells,PMSC）的实验组和注射磷酸盐缓冲液（PBS）的对照组,每组6只小鼠。比较两组的胚胎吸收率、胎鼠和胎盘质量。采用免疫组织化学的方法检测胎盘Laminin和Cytokeratin 8蛋白的表达情况。结果 两组小鼠无过敏、排异或死亡等异常反应。实验组小鼠的胚胎吸收率为8.33%（5/60）,对照组小鼠的胚胎吸收率为28.33%（17/60）,两组比较,差异有统计学意义（χ²=8.01,P=0.005）。实验组胎鼠质量为（1 127.59±87.92） g,胎盘质量为（674.35±66.29） g;对照组胎鼠质量为（981.57±118.25） g,胎盘质量为（572.24±89.25） g,两组比较,差异有统计学意义（P=0.036,P=0.047）。实验组Laminin蛋白表达高于实验组,胎儿血管分支明显增多,胎儿血管总面积以及母体血窦总面积均显著升高。实验组侵润到蜕膜组织的Cytokeratin 8（CK8）阳性滋养层细胞的数量明显高于对照组,滋养层细胞向蜕膜迁移的距离显著远于对照组。结论 PMSC对流产小鼠具有安全性,且大大降低了小鼠的胚胎吸收率,为复发性流产的治疗提供新思路。     

棕色脂肪干细胞与白色脂肪干细胞移植对心肌梗死大鼠心功能的影响

目的对比研究棕色脂肪干细胞（BADSCs）与白色脂肪干细胞（ADSCs）治疗急性心肌梗死大鼠的效果。方法采用酶消化法分别分离大鼠腹股沟脂肪组织及肩胛骨下脂肪组织,获得ADSCs与BADSCs,并进行流式分析与多谱系分化鉴定。30只雄性SD大鼠随机分为PBS对照组、ADSCs移植组及BADSCs移植组,建立急性心肌梗死模型,将各组对应细胞直接注入大鼠心肌梗死边缘区。移植后4周进行心功能检测并利用组织学检测移植细胞的体内分化与血管化作用。结果术后4周,与PBS对照组相比,ADSCs以及BADSCs移植组大鼠心功能均显著提高（P〈0.05）,且纤维化程度显著减弱（P〈0.05）。免疫荧光结果表明,移植的BADSCs成心肌分化数量显著高于ADSCs。免疫组化结果显示,ADSCs移植组以及BADSCs移植组大鼠心肌梗死区血管密度均较PBS对照组显著增加（P〈0.05）,ADSCs移植组血管密度显著高于BADSCs移植组（P〈0.05）。结论不同来源脂肪干细胞移植均具有改善心肌梗死患者心功能的作用,虽然BADSCs体内促血管化作用不如ADSCs,但其具有明显的心肌分化能力,可有效改善心脏功能。     

缺氧预处理的脂肪间充质干细胞对小鼠硬皮病模型的治疗作用

目的 观察脂肪间充质干细胞（adipose tissue-derived stromal cells, ADSCs）及缺氧预处理的ADSCs（hypoxia-pretreated ADSCs, hpADSCs）对硬皮病小鼠皮损组织的治疗作用。方法 分离提取小鼠的脂肪间充质干细胞,体外培养至第3代后,部分细胞进行缺氧预处理。使用博来霉素（bleomycin, BLM）对小鼠进行造模,根据处理方式分为PBS处理的空白对照组、BLM模型组、ADSCs治疗组、hpADSCs治疗组。各组皮损样本石蜡切片分别进行H-E染色、Masson染色,检测真皮厚度、羟脯氨酸评估胶原水平,检测H2O2评估氧化应激水平,使用Western印迹法和免疫组化评估α-SMA及TGF-β的表达水平。结果 与空白对照组相比,BLM模型组真皮厚度和组织内H2O2水平明显增加（P<0.05）,α-SMA和TGF-β表达水平也有一定程度的上调。虽然ADSCs治疗能够一定程度上降低真皮厚度,但是差异无统计学意义（P>0.05）,而hpADSCs治疗能够显著降低小鼠真皮厚度（P<0.05）。ADSCs与hpADSCs治疗均能够明显降低组织内H2O2水平（P<0.05）。相比ADSCs治疗,hpADSCs治疗能够更好地降低真皮内TGF-β和α-SMA的表达水平。结论 ADSCs能够降低硬皮病小鼠的胶原沉积并下调氧化应激水平,hpADSCs有更好的治疗效果。     

脂肪干细胞调节创面炎症反应并促进创面愈合

目的利用脂肪组织来源的干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)促进创面愈合并初步探讨其机制。方法采用胶原酶消化GFP转基因小鼠(GFP-C57BL)腹股沟处脂肪组织,获得ADSCs,并在体外证明其具有成骨和成脂的多向分化能力。14只C57BL小鼠随机分为两组并制作创面,实验组注射PBS缓冲液悬浮的ADSCs,对照组注射相同体积的PBS缓冲液。观察并分析创面愈合情况,通过荧光显微镜观察移植细胞的存活情况,利用real-time PCR检测创面组织中促炎因子白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(TCP-1)以及抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)的表达。结果分离的细胞具有较强的增殖能力,并具有多向分化潜能。同种异体移植ADSCs可以显著促进创面的愈合速度。移植两周后,荧光显微镜观察创面区域有少量ADSCs存活。与对照组相比,实验组小鼠的创面组织中促炎因子IL-1、IL-6和TCP-1表达下降,抗炎因子IL-10表达上升。结论通过同种异体局部注射ADSCs可以显著促进皮肤创面的愈合,其机制可能与AD-SCs降低了创面局部的炎症反应相关。     

融合基因重组卡介苗对肿瘤的抑制作用

目的 研究EB病毒基因BZLF1 和LMP2 融合基因重组卡介苗(recombinant BCG, rBCG)对肿瘤的抑制作用。方法 建立EB病毒阳性肿瘤(NPRC18)荷瘤小鼠(C57BL/6J)模型,根据注射的药物不同,分为rBCG组、BCG组、转pMV261载体BCG组(pMV261+ BCG)、PBS组。采取颈背部皮下多点注射方式进行免疫,对荷瘤小鼠肿瘤重量、成瘤时间、存活情况进行分析,C57BL/6J小鼠肿瘤抑瘤实验结束后,将小鼠的肿瘤裂解后用流式检测CD4⁺T、CD8⁺T细胞增殖情况,HE染色分析小鼠肿瘤组织中淋巴细胞浸润情况;使用统计学软件SPSS 19.0对rBCG抑瘤效果进行单因素方差分析(One-way ANOVA)。结果 重组BCG组分别用BZLF1和LMP2一抗杂交后,出现杂交目的蛋白,其蛋白质分子量约为70 KD,与对照相比,重组卡介苗对肿瘤抑制作用明显,小鼠成瘤时间延迟,平均成瘤时间约22 d,与对照PBS注射组8 d相比,其差异均有统计学意义(P ≤0.01);PBS组肿瘤重量为6.8 g,重组BCG组肿瘤重量为1.01 g,抑瘤率约为81%。经流式分析,重组BCG组产生的CD4⁺T、CD8⁺T细胞高于对照组。与对照组相比,rBCG延长了小鼠的生存时间,延缓了肿瘤生长和形成时间。结论 重组卡介苗在小鼠体内对肿瘤细胞具有抑制作用。     

人脐带间充质干细胞静脉输注小鼠的安全性

目的探讨C57/BL6J小鼠重复多次尾静脉输注人脐带间充质干细胞后的免疫反应和毒性。方法将SPF级别的32只C57/BL6J小鼠随机分为阴性对照组、细胞移植组,每组16只,雌雄各半,细胞移植组小鼠尾静脉注射分离培养的第5代人脐带间充质干细胞,一次5×106/只,每周注射一次,连续注射4周;阴性对照组每次注射相同容积的PBS。注射后后观察小鼠的一般症状,末次注射后1周、4周进行血细胞计数、血生化、免疫反应指标、脏器质量测定和组织病理学检查。结果细胞移植组小鼠血细胞计数、血生化、脏器重量和脏器系数与对照组无显著性差异(P>0.05),脏器组织病理学在光镜下检查结果与对照组无形态学差别,以及免疫结果测定(T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论人脐带间充质干细胞重复多次尾静脉输注C57/BL6J小鼠是安全可行的,对受者无明显免疫反应和毒副作用。     

过表达趋化因子受体2促进脂肪间充质干细胞对皮肤损伤的修复

目的 探讨过表达趋化因子受体2（CCR2）是否能促进脂肪间充质干细胞(ADSCs)皮下移植对小鼠皮肤创伤修复的效率。方法 分离培养ADSCs,取3~5代细胞通过流式细胞技术检测ADSCs相关的细胞表面标志物CD73、CD105、CD44和CD31的表达,并分别置于骨、软骨和脂肪诱导分化培养基中进行诱导分化,检测其多向分化潜能。通过慢病毒感染法构建过表达CCR2的ADSCs。在实验小鼠脊背两侧皮肤上分别制备一个面积为0.8cm×0.8cm的机械创面,随机分成3组,分别皮下注射CCR2-EGFP-ADSCs、EGFP-ADSCs和磷酸盐缓冲液（PBS）到小鼠创面4周。每天记录创面愈合情况,并进行病理切片观察,与对照组对比分析。结果 分离培养的ADSCs高表达CD73、CD105和CD44,不表达CD31,具有骨、软骨、脂肪诱导分化潜能。过表达CCR2的ADSCs构建成功。小鼠皮肤创伤造模及移植细胞后,各组小鼠均存活,创面逐日缩小。CCR2-EGFP-ADSCs组、EGFP-ADSCs组和对照组第5、9天的创面愈合率分别为(68±3.1)%和(91±2.1)%、(63±2.7)%和(87±2.1)%、(58±3.5)%和(80±2.9)%。注射了ADSCs的两组愈合率均显著高于对照组（均P<0.05）。病理组织切片显示3组小鼠第9天创面真皮层较正常皮层均有增厚,且CCR2-EGFP-ADSCs组观察到明显的类毛囊结构,多于EGFP-ADSCs组,对照组未观察到类似结构。结论 过表达CCR2可促进ADSCs对皮肤损伤的修复。     

脂肪干细胞的分离提取、鉴定及与脂肪颗粒的混合移植研究

目的分离提取脂肪干细胞(ADSCs),对其进行成脂、成骨的鉴定,并与脂肪颗粒混合移植,观察移植后的脂肪组织的存活情况。方法取大鼠腹股沟脂肪,磷酸盐缓冲液清洗,0.1%Ⅰ型胶原酶37℃消化1 h,离心,取沉淀,用含10%血清的DMEM培养基进行培养、传代,取第3代ADSCs用于成脂、成骨鉴定;另取第3代ADSCs用于移植,分为两组:ADSCs(密度为5×107/mL)0.9 mL+脂肪颗粒0.6 mL组、脂肪颗粒1.5 mL组,分别移植于大鼠背部两侧,共移植24只大鼠,分别于2周、1、3个月时脱颈椎处死8只大鼠,再取出背部脂肪组织。结果大鼠ADSCs成脂、成骨诱导后,经油红O、茜素红染色呈阳性,移植2周、1个月时,两组取出的脂肪组织的体积变化不大;但移植3个月后,取背部脂肪组织,称重:脂肪颗粒1.5 mL组平均重量为(0.4551±0.0024)g,而ADSCs(密度为5×107/mL)0.9 mL+脂肪颗粒0.6 mL组的平均重量为(0.7798±0.0033)g,两组脂肪组织的重量差异有统计学意义(P<0.05)。结论原代分离、培养的ADSCs生长状况良好,具有向成脂、成骨分化的能力,与脂肪颗粒混合移植后组织的存活率高,并能够改善脂肪颗粒单独移植时的液化吸收情况。     

兔脂肪基质细胞的分离培养及其成骨活性的研究

目的探讨兔脂肪组织来源脂肪基质细胞的分离培养方法及其成骨活性．方法取成年新西兰大白兔腹股沟皮下脂肪组织1～2mL,采用机械切割及Ⅰ型胶原酶消化法从脂肪组织中分离获得脂肪基质细胞,原代培养及传代以后,以诱导培养基（内含10mmol／Lβ-甘油磷酸钠、10～8mol／L地塞米松、50mg／L维生素C）进行诱导培养．实验评估：应用形态学观察、碱性磷酸酶钙-钴法染色检测碱性磷酸酶,Von Kossa钙化结节染色检测钙化结节的形成等方法来鉴定诱导分化所得细胞的成骨活性．结果行诱导培养的脂肪基质细胞呈多层成长,形态多为梭形,细胞外基质有白色钙化结节形成;细胞增殖速度减慢,生长周期变长．碱性磷酸酶钙钻法染色及Von Kossa钙化结节染色后均表现为阳性,未诱导培养的脂肪基质细胞则表现为阴性．结论初步建立了一套南脂肪组织分离培养脂肪基质细胞的方法,并证明该细胞在体外诱导培养条件下具备向成骨细胞分化的能力．     

人体脂肪干细胞培养及成骨诱导分化

目的 通过成人脂肪体外分离培养脂肪间充质干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）研究其生理特性及在特定培养条件下向成骨分化,探讨脂肪源性干细胞作为骨组织工程的种子细胞的前景.方法 从成人脂肪中利用胶原酶消化法分离并体外培养干细胞,流式细胞仪检测细胞表面标记物,CCK8检测细胞活性,P3代脂肪干细胞通过成骨诱导液诱导向骨细胞分化,BCIP/NBT比色法染色检测碱性磷酸酶（AKP）,茜素红染色检测钙结节形成,RT-PCR检测碱性磷酸酶（ALP）、骨桥蛋白（OP）表达变化.结果 成人脂肪间质来源的ADSCs,能稳定传代,增殖能力旺盛;流式细胞检测证实其特异表达相关干细胞表面标记物;成骨诱导后表现出呈典型的成骨细胞形态;ALP染色阳性,茜素红染色阳性,诱导培养0、3、7、14、21、28天后RT-PCR定量检测证实细胞中ALP、OP阳性表达.结论 成人脂肪中可分离得到ADSCs,其稳定表达特异性的表面抗原,并且经过相应诱导培养后可向骨细胞分化,阳性表达OP、ALP,可作为优良的骨组织工程的种子细胞来源.     

小鼠肺部肿瘤集聚髓源性抑制细胞实验研究

目的观察髓源性抑制细胞（MDSCs）在荷瘤小鼠肺部组织的表达情况。方法取12只C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组,每组6只。实验组：将体外培养的3LL细胞（0.3×106个）注射入小鼠尾静脉,成瘤后3周取小鼠肺组织,酶消化肺组织,制备肺组织单细胞悬液,采用流式细胞术检测MDSCs（GR1-FITC、CD11b-PE双染阳性）的表达量。对照组：在小鼠尾静脉注射PBS,其余步骤同实验组。结果实验组小鼠肺部组织高表达免疫抑制细胞MDSCs（GR＋CD11b＋双阳性）,表达量为（19.92±6.08）%;对照组MDSCs表达量为（7.06±2.67）%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。结论肺癌小鼠的肺组织高表达免疫抑制细胞MDSCs。