广东汉族人HLA－DQA基因多态性检测

广东汉族人ＨＬＡ－ＤＱＡ基因多态性检测周俊宜，罗超权，杨英浩，刘熙文（中山医科大学生物化学教研室；广州，５１００８９）关键词ＰＣＲ－ＳＳＯ，ＨＬＡ－ＤＱＡ，基因分型，基因多态性中图号０５２７．３；Ｄ９１９国外大量资料表明，ＨＬＡ各组等位基因的数量及其...     

中华民族11群体HLAⅡ类基因遗传结构分析及流动轨迹探踪

目的；阐明ＨＬＡⅡ类基因在中华民族中的旋流这和规律，并探索某些ＨＬＡ闰基因的起源。地中华民族１１嫩体和５个参考嫩休的ＨＬＡⅡ类７个多态座位的遗传结构进行聚类分析和频率分布的比较。结果和结论；初步揭示了自北向南流动的可能原于白人或黑人的基因谱和自南经流动的可能原于东进亚黄种人的基因谱；提出存在一类可能起源于中华民族某个大陆群体的ＨＬＡ基因；并发现ＨＬＡ基因在中华民族各群体之间的融合深刻而普遍，但傣、     

乙型肝炎后肝硬化与HLA—DQA 1基因

目的：了解ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因型与乙型肝炎后肝硬化有无关联。方法：对３０例乙型肝炎后肝硬化住院患者的外周血ＤＮＡ，进行聚合酶链反应法扩增ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因第二外显子多态性片，ｒ－＾３２Ｐ末端标记８个序列特异性寡核苷酸，进行斑点杂交以确定ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因型，并与４０例正常人的结果进行比较。结果：ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１０２和Ａ１＊０３０１的频率在肝硬化组较高，但均未达到统计学意义。结论：ＨＬＡ－     

中国人胰岛素依赖型糖尿病与HLA—DQ基因的相关性研究

本研究采用聚合酶链式反应和序列特异性寡核苷酸探针杂交方法，对北京地区汉族４９例胰岛素依赖型糖尿病患者及４８名健康对照者ＨＬＡ－ＤＱＢ１基因和２７例ＩＤＤＭ患者及２９名对照者ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因的研究提示：（１）ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因的Ａ４等位基因（ＲＲ＝１１．７，Ｐｃ＜０．０２）与ＩＤＤＭ易感性呈显著正相关，（２）ＨＬＡ－ＤＱＢ１基因的ＤＱＢ１０６０１（ＤＱＷ１．１２）等位基因与ＩＤＤＭ抵抗性相关（     

中国南京地区汉族人HLA－DR4DNA的快速分型

应用ＡＲＭＳ（ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｍｕｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ）方法对南京地区１００例汉族健康人ＨＬＡ－ＤＲ４进行基因分型，结果表明，本地区汉族人ＨＬＡ－ＤＲ４基因纯合子占６％，杂合子占１５％，非ＤＲ４占７９％。本法较ＰＣＲ／ＳＳＯ法简单、快速，结果可靠，可用于ＨＬＡ配型。检测结果为ＨＬＡ相关联疾病及人类学的研究提供了参考依据     

HLA-DRB1基因与2型糖尿病的关联

目的 探讨ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因与２型糖尿病的关系。方法 应用ＰＣＲ反向杂交法对１８名２型糖尿病患者进行２型糖尿病与ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因的关联研究。结果 ２型糖尿病患者ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因中ＨＬＡ－ＤＲ７基因频率明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）。结论 ２型糖尿病与ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因存在某些关联。     

HLA相容性对异基因造血干细胞移植疗效影响

用补体依赖微量淋巴细胞毒方法ＨＬＡ相容性对异基因造血干细胞移植疗效的影响。结果初步表明：供受者之间ＨＬＡ相容程度与异基因骨髓移植存活率，排斥率、ＧＶＨＤ发生率及严重程度有明显的相关性。     

HLA—DR基因分型中三种DNA提取法的比较

目的：寻找简便快速的ＨＬＡ－ＤＲ基因分型方法。方法：比较了标准酚－氯仿抽提法、ＮＰ－４９０法及快速盐析法抽提ＤＮＡ对ＨＬＡ－ＤＲ基因分型的影响。结果：３种方法抽提的ＤＮＡ含量、纯度、琼脂糖凝胶电泳结果及用于ＨＬＡ－ＤＲ基因分型的效果无差异,但酚－氯仿抽提法抽提ＤＮＡ所需时间比ＮＰ－４０法及快速盐析工。结论：ＮＰ＝４０法及快速盐析法可作为ＨＬＡ＿ＤＲ快速基因分型时提取ＤＮＡ的方法。     

中国人胰岛素依赖型糖尿病与HLA－DQ基因的相关性研究

本研究采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）和序列特异性寡核苷酸探针杂交（ＳＳＯＰＨ）方法（ＤＱＡｌ，共用９个探针，ＤＯＢ１，共１０个探针），对北京地区汉族４９例胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）患者及４８名健康对照者ＨＬＡ－ＤＯＢｌ基因和２７例ＩＤＤＭ患者及２９名对照者ＨＬＡ－ＤＱＡｌ基因的研究提示：（１）ＨＬＡ－ＤＱＡｌ基因的Ａ４等位基因（ＲＲ＝１１．７，Ｐｃ＜０．０２）与ＩＤＤＭ易感性呈显著正相关。（２）ＨＬＡ－ＤＱＢ１基因的ＤＯＢ１＊０６０１（ＤＱＷ１．１２）等位基因与ＩＤＤＭ抵抗性相关（ＲＲ＝０．０３，Ｐｃ＜０．００２）。（３）ＨＬＡ－ＤＱ６５７天门冬氨酸［ＨＬＡ－ＤＱβ５７Ａｓｐ（＋）纯合子基因型与ＩＤＤＭ易感性降低有关，而ＨＬＡ－ＤＱβ５７非天门冬氨酸［ＨＬＡ－ＤＱＢ５７Ａｓｐ（－）］纯合子基因型与ＩＤＤＭ易感性增强有关，说明ＨＬＡ－ＤＱβ链第５７位氨基酸在决定ＩＤＤＭ易感性方面的重要作用。同其它人种相比，ＨＬＡ－ＤＱβ５７Ａｓｐ（－）纯合子基因型频率在中国人群中的减少及ＨＬＡ－ＤＱβ５７Ａｓｐ（＋）纯合子基因型频率在中国人群中的增多可能同中国人群ＩＤＤＭ发病率低有关。     

骨髓移植配型中HLAⅡ类基因PCR-SSP分型技术的应用

ＨＬＡⅡ类基因是位于人类第 6号染色体短臂远端的一组高度多态的基因 ,主要包括ＨＬＡ ＤＲ、ＤＱ、ＤＰ3个亚区[1] 。ＨＬＡⅡ类基因配型对提高异基因骨髓移植存活率 ,减少ＧＶＨＤ ,具有重要意义[2 ] 。既往ＨＬＡⅡ类分型采用血清学微量淋巴细胞毒试验 ,近年国外实验室已转向基因分型 ,并已将其列为常规。我们采用序列特异性引物 (ＳＳＰ)ＰＣＲ技术对ＨＬＡ ＤＲＢ1,ＤＱＢ1进行基因分型 ,快速简便 ,报告如下。1　材料与方法1 1　样本　原山东医科大学附属医院提供 2 2名拟行骨髓移植的恶性血液病患者及相关供者样本。1.2　ＤＮＡ提取…     

HLA相容性对异基因造血干细胞移植疗效影响

采用补体依赖微量淋巴细胞毒方法观察了ＨＬＡ相容性对异基因造血干细胞移植疗效的影响，结果初步表明：供受者之间ＨＬＡ相容程度与异基因骨髓移植存活率、排斥率、ＧＶＨＤ发生率及严重程度有明显的相关性。     

HLAⅡ类基因区与1型糖尿病

目的：综述ＨＬＡⅡ类基因区与１型糖尿病的关系。方法：查阅国外有关献２０余篇加以综述。结果：ＨＬＡⅡ类基因区内的ＤＱ、ＤＲ基因位点与１型糠尿病具有相关性。结论：ＨＬＡⅡ因基因区内含有１型尿病的易感基因。     

应用PCR检测HL—60细胞诱导分化前后c—myc癌基因的扩增

应用ＰＣＲ方法研究了维甲酸（ＲＡ）和二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）诱导ＨＬ－６０细胞分化过程中ｃ－ｍｙｃ基因扩增的变化。结果：ＨＬ－６０细胞内ｃ－ｍｙｃ基因扩增为１１，经ＲＡ诱导６ｄ后，其扩增程度无明显变化，而ＤＭＳＯ诱导３ｄ后，ｃ－ｍｙｃ基因扩增出现下降，至５ｄ，较未诱导分化前下降约３０％。提示了ＲＡ和ＤＭＳＯ对ＨＬ－６０细胞不同的诱导分化机制。     

特异性寡核苷酸探针检测Graves病患者HLA—DR基因

特异性寡核苷酸探针检测Ｇｒａｖｅｓ病患者ＨＬＡ－ＤＲ基因罗国春刘述文陈香梅我们采用ＰＣＲ／ＳＳＯ技术检测４１例Ｇｒａｖｅｓ病患者ＨＬＡ－ＤＲ基因，并与２５５例正常人比较，以分析ＨＬＡ－ＤＲ与Ｇｒａｖｅｓ病的关系。一、对象和方法１．对象：Ｇｒａｖｅｓ病...     

系统性红斑狼疮与HLA—DQA1基因的相关性

为了探讨系统性红斑狼疮易感基因，用ＰＣＲ－ＰＡＧＥ法结合银染色对４１例无亲缘关系广东籍汉人ＳＬＥ患者进行ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因分型。     

无关供者骨髓移植HLA基因配型方法的进展

目前异基因骨髓移植（Ａｌｏ－ＢＭＴ）是治愈多种血液系统恶性肿瘤、免疫缺陷病和一些先天性代谢性疾病的唯一方法。Ａｌｏ－ＢＭＴ成功与否主要受限于供受者之间ＨＬＡ基因不相符而导致的移植物抗宿主反应。ＨＬＡ配型相符的骨髓同胞之间的骨髓移植成功率高于无关供者骨...     

器官移植HLA—Ⅱ类基因分型研究及应用

目的：提高ＨＬＡ－Ⅱ类基因ＤＲ、ＤＱ位点分型的准确性，选择合适的供受者对，延长移植物的存活时间。方法：对４２９例肾移植供受者ＨＬＡ－Ⅱ类基因分型进行了研究。ＰＣＲ－ＳＳＰ（聚合酶链式反应－序列特异性引物），全过程耗时３小时。结果：（１）用ＰＣＲ－ＳＳＰ方法可同时、同条件进行ＩＬＡ－Ⅱ类ＤＲ、ＤＱ基因分型。（２）１７２例次供受者ＨＬＡ－ＤＲ位点０个错配（０ＭＭ），其移植肾１年存活率为１００％；１个错配（１ＭＭ）为９２６％；２个错配（２ＭＭ）为８６５％。（３）在与疾病相关的研究中发现，尿毒症患者ＤＲ１０比例明显高于正常人。供受者ＤＲ、ＤＱ位点基因频率及单倍型连锁不平衡参数与国内外报道大致相同。结论：初步建立起一套完整的ＨＬＡ分型手段，为进一步研究ＨＬＡ打下了基础。     

反义寡核苷酸对HL60细胞c-myc基因表达的抑制和诱导分化作用

目的研究ｃｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法采用针对原癌基因ｃｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５’ｄ（ＣＴＴＣＴＣＧＡＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧ）３’与人早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞共培养５ｄ，检测ｃｍｙｃｍＲＮＡ量的变化及其对ＨＬ６０细胞分化的影响。结果用ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ检测出ＨＬ６０细胞ｃｍｙｃｍＲＮＡ的含量减少；细胞形态学变化以及非特异性酯酶（ＮＳＥ）染色、硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原试验均提示ＨＬ６０细胞出现了分化，部分细胞向粒细胞方向分化，部分细胞向单核细胞方向分化。结论ｃｍｙｃ反义寡核苷酸能够抑制ｃｍｙｃ基因的表达并能诱导ＨＬ６０细胞分化。     

HLA—DRB1基因多态性与河南汉族人群急性淋巴细胞白血病关 …

目的：探讨急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）易感性与ＨＬＡ＿ＤＲＢ１基因多态性之间的关联性,找出ＡＬＬ的易感基因。方法：采用序列特异笥引物聚合酶链反应（ＰＣＲ－ＳＳＰ）ＤＮＡ分型技术对５６例ＡＬＬ患者和１０５例健康对照组进行进行了ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因分型。结果：ＡＬＬ组与ＨＬＡ－ＤＲ７基因关联,基因频率为２４．１％,ＲＲ＝２．５６,χ＾２＝７．３４,Ｐ〈０．０１,病因分数为０．２９．其他等位基因频率ＡＬ     

序列特异性PCR在HLA—DRB1基因分型的应用

参照ＨＬＡⅡ型基因序列设计８条序列特异性引物，应用分别代表ＨＬＡ－ＤＲ１－１８血清学特异性的１１株ＤＮＡ标准品建立序列特异性ＰＣＲ（ＰＣＲ－ＳＳＰ）和套式ＰＣＲ方法，并对６４例ＩＤＤＭ病人和７２例健康对照者进行ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因分型。结果：（１）方法学鉴定示程序了各特异性引物均能从１１株ＤＮＡ标准口扩增出相应的等位基因，并能检出杂合子。除ＨＬＡ－ＤＲ３组特异引物对ＤＲ１发生交叉外，其余序列特异性