苯巴比妥诱导对普罗帕酮体外I相代谢的立体选择性影响

目的：观察苯巴比妥对S（ ）-和R（-）-普罗帕酮（PPF）体外I相代谢有无立体选择性的影响。方法：将消旋普罗帕酮与对照或苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体孵育后,采用手性衍生化反相高效液相色谱法,测定对映体的经时孵育曲线和酶动力学参数（最大反应速度、米氏常数、内在消除率）。结果：在对照大鼠肝微粒体中,PPF的I相代谢无立体选择性。经苯巴比妥诱导处理后,在5mg/L底物浓度时R（-）-PPF的代谢快于S（ ）-PPF,两对映体的米氏常数和内在清除率有显著性差异。结论：苯巴比妥选择性地诱导了大鼠肝微粒体对PFF的I相代谢。     

苯巴比妥诱导对普萘洛尔对映体的体外葡醛酸缀合反应立体选择性的影响

目的：探讨苯巴比妥诱导作用对鼠肝微粒体的体外葡醛酸结合反应立体选择性的影响。方法：用空白对照微粒体和垃苯巴比妥(PB)诱导的微粒体作酶源,用UDPGA启动葡醛酸结合反应,RP-HPLC法测定温育液中底物的浓度,观察苯巴比妥诱导作用对普摹洛尔对映体葡醛酸结合反应的立体选择性的彰响。结果：普萘洛尔R( )和S(-)两种对映体在两种鼠肝微粒体的体外孵育葡醛酸缀合代谢中,酶与底物亲和力、最大反应速度和内在清除率均表现出立体选择性。在酶与底物的亲和性和Clint参数方面,S(-)为优势对映体。诱导剂PB的处理使酶与S(-)对映体的亲和力和最大反应速度均显著增强,与R( )对映体的最大反应速度显著增强,但酶与R( )对映体的亲和力无显著变化,S(-)对映体的CUm值显著下降,而R( )对映体的Clint值则显著增大。酶源对普蓁洛尔对映体的葡萄糖醛酸化清除能力以S(-)型为优势对映体。结论：PB的诱导使鼠肝微粒体立体选择性差异缩小,但未改变其顺序,仍以S(-)型对映体占优势。     

苯巴比妥诱导对普萘洛尔对映体葡醛酸化立体选择性的影响

目的:以空白及苯巴比妥(PB)诱导的大鼠肝微粒体作为代谢反应酶源,研究R-( )及S-(-)-普萘洛尔体外葡醛酸化反应的立体选择性,考察酶动力学特性和对映体之间的代谢性相互影响.方法:采用体外孵育法进行底物葡醛酸化反应,高效液相色谱法分离测定普萘洛尔2种对映体葡醛酸化代谢产物.结果:空白及诱导组中,各种浓度下均以R-( )-普萘洛尔为优代谢对映体;与空白组相比,PB诱导组中R-( )、S-(-)-普萘洛尔的最大反应速度均显著增强(P<0.01);R-( )-普萘洛尔与酶的亲和力显著增强(P<0.01),S-(-)-普萘洛尔与酶的亲和力显著降低(P<0.05).结论:普萘洛尔2种对映体葡醛酸结合反应呈立体选择性;2种对映体间在高底物浓度时存在代谢抑制作用.     

氧氟沙星I相代谢的立体选择性

目的：测定Ｓ－（－ ）－和Ｒ－（＋ ）－氧氟沙星（ＯＦＬＸ）体外Ｉ相代谢的立体选择性。方法：分别将Ｓ－（－ ）－和Ｒ－（＋ ）－ＯＦＬＸ与大鼠肝微粒体孵育后,采用反相高效液相色谱方法,测定代谢物随反应时间的生成曲线和酶动力学参数（最大反应速度、米氏常数,清除率）。结果：Ｓ－（－ ）－ＯＦＬＸ代谢物的生成量和生成速度均大于Ｒ－（＋ ）－ＯＦＬＸ,两对映体的酶动力学参数也有显著差异。结论：Ｓ－（－ ）－ＯＦＬＸ和Ｒ－（＋ ）－ＯＦＬＸ在大鼠肝微粒体中的Ｉ相代谢具有立体选择性。     

细胞色素P—450对β—阻滞剂类药物代谢物与鼠肝微粒体大分子形成络合物的选择作用

目的：探讨不同来源鼠肝微粒体对β-阻滞剂类药物代谢形成络合物的选择能力和可能机制。方法：将经β-萘黄酮（BNF）、苯巴比妥（PB）、地塞米松（DEX）、普萘洛尔（PROP）、阿替洛尔（ATE）5种药物处理的鼠肝微粒体及对照组微粒分别与β-阻滞剂类的药物共孵育,测定孵育后代谢络合物形成的差示光谱。结果：与对照组相比,经PROP处理的鼠肝微粒体降低PROP代谢络合物形成,但增加美托洛尔（METO）代谢络合物形成;PB抑制PROP代谢;而BNF诱导METO代谢。S-PROP在不同微粒体中形成络合物能力较R-PROP强。结论：细胞色素P-450亚族地不同β-阻滞剂类药物或其对映体形成代谢络合物具有选择性作用。     

普罗帕酮立体选择性研究及临床意义

大多数人工合成的手性药物临床使用其消旋体(两种旋光对映体50-50比例的混合物)。两种对映体由于几何构型不同,其药动学及药效学特点可有差别,即表现出立体选择性(Stereoselectivity)［1］。普罗帕酮(Propafenone,心律平)为Ic类抗心律失常药,临床主要用于室上性、室性心动过速、预激综合症伴快速房颤、以及伴有心肌梗塞的心律常患者。普罗帕酮临床以消旋体供药,但近年来研究发现,其两对映体即(R)-和(S)-普罗帕酮药动及药效学特点表现立体选择性,且二者间存在相互作用。本文就此作一综述。1 普罗帕酮药动学的立体选择性普罗帕酮在人…     

依普黄酮体外代谢性药物相互作用研究

目的:研究依普黄酮与常用心血管类药物、激素类药物等在细胞色素P450酶介导的代谢过程中的相互作用.方法:以β-萘黄酮诱导的大鼠肝微粒体为酶源,将依普黄酮与普罗帕酮或雌二醇等共孵育,用HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度,观察依普黄酮与这些药物在体外代谢中的相互影响.结果:①与未加入依普黄酮相比较,10 μg/ml普罗帕酮与50 μg/ml依普黄酮共孵育后,普罗帕酮的代谢受到抑制,差异均有显著性(P<0.01),而10 μg/ml雌二醇与10 μg/ml或100 μg/ml依普黄酮共孵育后,雌二醇的代谢几无影响(P＞0.05).②与未加入其它药物相比较,20 μg/ml的依普黄酮分别与0.5 μg/ml的普奈洛尔或0.5 μg/ml的普罗帕酮或5.0 μg/ml的雌二醇共孵育后,依普黄酮的代谢受到不同程度的抑制,差异均有显著性(P<0.05,P<0.05,P<0.02).结论:依普黄酮与普罗帕酮之间代谢互受影响,而与雌二醇之间的相互作用程度较低.     

延胡索乙素对映体对小鼠CYP450酶诱导和抑制作用研究

目的:考察延胡索乙素(tetrahydropalmatine,THP)对映体对小鼠肝脏主要CYP450酶的体外抑制及体内诱导作用,从而预测其在临床上可能发生的代谢性药物相互作用,为临床合理用药提供科学依据。方法:以探针底物法,考察左旋延胡索乙素[(-)-tetrahydropalmatine,(-)-THP]和右旋延胡索乙素[(+)-tetrahydropalmatine,(+)-THP]体外对小鼠肝微粒体主要Ⅰ相代谢酶CYP1A2、CYP2C、CYP2D22、CYP2E1、CYP3A11活性的影响;采用微粒体体外孵育鸡尾酒法(cocktail法),考察小鼠经高、低剂量(-)-THP和(+)-THP(240 mg/kg和60 mg/kg)连续灌胃7 d后,其肝微粒体中主要I相代谢酶活性的变化,以评价(-)-THP和(+)-THP对小鼠肝微粒体主要CYP450酶是否具诱导作用。结果:(-)-THP和(+)-THP体外对小鼠肝微粒体主要的CYP 450 I相代谢酶的抑制作用均不强,(+)-THP对CYP2C抑制的IC50为43.89μmol/L,两者对本研究考察的其它CYP亚型的IC50均大于100μmol/L;...     

HPLC-MS/MS法研究普萘洛尔对映体在不同种属肝微粒体中的代谢差异

  目的  采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）建立R-（+）-普萘洛尔和S-（-）-普萘洛尔在肝微粒体孵育体系中的含量测定方法,并分别比较普萘洛尔不同对映体在大鼠、犬、猴以及人4种肝微粒体中的代谢特征。  方法  分别将R-（+）-普萘洛尔和S-（-）-普萘洛尔溶解在由烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）启动孵育的不同种属的肝微粒体中,在孵育不同的时间后加入乙腈终止反应。使用电喷雾离子源（ESI）,以卡维地洛为内标,在多反应监测模式（MRM）下进行正离子扫描,分别测定各孵育体系中R-（+）-普萘洛尔和S-（-）-普萘洛尔的浓度。以孵育0 min时不同构型的普萘洛尔的质量浓度为参照,分别计算R-（+）-普萘洛尔和S-（-）-普萘洛尔在不同肝微粒体样品中的药物剩余百分比和体外代谢半衰期和固有清除率。  结果  普萘洛尔的线性范围为0.05～10.00 μg/mL,定量下限为0.05 μg/mL;日内、日间精密度的RSD%均小于13%。在4个种属的肝微粒体孵育体系中,R-（+）-普萘洛尔在大鼠肝微粒体中代谢快,在猴肝微粒体中次之,在犬和人肝微粒体中代谢慢,体外消除半衰期依次为大鼠 < 猴 < 犬 < 人;而S-（-）-普萘洛尔则是在大鼠和犬肝微粒体中代谢快,在猴和人肝微粒体中代谢慢,体外消除半衰期依次为大鼠 < 犬 < 猴 < 人。在大鼠、犬和猴肝微粒体中,R构型普萘洛尔的t_1/2均大于S构型,CL_int小于S构型,但在人肝微粒体中却刚好相反。采用单因素方差分析,R-（+）-普萘洛尔和S-（-）-普萘洛尔在4种肝微粒体中的体外代谢半衰期t_1/2和固有清除率CL_int均具有显著性差异（P < 0.05）。  结论  建立的HPLC-MS/MS法具有简单、快速、准确的特点,可用于肝微粒体中普萘洛尔对映体质量浓度的测定。不同构型的普萘洛尔在大鼠、犬、猴和人4种肝微粒体中的代谢稳定性有显著差异。     

普萘洛尔在人肝细胞色素P450转基因细胞中的立体选择性测定

目的：建立一种手性色谱法，用于普萘洛尔经人肝细胞色素P450特基因细胞S9代谢的立体选择性研究。方法：以S—( )—普罗帕酮为内标，用柱前GITC手性衍生化反相高效液相色谱法测定普萘洛尔对映体在S9孵育液中的浓度。结果：5—(-)—普萘洛尔、内标及R—( )—普萘洛尔获基线分离。在5—500μmol/L／L范围内线性良好。定量限5μmol/L／L(22＝5，RSD＜10％)。S—(-)—和R—( )—普萘洛尔的平均回收率分别为98．7％和98．1％。日内、日间精密度均小于10％。经时孵育试验表明，普萘洛尔经CYP2Cl8有S—(-)—体优先代谢的立体选择性，而经CYP2C9有R—( )—体优先代谢的立体选择性。结论：该法简便、准确、重现性好、专属性强，可以用于普萘洛尔体外代谢的立体选择性研究。