降钙素对骨质疏松性骨内种植体影响的实验研究

目的　研究降钙素对骨质疏松性兔骨内种植体骨整合的影响。方法　将 12只骨质疏松症兔随机分均为 2组 ,其中 1组予降钙素治疗 ;另取同龄健康新西兰雌兔 6只作为健康对照。在各兔胫骨内植入纯钛螺纹状种植体 ,种植体植入 2、4和 8周后分别获取各组标本 2个 ,进行组织学、影像学等检查 ,观察各组种植体的骨整合效果。结果　各组种植体的骨整合效果在植入 4周时有明显差异 ,由高到低依次为正常对照组、降钙素组和骨质疏松症组 ;8周时差异无显著性。结论　降钙素对骨质疏松性骨内种植体的骨整合有促进作用     

降钙素对骨质疏松性骨内种植体骨生物力学性能的影响

目的 探讨降钙素对骨质疏松症兔胫骨植入种植体后生物力学性能的影响.方法 将72只健康新西兰雌兔随机平分为3组,其中2组经过卵巢切除形成骨质疏松症兔,再随机分为降钙素实验组(CT组)和骨质疏松症对照组(OP组);第3组为正常对照组(NC组).各组兔胫骨内植入纯钛螺纹状种植体,其中,CT组以降钙素治疗,其它2组用生理盐水治疗.各组分别于第2、4、8周后获取8个标本,行生物力学性能测定.结果 第2、4、8周时,各组平均弯曲破坏载荷(bend load,BL)为:NC组＞CT组＞OP组,差异有统计学意义(P＜0.01);各组平均最大拉伸长度(maxillary tensile length,TLmax)为:NC组＜CT组＜OP组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 降钙素对骨质疏松症有治疗作用,且能提高骨质疏松症骨的生物力学性能.     

透明质酸钠复合rhBMP-2促进骨质疏松症种植体骨结合的实验研究

目的:探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对于骨质疏松症种植体骨结合的影响?方法:构建骨质疏松症大鼠模型,随机分为对照组?模型组和实验组,于胫骨内植入种植体?实验组种植体周围植入透明质酸钠复合rhBMP-2,对照组及模型组植入同等体积的透明质酸钠?术后4周和8周,通过X线?组织学切片及扫描电镜分析技术,观察各组胫骨内种植体骨结合的情况?结果:实验组种植体周围新生骨组织包绕,骨质致密,结构优良,未见明显骨吸收现象,骨结合良好?对照组种植体周围同样新生骨形成,部分区域见炎症反应,少量结缔组织长入种植体周围?模型组种植体周围骨组织形成较少,种植体脱落,未形成骨结合,种植体窝内炎症反应明显,周围结缔组织增生,部分区域出现骨质断裂?结论:rhBMP-2能够显著促进骨质疏松症大鼠胫骨内种植体周围新骨形成,加快成骨速度,促进骨质矿化,形成良好的骨结合?     

微种植体表面酸蚀喷砂处理对周围骨组织NGF表达的影响

目的探讨酸蚀喷砂处理对微种植体周围骨整合过程中神经生长因子(NGF)表达的影响。方法 36枚微种植体随机分为2组,种植体表面进行SLA(酸蚀喷砂)处理为SLA组(n=18),种植体表面未进行处理为对照组(n=18)。选取6只Beagle犬下颌骨为植入区,每只犬一侧植入3枚SLA种植体(实验组),对侧植入3枚未经SLA处理的微种植体(对照组)。在实验初始、4周、6周时分别于下颌骨左右侧各植入1枚,实验8周时处死动物,获得愈合时间8周组、4周组、2周组的微种植体骨标本,并进行免疫组织化学观察及NGF平均光密度值测定。结果免疫组织化学显示2周时实验组和对照组NGF的染色强度最强,4周、8周时实验组染色强度减弱。而对照组4周时染色强度仍较高,8周减弱。2周时实验组NGF平均光密度值高于对照组(P<0.05),4周时实验组低于对照组(P<0.05),8周时NGF平均光密度值实验组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。两两比较发现除对照组2周与4周组无显著差异外(P>0.05),各组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论对微种植体表面进行SLA处理,可以促进骨整合的形成,具有良好的初期稳定性,可以进行早期负载。     

辛伐他汀与Bio-Oss骨粉复合物修复种植体周骨缺损的实验研究

目的探讨辛伐他汀（simvastatin,Simv）与Bio-Oss骨粉复合物对兔胫骨种植体周骨缺损修复的效果。方法选择12只健康日本大耳白兔,分别在双侧胫骨体部上1/3处各植入1枚种植体,并在种植体一侧建立骨缺损区。随机分为实验组（A组）和对照组（B组）,每组6只。实验组植入辛伐他汀与Bio-Oss骨粉复合物;对照组仅植入Bio-Oss骨粉,分别于术后4、8周各处死动物6只,行大体观察和骨密度分析。结果大体观察：4周时,A、B两组标本表面有少许骨痂生成;8周时,A组较B组可见明显的新骨生成。骨密度扫描：4周时,两组间差异无统计学意义;8周时,两组间差异有统计学意义,实验组单位面积的骨矿盐含量高于对照组。结论辛伐他汀与Bio-Oss骨粉复合物较Bio-Oss骨粉单独应用可以更好地促进兔胫骨种植体周围缺损区骨质的形成。     

兔上颌前牙即刻种植动物模型的构建及其骨结合观察

目的：构建新西兰兔上颌前牙即刻种植的实验动物模型,观察不同时间点的种植体骨结合特征。方法：准备16只新西兰兔,随机分为2周、4周、8周、12周组,每组4只。拔除兔的上颌前牙,在其新鲜拔牙窝内即刻植入纯钛实验种植体。术后分别在2周、4周、8周、12周采集含种植体的上颌骨标本,再通过大体观察、Micro?CT扫描、组织切片染色研究即刻种植后不同时间点的种植体骨结合特征。结果：①大体观察：各组实验兔的术后状态正常,食欲无明显异常,创口愈合良好,种植体均未松动脱落。②Micro?CT分析：随着种植体植入后愈合时间的延长,种植体螺纹处的骨质密度和厚度不断增加。③ 组织学检测：随着种植体植入后时间的延长,硬组织切片染色测算所得的种植体?骨接触率（bone?implant contact ratio,BIC）稳步增长,而脱钙颌骨切片染色显示种植体周围的骨质结构呈散在?岛状?条索状?板层状骨演化,提示骨结合形成良好。2周和4周组中存在大量的破骨细胞和炎症细胞,8周和12周组中则几乎未见这类细胞,但存在更多的红细胞和黄骨髓。结论：兔上颌前牙拔除后即刻植入种植体可构建即刻种植动物模型,为即刻种植后骨结合过程的观察以及钛种植体的动物体内研究提供新的选择和途径。     

载NGF纳米管促进种植体界面骨愈合的实验研究

目的 研究载神经生长因子(nerve growth factor,NGF)纳米管对种植体界面骨愈合的影响。方法 将纯钛种植体制备纳米管结构,加载NGF。选择健康成年比格犬6只,在拔牙即刻植入种植体(实验组植入载NGF纳米管种植体,对照组植入纳米管种植体,空白组植入未处理实验用种植体),随后于种植体近中制备骨缺损。术后4周和8周观察种植体情况,行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测、组织学观察和骨计量学分析。结果 种植体植入术后4周,ALP活性明显高于术后8周,其中以实验组数值稍低。随着植入时间的延长,ALP均降低,3组降幅相近。组织学观察发现术后4周和8周实验组的种植体界面可见更多的新生骨质,且骨质矿化程度更高。对照组和空白组的新生骨量略少,矿化略低。术后4周各组种植体骨结合率分别为63.105%±5.236%、43.219%±3.305%和32.312%±3.024%;术后8周分别为89.453%±6.315%、82.207%±5.183%和85.367%±6.148%。结论 载NGF纳米管能够在种植体界面骨愈合早期有效改善新骨的质量,加速其沉积矿化,进而提高种植体骨结合率。     

不同皮质骨厚度区域的加载正畸微种植体骨整合的组织形态学和生物力学分析

目的研究皮质骨厚度(CBT)对正畸微种植体骨整合的影响。方法选择四川大学实验动物中心的健康雄性成年Beagle犬12只,依据种植钉植入区皮质骨厚度分为厚CBT组与薄CBT组,将48枚微种植体植入12只Beagle犬两侧胫骨,厚CBT组与薄CBT组微种植体分别在距近中干骺端4 cm和2 cm处植入。术后1、3、5、7周处死,作力学拉拔测试和组织形态学研究。结果薄CBT组和厚CBT组1、3、5、7周CBT比较差异均有统计学意义(P<0.05);在第1、3、5周,厚CBT组骨整合、皮质骨体积密度(骨体积/总体积)、相交表面(与骨表面接触的微种植体)均显著高于薄CBT组,第7周时两组间差异无统计学意义;厚CBT组最大拉拔力在1周达顶峰,3周降到最低点,薄CBT组则随时间延长持续上升。结论较大CBT对微种植体初期稳定性有益,而较薄皮质骨更有利于二期稳定性的获得。     

兔下颌前牙即刻种植后种植体周围炎动物模型的构建

目的：构建兔下颌前牙即刻种植后种植体周围炎动物模型。方法：选取12只健康雄性新西兰大白兔,麻醉后拔除兔下颌左侧前牙,在拔牙窝中即刻植入锥柱状纯钛种植体。待种植体植入8周后,随机选择3只实验兔处死,采用Micro-CT观察种植体骨结合状况。剩余实验兔随机分为3组：空白组不加刺激,对照组种植体周围注射磷酸盐缓冲溶液,实验组注射细菌内毒素溶液。加刺激2周后处死实验动物,取含种植体的下颌骨标本,采用Micro-CT观测骨量;取种植体周围牙龈标本,采用HE染色,观察牙龈组织病理学改变。结果：即刻种植8周后,种植体骨结合良好,牙龈健康。加刺激2周后,空白组和对照组牙龈健康呈粉红色,质地坚韧,种植体骨结合良好,种植体顶部骨组织无明显吸收,牙龈组织中见散在炎症细胞;实验组牙龈红肿,质地软,种植体顶部牙槽骨明显吸收,骨密度和骨体积分数显著降低,牙龈组织中见大量炎症细胞弥散性浸润。结论：种植体周围局部注射细菌内毒素可快速构建兔种植体周围炎原位动物模型。     

正畸微植体支抗即刻负载后微植体-骨界面的组织形态学变化

目的:观察微植体植入即刻负载后不同时期微植体-骨界面的组织形态学变化.方法:健康犬4只,微型种植体32枚,将其分别植入犬双侧上颌颊侧基骨处,一侧为实验组,另一侧为对照组.实验组相邻两钉间即刻加载水平向力1.96 N.实验动物分别于加载后1、2、4、8周处死.采用HE染色及喷金法对加载后不同时期微植体-骨界面横断面各部位组织形态进行观察.结果:观察期内32枚种植体无松动、脱落,周围软组织愈合良好.2周内种植体与骨组织成纤维性愈合;4周时骨界面处有类骨质出现;8周时有层状骨形成.对照组4周时有明显类骨质形成.骨界面处各部位组织反应以颈部最重,尖部最轻;受力侧以吸收为主,非受力侧以增生为主.结论:界面处各部位骨组织反应不同;即刻加载不影响种植体-骨界面的骨整合.     

Effects of bone morphogenetic protein on the osseointegration of porous-surfaced implants：An experimental study in rabbits

Objective： Research on enhancing early osseointegration of cementless implants to improve early fixation and reducing of risk of loosening. Methods ： Thirty New Zealand rabbits were divided into two groups at random. BMP combined with DBM 30 mg was inserted around the prosthesis in 15 rabbits as experimental group, the remaining rabbits were served as control group. After 4, 8, and 12 weeks, five rabbits were sacrificed in each group. The humerus with the implants were retrieved. Bone ingrowth was analyzed by none-decalcification bone ground section and biomechanical test. Results： At the end of 4 and 8 weeks the osseointegration rates of BMP group were higher than those of control （P 〈 0.05）. The ultimate shear strength between BMP treated implantation and the control was the same as the results in osseointegration rates at 4, 8 weeks （P 〈 0.05）. However, there was no difference between the treated and untreated group in the osseointegration rate and ultimate shear strength at 12 weeks （P 〉 0.05）. Conclusion： BMP combination can enhance bone growth into gaps around cementless implants, especially in the early postoperative period.     

重组人血管内皮抑制素抑制角膜新生血管的实验研究

探讨重组人血管内皮抑制素(恩度)对于缝线诱导兔角膜新生血管的抑制作用。方法新西兰大白兔24只,按随机数字表法分为3组(A组、B组、C组、每组8只),采用缝线诱导法制备兔角膜新生血管。A组采用球结膜下注射生理盐水0.1mL,隔日1次;B组采用球结膜下注射恩度0.1mL,隔日1次;C组采用球结膜下注射地塞米松0.1mL(0.5mg),隔日1次。每日裂隙灯下观察并测量角膜长出的角膜新生血管的长度,计算出新生血管的面积,共3周时间。结果 B组和C组各时间点新生血管的长度和面积均小于A组,差异有统计学意义(P<0.001)。B组在第13天和第18天新生血管的长度和面积均小于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论动物实验表明恩度可以有效地抑制角膜新生血管的生长。     

异体脱蛋白松质骨复合骨唾液酸蛋白修复兔桡骨缺损

目的探讨骨唾液酸蛋白（Bone sialoprotein,BSP）在修复新西兰大白兔桡骨缺损中对骨形成和骨改建的作用,本实验拟评价骨唾液酸蛋白在兔体内的成骨活性,并为临床治疗骨缺损提供理论基础。方法采选用合适龄新西兰大白兔36只,前肢中段外侧骨段（连同骨膜）15mm,建立兔桡骨缺损模型,随机分为脱蛋白松质骨复合骨唾液酸蛋白组（A组）,脱蛋白松质骨组（B组）,自体骨移植组（C组）,分别于骨缺损处植入蛋白松质骨复合骨唾液酸蛋白,脱蛋白松质骨,自体骨移植,并在术后第4、8、10、12周,ABC三组各组随机选择3只动物,处死后游离桡骨标本备检。分别观察各组动物桡骨愈合X线片正侧位片情况,肉眼观察标本愈合情况,组织学观察。结果①脱蛋白松质骨复合骨唾液酸蛋白组肉眼观察,X线检查,HE染色均显示骨愈合均快于脱蛋白松质骨组,②脱蛋白松质骨复合骨唾液酸蛋白组肉眼观察,X线检查,HE染色均显示骨愈合均稍慢于自体骨移植组。结论脱蛋白松质骨复合骨唾液酸蛋白组与脱蛋白松质骨组相比,成骨活性增加,具有一定程度成骨活性,但较自体骨仍有差异。     

催产素干预兔骨质疏松模型骨微结构变化规律的实验研究

目的 采用显微CT(Micro-CT)评估催产素(oxytocin, OT)干预骨质疏松(osteoporosis, OP)后的骨质及骨微结构时序变化规律。 方法 60只20周龄新西兰雌性大白兔随机分为对照组、OP模型组和OT干预组,每组20只。对照组施行假手术,OP组行双侧卵巢切除术(ovariectomy, OVX)。OT组在兔OVX术后第2周起,每天皮下注射催产素持续8周或至实验时间点为止,对照组和OP组则皮下注射生理盐水。三组分别在术后第0、4、8、10、12周处死,获取兔左后股骨上段行Micro-CT扫描,计测骨组织矿物质密度(tissue mineral density, TMD)和主要骨微结构参数,三组间结果进行比较、统计学分析。结果 OP组TMD、骨体积分数(bone volume fraction, BV/TV)、骨小梁数目(trabecular number, Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness, Tb.Th)从第8周开始较对照组明显降低(P＜0.05),骨结构模型指数(structure model index, SMI)、骨小梁间隙(trabecular space, Tb.Sp)则较对照组明显升高(P＜0.05)。OT组TMD直到第12周较对照组明显降低(P＜0.05),而BV/TV、Tb.N从第8周开始较OP组明显增加(P＜0.05),Tb.Th从第10周开始较OP组增加(P＜0.05),SMI、Tb.Sp从第8周开始较OP组明显降低(P＜0.05)。结论 OP模型兔早期活体OT干预可有效减缓骨质衰败程度,Micro-CT能动态观察其病理生理变化过程,OT可能是一种有效防治OP的药物。     

松质骨骨折愈合方式的实验研究

目的研究兔股骨髁间截骨后松质骨骨折愈合方式。方法采用成年新西兰兔30只。在兔股骨髁间作完全性截骨后,分别采用皮质骨和松质骨螺钉内固定。术后3d,1、2、3和6周截取标本进行光镜观察和核酸原位杂交分析。结果采用皮质骨螺钉固定时,其愈合方式主要通过编织骨修复骨小梁。采用松质骨螺钉固定,其愈合方式主要通过板层骨重建骨小梁。结论兔股骨髁间截骨后,松质骨骨折愈合存在着直接骨形成和间接骨形成两种愈合方式。     

自体骨髓间充质干细胞移植促进交叉韧带重建后腱骨愈合的研究

目的探讨自体骨髓间充质干细胞对促进兔前交叉韧带重建后腱骨愈合的影响。方法采用骨髓穿刺法获取兔骨髓,体外分离、培养、扩增获得骨髓间充质干细胞。18只成年新西兰大白兔随机分为两组,每组9只,每只兔行双侧前交叉韧带重建手术,实验组将骨髓间充质干细胞和生物蛋白胶混合注入兔前交叉韧带重建模型的肌腱和骨道间隙内,对照组只注射生物蛋白胶,分别在2、4、8周各时间点每组处死3只兔子取材。组织学观察腱骨界面的愈合情况。结果对照组,术后8周在腱骨界面之间为瘢痕组织,腱-骨结合较紧密,有类Sharpey纤维成分。实验组,术后2周腱骨结合部位已经出现未成熟的类软骨细胞,术后8周为较成熟的软骨细胞,排列较整齐,从肌腱向骨道逐渐移行,类似于正常前交叉韧带的止点结构。结论前交叉韧带重建后,自体骨髓间充质干细胞移植于腱骨界面,形成类似正常前交叉韧带止点样结构,有利于促进腱骨愈合。     

脱钙骨基质为骨组织工程支架修复骨缺损实验研究

目的：利用骨组织工程原理对节段性骨缺损进行修复,探讨脱钙骨基质（demineralized bone matrix,DBM）在骨组织工程中的应用。方法：从兔股骨分离骨髓间质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）,经体外诱导分化、条件培养、5-溴-2′-dexyouridine,5-BrdU）标记后,接种到兔海绵状脱钙骨基质（sponge of DBM ,SDBM）支架上,然后分别植入兔背部肌肉内及兔桡骨中段10mm长的骨膜骨缺损内。对照组为缺损内单纯植入SDBM及空白组。术后观察6周。结果：经条件培养的BMSCs可在体外表达Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶,并形成钙结节;体内异位植入组织工程骨块可形成软骨及骨组织;组织工程骨块及单纯SDBM在术后6周完全修复骨缺损（6/6）;极限压缩强度测量显示,组织工程骨块植入组新生骨与正常桡骨段差异无显著性（P=0.623）,单纯SDBM植入组新生骨在生物力学方面低于正常桡骨段（P=0.038）。结论：脱钙骨基质在骨组织工程中是一种有效的生物活性支架材料。     

珍珠层/聚乳酸重组人工骨修复动物骨干缺损的实验研究

目的 探讨珍珠层/聚乳酸重组人工骨(NPCB)在体内的生物相容性、降解情况及成骨特点,评价其性能,为进一步的应用提供实验依据。方法 将NPCB随机植入成年新西兰白兔1.5 cm的桡骨缺损内,并设立不植入任何材料的空白对照,观察NPCB植入后动物的局部反应,检测动物术后1周、4周的血钙值,并与术前1天比较;于术后6、8、12、16周取材,作X线、骨矿含量、大体标本及组织形态学观察,分析不同时期组织反应、骨缺损修复及材料降解情况。结果 NPCB植入后无明显的局部不良反应,术后1周、4周血钙值与术前1天相比无明显差异。植入NPCB的骨缺损内骨矿含量在6~12周时升高幅度明显高于空白对照组,但12周后植入NPCB的骨缺损内骨矿含量出现下降。X线检查、大体标本及组织形态学观察显示NPCB的成骨方式主要是骨传导成骨,至术后16周时骨缺损基本修复,NPCB与宿主骨结合紧密,而空白对照骨缺损断端仅有少量骨修复,形成骨不连。NPCB植入后即开始其降解过程,12周以后材料周围出现较多吞噬有材料颗粒的巨噬细胞和多核巨细胞,16周时仍有部分材料未降解吸收。结论 NPCB具备良好的生物相容性和骨传导能力,可以在体内逐渐发生生物降解。     

Diaphyseal defect repair with nacre/polylactic acid composite artificial bone in rabbits]

OBJECTIVE: To evaluate the biocompatibility, degradation and bone formation activity of a new bone substitute for bone grafting, nacre/polylactic acid composite artificial bone (NPCB). METHODS: Radial bone defects 1.5 cm in length were induced in 32 New Zealand rabbits and immediately filled with NPCB or nothing. The animals' local and whole body responses to the implants were observed after the operation, and the serum calcium levels were detected 1 week and 4 weeks postoperatively. Tissue response, new bone formation in the defects and degradation of the implants were evaluated by X-ray, and examination of the bone mineral content (BMC) in the defects and histomorphological analysis were performed after the rabbits were sacrificed. RESULTS: All the rabbits survived the operation and the incisions healed smoothly. No significant difference was noted in the serum calcium level between 1 day before operation, 1 week and 4 weeks postoperation. BMC in the defects of the rabbits with NPCB grafts increased more rapidly than that in the control group 6-12 weeks after the operation and began to decrease after 12 weeks. Gross, X-ray and histological observations revealed that NPCB possessed osteoconductive activity and new bone ingrowth in the implants was found during the whole experiment. At 16 weeks, the defects grafts were almost completely repaired with NPCB while the defects in the control group remained nonunion. Biodegradation of the implants was observed early at 6 weeks, with numerous macrophage and multinuclear giant cells containing phagocytosed NPCB particles around the implants at 12 weeks, but NPCB remnants were still visible at 16 weeks. CONCLUSION: As a bone substitute, NPCB possesses good biocompatibility, biodegradability and osteoconductive activity.