脑缺血再灌注损伤的病理生理研究进展

脑缺血再灌注损伤是一复杂的病理生理过程,这个级联反应包括许多环节,如能量障碍,细胞酸中毒、兴奋性氨基酸释放增加、细胞内钙失稳态、自由基生成、炎性细胞因子的释放、凋亡基因激活等。本文就脑缺血再灌注损伤有关的病理生理研究进展做一综述。     

脑缺血再灌注损伤主要发病机制的研究进展

脑血管疾病是一种严重危害人类身体健康的疾病,具有死亡率、致残率高和难以预见等特点,一直受到国内外医学界的广泛关注。缺血性脑损伤疾病占脑血管疾病的绝大部分,当脑组织缺血时间较长时,再给予恢复血流再灌注的处理会进一步加重脑组织的损伤程度,此即为脑缺血再灌注损伤。脑缺血再灌注损伤的发病机制是一个快速的级联反应,这个级联反应包括许多环节［1,2］。主要环节有细胞内钙稳态失调、脑组织中氨基酸含量失稳态、自由基生成、炎症反应、凋亡基因激活及能量障碍等。这些机制彼此重叠,相互联系,形成恶性循环,最终引起细胞凋亡或坏死,导致缺血区脑组织不可逆的损伤。     

脑缺血/再灌注损伤机制的研究现状

缺血性脑血管病已成为当今世界最主要的致死、致残的疾病。脑缺血后再灌注既可挽救濒临死亡的细胞,又可加重缺血细胞的损伤,引起缺血/再灌注损伤。这是一个复杂的病理生理过程,包括许多环节,如炎性反应、细胞内钙失稳态、自由基生成、能量障碍、兴奋性氨基酸释放增加、凋亡基因激活等均参与了该事件的发生。现就脑缺血/再灌注损伤相关机制的研究进展予以综述。     

脑缺血再灌注损伤机制与治疗现状

脑缺血再灌注损伤是一种复杂的病理生理过程,这个级联反应包括多种因素多种环节相互作用、共同参与。现就脑缺血再灌注损伤的机制和治疗做一综述。     

脑缺血/再灌注损伤机制研究进展

脑缺血/再灌注损伤是多种机制参与的一种复杂病理生理过程,主要与自由基过度形成、兴奋性氨基酸毒性作用、细胞内钙超载、炎性反应等多种机制有关,多种环节因素之间又互相作用,进一步促进脑缺血/再灌注损伤后的神经功能破坏、脑梗死灶形成。脑缺血/再灌注损伤后通常出现神经细胞死亡和迟发性神经细胞死亡两种形式,后者是一种细胞主动性死亡,称之为凋亡,是脑缺血/再灌注损伤的最重要形式,受基因调控影响,机制尚不完全明确。     

脑缺血再灌注损伤治疗的实验研究进展

在脑缺血再灌注损伤过程中,脑组织的缺血缺氧导致氧化应激反应,产生的氧自由基可通过某些途径如脂质过氧化、蛋白质变性造成细胞坏死;线粒体、内质网途径、死亡受体途径的激活及直接的DNA损伤等导致细胞凋亡;炎症瀑布级联反应以及细胞信号调节等途径造成细胞死亡。目前实验研究发现,通过抗氧化剂、细胞凋亡抑制剂、抗炎、干扰细胞信号调节的药物以及中医药针灸等,可以缓解脑缺血再灌注损伤。本文综述了脑缺血再灌注损伤相关的实验研究,为临床脑缺血患者的治疗提供实验依据。     

Caspase-3激活和细胞色素c释放在脑缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨Caspase-3激活和细胞色素c释放在脑缺血再灌注损伤后神经元细胞凋亡中的作用。方法利用MACo法建立小鼠急性脑缺血模型，以酶活性测定、Western 杂交和免疫组化等方法对Caspase-3活性变化和激活以及细胞色素c释放进行规律性观察。结果① 脑缺血再灌注损伤后3h Caspase-3活性即开始升高，并随时间延长而进一步升高，12～24h达到高峰；② 脑缺血再灌注损伤后6h Caspase-3明显激活，手术组是假手术组的7.6倍（P＜0.01）；③脑缺血再灌注损伤后6h细胞色素c明显释放，手术组是假手术组的8.5倍（P＜0.01）。结论脑缺血再灌注损伤后早期Caspase-3明显激活，细胞色素c明显释放，表明Caspase-3激活和细胞色素c释放参与了脑缺血再灌注损伤早期过程，有助于进一步研究脑缺血再灌注损伤的机制。     

夏天无、钩藤生物碱抗脑细胞凋亡作用及急性毒性

目的观察钩藤总碱(RHA)、夏天无总碱(COAMTA)对脑缺血损伤诱发凋亡的保护作用.方法采用小鼠断头张口喘气模型,大鼠大脑中动脉缺血2h/再灌注22h模型,观察RTA、COAMTA抗脑缺血/再灌注损伤的效应.结果两药合用可延长小鼠张口喘气时间,降低大鼠脑缺血/再灌注后细胞凋亡.结论两药合用对脑缺血/再灌注损伤有保护作用.     

脑缺血再灌注损伤的病理机制研究进展

脑缺血再灌注损伤是指脑组织缺血后一定时间恢复血液供应 ,出现的更加严重的脑机能障碍现象 ,是在脑缺血基础上发生的病理过程.在这过程中 ,脑血流中断、血流恢复使脑组织发生一系列快速级联反应 ,包括能量代谢障碍、兴奋性氨基酸释放、自由基生成增加、细胞内钙稳态失衡、线粒体功能障碍及细胞凋亡通路被激活等,这些因素彼此关联 ,相互重叠 ,最终导致缺血区细胞凋亡或坏死 ,致脑机能发生障碍.本文就近年来脑缺血再灌注损伤的病因机制研究做一综述,为进一步研究其病理机制及药物治疗提供启示.     

大鼠脑缺血再灌注损伤后磷酸化JAK2、STAT3蛋白表达及细胞凋亡

目的 观察磷酸化JAK2、磷酸化STAT3蛋白在局灶性脑缺血再灌注损伤后的表达及细胞凋亡的变化.方法 采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,应用免疫组织化学及Western blotting检测大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后磷酸化JAK2、磷酸化STAT3蛋白表达水平的变化.利用原位缺口末端标记法研究神经细胞凋亡的变化.结果 与假手术组大鼠相比,脑缺血再灌注损伤后磷酸化JAK2、磷酸化STAT3蛋白表达明显增强,以缺血周边区表达最明显,再灌注24 h达高峰,之后开始下降,再灌注168h仍有少量表达.缺血再灌注损伤后凋亡细胞也显著增多,再灌注24h达高峰,凋亡细胞的变化与磷酸化JAK2、磷酸化STAT3蛋白表达变化一致.结论 脑缺血再灌注损伤后引发JAK2、STAT3的活化及超量表达可能与神经细胞生存和凋亡有关,JAK2/STAT3信号通路可能参与了脑缺血再灌注损伤与修复的病理生理过程.     

p53基因及其相关蛋白与心血管疾病关系的研究进展

p53不但是重要的抑癌基因,还与细胞凋亡关系密切.p53基因通过指导促凋亡基因Bax的转录而具有促进心血管系统细胞凋亡的作用.p53可通过影响细胞周期及线粒体Bcl-2/Bax比例的变化而促进细胞色素C及其他凋亡诱导因子的释放,启动caspase蛋白酶级联反应,进而引发心肌细胞的凋亡.该文总结分析了p53与心肌缺血/再灌注损伤、p53与心肌梗死、p53基因对移植心脏冠状动脉内膜增厚的抑制、p53与高血压等方面的研究进展.     

NF—κB信号通路在脑缺血再灌注损伤中的作用及中药有效组（成）分的干预研究

脑缺血／再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI）是一种机制复杂的级联反应性疾病,在其机制中炎症反应最为关键。核因子-κB（nuclear factor—κappa B,NF—κB）信号通路作为炎症反应的主要环节,通过调节多种细胞因子及下游基因表达启动炎症反应与细胞凋亡。目前研究显示,部分中药有效成分对CIRI具有保护作用,为明确中药有效成分在CIRI中的作用机理,就近年来NF-κB信号通路在CIRI后炎症反应及细胞凋亡方面可能相关作用作一综述。     

黄芪三七药对抑制炎症级联反应减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制研究

【目的】探讨黄芪三七药对对大鼠脑缺血再灌注后炎症级联反应的抑制作用及神经保护作用。【方法】将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪组、三七组、黄芪三七组,每组10只。假手术组仅行游离血管操作,不做插线处理,其他各组采用改良Longa法构建大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型,缺血2 h,再灌注24 h后,进行神经功能缺损评分,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织病理改变,原位末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)标记(TUNEL)染色法测定脑组织神经元细胞的凋亡情况,免疫组织化学法检测脑组织核转录因子κB p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分升高,脑组织可见明显的病理损伤,神经元坏死率、神经元凋亡率增加,脑组织NF-κB p65、TNF-α、MMP-9的表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,黄芪组、三七组、黄芪三七组神经功能缺损评分均降低,脑组织损伤不同程度得到改善,神经元坏死率、神经元凋亡率均减小,脑组织NF-κB p65、TNF-α、MMP-9的表达水平均显著降低,其中黄芪三七组的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】黄芪三七药对可有效减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,其神经保护作用机制可能与抑制炎症级联反应,减少神经元的凋亡有关,且疗效优于黄芪、三七单药。     

Impact of MAPK Cascade Pathway and P53 Pathway upon Liver Transplant

Summary： The change and the role of MAPK cascade pathway and P53 pathway after liver transplantation were explored. Thirty-four punctured donor liver specimens and 10 normal liver specimens were classified as group A （no rejection, n=10）, group B （mild/moderate acute rejection, n=10）, group C （serious acute rejection, n=8）, group D （chronic rejection/fibrosis, n=6） and group E （control, n= 10）. By using immunohistochemistry, the expression levels of mitogen activated protein kinase （MAPK）, Ras and P53 proteins, and by in situ hybridization, MAPK and ras mRNA expression levels were detected. The results showed that the expression levels of MAPK and Ras proteins were increased by turns in groups A, B and C, and decreased by turns in groups D and E. The protein expression of P53 was higher in the treated groups. The expression of Ras, HSP70 mRNA was identical as that of protein. It is suggested that the MAPK cascade pathway and P53 pathway can protect the hepatocytes by different mechanisms after liver transplantation. MAPKs cascade pathway repairs hepatocyte injury or accelerates hepatocytes into proliferation or differentiation. P53 pathway blocks cell cycle within G1 phase to make hepatocyte repair or apoptosis to reduce disorder differentiation.     

喉癌细胞周期和细胞凋亡的同步检测及意义

目的：检测喉鳞癌细胞的细胞周期变化和细胞周期各时相细胞凋亡情况,探讨细胞周期的变化和细胞周期各时相的细胞凋亡在喉癌发生、发展及预后中的作用。方法： 应用流式细胞仪双参数分析结合脱氧核苷酸原位末端标记（TUNEL）技术,检测15例声带息肉和387例喉鳞癌细胞周期和细胞周期各时相的细胞凋亡。结果：与声带息肉组比较,喉鳞癌组在G₀G₁期细胞构成比增加,但差异无显著性（P>0.05）,S期和G₂M期细胞构成比无明显变化,其细胞凋亡指数明显低于声带息肉组（P<0.05）,而且主要是由于G₀G₁期细胞凋亡的下降所引起;低分化鳞癌较高、中分化鳞癌G₂M期细胞构成比显著性增加,S期、G₂M期和总的细胞凋亡指数反而明显增加（P<0.05）;5年内死亡组与复发转移组的G₂M期构成比显著性增加,S期、G₂M期和总的细胞凋亡指数明显增加（P<0.05）;存活5年以上组和未复发转移组G₂M期细胞构成比下降明显,G₀G₁期和总的细胞凋亡指数亦较声带息肉组明显下降（P<0.05）。结论：肿瘤G₂M期细胞比例显著性增加,S期、G₂M期和总的细胞凋亡指数的明显增加可以作为喉癌恶性度高、预后不良、需要辅助治疗的客观指标。     

缺血/再灌注损伤时细胞周期调控的研究进展

体内许多器官,如肾、脑、肝等都可发生缺血/再灌注损伤(IRI)。IRI后,细胞周期检验点将受损伤的细胞阻滞在相应的位置进行修复,若修复成功,细胞进入下一个周期,否则发生凋亡。在细胞周期调控中,细胞周期蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子三者非常重要。现对IRI时细胞周期蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶、细胞周期依赖性激酶抑制因子三者调控细胞周期的研究进展进行综述。     

PC12细胞低压性缺氧损伤模型的建立

目的：构建PC12细胞低压性缺氧细胞模型。方法：将PC12细胞依据缺氧条件随机分为正常对照组、常压缺氧组、低压缺氧组;正常对照组以正常条件培养,常压缺氧组和低压缺氧组分别以常压缺氧和低压缺氧条件培养。通过考察氧气浓度、大气压力和低压缺氧时间,应用CCK-8法测定细胞活性,筛选低压缺氧的条件;显微镜下观察各组细胞形态、结构、数目,微板法检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量,流式细胞仪测定细胞凋亡比例和细胞周期。结果：在1%氧浓度和41?kPa低压缺氧环境下培养24h可建立低压性缺氧细胞模型。与正常对照组和常压缺氧组比较,低压缺氧组LDH活性及细胞MDA含量增加、SOD活性下降,细胞凋亡比例上升（均P<0.05）,细胞周期阻滞发生在G0/G1期。结论：建立了稳定可靠的低压性缺氧损伤PC12细胞模型,可用于高原低压性缺氧神经损伤的体外实验研究。     

活性氧在急性脊髓损伤中的关键作用

急性脊髓损伤(SCI)是一种常见的严重的神经功能损伤性疾病。SCI包括初始的机械性创伤和继发性损伤。一系列的病理生理机制共同促成了继发性损伤,如由出血和缺血/再灌注诱导的血管损伤效应、氨基酸的兴奋性毒性、钙超载、凋亡、线粒体功能障碍、活性氧生成等。这些因素能加重组织损伤的程度,促使损伤范围在伤后一段时间内不断扩大。在继发性损伤中关键的生化反应事件是活性氧诱导的氧化应激,鉴于其在SCI进程中的重要性,关注活性氧将有助于寻找治疗SCI的药物。     

抗抑郁药奥氮平对大鼠海马神经细胞凋亡和细胞周期的影响

目的：探讨抗抑郁药物奥氮平对谷氨酸（Glu）损伤的大鼠海马神经元凋亡、坏死和细胞周期的影响,阐明奥氮平神经保护作用的机制。方法：采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制Glu损伤模型,细胞分为正常对照组、Glu损伤组和奥氮平+Glu损伤组,在体外通过流式细胞术测定各组神经元细胞凋亡率、坏死率和细胞周期的改变。结果：与正常对照组比较,其他组细胞凋亡率增加 (P<0.01);与Glu损伤组比较,10.0 μmol/L奥氮平+Glu损伤组细胞凋亡率降低（P<0.01 )。与正常对照组比较,Glu损伤组神经元坏死率升高2.9倍 (P<0.05);与Glu损伤组比较,100.0和200.0 μmol/L奥氮平+Glu损伤组神经元坏死率降低(P<0.05或P<0.01)。与正常对照组比较,Glu损伤组G0/G1期细胞百分数增加 (P<0.01）,S期细胞百分数下降（P<0.01）,G2 + M期变化不明显;而与Glu损伤组比较,
50.0和100.0 μmol?L-1奥氮平+Glu损伤组G0/G1期细胞比例下降为Glu损伤组的79.9%和62.6% (P<0.05或P<0.01);S期细胞比例上升为Glu损伤组的2.5和3.8倍 (P<0.05或P<0.01)。结论：奥氮平能够抵抗Glu诱导的神经元凋亡和坏死,改变细胞周期进程。