颅脑损伤的差异蛋白组学及细胞因子研究进展

<正>颅脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)是最常见的机械性损伤,继发脑组织缺血、缺氧及炎性反应是颅脑损伤后高病死率和高致残率的重要原因[1]。颅脑损伤的差异蛋白组学是通过寻找颅脑损伤引起的中枢神经蛋白质表达差异,以解释细胞生理和病理机制,笔者旨在对颅脑损伤的差异蛋白组学和细胞因子研究进展进行概述。1差异蛋白质的分离和鉴定差异蛋白组学包括双向电泳、SELDI蛋白质芯片技术,用     

靶向CD_(47)及其配体TSP-1/SIRPα在免疫及损伤应答中的研究进展

整合素相关蛋白CD_(47)是一个广泛表达于细胞表面的分子标志物,作为信号调节蛋白α的配体在免疫应答过程中发挥重要调控作用,同时也是机体应对刺激信号调节细胞反应时凝血酶敏感蛋白1的信号受体,控制机体对损伤应答的反应程度。CD_(47)及其配体凝血酶敏感蛋白1、信号调节蛋白的表达调控在感染及肿瘤免疫、缺血/再灌注损伤、脑出血损伤及电离辐射损伤中起到非常重要的作用,具有较强的临床应用价值。     

各型颅脑损伤后血清高敏C-反应蛋白的变化及意义

目的:探讨颅脑损伤后患者高敏血清C-反应蛋白(hs-CRP)水平与脑损伤之间的关系。方法:测定50例颅脑损伤患者血清C-反应蛋白,根据格拉斯哥(GCS)评分,分析CRP与轻、中、重型颅脑损伤之间的关系。结果:CRP在重型颅脑损伤患者显著高于中型组(P<0.01);中型组也高于轻型组(P<0.05)。结论:血清CRP是颅脑损伤患者急性期脑细胞损伤敏感而特异的血清蛋白指标,对判断病情、治疗效果和预测预后有临床参考价值。     

体外鼠脑星形胶质细胞损伤后c-fos蛋白、GFAP及其mRNA的动态表达

研究ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＧＦＡＰ—ｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ在鼠脑星形胶质细胞（ａｓｔｒｏｃｙｅ，ＡＳ）损伤后反应性星形胶质化时的动态变化。用ＡＳ原代培养技术建立体外ＡＳ机械损伤模型．并结合应用免疫组织化学和原位杂交方法．结果：（１） ｃ－ｆｏｓ蛋白于损伤后 ４５ ｍｉｎ即有阳性表达，伤后 ２ ｈ消失； （２损伤边缘的 ＡＳ于损伤后 ６ ｈ开始表达 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ， １ｄ达高峰，３ ｄ则在损伤边缘少数 ＡＳ中可检出 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ；（３）损伤后 １ｄ，ＧＦＡＰ表达明显增强，胞体肥大，粗大突起伸向损伤区形成反应性星形胶质化。结论：（ｌ） ＡＳ受损后原癌基因 ｃ－ｆｏｓ首先被激活，ｃ－ｆｏｓ蛋白呈－过性的表达，参与调节ＡＳ的激活；（２）ＡＳ损伤后，ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ的转录增加，ＧＦＡＰ表达增强是由于在转录水平上ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ表达增强的结果；（３）反应性星形胶质化是ＡＳ的自身特性，以ＡＳ肥大为主，ＡＳ受损后，原癌基因ｃ－ｆｏｓ的蛋白参与调节ＡＳ激活的确切机制尚待阐明。     

以Nogo蛋白及其受体为靶点促进神经再生的研究进展

大量基础研究表明,哺乳动物中枢神经系统(CNS)损伤后神经再生受限的主要原因是轴突生长抑制因子的存在。研究者试图通过不同的方法来中和或破坏髓鞘,清除髓鞘相关抑制分子,从而达到促进脊髓损伤后轴突再生和神经功能恢复的目的。目前,与Nogo蛋白相关的药物和基因治疗已成为CNS损伤后促进轴突再生新的有效手段,现对其研究进展作一综述。     

各型颅脑损伤后血清高敏C-反应蛋白的变化及意义

目的：探讨颅脑损伤后患者高敏血清C-反应蛋白（hs—CRP）水平与脑损伤之间的关系。方法：测定50例颅脑损伤患者血清C-反应蛋白，根据格拉斯哥（GCS）评分，分析CRP与轻、中、重型颅脑损伤之间的关系。结果：CRP在重型颅脑损伤患者显著高于中型组（P〈0．01）；中型组也高于轻型组（P〈0．05）。结论：血清CRP是颅脑损伤患者急性期脑细胞损伤敏感而特异的血清蛋白指标，对判断病情、治疗效果和预测预后有临床参考价值。     

S-100B蛋白的测定对颅脑损伤分型与判断预后的意义

颅脑损伤是神经外科疾病中的常见病和多发病。尽管颅脑损伤后的检测方面有了长足的进步,但目前很难量化原发性和继发性脑损伤的程度。S-100B蛋白是新近发现的一种颅脑损伤的血清标记物。它的生化性质及其在脑组织特异性和高敏感性的表达,使其作为颅脑损伤程度和预后的判断指标有重要的临床意义。S-100B蛋白是一类能反映颅脑损伤及其程度的新型生物学指标。     

体外培养大鼠脑皮层神经元机械性损伤后mGluR1a及Homer蛋白的表达及其意义

目的：研究体外培养大鼠脑皮层神经元机械性损伤后mGluRla及Homer1a蛋白表达及其意义．方法：实验分为损伤与对照组，将SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7d．损伤组以微量移液器塑料滴头在培养孔内“十”字形划割，造成机械性损伤，伤后不同时间点(10，30min，1，3，6，12，24h)行神经元免疫组化染色；对照组除不进行“十”字形划伤培养神经元外，其他处理同损伤组．结果：损伤组神经元mGluRla与Homerla蛋白免疫组化染色均呈阳性，自伤后10min持续至伤后24h，阳性染色颗粒分布于胞质、胞膜及突起；对照组mGluRla与Homerla蛋白免疫组化染色均呈弱阳性．结论：体外培养大鼠脑皮层神经元机械性损伤后mGluRla及Homerla蛋白表达时间与分布规律基本一致，提示Homerla与mGluRla可能共同参与了神经元损伤过程。     

UCP2对紫外线诱导细胞凋亡的影响

研究表明,紫外线辐射诱导细胞内活性氧(ROS)过度累积是导致细胞氧化损伤的最直接因素之一。长波紫外线(UVA)或中波紫外线(UVB)照射角质形成细胞后均可引起DNA损伤,UVA主要是通过生成ROS间接损伤DNA,UVB则是直接损伤DNA[1-2]。线粒体是细胞中的膜性结     

硫酸软骨素蛋白多糖在脊髓损伤中的研究进展

硫酸软骨素蛋白多糖（chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs）是中枢神经系统细胞外基质的组成部分,在中枢神经系统发育、正常维持及病理过程中都发挥着关键的作用。脊髓损伤后,损伤部位CSPGs的表达明显上调,这主要源于病变部位活化的星形胶质细胞。CSPGs的上调会限制脊髓损伤部位的轴突再生、传导和再髓鞘化,并且可以促进脊髓损伤中的炎症反应,不利于脊髓损伤后神经功能恢复。因此,抑制CSPGs可能是促进脊髓损伤后轴突再生和功能恢复的有效治疗方法。本文对CSPGs在脊髓损伤中的研究现状进行综述。     

糖尿病肾病患者蛋白氧化损伤的研究

目的检测糖尿病肾病不同阶段患者血清晚期氧化蛋白产物水平及蛋白羰基含量,评价蛋白氧化损伤程度。方法根据24小时尿白蛋白定量将糖尿病患者分为单纯糖尿病组（DM组）、糖尿病早期肾病组（DN1组）、糖尿病肾病组（DN2组）,并设健康对照组（NC组）,检测各组血清晚期氧化蛋白产物（advancedoxidationproteinproducts,AOPPs）、蛋白质羰基含量（proteincarbonyl,pco）水平。结果DM组血AOPPs、PCO较NC组明显升高,DN组患者血AOPPs、PCO较DM组明显升高,且随着肾病的进展AOPPs、PCO逐渐升高,组间差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论糖尿病肾病患者蛋白氧化损伤较单纯糖尿病患者明显加重,而且随着糖尿病肾病的进展,蛋白氧化损伤进一步加重,蛋白氧化损伤产物积累增多。     

大鼠脊髓损伤程度与血清β-淀粉样前体蛋白及超敏C反应蛋白的相关性研究

[摘要]　目的　探讨大鼠急性脊髓损伤（SCI）程度与血清β-淀粉样前体蛋白（β-APP）和超敏C反应蛋白（hs-CRP）含量变化的相关性。　方法　取雌性SD大鼠90只,采用动脉夹压力法制备大鼠脊髓轻度损伤（轻度损伤组,30只）和重度损伤（重度损伤组,30只）动物模型,另30只大鼠仅行椎板切除作为假手术组。通过行为学观察（BBB评分）了解脊髓损伤程度及变化,分别于造模成功后12 h、24 h、3 d 、7 d、14 d采股静脉血,ELISA检测不同程度SCI大鼠伤后血清β-APP、hs-CRP含量变化。　结果　重度脊髓损伤组与轻度损伤、假手术组各时间点BBB评分差异有显著性意义（P<0.05）。β-APP于损伤后24 h达到高峰后逐渐回落,hs-CRP于3 d达到高峰后回落。重度脊髓损伤组与轻度脊髓损伤、假手术组各时间点β-APP、hs-CRP比较差异均有显著性意义（P<0.05）;轻度脊髓损伤组与假手术组β-APP、hs-CRP水平除14 d点差异无显著性意义外,其余各时间点差异均有显著性意义（P<0.05）。　结论　急性SCI大鼠血清β-APP、hs-CRP水平变化可反映SCI的严重程度,β-APP比hs-CRP的变化敏感。     

细胞周期素依赖性激酶抑制剂olomoucine对大鼠脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及其意义

目的 探讨细胞周期素依赖激酶抑制剂olomoucine对脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及意义。方法 建立脊髓半切损伤模型,实验大鼠随机分为假手术组、损伤对照组和olomoucine干预组,采用Western印迹分析脊髓损伤后细胞周期相关蛋白的表达;应用免疫荧光技术检测损伤区域胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、硫酸软骨素蛋白多糖（CSPG）以及生长相关蛋白43（GAP-43）的表达;采用改良的Gale联合评分法对大鼠瘫痪后肢进行运动功能评估。结果 假手术组细胞周期素（cyclin）A、B1、E和增殖细胞核抗原以及GFAP、CSPG和GAP-43的表达较弱;脊髓损伤后cyclinA、cyclinB1、cyclinE和细胞周期素（PCNA）等细胞周期相关蛋白的表达显著增高,星形胶质细胞明显活化增殖,GFAP和CSPG的表达明显增强（均P〈0．01）,GAP-43的表达高于假手术组（P〈0．05）;给予olomoucine干预后,细胞周期相关蛋白的表达显著下调,损伤区域星形胶质细胞的增殖和胶质瘢痕形成受到抑制,胶质瘢痕产生的CSPG的表达明显减少,GAP-43的表达显著增高,瘫痪后肢的运动功能明显改善（均P〈0．05）。结论 olomoucine可通过调控细胞周期,抑制脊髓损伤后胶质细胞的活化增殖和胶质瘢痕的形成,减少抑制因子CSPG的表达以及上调有利于轴突再生的GAP-43的表达。改善损伤后轴突再生微环境最终促进瘫痪后肢的运动功能恢复。     

血清H-FABP浓度心肌型脂肪酸结合蛋白——组织损伤的新型标志物

心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)是关键的脂肪酸载体蛋白,人H-FABP是一种酸性蛋白质,其等电点为5.1。目前,H-FABP是最具潜质的心肌损伤标记物,其在急性心肌梗死早期(0～3 h)即可检测到高水平的血浆H-FABP,并且其释放本质上依赖于心肌缺血损伤。对比其他已知心肌标志物,H-FABP对于诊断急性冠状动脉综合征中不同形式的心肌缺血损伤具有高度敏感性和特异性,并且H-FABP在其他组织损伤时也具有较高的应用价值。     

创伤性颅脑损伤标志物的研究进展

创伤性颅脑损伤(TBI)严重危害人类的生活和健康,在众多创伤性疾病中最易引起患者残疾和死亡。如何客观、快速、准确、早期对TBI做出诊断和严重程度分级,对TBI的临床治疗和预后起着重要作用。颅脑损伤标志物在损伤早期就可出现在血清和脑脊液中,其敏感性和特异性往往比影像学检查更具优势。现就常见的TBI标志物研究现状和实际应用情况予以综述。     

重型颅脑损伤患者血清S-100β及CRP的检测及其临床意义

目的探讨重型颅脑损伤患者血清S-100β及C-反应蛋白(CRP)动态水平变化及其临床意义。方法选取105例重型颅脑损伤患者和25例健康体检者作为研究对象。入院时,按格拉斯哥昏迷评分(GCS)将患者分为特重型组(GCS 3～5分)和重型组(GCS 6～8分);按CT检查结果将患者依损伤类型分为3组:脑挫裂伤和(或)脑内、硬膜下血肿组,弥漫性轴索损伤和脑干损伤组,硬膜外血肿组等3组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清S-100β的浓度。用特殊蛋白分析仪检测CRP的浓度。结果重型、特重型颅脑损伤患者入院初血清S-100β和CRP含量较正常对照组升高,差异均有统计学意义(均P<0.01);特重型组患者入院初血清S-100β含量高于重型组,差异有统计学意义(P<0.01);3种不同类型的颅脑损伤患者之间血清S-100β含量差异有统计学意义(P<0.05);而血清CRP含量在特重型组和重型组之间以及3种不同类型的颅脑损伤之间差异均无统计学意义(均P>0.05);动态检测结果显示,血清S-100β和CRP含量在伤后第2天达到峰值,然后血清S-100β含量迅速下降,而血清CRP含量则缓慢下降。结论重型颅脑损伤患者入院初血清S-100β及CRP水平增高与疾病的发生相关。S-100β是判断脑损伤程度比较客观的指标,其含量愈高,表示脑损伤程度愈重,且可区分不同类型的脑损伤,可作为早期监测重型颅脑损伤的特异性指标。CRP检测值不能完全区分脑损伤程度及类型。     

谷氧还蛋白与氧化应激状态

氧化应激(OxidativeStress)状态是组织氧化损伤的表现,氧化应激与衰老、心脑血管病、神经退行性疾病、糖尿病、白内障、免疫系统疾病、肿瘤等多种疾病发病机理密切相关。谷氧还蛋白(Gl-utaredoxin,Grx)是细胞内一种重要的巯基-二硫键氧化还原酶,具有多种生物学功能,在细胞内氧化还原平衡状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用,Grx特异的恢复氧化应激损伤产生的谷胱甘肽化蛋白活性的能力可能会使其成为热点药物。     

脑损伤后脑脊液和血清中C-反应蛋白动态变化的临床意义

目的:研究颅脑损伤后不同阶段脑脊液(CSF)和血清中C-反应蛋白(CRP)的动态变化与脑损伤病情发展的关系。方法:将46例患者分成重型和轻中型分别为22例和24例并与10例正常(志愿者)对比,采用免疫浊度法在第1、3、7、14天时测定脑脊液和血清中CRP的含量变化,用统计学方法分析其数据。结果:重型组CSF和血清中CRP含量在受伤后1天内明显升高,7天达到高峰,维持14天,其水平均高于相应时段的轻中型组(P<0·05),两组均明显高于对照组(P<0·01),伤后到高峰期CSF中的含量显著高于血清(P<0·05);轻中型组中CRP水平在受伤后1天内明显升高,3天达到高峰,以后逐渐下降,14天时接近正常水平。结论:急性颅脑损伤后脑脊液和血清中早期CRP的水平与颅脑损伤的严重程度密切相关。CSF和血清中CRP是重型颅脑损伤患者急性期脑细胞损伤敏感指标,可以作为重型颅脑损伤患者危险性的独立预测因子,对判断病情、治疗效果及估计预后有重要意义。     

C反应蛋白和原发性高血压血管内皮损伤标志物的研究进展

炎症在原发性高血压血管内皮损伤的病理过程中发挥重要作用。C反应蛋白由肝脏产生并分泌,是评价炎性反应的一项敏感指标。C反应蛋白在血液循环中的含量和活性与原发性高血压患者某些血管内皮损伤标志物的浓度存在正相关,成为原发性高血压治疗的新靶点。     

GFAP?NF在原发性脑干损伤后的表达及诊断价值分析

目的:研究原发性脑干损伤后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝蛋白(NF)染色的表达变化及其诊断价值.方法:收集明确死于原发性脑干损伤和脑外疾病者共65例,分为损伤组(25例)和对照组(其中死于心血管疾病20例、非心血管疾病20例),通过对中脑、脑桥和延脑切片,HE染色光镜下观察,免疫组化GFAP、NF染色观察,对所得数据作统计学处理.结果:损伤组中脑干出现星形细胞的急性反应及神经轴索的特征性改变,损伤组与对照组相比,脑干的星形细胞数量及轴索肿胀程度有明显差异(P<0.05). 结论:上述病理变化对原发性脑干损伤的尸解病理诊断有一定的价值,通过测量星形细胞数量及轴突横径,为脑干损伤导致死亡的诊断提供了一种可参考的量化指标.