Caspase-3、XIAP在骨关节炎中的表达及意义

目的探讨Caspase-3、XIAP在骨关节炎软骨细胞中的表达及意义。方法用免疫组化SP法、原住末端标记技术（TUNEL）等检测Caspase-3、XIAP在22例骨关节炎患者关节软骨细胞中的表达和软骨细胞凋亡情况。结果在软骨细胞中Caspase-3的表达实验组阳性率高于对照组（P〈0．01）；实验组软骨细胞凋亡程度与XIAP的表达呈负相关（P〈0．05），与Caspase-3的表达呈正相关（P〈0．01）。结论Caspase-3、XIAP基因的表达与骨关节炎发生发展有密切关系。     

碘对人甲状腺细胞凋亡的影响

目的：研究碘对人甲状腺细胞凋亡的影响，探讨其在甲状腺疾病发病机制中的作用和意义。方法：分别以不同浓度NaI刺激单层培养的人正常甲状腺上皮细胞，采用流式细胞术，Western印迹和半定量RT－PCR等方法分别检测刺激前后细胞凋亡率，凋亡相关蛋白Fas,Bcl-2和Bak以及Fas，可溶性Fas(sFas)mRNA表达的变化，并以ELISA法检测细胞培养液中sFas含量。结果：（1）低浓度Nal(10^-8mol/l）明显抑制细胞凋亡（P＜0．05），中，高浓度（10^-6-10^-4mol/L)时显著增加细胞凋亡（P＜0．05），（2）低浓度NaL显著促进sFas蛋白及mRNA的表达（P＜0．05），不影响Fas蛋白及mRNA的表达；（3）中，高浓度Nal则明显增加Fas蛋白及mRNA表达，但抑制sFas蛋白及mRNA表达（P＜0．0．5），（4）在10^-8-10^-4mol/L浓度范围内，Nal剂量依赖性地抑制甲状腺上皮细胞表达Bcl-2蛋白，但显著增加Bak蛋白的表达（P＜0．05），结论：碘可通过调节Fas,sFas,Bcl-2及Bak的表达，影响甲状腺细胞凋亡的发生，其中低浓度碘可抑制凋亡，而中，高浓度碘则促进细胞凋亡。     

胶原诱导关节炎大鼠CD44和Fas／FasL的表达

目的了解胶原诱导关节炎（CIA）大鼠血清及滑膜CD44、Fas／FasL的变化及其在类风湿关节炎（RA）发病机制中的作用。方法选取雌性Wistar大鼠40只,随机分为对照组8只,CIA组32只。对照组不做任何处理,CIA组建立CIA模型,30d后测定关节炎指数（AI）,用ELISA法检测血清CD44、Fas和FasL水平,RT—PCR检测滑膜CD44水平,免疫组化法检测滑膜Fas、FasL水平。结果CIA组大鼠血清CD44和Fas、FasL水平均高于对照组,差异有显著性（t=11．917～195．960,P〈0．01）;滑膜CD44、Fas的表达亦明显高于对照组,而滑膜FasL的表达低于对照组,差异有显著性（t=6．916～20．264,P〈0．01）。CIA组大鼠血清CD44、Fas／FasL水平与AI呈正相关（r=0．603、0．485,P〈0．05）,血清CD44水平与Fas／FasL水平呈正相关（r=0．533,P〈0．05）。结论CD44可能通过上调Fas的表达、下调FasL的表达,使得Fas和FasL结合减少,从而引起细胞凋亡减少,导致滑膜增生,参与RA的发病过程。     

乳腺癌和乳腺不典型增生中细胞凋亡及相关基因蛋白产物的表达

目的探讨Fas及Bcl-2对乳腺浸润性导管癌中细胞凋亡的作用。方法用免疫组化ABC法检测62例乳腺浸润性导管癌及56例乳腺不典型增生中Fas及Bcl-2的表达，TUNAL法检测细胞凋亡的发生。结果乳腺浸润性导管癌与乳腺不典型增生组织相比，细胞凋亡率显著降低，并且Fas表达减弱，而Bcl-2表达增强，均有统计学差异（P〈0．05），相关分析显示细胞凋亡率与Fas表达呈正相关（r=.．62，P〈O．05），与Bcl-2表达呈负相关（r=-0．56。P〈0．05）。结论乳腺癌和乳腺不典型增生组织均可发生细胞凋亡，Fas及Bcl-2基因参与乳腺癌的发生和发展。     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者外周血淋巴细胞凋亡调控基因的初步研究

目的探讨外周血淋巴细胞凋亡调控基因在妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）发病中的意义。方法采用免疫细胞化学染色技术检测ICP患者和正常妊娠妇女外周血淋巴细胞上凋亡调控基因Fas、FasL、Bcl-2的蛋白表达水平；采用RT—PCR法检测外周血淋巴细胞上凋亡调控基因mRNA表达水平。结果ICP患者外周血淋巴细胞上Fas的表达低于正常妊娠者（P〈0．005），FasL的表达与正常妊娠组差异无统计学意义，Bel-2的表达则高于正常组（P〈0．05）；ICP患者外周血淋巴细胞上Fas mRNA水平低于正常妊娠组（P〈0．001），FasL mRNA及Bcl-2mRNA水平与正常组差异无统计学意义。结论ICP患者存在外周血淋巴细胞凋亡调控基因表达异常。     

生长激素对大鼠阿霉素心肌病心肌细胞凋亡及Fas的影响

目的：观察生长激素（Growth hormone．GH）对阿霉素（Adriamycin，ADR）心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响及凋亡相关基因Fas蛋白表达的影响。方法：30只雄性Wistar大鼠，体重200～250g．随机分为3组：对照组、ADR组和GH＋ADR组。用原位末端标记法（TUNEL）标记凋亡的心肌细胞，用免疫组织化学方法检测Fas蛋白的表达。结果：与对照组比较，ADR组心肌细胞凋亡指数明显升高（P〈0．05）．GH＋ADR组细胞凋亡指数低于ADR组（P〈0．05）。ADR组Fas蛋白表达明显高于对照组（P〈0．05）。GH＋ADR组Fas蛋白表达明显低于ADR组（P〈0．05）。结论：心肌细胞凋亡是阿霉素心肌病的重要发病机制，Fas蛋白表达升高是诱发凋亡的机制之一。GH干预治疗可减少阿霉素心肌病的心肌细胞凋亡．Fas基因蛋白表达的减少是其抑制凋亡的可能机制之一。     

缺氧与缺氧后吸入纯氧致肺损伤新生鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL表达和意义

目的探讨细胞凋亡与其相关基因Fas／FasL系统表达在缺氧、缺氧后吸入纯氧致肺损伤发病机制中的意义。方法通过复制缺氧、缺氧后吸入纯氧大鼠肺损伤模型，采用TUNEL法、原位杂交检测、SqRT—PCR，Wester Blot技术观察肺组织细胞凋亡情况、Fas，FasLmRNA及蛋白表达强度探讨其相关基因的表达情况。结果缺氧组或缺氧后吸入纯氧组在缺氧4h后即可见大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞出现凋亡现象，并随着时间延长，细胞凋亡指数增高（P=0．0239，P=0．0425），同时FasmRNA，FasLmRNA表达及Fas蛋白质、Fas—L蛋白质表达均上调．且缺氧后吸入纯氧组大鼠FasmRNA，FasLmRNA表达和Fas蛋白质、Fas—L蛋白质表达均较单纯缺氧组明显增强（P〈0．05）。结论细胞凋亡与FasmRNA，FasLmRNA及其相关蛋白表达的上调可能参与缺氧和缺氧后吸入纯氧时导致的肺损伤。     

细胞凋亡与子宫肌瘤相关性研究

目的 探讨细胞凋亡与子宫肌瘤发生发展的关系。方法 应用免疫组化SP法检测40例子宫肌瘤（肌瘤组）及其邻近正常平滑肌组织（正常组）中凋亡基因Bcl-2、Bax、Fas、Fas-L的表达。结果 Bcl-2在子宫肌瘤组织中的表达明显高于其邻近正常平滑肌组织（P〈0．001），Bax、Fas、Fas-L在子宫肌瘤组织中的表达明显低于邻近正常平滑肌组织（P〈0．001）。结论 细胞凋亡异常与子宫肌瘤的发生发展有关。     

慢性胃炎脾胃虚实证候胃粘膜细胞凋亡及相关蛋白的研究

为探讨脾胃虚实证候与胃粘膜细胞凋亡的相关性，采用辨证分型，以胃粘膜细胞凋亡指数（AI）、凋亡基因相关蛋白p53、Bcl-2、Fas等为指标进行研究，结果：①脾胃虚证和实证均表现为胃粘膜Al增加（P〈0．05），虚证组高于实证组（P〈0．05）；②脾胃虚证组和实证组p53、Bcl-2表达高于对照组（P〈0．01～0．05）；③脾胃实证组Fas表达高于对照组（P〈0．05）。说明慢性胃炎从正常到实证到虚证的发展过程中，细胞凋亡逐步增多；p53、Bcl-2、Fas的表达参与细胞凋亡的调控，与证候形成的复杂性有关。     

外周血生存素Fas及bcl-2的表达在膀胱移行细胞癌诊断中的意义

目的探讨抗凋亡基因生存素和bcl-2及促凋亡基因Fas在膀胱移行细胞癌（TCC）发生发展中的作用,为TCC的早期诊断提供无创、敏感的指标。方法采用RT-PCR法分析生存素在68例TCC患者、30例泌尿系统其他疾病及30例正常人血液单个核细胞及尿液脱落细胞中的表达,用流式细胞分析术检测外周血单个核细胞Fas、bcl-2的表达。结果TCC组患者生存素和bcl-2的表达显著高于对照组和正常组（P〈0．01）,而外周血Fas表达明显低于正常组及对照组（P〈0．01）。TCC患者外周血生存素与外周血单个核细胞bcl-2的表达成正相关（r=0．3126,P〈0．05）,而与Fas的表达呈负相关（r=-0．3567,P〈0．05）。结论生存素与Fas、bcl-2等指标联合检测可进一步提高TCC阳性检出率,可作为早期诊断的敏感指标,为新发及复发性TCC提供了一个简单无创的检测方法。     

uPA/uPAR在骨关节中的表达及与软骨细胞凋亡的关系

目的探讨uPA/uPAR在骨关节炎软骨中的表达及与软骨细胞凋亡的关系。方法成年新西兰大白兔24只,根据文献采用石膏固定方法制作骨关节炎动物模型,用免疫组化、原位末端标记技术(TUNEL)等方法检测uPA/uPAR在兔膝关节软骨中的表达和软骨细胞凋亡情况。结果在软骨中uPA/uPAR的表达实验组阳性率高于对照组(P<0.05);实验组软骨细胞凋亡程度与uPA/uPAR的表达均呈正相关(P<0.05)。结论uPA/uPAR与骨关节炎发生发展有密切关系。     

糖蛋白YKL-40在骨关节炎中的表达

目的探讨YKL-40在骨关节炎软骨细胞中的表达及意义。方法用免疫组化SP法、原位末端标记技术(TUNEL)等检测YKL-40在22例骨关节炎患者关节软骨细胞中的表达和软骨细胞凋亡情况。结果在软骨细胞中YKL-40的表达实验组阳性率高于对照组(P<0.05);实验组软骨细胞凋亡程度与YKL-40的表达呈正相关(P<0.05)。结论YKL-40骨关节炎发生发展有密切关系。     

YKL-40在骨关节炎软骨细胞中的表达及意义

目的:探讨YKL-40在骨关节炎软骨细胞中的表达及意义.方法:随机选取32例骨关节炎患者作为实验组,同时排除类风湿性关节炎、痛风等其他疾病,同时选择骨折关节置换、外伤截肢患者28例作为对照组,我们采用HE染色观察组织学变化,用免疫组化EliVision plus法检测关节软骨中YKL-40的表达情况,并探讨YKL-40...     

骨关节病与大骨节病关节软骨细胞凋亡的比较

目的比较成年人大骨节病与骨关节病关节软骨细胞凋亡及凋亡相关调控因子Fas和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达分布特点,探讨两种疾病发病机制的异同。方法收集15例大骨节病、15例正常对照以及15例骨关节病的关节软骨,分别采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记(TUNEL)技术和免疫组化法,观察大骨节病、骨关节病和正常对照关节软骨的细胞凋亡率、Fas及iNOS蛋白表达及其分布特点。结果大骨节病及骨关节病关节软骨细胞凋亡率较正常对照高(P<0·01),且关节软骨剥蚀区的细胞凋亡率较未剥蚀区高(P<0·05),但大骨节病与骨关节病之间软骨细胞凋亡率差异无显著性。大骨节病与骨关节病关节软骨Fas及iNOS表达阳性细胞数较正常关节软骨增多(P<0·01),且关节软骨剥蚀区Fas及iNOS表达阳性细胞数较未剥蚀区增多(P<0·05),但大骨节病与骨关节病之间Fas及iNOS表达阳性细胞数差异无显著性。结论骨关节病和大骨节病均存在软骨细胞异常凋亡,Fas和iNOS可能参与了细胞凋亡过程。     

大骨节病与骨关节病患者软骨细胞凋亡及其机制的比较研究

目的比较分析大骨节病与骨关节病关节软骨中细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2、Bax、Fas及iNos的表达分布特点，探讨两病发病机制的异同。方法收集大骨节病和骨关节病的关节软骨各15例．并以15例正常人作对照。采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记（TUNEL）技术和免疫组化抗生物素蛋白-生物素-碱性磷酸酶（B-SA）法染色，观察大骨节病、骨关节病和正常对照关节软骨的凋亡细胞和Bcl-2、Bax、Fas及iNOS蛋白阳性表达率及其分布特点。结果（1）大骨节病及骨关节病关节软骨凋亡阳性细胞数较正常关节软骨增多（F=20．90～53．16，df=42，P〈0．01），且关节软骨剥蚀区的凋亡阳性细胞数较未剥蚀关节软骨区增多（t=4，154-6.004，df=28，P〈0.01），但大骨节病与骨关节病之间软骨细胞凋亡阳性数无显著性差异（t=1.329～1.362，df=28，P〉0.05）。（2）大骨节病与骨关节病关节软骨Bcl-2、Bax、Fas及iNos表达阳性细胞数较正常关节软骨增多（F=25.46-215.31，df=42，P〈0．01），且关节软骨剥蚀区Bcl-2、Bax、Fas及iNos表达阳性细胞数较未剥蚀区增多忙2．278～7.77，df=28，P〈0．05），但大骨节病患者与骨关节病Bcl-2、Bax、Fas及iNos的表达阳性细胞数无显著性差异（t=0.284-1．590，df=28，P〉0．05）。结论大骨节病与骨关节病均有相似的细胞凋亡，而且凋亡机制相同，即Bcl-2、Bax、Fas及iNos途径。     

大骨节病关节软骨细胞凋亡及其相关调控因子的表达

OBJECTIVE: To investigate the characteristics of chondrocyte apoptosis and distribution of Bcl-2, Bax, Fas and iNos expressions in articular cartilage in Kashin-Beck disease (KBD). METHODS: Samples of articular cartilage were collected from 15 healthy children and 15 children with KBD diagnosed according to the Pathological Criteria of KBD Diagnosis in China. Chondrocyte apoptosis was detected by TUNEL method, and the articular chondrocytes positive for Bcl-2, Bax, Fas and iNos were stained by B-SA immunohistochemistry. RESULTS: The percentage of apoptotic chondrocytes positively stained by TUNEL in the middle layer of articular cartilage was significantly higher in KBD children than in the control group (33.60%+/-2.71% vs 1.33%+/-0.41%, t=11.59, P<0.01). Significant difference in Bcl-2, Bax, Fas and iNos expressions was observed between the upper, middle and deep layers of the articular cartilage of KBD children (F =73.49-114.42, P<0.01), and staining for Bcl-2, Bax, Fas and iNos in KBD children was prominent in the upper layer (41.93%+/-12.26%, 45.60%+/-15.78%, 53.60%+/-16.49%, and 45.47%+/-14.02%, respectively) and the middle layer (14.93%+/-3.50%, 13.87%+/-4.32%, 23.27%+/-4.83%, and 21.67%+/-6.82%, respectively) of the articular cartilage; the percentages of chondrocytes positively stained for Bcl-2, Bax, Fas and iNos were significantly higher than those of the control group (t=11.75-18.65, P<0.01). CONCLUSION: The percentages of apoptotic chondrocytes and chondrocytes positive for Bcl-2, Bax, Fas and iNos in the articular cartilage of children with KBD are significantly higher than those in healthy children.     

大骨节病关节软骨细胞凋亡及其相关调控因子的表达

目的 探讨大骨节病患者关节软骨细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2、Bax、Fas及iNos表达分布的特点。方法 收集15例大骨节病儿童和15例正常对照儿童关节软骨。采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记(TUNEL)技术和Bcl-2、Bax、Fas及iNos蛋白免疫组化抗生物素蛋白-生物素-碱性磷酸酶(B-SA)法染色,观察大骨节病儿童和正常对照儿童关节软骨的凋亡细胞和Bcl-2、Bax、Fas及iNos蛋白阳性表达细胞的密度与分布。结果 (1)大骨节病儿童关节软骨中层凋亡阳性细胞数[(33.60±2.71)%]较正常关节软骨[(1.33±0.41)%]显著增多(t=11.59,P<0.01);(2)大骨节病儿童关节软骨表层和中层Bcl-2、Bax、Fas及iNos的表达显著高于正常关节软骨中的表达(t=11.75~18.65,P<0.01);大骨节病儿童关节软骨各层Bcl-2、Bax、Fas及iNos表达阳性率有显著性差异(F=73.49~114.42,P<0.01),以表层最多[分别为(41.93±12.26)%、(45.60±15.78)%、(53.60±16.49)%和(45.47±14.02)%],其次为中层[分别为(14.93±3.50)%、(13.87±4.32)%、(23.27±4.83)%、(21.67±6.82)%]。结论 大骨节病患者关节软骨细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2、Bax、Fas、iNos表达较正常人显著增多。     

关节制动制作骨性关节炎动物模型的探讨

目的 探讨应用关节制动的方法制作OA动物模型的可行性及可靠性。方法 成年新西兰太白兔28只，左后肢膝关节伸直住石膏管型固定，分别于制动后1,2、4和6周随机处死一只．观察其左后肢膝关节软骨病理改变，了解制动效果，其余动物6周后取左侧膝关节软骨及滑膜标本为实验组．对侧肢体膝关节软骨及滑膜标本为对照组，比较两组软骨及滑膜细胞凋亡情况。结果 6周后，无论从大体还是镜下以及细胞凋亡情况，兔左后肢膝关节均呈典型的OA特征。结论 膝关节伸直位制动5—6周是一个制作OA动物模型的较为理想的方法。     

正常关节和骨关节炎软骨细胞凋亡和超微结构的研究

目的 探讨正常关节和骨关节炎（OA）软骨细胞凋亡和超微结构的变化,以及正常关节和OA关节软骨细胞体外培养的凋亡来分析骨关节炎可能的发病机制。方法 胡氏造模法制作新西兰大白兔OA模型,3周后切取关节软骨,末端原位标记染色法分析正常关节软骨,骨关节炎软骨的细胞凋亡。分离关节软骨细胞体外培养,然后通过钙黄绿素和双FITC-AI双染色,分析软骨细胞的活力和凋亡情况,同时切取关节软骨细胞行透射电镜分析软骨细胞中一些超微结构的变化。结果 发现OA组软骨中凋亡细胞（14.32±3.17）比正常组（4.54±1.17）明显增多,两组间比较差异有统计学意义（t''=15.85,P<0.05）;而体外培养的软骨细胞中,OA组分离的软骨细胞存在大量凋亡细胞（83.63±20.11）和正常组（91.45±4.70）比较,差异有统计学意义（t''=2.07,P<0.05）。OA组部分软骨细胞的活力明显增强,OA组为79.45±3.60,正常组为75.60±5.33（t=3.28,P<0.01）。在超微结构的研究中,发现大量软骨细胞内的超微结构,有明显的变化,特别是线粒体在正常组为7.3±2.3,而OA为3.4±1.7,明显减少,比较差异有统计学意义。OA组染色质边缘化,空泡化和分布异常也非常明显。结论 在OA模型中,存在软骨细胞大量凋亡现象,通过超微结构现象分析凋亡细胞增多同时存在染色质的减少和分布异常,以及一些细胞小体的减少,可能和软骨细胞能量过度代谢和线粒体的减少等有密切的关系。