针对p53功能缺陷的肿瘤基因治疗

p53基因是与细胞凋亡有关的抑癌基因,p3基因突变是肿瘤中最为常见的遗传变异[1].在大量关于p53的研究论文中,有相当一部分与肿瘤的基因治疗有关.     

p53基因与卵巢癌的研究现状

随着肿瘤遗传学和分子生物学技术的迅猛发展，人们已经认识到肿瘤的发生是多步骤、多基因现象的结果，癌基因的激活及抑癌基因的失活是细胞癌变的分子基础。迄今为止，已被分离和鉴定的与人类肿瘤有关的癌基因达100多种，而抑癌基因只有12种。P53基因过去一直认为是一种癌基因，直至1989年才发现真正起癌基因作用的是突变的p53，而野生型p53基因是一种抑癌基因。许多肿瘤中存在P53的突变或等位基因缺失，而在妇科肿瘤中以卵巢癌p53突变的发生率为最高。目前，国内外对卵巢癌P53基因突变和基因治疗等研究越来越深入，本文将就这一研究现状…     

p53基因的研究进展

p53基因是人体抑癌基因。人们对基因的结构和功能做了大量深入细致的研究,发现超过50%以上的人类肿瘤存在p53基因的异常,p53基因的失活对肿瘤形成起重要作用,可诱导细胞生长阻滞、细胞凋亡、细胞分化以及DNA修复。p53突变体可能会使野生型p53基因的抑癌功能失活,甚至发挥癌基因的功能,p53基因与肿瘤的发生、发展以及肿瘤病人的预后关系密切。p53基因治疗,目的是纠正恶性细胞中突变的p53基因功能,在多种肿瘤的体内外试验中显示出明显疗效,随着分子生物学技术的发展,人们对p53基因调控网络也有很多新的认识。笔者就p53治疗肿瘤的研究现状及进展情况予以综述。     

抑癌基因p53在细胞周期调控和肿瘤治疗中的研究进展

p53是研究得最深入的肿瘤抑制基因，它在细胞周期调控和肿瘤发生中都起了重要的功能。在许多人类肿瘤中都有p53基因的突变，针对p53突变基因的治疗逐渐成为肿瘤基因治疗的重要手段之一。本文就p53在细胞周期调控和肿瘤治疗中的研究进展作一综述。     

腺病毒介导野生型p53基因对人肺腺癌细胞的抑制效应

目的：p53基因突变是人类肿瘤中常见的遗传学改变。将野生型p53基因导入一些肿瘤细胞中被证明能抑制其细胞增殖，因此做为肺癌基因治疗主要目的基因而备受关注。本研究旨在观察野生型p53基因对人肺腺癌细胞和裸鼠移植瘤的抑制效应，并对其抑癌机制进行分析，为今后肺癌基因治疗的临床试验提供科学依据。方法：采用重组体腺病毒Ad-p53基因转染人肺腺癌细胞系GLC－82；以裸鼠皮下移植瘤治疗试验观察Ad-p53基因的抑瘤效应；用流式细胞计数，DNA片断化及TUNEL分析探讨Ad-p53基因的抑癌机制。结果：导入Ad-p53基因后人肺腺癌GLC－82细胞生长能力显著下降，克隆形成能力受到明显抑制；并显著抑制裸鼠皮下移植瘤的生长；肺癌细胞发生凋亡，并出现明显的G1期阻滞现象。结论：腺病毒介导野生型p53基因（Ad-p53)对人肺腺癌细胞和裸鼠皮下移植瘤均有明显抑制效应，主要通过诱导癌细胞凋亡和参与细胞周期调控实现，进而提示Ad-p53基因有可能在人肺癌基因治疗中发挥重要作用。     

粪便p53基因突变检测在消化道肿瘤中研究进展

p53基因是细胞生长重要的调节因子，它与细胞周期的调控DNA的修复和合成、细胞的分化及凋亡有关，业已证实p53基因突变与消化道肿瘤的发生有着密切关系。近年来有关粪便中检测p53突变对预测及诊断消化肿瘤有诸多文献，并有一定突破，现综述如下。     

急性白血病患者p53和MGMT基因突变检测

目的：研究p53和MGMT基因突变在急性白血病发病中的意衣以及p53基因突变与MGMT基因突变的关系。方法：应用聚合酶链反应－单莲构象多态性（PCR－SSCP）技术，对36例急性非淋巴细胞白血病（ANLL），26例急性淋巴细胞白血病（ALL）和23例健康对照组骨髓细胞的p53和MGMT基因突变进行了分析。结果：p53基因突变率在ANLL中为16．7％、ALL中为19．2％，MGMT基因突变率在ANLL中为13．9％、ALL中为15．4％；62例急性白血病中有4例为p53和MGMT2个基因同时发生突变；正常对照组均未发生p53和MGMT基因突变。结论：p53和MGMT基因突变在急性白血病发生与发展中起到一定作用，急性白血病中p53基因突变和MGMT基因突变密切相关。     

野生型p53诱导基因1研究进展

p53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因.过去20多年来,人们对p53基因的认识经历了癌蛋白抗原,癌基因到抑癌基因的3个认识转变,现已认识到,引起肿瘤形成或细胞转化的突变型p53蛋白是野生型p53基因突变的产物,是一种肿瘤促进因子,它可以抑制正常p53蛋白的功能,而野生型p53基因是一种抑癌基因,它的失活对肿瘤形成起重要作用[1].     

胃肠恶性肿瘤及其切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达

目的 探讨胃肠道恶性肿瘤及其切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达与手术切缘的安全性关系。方法 用PCR－SSCP和免疫组化S－P方法检测20例胃癌和10例大肠癌标本和切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达情况。结果 （1）胃肠道恶性肿瘤组织中有很高的p53基因突变率（63％）和p53蛋白阳性表达率（53．33％）。（2）肿瘤组织中p53蛋白表达是切缘组织中p53蛋白表达的前提。（3）p53基因突变和p53蛋白表达随肿瘤切缘距离的增加而呈现极显著的递减趋势。结论 就p53基因突变和p53蛋白表达而言,距离肿瘤边缘5cm可定为肿瘤的分子切缘。     

HCT116-p53-/-细胞中p53基因突变子模型的建立

目的：合成p53基因突变子及构建真核表达载体,并在HCT116-p53^-/-细胞中建立248W和273H突变子表达模型，为研究p53突变子在肿瘤发生中的作用及通过封闭p53突变子的方法进行肿瘤基因治疗提供实验基础。方法：以野生型p53基因为模板，采用引物重叠PCR定点突变技术，合成p53基因248W和273H突变子，并利用基因重组技术构建出表达载体，用脂质体转染法建立模型，Western blotting检测p53突变子蛋白。结果：经基因测序后证实第248位密码子由精氨酸（CGG）突变为色氨酸（TGG），第273位密码子由精氨酸(CGT)突变为组氨酸（CAT），说明成功合成p53突变子，构建的表达载体转染HCT116细胞后，经Western blotting检测，以特异表达条带与内参GAPDH的比值做为相对值进行半定量比较，特异蛋白表达显著升高，证实模型建立成功。结论：通过引物重叠PCR定点突变技术成功构建p53基因248W和273H突变子，并在HCT116细胞中成功表达。     

Study on the p53 Protein Expression in Gastric Cancer and Precancerous Lesions by Flow Cytometry

Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｐ５３ＰｒｏｔｅｉｎＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＧａｓｔｒｉｃＣａｎｃｅｒａｎｄＰｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓＬｅｓｉｏｎｓｂｙＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｒｙＨＡＯＹｉｎｇ（郝莹）；ＺＨＡＮＧＪｉｎｋｕｎ（张锦坤）ＹＩＣｕｉｑｉｏｎｇ（易粹琼）...     

鼠双微体基因2与p53在子宫颈癌发生中的作用

鼠双微体2(murine double minute2,mdm2)基因是从一个含有鼠双微体(murine double minut,DM)自发转化的BALB/3T3DM细胞中克隆出来的高度扩增的基因,高表达时呈现癌基因功能。子宫颈鳞状上皮由CIN转变为癌有许多因素参与,其中mdm2和p53在宫颈感染人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)情况下相互作用,可促进宫颈上皮的恶性转变,是导致子宫颈癌的发生的因素之一,本文对其进行综述。     

抗癌基因失活与葡萄胎恶变的关系

为探讨ｐ５３及ｎｍ２３抗癌基因失活与葡萄胎恶变的关系，对８２例葡萄胎、３０例侵蚀性葡萄胎和３０例绒癌石蜡包埋切片进行免疫组织化学染色分析。８２例葡萄胎中，未发生恶变３２例，恶变５０例。恶变组葡萄胎中ｐ５３基因的表达明显强于非恶变组（Ｐ＜０．０５），ｎｍ２３基因的表达显著低于非恶变组（Ｐ＜０．００１）。不同来源的绒癌之间以及绒癌和侵蚀性葡萄胎之间ｐ５３和ｎｍ２３基因的表达差异无显著性（Ｐ均＞０．０５）。ｐ５３及ｎｍ２３基因的失活与葡萄胎恶变有关，但与葡萄胎恶性转化方向无关     

组蛋白乙酰化修饰对IEC-6恶性转化细胞细胞周期和p53、p21WAF1基因表达的调控

目的 分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响.方法 采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次) 的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞的细胞核蛋白,采用免疫印迹检测H3乙酰化水平;并用ChIP及RT-PCR检测组蛋白H3乙酰化对p21WAF1表达的影响.结果 24次IEC-6恶性转化细胞组蛋白H3乙酰化水平高于6次IEC-6转化细胞,而组蛋白H3去乙酰化水平低于6次IEC-6转化细胞;同时发现p21WAF1的启动子区PCR产物减少.在6、12次IEC-6转化细胞中均有较弱的p53、p21WAF1表达;在24次IEC-6恶性转化细胞中仍可检测到较弱的p53表达,但p21WAF1表达缺如.结论 IEC-6恶性转化细胞过程中,组蛋白H3乙酰化水平增高,导致p21WAF1基因表达受抑,近而可能影响转化细胞的细胞周期.     

中医药对肺癌p53基因表达影响的研究进展

正原发性肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。据最新数据统计,我国新发肺癌病例70.5万,死亡病例为56.9万,死亡率占我国恶性肿瘤死亡率的第一位~[1]。p53与肺癌的生物学行为存在相关性~[2]。p53作为一种抑癌基因,是癌症中最常见的突变基因之一~[3],人类恶性肿瘤患者中超过50%的人存在p53基因的突     

应用PCR-SSCP方法检测胸水细胞中p53基因突变鉴别良恶性胸水

目的 探讨胸水细胞中ｐ５３基因突变的检测对鉴别良恶性胸水的价值。方法 应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３４例肺癌患和１６例良性肺部疾病患的胸水细胞中的ｐ５３基因突变情况进行了检测,同时进行了胸水的瘤细胞学检查和部分肺癌组织的ｐ５３基因突变检测,并将结果进行了比较。结果 在４７．０％９１６／３４）的肺癌患的胸水细胞中检测到ｐ５３基因的突变,在３７．５％（６／１６０的瘤细胞学检查阴性的肺癌患的胸水细     

Aurora -A与卵巢癌早期诊断、耐药性产生和预后之间关系的研究进展

Aurora -A是中心体相关激酶,在细胞有丝分裂中起重要作用,可能通过上调癌基因c- myc的表达及抑制抑癌基因p53的作用等使细胞发生恶性转化.Aurora -A过表达是卵巢癌发生中的早期事件,与卵巢癌耐药性的产生及预后差相关.本文重点综述了Aurora -A在卵巢癌的早期诊断、耐药性产生及预后方面的研究进展.     

乳腺癌及其癌前病变中p53,bcl-2,c-myc蛋白的表达

[ 目的 ]通过检测乳腺癌及其癌前病变中 p5 3,bcl 2 ,c myc蛋白的表达 ,探讨其在乳腺组织恶性转化进程中的作用 .[方法 ]应用免疫组织化学方法原位观察了 31例乳腺癌 ,2 0例乳腺不典型增生 ,2 0例乳腺单纯性增生中p5 3 ,bcl 2 ,c myc蛋白的表达 ,以 8例正常组织作对照 .[结果 ]p5 3,c myc蛋白在乳腺癌中阳性率分别为 6 7% ,6 4% ,均高于正常组织 ;在乳腺不典型增生中阳性率分别为 5 0 % ,5 0 % ,也高于正常组织 ;在乳腺单纯性增生中阳性率分别为 40 % ,30 % .bcl 2蛋白在乳腺癌、乳腺不典型增生及单纯性增生中阳性率分别为 77% ,85 % ,90 % .[结论 ]p5 3 ,c myc蛋白的过表达、bcl 2蛋白的表达降低在乳腺组织恶性转化进程中起重要的作用     

p53、Ki-67、p16和cyclin D1在口腔癌前病变的表达及相关性研究

目的探讨多基因表达及相互作用与口腔癌前病变癌变的关系。方法采用免疫组织化学ABC法对76例上皮异常增生和84例正常口腔黏膜p53、Ki-67、p16和cyclin D1的表达进行研究,并对上皮异常增生患者实际癌变率做了3年追踪调查。结果口腔黏膜癌前病变组织p53和Ki-67表达明显高于正常口腔黏膜,差异有统计学意义（P〈0.05）;p53和Ki-67同时过度表达与实际口腔癌前病变癌变率密切相关;口腔黏膜癌前病变组织中存在p16和cyclin D1表达失衡现象。结论p53和Ki-67同时过度表达及p16和cyclin D1表达失衡是口腔黏膜癌前病变癌变的重要标志。     

Maspin蛋白和p53在卵巢上皮性肿瘤中的表达及两者的关系

Maspin最早是从正常乳腺上皮细胞和乳腺癌中采用消减杂交技术分离出来的,是一种候选肿瘤抑制基因。研究表明,Maspin对肿瘤细胞的运动、侵袭、转移、抗血管新生和诱导凋亡等有抑制作用。p53是迄今发现与人类恶性肿瘤相关性最高的抑癌基因。Maspin的启动子区域存在一个p53结合位点,p53可直接结合到该位点进行调节,从而控制其mRNA的表达。现就Maspin和p53的结构、在卵巢癌中的表达,以及两者表达的相关性予以综述。