广西玉林市2015—2020年HIV抗体不确定结果的随访分析

目的 探讨人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）抗体不确定结果转归特点及HIV-1病毒载量检测在HIV抗体不确定诊断中的应用。方法 收集2015—2020年广西壮族自治区玉林市HIV抗体筛查为HIV抗体有反应的样本,使用胶体金和胶体硒两种快速法检测试剂复核,出现单反应或双反应的标本使用蛋白免疫印迹法（Western-blot, WB）进行确证试验,WB结果为不确定的样本检测其HIV-1病毒载量作为补充试验并在1~4周后进行随访。结果 2015—2020年共收到HIV抗体确证检测样本4 906人份,不确定结果153人份（3.12%）,最终完成随访并有检测结果91例。在91例中有59例阳转（64.84%）,32例阴转（35.16%）;复核双反应和单反应的阳转率分别为94.74%（54/57）和14.71%（5/34）;WB结果为2条带以上的阳转率为89.80%（44/49）,WB结果仅有1条带的阳转率为35.71%。91例随访中病毒载量>5 000 CPs/mL的有59例,阳性率为90%,病毒载量≤5 000 CPs/mL的有32例,阳性率为0。结论 HIV抗体复核出现双反应且WB至少2条带型的样本阳转率比较高;HIV抗体复核仅单反应且WB仅有1条带型的也有感染的高风险,可检测HIV-1病毒载量以尽早确定患者是否感染HIV病毒。     

人类免疫缺陷病毒抗体确证试验假阳性1例分析

目的:通过对1例人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体确证试验结果假阳性者进行随访检测分析,探讨HIV抗体确证试验技术在实际工作中存在的问题和解决的方法。方法:对1例受检者进行HIV抗体筛查和确证试验,并于4周、8周和12周随访检测,后两次随访进行HIV-1病毒载量检测以及第四次进行CD4+T淋巴细胞检测。结果:4次HIV抗体检测结果免疫印迹试验带型均为gp160、gp120、p24;后两次病毒载量结果均为TND,第四次CD4+T淋巴细胞检测结果为885 cells/μl,结合流行病学资料,最终判定HIV抗体阴性。结论:随着HIV抗体确证试验结果不确定样本不断增多,检测者要格外谨慎判断处于临界状态的样本,必须结合流行病学资料分析及随访检测,才能给予准确的检测报告。     

HIV抗体不确定样品的鉴别策略研究

目的探索HIV抗体不确定样品的确证策略。方法对93例HIV抗体不确定样品的抗体检测数据进行分析,并进行病毒载量检测和HIV抗体随访检测。结果复检时两种试剂检测结果不一致的有51例,病毒载量检测结果均为阴性。两种复检试剂检测结果均为阳性的42例样品中,有27例病毒载量检测结果为阳性,其中ELISA S/CO6的9例样品病毒载量检测结果均为阳性,ELISA S/CO≤6的33例样品中有18例病毒载量检测结果为阳性。对17例不确定样品进行了HIV抗体随访检测,11例病毒载量为阳性的样品均确证为HIV抗体阳性,6例病毒载量为阴性的样品均排除HIV感染。结论对于HIV抗体不确定样品应当慎重对待,HIV抗体复检结果和病毒载量检测结果有助于鉴别HIV感染状态。     

核酸检测在血液传染病筛查的应用价值

目的 探讨核酸检测在血液传染病筛查[乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒(HIV)]的应用价值.方法 选取2018-2019年在该院住院因手术或输血需要检测乙肝五项和抗HCV、HIV抗原抗体的500例患者血清标本.化学发光法检测乙肝五项、抗HCV、HIV抗原抗体,提取核酸定性检测HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA.比较两种方法的检测结果,不一致的标本检测病毒载量确认最终结果.结果 检测出11例HBV化学发光与核酸定性结果不一致标本,未检出HCV和HIV化学发光与核酸定性结果不一致标本.2例HBsAg阳性HBV DNA定性阴性检测标本检测载量均小于20 IU/mL.9例HB-sAg阴性HBV DNA定性阳性样品中2例未检测到HBV DNA载量,6例标本检测到HBV DNA载量小于20 IU/mL,1例标本HBV DNA载量为23.6 IU/mL.结论 HBV、HCV、HIV病原体核酸检测有利于检测出窗口期和免疫状态异常的感染者.     

化学发光四代试剂结合病毒载量检测在HIV-1感染急性期诊断中的应用分析

目的分析化学发光四代HIV筛查试剂结合病毒载量检测在HIV感染诊断中的重要作用,补充确证实验的不足。方法对化学发光四代试剂筛查阳性,WB确证为HIV-1抗体不确定、阴性的20份标本进行病毒载量实验,并对其持续跟踪了解感染状况。结果 20份化学发光四代试剂筛查阳性的标本,确证结果为3份阴性和17份不确定,病毒载量结果最低1.9E5 cps/ml,病毒载量最高1.8E7 cps/ml,经2～4周随访后,WB确证均为HIV-1抗体阳性。结论四代试剂结合病毒载量检测可及早发现急性期高病毒血症的感染者,为控制HIV的传播提供科学的实验室依据。     

HIV-1抗体不确定和阴性者WB条带及病毒载量分析

目的 目前针对病毒载量检测在I型艾滋病病毒(HIV-1)抗体不确定及阴性个体中诊断意义的报道较少.文中旨在通过分析HIV-1抗体不确定和HIV抗体阴性病例的蛋白印迹试验(WB)带型及随访情况,探索病毒载量检测在鉴别HIV-1抗体不确定不同带型和HIV抗体阴性个案中的作用,评价核酸检测对于WB中HIV-1抗体不确定或HI...     

昆明地区艾滋初治病例感染、免疫及耐药情况调查

  目的  研究针对昆明地区艾滋初治病例感染、免疫及耐药情况进行调查研究,将临床特征及病毒学特征进行联合分析,为艾滋病治疗难易程度的判定及抗病毒精准医疗个体化方案的制定提供依据。  方法  选取初治HIV病例200例,于治疗前采集血液,进行HIV病毒载量、HCV病毒载量、HBV病毒载量、CD4+T淋巴细胞计数,血清白蛋白、ALT、AST、HIV分型及耐药等检测。  结果  昆明地区艾滋初治病例感染途径以异性传播为主,占比80.5%,MSM人群也占有一定比例（6.5%）,青少年及老年人群占比25%。200例HIV初治病例CD4水平与HIV病毒载量负相关（r = -0.58,P < 0.05）,其中有83例发生机会性并发感染。艾滋初治病例HIV亚型以CRF08_BC亚型占比最高（27.5%）。200例HIV初治人群中共有7例感染者检出耐药突变位点,原发耐药率为3.5%。  结论  昆明地区艾滋病传播出现了新特征,传播途径从静脉吸毒为主转变为以异性传播为主,MSM人群、青少年及老年感染人群占比增加。昆明地区HIV初治人群HIV亚型具有独特分布特点,免疫状态整体偏低,原发耐药率为3.5%。     

HCV RNA定量检测试剂的临床应用

目的:探讨HCV RNA定量检测试剂的临床应用效果。方法:通过和市场上广泛使用的柱提取试剂比实验,对一种丙型肝炎病毒磁珠法核酸提取荧光定量PCR检测试剂的临床使用进行评估。结果:①浓度在5.00E+03～5.00E+06 IU/mL的样本,两种试剂的定量结果与理论靶值均具有很好的对应性,具有较好的重复性和精密度;对于1.00E+03IU/mL以下的样本,磁珠法的定量结果重复性好,定量准确;而柱提取法大部分均未能检出。②对于2种方法检测的339例临床样本,中高病毒载量组柱提取法检测>5.00E+02IU/mL有147例,两种试剂定量结果基本一致,相关性r为0.9413。3 339例临床血清样本中5例样本磁珠法检测为阳性,而柱提取法检测为阴性,P<0.01,二者有显著性差异。这5例样本,丙肝肝炎抗体检测均为阳性。结论:①对于中高病毒载量的样本,两种试剂均具有良好的检测效果;②磁珠法对比柱提取法在低病毒载量区域,灵敏度更高,同时操作相对简单,不易出现污染与脱靶,具有较高的临床应用价值。     

昆明地区低病毒载量慢性乙肝患者血清高敏HBV DNA检测分析

  目的  探讨昆明地区持续低水平病毒血症的慢乙肝患者,高敏HBV-DNA载量、HBV的基因型分布特点、HBV P区耐药位点的突变特征,和HBeAg、HBsAg、ALT之间的关系及临床应用价值。  方法   采集2021年1月至2021年12月期间于昆明市第三人民医院就医的707例慢性乙肝患者的血清,分析高敏HBV-DNA、HBV的基因型以及HBV P区的耐药位点突变情况,并分析不同HBV-DNA载量与HBeAg、 HBsAg、ALT之间的关系。  结果  研究707例持续低载量慢性乙肝患者中,高敏HBV DNA（< 500 IU/mL）446例,占（63.50%）,高敏HBV DNA 小于2000 IU/mL的慢乙肝患者共有576例,占（81.90%）;HBeAg 阳性262例（37.05%）;基因分型以C基因型占比最高60.53%（428/707）。在196例HBeAg阳性且HBV DNA < 2000 IU/mL患者组中,男性为主,占69.89%;ALT > 40 U/L占28.57%,有73.47%患者的HBV DNA > 20 IU/mL。在265例HBV DNA < 20 IU/mL的患者中,80.38%（213例）患者HBeAg阴性,19.62%（52例）HBeAg呈阳性。临床指标比较,HBeAg阳性率、ALT异常率、耐药位点和其它位点突变率在HBV DNA 载量水平不相同组之间差异有统计学意义（P < 0.05）。  结论  对持续低水平病毒血症的慢性乙型肝炎患者,选择高敏的PCR技术定期监测乙肝病毒HBV DNA,结合HBeAg、HBsAg 、ALT等临床指标的定量监测,可为后续患者的临床治疗提供客观的参考依据。     

33例HIV-1抗体免疫印迹试验不确定结果分析

目的调查HIV-1抗体确证检测中不确定样本结果的血清学特征并探讨缩短患者检测窗口期的可行性方法。方法采用胶体硒快速试验、酶联免疫吸附试验及免疫印迹试验对云南省传染病专科医院确证试验中HIV抗体不确定样本结果进行带型比较,分别对gag、pol和env3个基因区对应抗原条带出现频率、出现时间、组合类型进行比对分析,同时对不确定样本的HIV核酸检测、快速试验和ELISA实验结果的敏感性和特性性进行验证,以阐明不确定样本中各WB条带出现时间顺序和组合特点,为临床检测提供理论参考。结果 2013至2016年本院共检出33例HIV抗体不确定样本,其中20例在随访过程中确定为HIV感染:血清抗体检测阳转18例,核酸定量检测阳转者2例。33例不确定样本中有12例在初次确证检测与第2次随访之间进行HIV核酸定量检测,其中10例均5 000 copies/mL,且第2次血清抗体检测随访均阳转。HIV核酸检测的敏感性和特异性均达100%。33例不确定样本WB特征条带中,gp160和p24单独出现频率最高,分别为100.0%和72.7%;在组合带型中,gp160、p24出现频率最高为45.4%,20例随访阳转的样本中均包含gp160、gp120或p24条带。结论 gp160、p24带型的出现提示标本有较大感染风险,对含有gp160、p24带型的不确定标本补充HIV核酸定量检测可缩短检测窗口期。     

惠州市2013—2017年无偿献血者HIV检测结果

目的 调查惠州市无偿献血者HIV感染情况、为后续的献血者招募及HIV防治提供数据支持。方法 收集惠州市2013年1月1日—2017年12月31日5年期间无偿献血者的HIV检测资料,并进行统计学分析。结果 惠州市2013—2017年共检测无偿献血者标本326 388份,HIV抗体筛查阳性待确证标本187例,其中HIV抗体确证结果阳性138例,确证阳性率为4.22/万,核酸检测阳性结果与确证结果符合率为99.28%;HIV抗体确证结果阴性33例,核酸阴性结果与确证结果符合率为100.00%;HIV抗体确证结果不确定者16例,占8.56%,其中核酸检测结果有反应者2例,4周后随访,HIV抗体确证结果转为阳性;男性平均确证阳性率为5.13/万,女性为1.48/万。26~35岁年龄段的确证阳性率最高,最低确证阳性率的年龄段为46~60岁。结论 对HIV抗体不确定结果人群应结合核酸和抗体确证的结果进行综合判定;加强献血前健康征询工作,将HIV感染者隔离于献血前,从而从源头上保障血液安全;5年间惠州市无偿献血普通人群HIV感染率一直处于稳定的低流行状态。     

昆明地区1 452例低病毒载量慢乙肝患者耐药突变相关位点的分析

  目的  对昆明地区低病毒载量乙肝患者进行基因分型及耐药突变位点的分析研究,为低载量乙肝患者临床抗病毒治疗难易程度的判定及抗病毒精准医疗个体化方案的制定提供依据。  方法  选取1452例低病毒载量（HBV DNA《2.0x103 IU/mL）慢性乙型肝炎患者,进行乙肝分型和耐药基因位点检测。  结果  昆明地区乙肝低载量人群中HBeAg阴性者占比较高（59.5%）,男性患者占比（70.6%）高于女性,年龄分布以30～60岁为主（72.7%）,基因分型以C基因型占比最高（61.8%）。1 452例昆明地区低载量乙肝患者中共有37例患者检出耐药突变位点,其中拉米夫定与恩曲他滨耐药率一致（1.6%）,替比夫定耐药率为1.2%,阿德福韦耐药率0.9%,恩替卡韦耐药率0.2%,替诺福韦未检出耐药突变位点。除耐药突变位点外,还检出其他突变位点112例,其中S256G、S213T、N/H238T/D、Q215H检出率最高,检出率最低的突变位点为A194T。  结论  昆明地区乙肝基因型以C型为主,提示该地区的 HBV 基因型分布状况有独立特征。昆明地区低病毒载量乙肝患者恩替卡韦的耐药率最低,未发现 TDF耐药,但存在替诺福韦酯药物敏感性下降。检出的其他突变位点是否与耐药性相关,仍存在一定的争议,但其检出率也存在一定的占比。     

四种幽门螺杆菌检测方法的灵敏度比较实验

  目的  用标准微生物学方法测定4种幽门螺杆菌实验室常用检测方法的灵敏度并纵向比较各方法的差异性。  方法  用幽门螺杆菌标准菌株（SS1）为参照,以菌落形成单位（CFU）为测定能力定量分析单位,以不同浓度梯度稀释的SS1菌液为模拟样本,分别对幽门螺杆菌培养法、快速脲酶试验法、抗原检测法、荧光定量PCR法进行测定能力的试验研究,记录4种幽门螺杆菌常用检测方法对应的不同浓度的CFU值并进行差异性分析。  结果  幽门螺杆菌培养法检测灵敏度为2.0×10 CFU/mL,快速脲酶试验法检测灵敏度为2.0×107 CFU/mL,抗原检测法检测灵敏度为2.0×105 CFU/mL,荧光定量PCR法检测灵敏度为2.0×102 CFU/mL。  结论  幽门螺杆菌实验室不同检测方法的灵敏度差异显著。培养法和荧光定量PCR法的敏感性较高,但培养法耗时长、操作复杂;抗原检测和快速脲酶试验需要的时间短,但试验敏感性较低。临床以及实验室可根据检测目的选择能识别幽门螺杆菌对应变化的检测方法。     

1例因窗口期输血引起HIV-1感染的调查

目的明确患者是否由窗口期输血感染HIV-1。方法采集献血者存留样品及患者阳性样品,进行核酸提取、病毒载量检测、PCR及基因测序,对所得结果进行pol基因鉴定,同时用软件MEGA4.1进行系统发生分析。结果 2名献血者中,有1名献血者存留样病毒载量结果为37 000 IU/ml,与患者HIV-1毒株均为CRF07_BC重组亚型,其相似性为100%。结论患者体内的HIV-1毒株为窗口期输血感染。在采供血机构推广核酸检测将更有利于临床输血的安全。     

孕妇HIV疾病状况与新生儿LBW的相关性

  目的  分析HIV阳性孕妇所生新生儿的低出生体重（low birth weight，LBW）情况及其相关的危险因素。  方法  选择2013年1月至2018年5月于昆明市第三人民医院住院分娩的194例HIV阳性孕妇为研究对象。孕妇信息包括人口特征、妇产科病史、抗逆转录病毒药物史、HIV传播途径以及HIV疾病状况（包括入组时的CD4计数、HIV RNA病毒载量和血红蛋白）。采用Logistic回归分析确定与LBW相关的危险因素。  结果  在194名婴儿中，38例（19.6%）为LBW（< 2500 g）。LBW婴儿与非LBW婴儿在入组体重、怀孕期间抗逆转录病毒药物治疗、入组CD4计数、入组HIV RNA病毒载量和分娩时孕龄差异均有统计学意义（P < 0.05）。多变量Logistic回归分析显示，入组时体重轻（OR = 2.14，95% CI = 0.84～4.05，P = 0.013）、入组时CD4计数（OR = 6.02，95% CI = 1.50～24.13，P < 0.001）、入组时HIV RNA病毒载量（OR = 3.34，95% CI = 1.70～6.55，P < 0.001）和分娩时孕龄（OR = 12.90，95% CI = 2.03～81.88，P < 0.001）是LBW的独立危险因素。  结论  孕妇HIV疾病状况与新生儿LBW相关。HIV的产前筛查和诊断，对于早期预防和治疗HIV母婴传播，减少不良妊娠结局至关重要。     

宏基因组测序在临床重症感染患者寻找病原体中的应用

  目的  应用宏基因组测序检测重症患者感染病原体,了解在重症患者中的应用对寻找感染病原体的帮助。  方法  对1例表现为腹痛、逐渐进展至意识障碍合并严重感染的急性重症胰腺炎患者,用传统方法检测病原体的同时应用宏基因组测序。传统方法包括:常规涂片、培养,VitekII Compact全自动微生物鉴定和药敏分析,实时荧光定量PCR检测病毒载量,以及免疫组织化学等病理检查。宏基因组测序则采用基于BGISEQ-100高通量测序平台的二代测序,剔除人类宿主序列后,将保留下来的序列与包含病毒、细菌、真菌和寄生虫基因组序列的微生物基因组数据库进行比对,确定标本中所有的病原体。  结果  传统检验发现该患者感染了耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌和耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌。宏基因组测序结果不仅检出了前述病原体,还检查出了加重疾病恶化的巨细胞病毒（CMV）,耗时约5 d。实时荧光定量PCR补充病毒载量检测证实其CMV载量为189 000 copies/mL。  结论  在本例重症患者中,宏基因组测序一次性快速准确检出了3种病原菌和1种病毒,可辅助重症患者感染病的快速诊断。