丙泊酚对缺氧大鼠海马脑片诱发电位的影响

目的采用离体海马脑片缺氧模型,观察丙泊酚对缺氧大鼠海马脑片诱发电位的影响。方法用细胞外记录方法,电极刺激海马CA3区谢弗侧支,在CAl锥体细胞层记录诱发电位。观察丙泊酚对缺氧海马脑片诱发电位———顺向群峰电位(OPS)和缺氧损伤电位(HIP)的影响。大鼠海马脑片随机分为4组,每组8个脑片。缺氧组:脑片用缺氧无糖的人工脑脊液(ACSFOGD)灌流14 min,实施缺氧过程;药物组分为P1、P5和P15组:在ACSFOGD灌流液中分别含1,5和15μmol.L-1的丙泊酚。结果缺氧组OPS消失时间为(186±26)s,在缺氧10 min左右,均出现HIP,持续时间为(113±16)s;恢复供氧后,OPS恢复率和恢复幅度分别为25%和(30±23)%。与缺氧组相比,P5及P15组OPS消失时间向后推迟,OPS恢复率和恢复幅度都有增加;并且HIP出现率下降,其出现时间明显延后、持续时间显著增加。而P1组各项指标与缺氧组相比,无明显差异。结论丙泊酚能改善缺氧海马脑片细胞外记录电生理指标,提示对脑缺氧损伤有保护作用。     

藏药合剂抗脑缺血损伤作用的研究

目的 :观察藏药合剂对大鼠海马脑片缺血性损伤的保护作用。方法 :通过电刺激离体海马脑片 CA3区的 Schaffer侧支 ,记录 CA1区锥体细胞层的顺向群峰电位 (orthodromic population spikes,OPS) ,观察藏药合剂对缺血状态下 OPS的影响。结果 :藏药合剂组用药后 OPS恢复程度为 (6 4 .0± 19.5 ) % ,明显高于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :在离体海马脑片模拟缺血损伤的研究中 ,藏药合剂对缺氧缺血性脑损伤有保护作用 ,而且效果较好。     

人参皂甙Rb1抗脑缺血损伤作用的实验研究

目的　研究人参皂甙Rb1对脑缺血损伤的保护作用。方法　观察大鼠海马脑片在缺血条件下顺向群峰电位 (orthodromicpopulationspike ,OPS)的变化及人参皂甙Rb1对它的影响。结果　使用人参皂甙Rb1(6 0 0 μmol/L)后 ,可使缺氧损伤电位 (hypoxicinjurypotential,HIP)发生率明显减少 (P <0 .0 1) ,OPS恢复率和OPS恢复程度与对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　人参皂甙Rb1有明显的抗脑缺血损伤作用     

人参皂甙Rb1抗脑缺血损伤作用的实验研究

目的研究人参皂甙Rb1对脑缺血损伤的保护作用.方法观察大鼠海马脑片在缺血条件下顺向群峰电位(orthodromic population spike,OPS)的变化及人参皂甙Rb1对它的影响.结果使用人参皂甙Rb1(600 μmol/L)后,可使缺氧损伤电位(hypoxic injury potential,HIP)发生率明显减少(P＜0.01),OPS恢复率和OPS恢复程度与对照组比较有显著性差异(P＜0.05).结论人参皂甙Rb1有明显的抗脑缺血损伤作用.     

丹参合剂抗脑缺氧作用的研究

目的：通过整体动物实验和离体海马脑片实验，研究丹参合剂的抗脑缺氧作用。方法：观察密闭三角烧瓶中小白鼠缺氧存活时间；观察大鼠离体海马脑片缺氧过程中缺氧损伤电位（ＨＩＰ）的出现率及缺氧后诱发顺向群峰电位（ＯＰＳ）的恢复率和恢复程度。结果：小白鼠缺氧存活时间（ｍｉｎ），用药组（３３．１６±６．８７）较正常对照组（２１．１±３．９７）显著延长（Ｐ＜０．０１）；用药组ＯＰＳ恢复率７１．４％、恢复程度９２．４±５３．２％、ＨＩＰ发生率１４．３％，对照组ＯＰＳ恢复率２０％、恢复程度３０．２±３６．６％、ＨＩＰ发生率８０％，组间３项指标比较，差异均有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论：实验用丹参合剂有明显的抗脑缺氧作用，其作用机制可能与丹参降低神经元的兴奋性，减少能耗，从而保护脑细胞有关。     

左旋硝基精氨酸抗大鼠海马脑片缺氧损伤的电生理研究

目的 :为进一步证实一氧化氮合酶 ( NOS)抑制剂左旋硝基精氨酸 ( L -NNA)抗缺血缺氧性脑损伤的作用。方法 :在大鼠离体海马脑片 ,用电生理记录技术 ,观察 L-NNA对缺氧时海马脑片顺向群峰电位 ( OPS)的影响。结果 :使用 L-NNA的海马脑片缺氧后 OPS的恢复程度和恢复率分别为 10 4.79± 6 6 .2 5 %、75 .0 0 % ,与对照组相比有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。结论 :L-NNA有明显抗缺氧脑损伤作用 ,作用机理可能是 L -NNA抑制了 n NOS活性 ,降低缺氧时神经源性 NO的形成 ,减轻 NO对神经细胞的毒性作用     

左旋四氢巴马汀对大鼠海马脑片缺氧损伤电生理的影响

目的 在海马脑片水平观察左旋四氢巴马汀(L-tetrahydropalmatine,L-THP)对脑组织缺氧后及恢复给氧早期突触功能的影响.方法 大鼠离体海马脑片以人工脑脊液孵育,观察缺氧后海马CA1区诱发群峰电位(population spike,PS)开始减小的时间和消失时间,缺氧损伤电位(hypoxic injury potential,HIP)出现时间、出现率和保持时间,复氧后PS的恢复率和恢复程度等指标并观察L-THP对这些指标的影响.结果 L-THP(0.028,0.14,0.28 mmol&#183;L-1)组脑片PS减小时间、消失时间与缺氧组相比后延,并有显著差异(P＜0.05),但其作用强度随剂量递减.缺氧组脑片平均在658.8 s出现HIP,L-THP 0.028 mmol&#183;L-1组,0.14 mmol&#183;L-1组和0.28 mmol&#183;L-1组脑片出现时间分别推迟为1 152.4和851.1,723.5 s,与缺氧组相比均有显著差异(P＜0.05).各组的HIP出现率分别为100%,33.3%,67.0%,83.3%.复氧30 min后,氧-葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)组的恢复率为8.33%,恢复程度为19.8%.在L-THP组(0.028,0.14,0.28 mmol&#183;L-1),PS的恢复率分别为92%、75%和33.3%,恢复程度分别为82.5%,70.4%和58.6%,与对照组比有非常显著的差异(P＜0.01).结论 L-THP能减缓缺氧时PS幅度的降低速度,减轻和防止脑片突触功能的不可逆损伤,提高脑片的耐缺氧能力,但随着剂量增加而作用减弱.     

银杏内酯对大鼠海马脑片缺血性损伤的保护作用

目的 :研究银杏内酯对海马脑片缺血性损伤的保护作用及其与剂量的关系。方法 :电刺激离体海马脑片诱发顺向群峰电位 (orthodromic population spikes,OPS)的方法 ,观察不同浓度的银杏内酯对缺血条件下 OPS变化的影响。结果 :银杏内酯 (37.5 mg/10 0 m l) OPS恢复幅度和恢复率分别为 (5 4 .8± 4 8.2 ) %、5 7.2 % ,与对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。而且银杏内酯组 OPS恢复幅度与其浓度呈正相关。结论 :银杏内酯对海马脑片缺血性损伤具有保护作用 ,并与浓度呈正相关     

刺五加注射液治疗急性脑血栓的临床分析及抗谷氨酸作用的研究

目的:观察刺五加(AS)注射液对急性脑血栓的治疗效果并探讨其作用机理。方法:1、对急性脑血栓患者采用单盲对照法,刺五加组74例,在常规治疗基础上用AS注射液60ml加入0.9%生理盐水500ml中静脉滴注,每天1次,共14天;对照组74例,以复方丹参注射液20ml静脉滴注,每天1次,共14天。观察临床效果。2、实验研究用大鼠海马脑薄片电生理和组织学检查,观察使用AS注射液(AS组)和未使用AS(对照组)对谷氨酸(Glu)所致的缺血性海马脑片顺向群峰电位(OPS)的影响以及脑片的超微结构变化。结果:(1)临床观察AS组优于对照组。(2)AS组脑片在加入Glu后5分钟OPS减小并消失,去除Glu1小时后OPS恢复率为83.3%,平均恢复程度为86.4%;对照组脑片加入Glu后OPS在3分钟迅速减小并消失,去除Glu1小时后OPS恢复率为16.6%,恢复程度为41.5%。两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(3)电镜下观察发现,加有Glu海马脑片的CA1区锥体细胞核染色加深,核膜不完整,核内染色质凝聚成块,胞浆中内质网高度扩张。使用AS后的神经细胞核膜完整,核内染色质轻度凝聚,内质网轻度扩张。结论:AS注射液可能通过抗Glu毒性作用对急性脑血栓形成有治疗作用。     

缺血再灌注离体海马脑片活性的光通透性评价方法

目的 :探讨缺血再灌注离体海马脑片的光信号改变特征 ,以及 L型 Ca2 +通道在脑缺血急性期损害中的作用。方法 :以缺氧缺糖 (OGD)方法诱导离体海马脑片缺血模型 ,采用自行构建的脑片透光检测系统 ,结合图象处理软件 Photoshop中的灰度分析检测脑片活性 ,并观察尼莫地平的作用。结果 :体外缺血使海马 CA1区域对光通透性增加 ,(7.5 9± 1.4 2 ) min达峰值 ,再灌后 (6 .37± 1.89) min恢复至本底水平 (n=15 slices) ;L型 Ca2 + 通道阻断剂尼莫地平 (0 .5 μmol/ L,n=10 slices;5 μmol/ L,n=9slices)对缺血所致的海马脑片透光度增加具有抑制作用。而高剂量组 (5 0 μmol/ L,n=11slices)则引起脑片透光度的增加 ,给药后 (2 5 .83± 6 .32 ) min达峰值 ;尼莫地平使海马脑片透光度增加 ,并呈剂量依赖性。结论 :离体脑片光通透性检测是一种简易 ,无创性的脑片活性评价方法 ;L型Ca2 +通道对于维持正常脑片活性具有重要意义 ,同时参与脑缺血急性期损害 ,作用具有双重性     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在缺氧缺血性神经细胞死亡中的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在缺氧缺血性神经细胞死亡中的作用。方法体外实验采用原代培养的大鼠胎鼠皮质神经细胞,给予缺氧再给氧处理;体内实验采用线栓法建立大鼠局灶性短暂性脑缺血再灌注损伤模型。用噻唑蓝比色法测定神经细胞生存率,用电泳迁移率变动分析法检测PPARγ的结合活性。结果缺氧处理后的神经细胞,其PPARγ的结合活性明显增加,以对照组活性为100,而缺氧3h组为160.3,缺氧3h再给氧的2、4、8h分别为157.5、136.6、103.3;缺氧3h及再给氧2h组与未处理组相比(P<0.01)。缺血处理后的神经细胞,其PPARγ的结合活性也明显增加,以假手术组为100,则手术组缺血侧、未缺血侧分别为144.8、102.6,缺血侧PPARγ的结合活性与未缺血侧及假手术组相比(P<0.01);PPARγ拮抗剂GW9662能明显增加缺氧再给氧后神经细胞的生存率,以对照组(CTL)生存率为100%计算,单纯缺氧组为58.6%,不同浓度的GW9662(0.5、1、2.5)预处理后分别为68%、73.6%和89.7%,GW9662预处理组与单纯缺氧再给氧组相比(P<0.05或P<0.01);GW9662能明显降低由于缺氧而增高的PPARγ结合活性,以未处理组为100,单纯缺氧组、GW9662预处理组分别为184、105,GW9662预处理组神经细胞PPARγ的结合活性与单纯缺氧再给氧组相比,P<0.01。结论PPAR     

复方人参提取物缓解体力疲劳作用的研究

目的研究复方人参提取物缓解体力疲劳的作用。方法通过对小鼠负重游泳时间、血清尿素、肝糖原、血乳酸的含量影响,观察复方人参提取物缓解体力疲劳的作用。结果实验组的小鼠负重游泳时间明显长于对照组,具有统计学意义（P〈0.05）;小鼠游泳运动后体内血清尿素值明显降低（P〈0.05）;肝糖原含量显著升高（P〈0.05）;血乳酸值较对照组降低,游泳后休息20 min后再测血乳酸,阳性组仍然较对照组为低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论复方人参提取物可明显增强机体对运动负荷的适应能力,抵抗疲劳的产生。     

还原型谷胱甘肽对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞的干预性研究

目的：探讨还原型谷胱甘肽（GSH）对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法：将原代培养的乳鼠心室肌细胞分为正常对照与GSH不同浓度处理组，缺氧、复氧前均给予0、40、80、160mg/L浓度的GSH，缺氧2 h，复氧1 h。应用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性，用硫代巴比妥酚显色法测定丙二醛（MDA）含量。结果：与对照组相比,单纯缺氧/复氧（0 mg/L）组SOD活性显著下降、MDA水平显著升高（P＜0.01）。GSH预处理以剂量依赖性减轻细胞活力下降及MDA的上升,而对SOD的作用则在160 mg/L组达到峰值。结论：GSH对缺氧/复氧损伤的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与GSH的抗氧化作用有关。     

香丹注射液配伍组对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血损伤的保护作用

目的观察香丹注射液配伍组(ADE)对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌缺血损伤的保护作用。方法采用大鼠皮下多点注射ISO(2 mg.kg-1),观察ADE对大鼠注射ISO后不同时间点心电图(ECG)J点下移的影响;采用大鼠急性心肌损伤模型,探讨ADE对血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)活性和心肌组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,同时观察心肌组织形态学的改变。结果 ADE组能明显改善异丙肾上腺素引起的J点下移变化,降低血清LDH活性,并减轻心肌组织的损伤。结论香丹注射液配伍组抗异丙肾上腺素所致的大鼠急性心肌缺血的作用与香丹注射液组相当。     

比索洛尔预处理对缺氧/复氧诱导的H9c2细胞损伤的影响

目的研究比索洛尔预处理对缺氧/复氧诱导的大鼠心肌细胞损伤的保护作用,并探讨该作用的机制。方法对大鼠心肌细 胞株（H9c2）进行缺氧复氧（6 h/2 h）,模拟大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,将H9c2细胞随机分成4组：正常对照组（control组）、缺 氧/复氧组（H/R组）、缺氧/复氧+比索洛尔预处理组（H/R+B组）、缺氧/复氧+比索洛尔预处理+PI3K/AKT阻滞剂LY294002组（H/ R+B+LY组）;分别采用MTT法检测心肌细胞活力,流式细胞仪法检测心肌细胞凋亡、ROS水平,Western免疫印迹法检测心肌 细胞p-AKT及p-GSK3β蛋白表达情况。结果与正常组相比,H/R组细胞活力下降,细胞凋亡率增加、ROS水平升高;经比索洛 尔预处理后,细胞活力明显提高,细胞凋亡率下降、活性氧水平降低,p-AKT/GAPDH、p-GSK3β/GAPDGH显著提高,而加入 PI3K/AKT阻滞剂LY294002后比索洛尔的保护作用消失。结论比索洛尔能减少缺氧/复氧所引起的氧化应激,对心肌细胞具 有明显的保护作用,其作用机制是通过激活PI3K/AKT/GSK3β通路而提高AKT、GSK3β磷酸化水平,减少ROS产生,增加细胞 的活性实现的。     

应用两种麦管系统对小鼠囊胚的玻璃化冷冻

OBJECTIVE: To compare open pulled straws with conventional sorans system for the purpose of establishing an effective vitrification method for mouse blastocysts. METHODS: With open pulled straws (OPS) and conventional straws, vitrifi- cation of mouse blastocysts was performed, and the survival and hatching rates of the blastocysts were observed after thawing. RESULTS: After vitrification, the embryo survival in the OPS group (82.3%) was significantly higher than conventional straw group (68.6%, P<0.01), and the hatching rate was also higher (70.3%, P<5 CONCLUSIONS: Vitrification of mouse blastocysts using OPS results in higher survival and hatching rates as compared with conventional straw method.     

异丙酚对缺血再灌注损伤神经细胞的保护作用

目的 研究异丙酚对缺血再灌注损伤神经细胞的保护作用.方法 取12h新生Wistar大鼠海马细胞进行体外培养,建立原代海马细胞缺糖缺氧再给氧模型(oxygen glucose deprivation,OGD).观察海马细胞形态,苔盼蓝染色计算细胞存活率.建立SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型,分为模型组、异丙酚用药组、正常对照组.观测各组动物术后神经症状评分、TTC染色测定脑梗死体积大小及HE染色.结果 海马细胞缺糖缺氧再给氧显示异丙酚用药组海马细胞存活数量较多,胞体较大突起保持稠密的神经网.异丙酚100μmol/L组细胞存活率为(56.2±3.7)％,较模型组(细胞存活率38.6％±4.3％)明显增高(P＜0.05).大脑中动脉阻断(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型24h神经症状评分,异丙酚用药组评分为(0.8±0.5)较模型组(2.3±0.5)显著降低(P＜0.05).TTC染色脑梗死体积异丙酚用药组为(123.21±11.04)mm3,较模型组(214.95±16.79)mm3显著降低(P＜0.01).HE染色可见异丙酚用药组正常细胞较多.结论 细胞和动物模型均显示异丙酚对缺血再灌注损伤后神经细胞具有保护作用.     

通络单味药与复方通心络的通络效果比较研究

目的研究单味药与复方通心络的通络效果。方法建立内皮损伤模型、内皮损伤并微循环障碍模型、内皮损伤并急性心肌缺血模型,分别检测一氧化氮(NO)、血管性血友病因子(vWF)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FG)、血小板计数(PLT)、脑利钠肽(BNP)、大内皮素1(Big ET-1)、C反应蛋白(CRP)。结果①内皮损伤模型:通心络组、人参组、水蛭组、蜈蚣组NO水平显著高于阳性对照组,vWF水平显著低于阳性对照组(P<0.05);②内皮损伤并微循环障碍模型:通心络组的PT、APTT水平均显著低于阳性对照组,FG、TT、PLT水平均显著高于阳性对照组(P<0.05);③内皮损伤并急性心肌缺血模型:通心络组、人参组、水蛭组、蜈蚣组BNP、Big ET-1、CRP水平显著低于阳性对照组,且通心络组BNP、Big ET-1、CRP水平变化更为显著(P<0.05)。结论复方通心络与单味药比较,对血管内皮损伤、络脉瘀阻以及络脉绌急具有更好的通络效果。     

巴戟素补肾健脑作用的神经活动基础

巴戟素是广州中医药大学新近从补肾中药巴戟天中提取的一种糖类单体物。为探讨巴戟素的补肾健脑的神经作用机制, 本实验以大鼠离体海马脑片为标本, 从细胞分子水平上观察巴戟素对大鼠海马脑片缺氧状态下的诱发群锋电位（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｐｉｋｅ, ＰＳ） 和突触传递长时程增强（ｌｏｎｇ ｔｅｒｍ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ , ＬＴＰ） 的影响。结果观察到巴戟素对脑缺氧损伤具有保护作用, 并能增强脑的记忆功能; 并观察到其作用机制与一氧化氮（ＮＯ） 有一定关系。实验结果从神经活动角度为中医补肾健脑理论增补了现代科学内容, 同时对开发巴戟素的临床应用提供了实验依据