超声对鼻咽癌拓扑替康热化疗的增效作用研究

目的以人鼻咽癌细胞株（CNE-2）为对象,观察超声对拓扑替康（TPT）热化疗作用的影响。方法计算TPT对CNE2的半数抑制浓度（IC50）后设单纯超声组、单纯TPT组、单纯热疗组、热疗＋TPT组、超声＋TPT热化疗组;记录各组数据得到生长抑制率,并在透射电镜下观察各组细胞的亚细结构变化。结果TPT对CNE-2的IC50为0．396μg／mL;热疗联合TPT对细胞的杀伤效应明显强于单纯TPT组,超声联合后抑制效应更为明显,组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）;透射电镜显示超声＋TPT热化疗组的细胞损伤最严重,细胞器毁损特征明显。结论热疗对TPT有增效作用,超声增强了TPT热化疗的杀伤效应。     

回生口服液调控Wnt通路CyclinD1影响人肺腺癌细胞增殖的机制

目的：研究回生口服液调控Wnt信号传导通路细胞周期蛋白D1（CyclinD1）影响人肺腺癌细胞（LAC）增殖的机制。方法：制备高、中、低剂量（11．6g／kg,5．8g／kg,2．9g／kg）回生口服液含药血清,与人肺腺癌细胞系共同培养,MTT法检测含药血清对肺腺癌细胞的抑制率,流式细胞仪检测肺腺癌细胞周期相对分布;建立C57BL／6人肺腺癌荷瘤小鼠模型,予回生口服液高、中、低剂量治疗,免疫组化法检测小鼠移植瘤肺腺癌细胞Cyclin—D1阳性表达水平。结果：与阴性对照组比较,回生口服液高、中剂量组及顺铂组含药血清对肺腺癌细胞的生长抑制率明显增高,且干预的肺腺癌细胞G1期细胞比例明显增高,s期、G2期细胞比例明显减少（P〈0．01,P〈0．05）;回生口服液中、高剂量及顺铂（DDP）治疗组小鼠肺腺癌细胞内CyclinD1阳性表达率明显低于模型组（P〈0．01）。结论：回生口服液可明显抑制人肺腺癌细胞生长,使癌细胞停滞于细胞周期的G1期,并可明显降低肺腺癌细胞内CyclinD1的阳性表达。     

区域亚高温热疗联合胸腔灌注顺铂治疗恶性胸腔积液

目的：观察区域亚高温热疗联合胸腔灌注顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效及对患者生存质量的影响。方法：108例恶性胸腔积液患者随机分为热化疗组（56例）和对照组（52例）,两组均先用中心静脉导管胸腔闭式引流,尽量引流尽胸水。热化疗组予以胸腔区域亚高温热疗,1周2次,热疗温度保持在40～42％,1次90min,每周第1次热疗同时结合胸腔内灌注顺铂40～60mg,第2次热疗为单纯热疗;对照组进行胸腔闭式引流后局部灌注顺铂1次40～60mg,1周1次。两组均治疗4周后评估疗效。结果：近期疗效：热化疗组有效率71．4％,对照组有效率为51．9％,两组差异有显著性意义（P〈0．05）。热化疗组中位生存期（MST）8．9个月,对照组为6．2个月;热化疗组一年生存率39．3％,对照组为34．6％,两组差异无显著性意义（P〉0．05）。生存质量评分：热化疗组治疗后比治疗前明显提高（48．08±7．32分 vs 43．76±8．32分,P〈0．05）,对照组治疗后比治疗前降低（39．02±7．63分 vs 43．98±8．18分,P〈0．05）。结论：区域亚高温热疗联合胸腔灌注顺铂,有助于控制恶性胸水,提高患者生存质量。     

热疗与紫杉醇联合应用对H446细胞生长和MMP-2 mRNA表达的影响

目的：探讨单纯热疗、单纯化疗以及热化疗联合应用对H446细胞生长及MMP-2mRNA表达的影响。方法：以不同温度（39℃、40℃、41℃、42℃、43℃和44℃）、不同剂量紫杉醇（30μg／L、60μg／L、120μg／L、240μg／L和480μg／L）及热化疗联合的方法处理H446细胞，同时设对照组（0μg／L紫杉醇，37℃），每组又分为3个热疗时间（30min、60min和90min），观察热疗、化疗和热化疗联合对H446细胞生长抑制率的影响；另取H446细胞，分为单纯热疗组（43℃，90min），单纯紫杉醇化疗组（60μg／L、120μg／L和240μg／L），43℃热疗90min联合紫杉醇组（60μg／L、120μg／L和240μg／L），对照组（0μg／L、37℃），采用RT—PCR检测各组细胞MMP-2mRNA的表达。结果与结论：单纯热疗与紫杉醇均可抑制H446细胞的生长，热疗不同程度地增强了紫杉醇对H446细胞的增殖抑制率，热化疗联合对H446细胞生长抑制的最优组合是43℃热疗90min联合120μg／L紫杉醇化疗，在此条件下，H446细胞MMP-2mRNA的表达明显降低，提示热化疗联合对H446细胞增殖的抑制作用可能是通过降低MMP-2mRNA的表达，从而抑制肿瘤细胞的侵袭和转移而实现。     

用18F-FDG细胞摄取早期评价5-FU和热疗对肠癌细胞HCT-116的疗效

摘要 目的 建立稳定的检测结肠癌HCT-116细胞摄取18F-FDG的方法,探讨用18F-FDG 细胞摄取抑制率评价化疗、热疗和热化疗联合对肠癌细胞HCT-116的杀伤效应。方法：1.依次改变细胞结合实验条件中细胞浓度,反应时间,18F-FDG放射性活度,葡萄糖的浓度,测定结肠癌HCT-116细胞的18F-FDG细胞摄取率。2.在加入不同浓度5-FU后,分别采用四甲基偶氮唑盐法（MTT）测定细胞生长抑制率、18F-FDG细胞摄取率和细胞摄取抑制率。3.在化疗(5-FU 浓度为100μg/ml 10μl,)、热疗（43℃,40min）和热化疗（上述两种条件联合,热疗后即加入5-FU）治疗24h后,测定细胞生长抑制率和18F-FDG细胞摄取抑制率,用流式细胞仪测早期凋亡率,透射电镜观察细胞形态变化,测定细胞培养液中葡萄糖浓度和乳酸脱氢酶浓度变化。结果：1.当细胞浓度1×106/瓶、加入18F-FDG放射性活度为3.7KBq,葡萄糖浓度为5.5mmol/L,反应时间为100min,18F-FDG细胞摄取率为44.25±2.19% 。2.加入浓度不同浓度5-FU 100μL作用24h后,18F-FDG细胞摄取率随5-FU剂量增加而下降,两者呈负相关（r=-0.879,P＜0.01）,MTT实验细胞生长抑制率与18F-FDG细胞摄取抑制率呈正相关（r=0.831,P＜0.01）。3.HCT-116细胞经热疗、化疗、热化疗治疗24h后,18F-FDG细胞摄取抑制率为（12.94±2.80）%、（28.25±4.59）%、（21.60±3.68）%,化疗组较热疗组和热化疗组都高,差异有统计学意义（P＜0.01）。4.治疗24h后,热疗组、化疗组和热化疗组的早期凋亡率分别为（9.80±0.16）%、（19.80±2.40）%、（15.70±1.80）%,电镜下可见早期凋亡细胞,细胞培养液中葡萄糖浓度和乳酸脱氢酶浓度较治疗前高。结论： 18F-FDG细胞摄取抑制率可以早期评价5-FU和热疗对结肠癌细胞的杀伤作用,温热（43℃,加热40min）对低浓度5-FU无明显协同作用。     

热疗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤

目的 探讨热疗联合化疗治疗晚期癌症的临床疗效，方法将42例晚期癌症病人作为观察组，接受热化疗；36例晚期癌症病人作为对照组，单纯接受化疗。结果观察组有效率（64．29％）明显高于对照组（36．11％），两组比较（P（0．05）；两组毒副反应无显著差异（P（0．01）。结论热疗在治疗晚期癌症应用中无不良反应，热化疗对晚期癌症治疗效果令人满意。值得进一步研究。     

热疗联合化疗治疗晚期胃癌的疗效观察

目的观察比较热疗联合全身化疗和单纯全身化疗治疗晚期胃癌的疗效、毒副反应和临床受益率。方法选择51例晚期胃癌患者,其中热化疗组27例,单纯化疗组24例,均采用奥沙利铂联合亚叶酸钙和氟尿嘧啶方案化疗。热化疗组使用（13．56±0．2）MHz体外高频热疗机同步进行局部热疗,每周2次。结果热化疗组有效率45％,单纯化疗组为37．5％,两组有效率差异无统计学意义（P〉0．05）;热化疗组临床受益率为66％,而单纯化疗组为46．5％,两组临床受益率差异有统计学意义（P〈0．05）。两组患者治疗前后KPS评分的比较差异有统计学意义（P〈0．05）,两组毒副作用无明显差异。结论热疗联合全身化疗治疗晚期胃癌具有良好的耐受性和较好的近期疗效。     

热疗联合阿霉素对K562细胞体外杀伤作用及Bcl-2表达的研究

目的观察热疗联合阿霉素增强对慢性髓系白血病细胞系K562的体外增殖抑制作用、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法采用MTT法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40℃、42℃,体外作用于K562。作用前及48h采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2表达。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果作用48hIC50的药物浓度作为实验的工作浓度。单纯热疗60min对K562细胞系有抑制作用（P〈0.01）,抑制作用随温度增高而增强;热化疗组在40℃及42℃下,对K562均有显著的抑制作用（P〈0.01）,随着温度的增高而增强。热疗组、化疗组、热化疗组细胞凋亡率均较对照组显著升高,各组之间差异均有显著性（P〈0.01）;Bcl-2蛋白的表达则下降,各组之间差异也有显著性（P〈0.01）。结论热疗联合阿霉素能增强对K562细胞体外抑制作用,提高肿瘤细胞的凋亡率,下调Bcl-2蛋白的表达。     

胰岛素对人宫颈癌Hela细胞化疗敏感性的影响

目的探讨胰岛素能否增强人宫颈癌Hela细胞对顺铂（DDP）的化疗敏感性及其相关机制。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞株,MTr法检测5U／L胰岛素作用3、6、9、12、15、18、21h后,联合DDP（7．26mg／L）对人宫颈癌Hela细胞增殖抑制率的影响。流式细胞仪检测对照组、DDP组、胰岛素组及联合组（胰岛素化疗前作用6h）的细胞周期时相变化情况。结果DDP组、胰岛素化疗前作用不同时间组与对照组相比,Hela细胞的增殖抑制率明显上升（P〈0．01）;且胰岛素于化疗前提前作用3、6、9、12、15h后加入DDP,宫颈癌Hela细胞的增殖抑制率明显高于DDP组（P〈0．01）。流式分析显示DDP组及胰岛素组的S期细胞比例较对照组高（P均〈0．01）,联合组s期细胞比例较DDP组高（P〈0．01）。结论胰岛素具有较显著的DDP化疗增敏作用,胰岛素作用时机选择是胰岛素对宫颈癌细胞化疗增敏作用的关键。     

不同方式加热联合甲基莲心碱对耐药乳腺癌MCF一7／Adr细胞r／H2AX及mdr一1／P—gP表达的影响

目的：检测不同模式加热联合甲基莲心碱（neferine,Nef）对耐药乳腺癌MCF一7／Adr细胞的增殖抑制及3,H2AX和mdr一1／P—gp表达的影响。方法：采用MTT法检测金属模块加热、培养基加热、烤箱加热及水浴加热等不同模式加热联合10仙g／mLNef对经阿霉素培养的MCF-7／Adr细胞的增殖抑制,实时定量PCR检测mdr一,mRNA的表达,Western印迹法检测rH2AX及P糖蛋白（P—glycoprotein,P—gP）的表达。结果：42℃及450C不同模式加热组较37℃培养组MCF一7／Adr细胞吸光度值明显下降,mdr一1／P—gP表达下降,rH2AX表达上调（均P〈0．01）。加热联合10μg／mLNef组较单纯热疗组及单纯10斗∥mLNef组MCF~／Adr细胞吸光度值明显下降（均P〈0．01）,mdr一1／P—gP表达下降,rH2AX表达上调（均P〈0．05）。42℃及45℃不同模式加热组比较,水浴加热组P—gp表达下降及rH2AX表达上调最为明显（P〈0．05）。结论：加热能增加阿霉素对MCF一7／Adr细胞的细胞毒性反应,能明显增加McF-7／Adr细胞DNA损伤且随温度升高而加剧：MCF-7／Adr细胞对不同模式的加热反应可能不同;热疗联合Nef能增敏阿霉素的化学治疗效果。     

热疗联合柔红霉素对人急性髓细胞白血病KG1a细胞增殖抑制及凋亡的影响

目的观察热疗联合柔红霉素(DNR)对人急性髓细胞白血病细胞株KG1a体外增殖抑制和凋亡的影响。方法甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DNR作用KG1a细胞48 h抑制50%的药物浓度(IC50),以此浓度为工作浓度,设对照组(正常培养)、热疗组(单纯加热)、化疗组(单纯DNR处理)和热化疗组(加热联合DNR处理),热疗和热化疗各设40℃、42℃、43℃3个温度组,热疗在恒温水浴箱中加热60 min;MTT法检测作用前后对KG1a细胞的抑制作用;甲基纤维素培养体系分析细胞克隆能力;流式细胞仪检测KG1a细胞凋亡率。结果热疗、化疗和热化疗均能抑制KG1a细胞增殖,热化疗组细胞抑制率明显高于化疗组及相同温度的热疗组,且抑制作用随温度的升高而增强(P<0.05);热疗组、化疗组和热化疗组细胞克隆形成率明显低于对照组(P<0.05),热化疗组克隆集体落形成率明显低于热疗组、化疗组(P<0.05);热疗组、化疗组和热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高(P<0.05),热化疗组与化疗组及相同温度热疗组相比细胞凋亡率均显著提高(P<0.05)。结论热疗联合DNR能增强对KG1a细胞的体外抑制作用,提高其凋亡率。     

PPAR-γ配体联合顺铂对人肺癌PLA-801D细胞增殖抑制及诱导凋亡作用

目的：探讨15-脱氧前列腺素J₂(15d-PGJ₂ )联合顺铂（DDP）对人肺癌PLA-801D细胞生长的影响及其诱导凋亡的机制。方法：取生长良好的人肺癌PLA-801D细胞株,接种于96孔培养板,培养24 h后分别加入不同浓度15d-PGJ₂(0、5、10、20、40、80 μg•L^-1) (单纯使用15d-PGJ₂各组)和联合加入15d-PGJ₂与DDP (3 mg•L^-1)(15d-PGJ₂+DDP各组)(0 μg•L^-1 为对照组),作用24 h后用倒置显微镜观察每组细胞形态学的变化。采用MTT比色法检测15d-PGJ₂联合顺铂对人肺癌PLA-801D细胞增殖抑制作用;DPA 法检测其活性;流式细胞术检测其诱导细胞凋亡及周期的变化。结果：当低浓度15d-PGJ₂（5、10和20 μg•L^-1）,作用于人肺癌PLA-801D细胞时,细胞生长抑制率、凋亡率、DNA 片段化比率和caspase-3 活性与对照组比较差异均无显著性（P>0.05）,当浓度为40 μg•L^-1时,细胞生长抑制率、凋亡率、DNA 片段化比率和caspase-3活性均高于对照组(P<0.01);当 15d-PGJ₂(10 μg•L^-1)和DDP（3 mg•L^-1）联合应用时, 即可使人肺癌PLA-801D细胞生长抑制率、细胞凋亡率、DNA 片段化比率和caspase-3 活性均较单独使用15d-PGJ₂明显增高(P<0.01)。当15d-PGJ₂(40 μg•L^-1)作用人肺癌PLA-801D细胞24 h后,G₀/G₁期细胞比例明显高于对照组（P< 0.01）,S和 G₂/M 期细胞比例均明显低于对照 组（P<0.01）。结论：单独使用15d-PGJ₂在高浓度时可以诱导人肺癌PLA-801D细胞凋亡, 15 d-PGJ₂与DDP联合应用时,前者低浓度即可诱导人肺癌PLA-801D细胞凋亡作用增强。     

热疗在阿霉素对KG-1a白血病细胞杀伤作用中的增敏作用

目的观察热疗在阿霉素对人急性髓系白血病细胞株KG-1a细胞杀伤作用中的増敏作用。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化学治疗和热疗联合化学治疗,选择温度40、42℃,体外作用于KG-1a细胞。作用前及作用48 h后,采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率的变化。结果各处理组的存活率明显要低于对照组(P<0.01),40、42℃热疗联合化学治疗组的细胞存活率明显低于单纯的热疗组(P<0.01)和化学治疗组(P<0.01)。40、42℃热疗联合化学治疗组的细胞抑制率明显高于化学治疗组(P<0.01)和单纯的热疗组(P<0.01)。各处理组的细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01),40、42℃热疗联合化学治疗组细胞凋亡率明显高于化学治疗组(P<0.01)和单纯的热疗组(P<0.01)。结论热疗可以增加阿霉素对KG-1a细胞的杀伤作用,提高肿瘤细胞的凋亡率。     

同步热放化疗对宫颈癌组织VEGF蛋白表达的影响

目的：研究同步热放化疗治疗宫颈癌的疗效,分析治疗前和治疗中对宫颈癌组织VEGF蛋白表达的影响。方法：将40例宫颈癌1IIb期分为同步热放化疗组（H＋CRT组）和同步放化疗组（CRT组）,观察比较局部肿瘤消退情况和1,2,3年累积生存率;采用免疫组化法检测两组治疗前、中宫颈肿瘤组织中VEGF蛋白表达。结果：在完成体外照射27Gy时H＋CRT组局部肿瘤完全消退率高于CRT组（P〈0.05）,但两组患者的1,2,3年累积生存率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;两组治疗中VEGF蛋白表达强度均较治疗前减弱,差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗中H＋CRT组VEGF蛋白表达强度较CRT组减弱,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：同步热放化疗能有效降低肿瘤VEGF的表达强度,抑制肿瘤增殖,促进肿瘤消退。热疗与同步放化疗具有协同增强作用。     

不同方式加热联合甲基莲心碱对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞γH2AX及mdr-1/P-gp表达的影响

目的:检测不同模式加热联合甲基莲心碱(neferine,Nef)对耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞的增殖抑制及γH2AX和mdr-1/P-gp表达的影响.方法:采用MTT法检测金属模块加热、培养基加热、烤箱加热及水浴加热等不同模式加热联合10μg/mL Nef对经阿霉素培养的MCF-7/Adr细胞的增殖抑制,实时定量P...     

Gp方案联合局部热疗治疗晚期胰腺癌疗效观察

【目的】探讨Gp方案化疗联合局部热疗治疗晚期胰腺癌的协同增敏作用。【方法】39例晚期胰腺癌患者,分为实验组（Gp方案化疗＋热疗）和对照组（单用Gp方案化疗）。实验组分别在化疗周期的第1、8天,静脉滴注吉西他滨1000mg/m2,30min;在化疗周期的第1、2、3天,静脉滴注顺铂25mg/m2,每3周为1周期。每个化疗周期同步热疗3次,分别在化疗周期内的第1、3、5天进行。将患者腹部置于高频透热治疗机两极板间,将温度控制在41～43℃,加热1h。对照组单用Gp方案化疗,治疗剂量及方法同实验组。【结果】实验组的有效率和临床获益率明显高于对照组。【结论】对于晚期胰腺癌患者,化疗联合热疗临床优势明显,逆转了耐药性,近期疗效高,能改善患者生存质量。     

热疗对巨噬细胞M2极化作用及其对肺癌细胞侵袭、迁移影响的体外实验研究

背景　热疗是一种安全的辅助治疗方法,通过抑制肿瘤细胞DNA修复、促进其凋亡、提高机体免疫等作用阻碍其发生、发展。但是,对于热疗是否可以通过干预巨噬细胞间接影响肿瘤细胞的研究并不多。目的　通过体外模拟热疗产生的温热作用,探讨在热疗条件下M2型肿瘤相关巨噬细胞对肺癌细胞（LLC）的调控作用。方法　本研究于2019年6-12月实施。10 000 ng/L的干扰素γ（INF-γ）和100 000 ng/L的脂多糖（LPS）诱导RAW264.7细胞48 h成为M1型巨噬细胞,20 000 ng/L 白介素（IL）-4诱导RAW264.7细胞48 h成为M2型巨噬细胞;通过流式细胞术和ELISA法分别检测M1、M2巨噬细胞表面标志抗原CD86、CD206的表达率和细胞因子IL-10、IL-12的分泌水平;采用CCK-8法检测不同热疗温度（41 ℃、42 ℃、43 ℃）干预对M2型巨噬细胞在24 h、48 h和72 h的增殖活性作用;采用实时荧光定量聚合酶链反应法（RT-PCR）检测M0、M2型巨噬细胞及热疗（42 ℃）后M2型巨噬细胞Arg-1、Fizz-1、Ym-1 mRNA相对表达水平;Western blotting法检测M2型巨噬细胞及热疗（42 ℃）后M2型巨噬细胞Arg-1、Fizz-1、Ym-1蛋白相对表达水平;Transwell法检测LLC+M2、LLC+M2+热疗（42 ℃）中LLC的侵袭、迁移能力。结果　IFN-γ和LPS可诱导RAW264.7细胞向M1型极化,IL-4可诱导RAW264.7细胞向M2型转化。流式细胞术检测结果显示,M2型巨噬细胞CD86、CD206的表达率高于M0型巨噬细胞和M1型巨噬细胞（P<0.001）。ELISA法检测结果显示,M2型巨噬细胞IL-10的分泌水平较M0、M1型巨噬细胞高（P<0.001）;M1型巨噬细胞IL-12分泌水平较M0、M2型巨噬细胞高（P<0.001）。CCK-8法检测结果显示,42 ℃时热疗抑制巨噬细胞的能力高于41 ℃及43 ℃时（P<0.001）。RT-PCR检测结果显示,与M0型巨噬细胞相比,M2型巨噬细胞的Ym-1、Arg-1、Fizz-1 mRNA相对表达水平升高（P<0.001）。热疗（42 ℃）后M2型巨噬细胞的Ym-1、Arg-1 mRNA和蛋白相对表达水平降低（P<0.001）。Transwell法检测结果显示,M2型巨噬细胞与LLC共培养后LLC侵袭、迁移数量增加（P<0.001）;热疗（42 ℃）后LLC侵袭、迁移数量减少（P<0.001）。结论　热疗可能通过下调M2型巨噬细胞的Arg-1、Ym-1 mRNA的表达水平从而抑制LLC的侵袭与迁移能力。     

体外冲击波与高频热疗治疗ⅢB型前列腺炎患者168例疗效评价

目的探讨体外冲击波与高频热疗对治疗ⅢB型前列腺炎的有效性．方法对168例ⅢB型前列腺炎患者随机分成2组：冲击波组96例,高频热疗组72例．分别采用体外冲击波与高频热疗对其进行治疗．结果2组患者在治疗后国际慢性前列腺炎症状评分（NIHCPSI）总分及疼痛不适症状评分均较治疗前降低（．P〈0．05）,冲击波组降低的幅度比高频热疗组更明显∽〈0．05）．结论冲击波和高频热疗对SB型前列腺炎治疗均有效,冲击波对改善ⅢB型前列腺炎的疼痛不适症状更为明显．