催乳素保护人B淋巴细胞免其凋亡的实验研究

目的:研究人催乳素(PRL)在B淋巴母细胞系IM-9细胞凋亡中的保护作用。方法:在地塞米松诱导IM-9细胞凋亡的实验体系中加入PRL(10ng/ml),DNA琼脂糖凝胶电泳观察PRL对地塞米松诱导IM-9细胞凋亡的保护。结果:地塞米松组诱导的IM-9细胞在48h后出现细胞凋亡,DNA琼脂糖凝胶电泳显示有大量小分子DNA片段形成,呈典型的细胞凋亡DNA梯形带,地塞米松-PRL组的IM-9细胞的DNA经电泳后未出现凋亡的DNA条带。结论:地塞米松能诱导IM-9细胞的凋亡,PRL能保护IM-9细胞,免其凋亡。     

VBE-3对卵巢癌CoC1细胞凋亡的影响

目的:观察黄荆子木脂素VBE-3诱导人卵巢癌CoC1细胞凋亡作用。方法:体外培养CoC1细胞和中国仓鼠卵巢CHO-K1细胞,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率,琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA梯形条带。结果:PI染色FCM分析发现VBE-3以浓度依赖方式诱导CoC1细胞凋亡(P<0.01),对CHO-K1细胞的作用弱。琼脂糖凝胶电泳观察结果表明10μmol/L的VBE-3和LY294002处理24小时,CoC1细胞呈现典型凋亡细胞的DNA梯形条带;而CHO-K1细胞未见DNA梯形条带。结论:VBE-3选择性诱导CoC1细胞凋亡作用与其阻断PI3K信号传导有关。     

子宫平滑肌瘤组织中MMP-2、TIMP-2的表达及意义

目的 研究子宫平滑肌瘤组织中基质金属酶(MMP-2)、基质金属抑制酶(TIMP-2)的表达及意义.方法 应用免疫组化S-P法检测50例子宫平滑肌瘤组织中和50例子宫平滑肌组织中MMP-2、TIMP-2的表达.并分析MMP-2、TIMP-2的表达与肌瘤大小个数之间有无密切关系.结果 (1)在50例子宫平滑肌瘤组织中MMP-2阳性表达检出率为52.0%(26/50);高于在50例子宫平滑肌正常组织中的阳性表达率28.0%(14/50),(P<0.05).TIMP-2阳性表达检出率在两组中阳性表达率分别为26.0%(13/50)、20.0%(10/50),表达无差异(P>0.05).(2)MMP-2阳性表达率与子宫平滑肌瘤个数、大小有一定相关性(P<0.05).结论 提示子宫平滑肌瘤的发生发展与MMP-2、TIMP-2表达有关系.     

胎盘细胞凋亡与早产流产关系研究

目的 研究早产流产与胎盘细胞凋亡关系及其可能机制。方法 随机选取正常妊娠足月分娩胎盘30例,早产胎盘30例,流产胎盘30例,取胎盘组织制备单细胞悬液,FCM检测胎盘细胞的凋亡率;DNA琼脂糖电泳检测胎盘细胞的凋亡特征性DNA条带;westernblot检测细胞凋亡相关蛋白表达。结果 早产和流产胎盘细胞的凋亡率,明显高于正常妊娠分娩的胎盘细胞的凋亡率(P＜0.05);同时琼脂糖凝胶电泳出现典型的凋亡细胞DNA梯形条带,伴随着bcl-2蛋白表达下调,bax、cyt-c、caspase-9和caspase-3蛋白表达上调,bcl-2/bax比值下降。结论 早产流产可能与胎盘细胞启动线粒体途径凋亡密切相关。     

丙戊酸钠抑制NB4细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)对NB4细胞的作用.方法:台盼蓝细胞计数检测不同浓度VPA对NB4细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术检测VPA作用后NB4细胞CD11b的表达,用DNA梯形片段电泳分析细胞凋亡.结果:VPA能显著抑制NB4细胞的增殖(P＜0.01),VPA处理NB4细胞72h时的半数抑制浓度(IC50)为1.17mmol/L;VPA组NB4细胞髓系分化抗原CD11b表达水平明显高于对照组(P＜0.05);NB4细胞经不同浓度VPA处理48h后,出现典型的凋亡细胞所具有的梯形DNA条带.结论:VPA能抑制NB4细胞增殖,诱导细胞分化和凋亡.     

光动力疗法对人肺腺癌细胞系A549凋亡的影响

目的:探讨光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对体外培养的人肺腺癌细胞系A549凋亡的影响.方法:以人肺腺癌细胞系A549为研究对象,用MTT法筛选最佳PDT参数.实验分为对照组(不进行PDT)和PDT组,在PDT 24 h后,采用DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的梯形条带、流式细胞术检测细胞周期及凋亡率、TUNEL标记法测定细胞凋亡指数(AI).结果:血卟啉衍生物(HPD)浓度10 mg/L、激光剂量10 J/cm2是PDT对A549细胞杀伤作用的最佳条件.当激光剂量均为10 J/cm2时,采取6组不同的功率时间组合测得的D492值无统计学差异.在最佳PDT条件下,琼脂糖电泳结果可见PDT组产生了特征性的DNA梯形条带;流式细胞术检测显示PDT组发生了G0/G1期生长停顿,凋亡率为(18.443±7.122)%,显著高于对照组的(0.301±0.361)%(P<0.01);TUNEL标记法也证实该组可见明显的棕黄色凋亡细胞,AI为(18.480±9.555)%,明显高于对照组的(0.880±0.944)%(P<0.01).结论:PDT通过诱导凋亡对体外培养的A549细胞产生杀伤作用.     

西红花苷对3β,5α,6β-三羟胆甾烷致内皮细胞凋亡和相关基因表达的影响

目的:研究西红花苷(crocin)对3β,5α,6β-三羟胆甾烷(cholestane-3β,5α,6β-triol,Triol)致血管内皮细胞凋亡和相关基因表达的影响.方法:将内皮细胞分成正常对照组、模型组(25 μmol/L Triol)、西红花苷 (10-6 mol/L,10-7mol/L,10-8mol/L) 25 μmol/L Triol组.采用诱导内皮细胞凋亡的模型,用比色法测定丙二醛含量.光学显微镜、电子显微镜观察细胞形态和超微结构的变化,电泳法检测DNA 梯形条带、流式细胞仪分析法检测细胞凋亡率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Bcl-2和Bax mRNA表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达.结果:用Triol处理后,培养液中MDA含量增加(P<0.01 vs control),细胞收缩,核浓缩,深染,线粒体肿胀空化,出现凋亡小体、DNA 梯形条带和亚二倍体峰,细胞凋亡率为30.62%,Bax mRNA、Bax蛋白和Caspase-3蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.01);Bcl-2 mRNA和蛋白表达低于正常对照组(P<0.01);西红花苷(10-7mol/L、10-6mol/L) Triol组,MDA含量减少,内皮细胞形态结构完整,细胞凋亡率分别为24.4%、6.3%,细胞Bax和Caspase-3基因表达明显下调,Bcl-2基因表达上调(P<0.05 or P<0.01 vs Triol).结论:西红花苷可能是通过调节Bcl-2,Bax 和Caspase-3基因表达抑制Triol诱导的内皮细胞凋亡.     

芹菜素增强TRAIL诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡

目的:研究芹菜素(API)与重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)合用对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。方法:体外培养人宫颈癌HeLa细胞。碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)定量分析sub-G1百分率。DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA梯形条带。结果:API(20μmol/L)和TRAIL(20ng/mL)以及两者合用作用48h的人宫颈癌HeLa细胞sub-G1百分率分别是3.56%±0.20%、6.69%±0.40%和59.8%±4.20%;DNA琼脂糖凝胶电泳显示:20μmol/LAPI与20ng/mL的TRAIL联合处理,展示出典型DNA梯形条带图谱。结论:芹菜素具有增强TRAIL诱导HeLa细胞凋亡作用。     

左炔诺酮宫内缓释系统对子宫肌瘤合并月经过多患者子宫体积的影响

目的 我们进行了左炔诺孕酮宫内缓释系统(LNG-IUS)治疗子宫平滑肌瘤所致月经过多患者对其子宫和子宫平滑肌瘤体积影响的研究,同时设置器械避孕对照组.方法 在放置宫内节育系统时及放置后的第3、6、12、24、36个月分别进行临床和超声波检查的评价,使用椭圆形体积计算公式(前后径×横径×纵径×4/3×π)对子宫和平滑肌瘤的大小进行计算,对于多发性平滑肌瘤,则是将每个平滑肌瘤的体积加起来计算每个患者总的平滑肌瘤体积.结果 实验组患者平均子宫体积显著减小,而对照组妇女平均子宫体积减小不明显,差异无统计学意义(P＞0.05).使用LNG-IUS 3年后,平滑肌瘤的平均体积轻微减小,差异无统计学意义(P＞0.05).使用36个月后,闭经和月经过少是最常出现的经血模式.对照组妇女闭经发生率(57.1%),较实验组闭经发生率(44.5%)显著增加(P＜0.05).结论 左炔诺孕酮宫内节育系统可以显著缩小子宫平滑肌瘤所致月经过多患者的子宫体积,但不能显著缩小平滑肌瘤的体积,同时可以减少月经量.     

紫花牡荆素通过线粒体凋亡途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡

目的:研究紫花牡荆素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡作用,并探讨其诱导凋亡机制.方法:体外培养人宫颈癌HeLa细胞.细胞凋亡ELISA试剂盒检测HeLa细胞组蛋白/DNA碎片;碘化丙啶染色流式细胞术定量分析Sub-G1细胞百分率;DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯形条带.caspase比色试剂盒检测caspase-3/-9活性;Rh123探针染色FCM检测线粒体膜电位;Western blot检测细胞色素c、Bax、Bcl-2、Bcl-xL和XIAP蛋白的表达.结果:不同浓度的CAS处理48h后,HeLa细胞组蛋白/DNA碎片增加、Sub-G1细胞百分率显著增高、DNA琼脂糖凝胶电泳法观察到典型的DNA梯形条带;CAS处理组caspase-3/-9活性明显升高、线粒体膜电位降低、细胞色素c、Bax显著升高,而Bcl-xL和XIAP蛋白表达水平降低.结论:CAS通过线粒体凋亡途径诱导HeLa细胞凋亡.     

子宫肌瘤138例疼痛的临床研究

目的 :研究与子宫肌瘤病人疼痛症状程度有关因素。方法 :从 1997年 1月～ 1999年 12月我院 5 0 0例手术的子宫肌瘤病人中选择具有腹痛症状的 138例 ,按病理检验证实有变性的 (变性组 ,n =30 )和无变性 (对照组 ,n =10 8)分为两组 ,采用表格式记录病史、症状 ,B超检查测算子宫平均体积和最大肌瘤体积及最大肌瘤平均体积以及妇科检查子宫大小。两组各项资料用统计学测算其差异显著性。结果 :①变性组子宫平均体积和最大肌瘤平均体积均明显高于对照组 (P<0 .0 0 1)。②肌瘤变性明显多见于单发肌瘤 (76 .6 7% ) ,少见于多发肌瘤 (2 3 .33 % ) ,P <0 .0 0 1。③呈急腹症 18例均属变性组 ,占其 6 0 % ,其余 40 %疼痛症状也严重 ,而对照组全部病人疼痛均为轻度。④当子宫肌瘤体积超过 3cm3 时 ,或妇科检查子宫增大超过妊娠 8周大小时 ,均易发生肌瘤变性。结论 :子宫肌瘤变性者疼痛症状严重 ,变性的发生与肌瘤体积有关 ,易诱至肌瘤变性的肌瘤体积及子宫体积具有一定的临界参考参数。     

外源性硫化氢通过ATP敏感钾通道诱导人子宫肌瘤细胞凋亡

目的探讨ATP敏感钾通道（K_ATP）在外源性硫化氢（H₂S）诱导人子宫肌瘤细胞凋亡中的作用。方法用硫氢化钠(NaHS)作为H₂S的供体处理原代培养的人子宫肌瘤细胞,K_ATP通道抑制剂格列本脲(Gly)预处理细胞。实验分为对照组、不同浓度NaHS组、ATP敏感性钾通道（K_ATP）抑制剂组和Gly + NaHS组。用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用实时定量PCR和Western blot分别检测p53和bcl-2 mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,NaHS（10^-4 和10^-3 mol/L）处理人子宫肌瘤细胞24和48 h后以剂量和时间依赖的方式增加了细胞的凋亡率（均P<0.05）。与对照组比较,NaHS（10^-4 mol/L）处理人子宫肌瘤细胞24 h后p53的表达显著增加（P＜0.05）,而bcl-2表达显著降低（P＜0.05）。Gly没有影响人子宫肌瘤细胞的凋亡率、p53和bcl-2的表达,但部分地拮抗NaHS的致凋亡作用以及NaHS诱导的子宫肌瘤细胞中p53表达的上调和bcl-2表达的下调（均P<0.05）。结论外源性H₂S诱导子宫肌瘤细胞凋亡,其机制与H₂S开放K_ATP通道有关。     

子宫肌瘤患者Ki-67、孕激素受体及细胞凋亡相关性研究

目的　通过检测细胞周期、孕激素受体 (PR)、细胞核增殖相关抗原 (Ki 6 7)在子宫肌瘤组织中的表达 ,探讨三者间的相关性及与子宫肌瘤发生的关系。方法　应用流式细胞术、免疫组化检测 4 6例子宫肌瘤及其邻近肌层组织中细胞凋亡率、Ki 6 7、和PR的表达。结果　细胞凋亡率在子宫肌瘤细胞与其邻近肌层细胞间差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,PR、Ki 6 7在子宫肌瘤细胞中的表达明显高于其邻近肌层 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ;PR的阳性率与Ki 6 7的阳性率呈正相关 (P <0 0 5 )、与细胞凋亡率呈负相关 (P <0 0 5 ) ,Ki 6 7与细胞凋亡表达呈负相关 (P<0 0 5 )。结论　子宫肌瘤是卵巢性激素依赖性肿瘤 ,孕激素能促进子宫肌瘤生长 ,子宫肌瘤与核增殖、细胞凋亡有关。     

射频自凝刀治疗子宫肌瘤30例分析

目的 :探讨射频自凝刀治疗子宫肌瘤的临床疗效。方法 :对经射频治疗的 30例子宫肌瘤患者进行随访及回顾性分析。结果 :30例患者中 ,治愈 2例 ,治愈率 6 .6 7% ;显效 15例 ,显效率 5 0 % ;好转 13例 ,好转率 4 3.33% ;总有效率 10 0 %。结论 :射频自凝刀治疗子宫肌瘤安全有效 ,操作简单 ,值得推广     

TGF-β3和MMP11在大鼠子宫肌瘤模型中的表达

目的:建立大鼠子宫肌瘤模型,探讨TGF-β3和MMP11在子宫肌瘤的表达.方法:将20只大鼠随机分成对照组和模型组,对照组肌内注射生理盐水,模型组采用苯甲酸雌二醇和黄体酮负荷法建立大鼠子宫肌瘤模型,观察大鼠子宫大体形态;HE染色镜下观察大鼠子宫平滑肌病理改变,免疫组织化学和RT-PCR方法检测TGF-β3和MMP11的...     

ATRA对体外培养子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的研究

目的探讨全反式维甲酸对体外培养子宫肌瘤细胞中COLⅠ、FN表达的影响以及对细胞增殖和凋亡的作用,为子宫肌瘤药物治疗提供新的实验依据。方法体外培养子宫肌瘤细胞,不同浓度全反式维甲酸作用后,应用MTT法检测细胞增殖活性,半定量RT-PCR检测COLⅠ、FN水平变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果低浓度（10-8mol/L）全反式维甲酸可降调肌瘤细胞中COLⅠ、FN表达,抑制肌瘤细胞的增殖及促进肌瘤细胞的凋亡（P〈0.05）;且随着药物浓度的递增,COLⅠ、FN表达逐渐降低（P〈0.05）,抑制肌瘤细胞增殖活性及促进肌瘤细胞凋亡率逐渐增强。结论全反式维甲酸以浓度依赖性方式,从核酸水平检测降调肌瘤细胞中COLⅠ、FN的表达,抑制体外培养肌瘤细胞的增殖且促进其凋亡。     

Stathmin-1作为子宫平滑肌肉瘤早期诊断及预后评估的分子标志物的研究

目的研究Stathmin-1在子宫平滑肌肿瘤中的表达及临床意义。方法选取2013年1月～2016年12月温州市人民医院及温州医科大学附属第一医院82例手术患者,分为典型子宫平滑肌肿瘤(UL组)30例、子宫富于细胞平滑肌肿瘤(CL组)30例、子宫平滑肌肉瘤(LMS组)22例,同时选择肌瘤旁正常肌层(M组)30例。采用免疫组化Envision二步法研究Stathmin-1在各组中的表达、临床病理学特征及预后的相关性。根据Stathmin-1表达水平,CL组及LMS组进一步分成低表达组及高表达组,进行复发及生存率分析。结果 Stathmin-1表达于细胞质,在子宫平滑肌肉瘤组的染色分值高于另三组(均P0.05)。Stathmin-1在子宫平滑肌肿瘤中的表达与患者年龄、肿瘤大小、肿瘤数目等临床病理学特征均无相关(均P0.05)。子宫富于细胞平滑肌中Stathmin-1高表达组较低表达组复发率高(P0.05)。子宫平滑肌肉瘤中Stathmin-1高表达组较低表达组生存率低(P0.05)。结论Stathmin-1在子宫平滑肌肉瘤中的高表达,提示检测Stathmin-1在早期辅助诊断子宫平滑肌肉瘤上有一定的临床意义。其在子宫平滑肌肿瘤中的表达水平与富于细胞平滑肌肿瘤的复发及子宫平滑肌肉瘤的预后可能相关。     

米非司酮对子宫肌瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

目的探讨米非司酮对子宫肌瘤和内膜组织Ki67基因、MMP2基因、Fas基因表达的影响。方法 62例子宫肌瘤患者随机分为对照组24例和治疗组38例,治疗组患者从月经周期第2~3d开始,每日服用25mg米非司酮,连续服用1个月后行子宫手术;对照组病人入院后不服用任何药物,直接手术,术中均取瘤体及内膜组织。用免疫组化SP法检测子宫肌瘤及内膜组织中Ki67、MMP2、Fas基因的表达水平。结果治疗组子宫肌瘤组织Fas阳性率为55.3%,明显高于对照组的29.2%,差异有统计学意义(P0.05);治疗组子宫肌瘤Ki67的阳性表达率为36.8%,明显低于对照组的70.8%,差异有统计学意义(P0.01);治疗组子宫肌瘤MMP2的阳性表达率为36.8%,明显低于对照组的66.7%,差异均有统计学意义(P0.05);但两组子宫内膜组织中Ki67、MMP2和Fas的表达没有显著变化,差异均无统计学意义(P均大于0.05)。结论米非司酮抑制子宫肌瘤细胞的增殖和侵袭转移,促进肌瘤细胞凋亡,这可能是米非司酮治疗子宫肌瘤的作用机理。     

来曲唑通过下调bcl-2和上调caspase-3的表达促进人子宫肌瘤细胞调亡

目的 探讨来曲唑对人子宫肌瘤细胞增殖和凋亡以及bcl-2和caspase-3表达的影响. 方法 来曲唑处理原代培养的人子宫肌瘤细胞,用MTT法测定细胞生长曲线,流式细胞术测定细胞凋亡率,放射免疫法测定培养基中雌二醇水平,用实时定量聚合酶链反应和蛋白印迹检测bcl-2和caspase-3表达. 结果 来曲唑呈浓度和时间依赖性抑制子宫肌瘤细胞的增殖,降低子宫肌瘤细胞的凋亡率,同时呈浓度依赖性降低子宫肌瘤细胞雌二醇的分泌.来曲唑呈浓度依赖性降低bcl-2的表达,增加caspase-3的表达. 结论 来曲唑抑制子宫肌瘤细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与来曲唑减少雌二醇的分泌、降低bcl-2表达和增加caspase-3表达有关.     

Apoptosis of Human Trabecular Meshwork Cells Induced by Transforming Growth Factor-p2 in vitro

Summary: Whether transforming growth factor-β2 (TGF-β2) induces apoptosis of human trabecular meshwork cells was investigated in vitro. Cultured 3-5 passage human trabecular meshwork cells were treated with 0 (control), 0.32, 1, 3.2 ng/ml TGF-β2 for 48 h and divided into control group and experimental group. The apoptosis of human trabecular meshwork cells was examined by transmisson electron microscopy, TUNEL technique and flow cytometry. The results showed characteristic morphologic changes of apoptotic cells were observed under transmission electron microscopy.DNA fragmentation of human trabecular meshwork cells was found by TUNEL technique. Quantitative analysis of flow cytometry showed that percentages of apoptotic human trabecular meshwork cells were (2.79±0.44) %, (4.43±1.17) % and (9. 60±2.05) % respectively with different concentrations [1 ng/ml (P＜0. 05), 3.2 ng/ml (P＜0.01)] of TGF-β2 with the difference being significant between experimental group and control group[(1. 41±0.34) %]. It was concluded that TGF-β2 can induce apoptosis of human trabecular meshwork cells in vitro and may be involved in the decrease of trabecular meshwork cells in the patients with primary open angle glaucoma and aging of normal people.