牙体机械损伤后牙本质牙髓组织MMP-2和MMP-9表达变化

目的 研究牙体机械损伤后牙本质牙髓组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的变化.方法 以离体第三磨牙(n=30)制作牙体机械损伤的牙本质牙髓复合体体外培养模型(模型组).分别于培养后第3、7、14天收集样本,免疫组化染色、Real-time PCR和Western blotting检测MMP-2和MMP-9在培养后不同时间点的表达.以无牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养的离体第三磨牙(n=30)作为对照组.结果 免疫组化染色发现,MMP-2和MMP-9在对照组成牙本质细胞呈阳性表达,在牙髓细胞则呈阴性表达;在模型组,成牙本质细胞和牙髓细胞MMP-2和MMP-9均呈阳性表达.图像分析显示,模型组培养后各时间点MMP-2和MMP-9表达均显著高于对照组(P<0.05);且模型组培养第3天MMP-2和MMP-9表达均显著高于培养第7和第14天(P<0.05).Real-time PCR检测表明,模型组培养后第3天的MMP-2和MMP-9 mRNA表达显著高于培养后第7和第14天(P<0.05).Western blotting检测发现,模型组培养后各时间点均有MMP-2和MMP-9蛋白表达,以培养后第3天时较为明显.结论 在牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养过程中,MMP-2和MMP-9表达呈现先增加后减弱,与基质降解和合成的时间相对应.     

牙体机械损伤后牙本质牙髓组织MMP-2和MMP-9表达变化

目的 研究牙体机械损伤后牙本质牙髓组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的变化.方法 以离体第三磨牙(n=30)制作牙体机械损伤的牙本质牙髓复合体体外培养模型(模型组).分别于培养后第3、7、14天收集样本,免疫组化染色、Real-time PCR和Western blotting检测MMP-2和MMP-9在培养后不同时间点的表达.以无牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养的离体第三磨牙(n=30)作为对照组.结果 免疫组化染色发现,MMP-2和MMP-9在对照组成牙本质细胞呈阳性表达,在牙髓细胞则呈阴性表达;在模型组,成牙本质细胞和牙髓细胞MMP-2和MMP-9均呈阳性表达.图像分析显示,模型组培养后各时间点MMP-2和MMP-9表达均显著高于对照组(P<0.05);且模型组培养第3天MMP-2和MMP-9表达均显著高于培养第7和第14天(P<0.05).Real-time PCR检测表明,模型组培养后第3天的MMP-2和MMP-9 mRNA表达显著高于培养后第7和第14天(P<0.05).Western blotting检测发现,模型组培养后各时间点均有MMP-2和MMP-9蛋白表达,以培养后第3天时较为明显.结论 在牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养过程中,MMP-2和MMP-9表达呈现先增加后减弱,与基质降解和合成的时间相对应.     

全冠牙体预备后影响牙髓-牙本质复合体反应因素的研究

目的:观察全冠牙体预备后牙髓牙本质复合体的反应及剩余牙本质厚度和修复时间对牙髓的影响。方法:选择因正畸需要拔除的健康第一前磨牙38颗,根据牙体制备的深度不同分为3组,暂时冠修复后分别于术后1,3,6周后拔除观察牙髓的炎症反应及剩余牙本质厚度。结果:全冠牙体预备后,牙髓组织主要表现为轻、中度的炎症反应。6周左右可见修复性牙本质形成。剩余牙本质厚度影响牙髓的反应,牙本质越厚,牙髓重度炎症的发生率越低(P<0.05)。结论:术后观察时间对牙髓预后的影响是以剩余牙本质的厚度为前提,剩余牙本质小于2mm时,时间与牙髓反应关系密切(P<0.01)。剩余牙本质为2～2.5mm时,时间与牙髓的反应相关(P<0.05)。但剩余牙本质厚度大于2.5mm时,时间与牙髓反应无关。     

正畸力作用下大鼠牙髓组织中热休克蛋白70的表达及意义

目的检测正畸力作用下大鼠牙髓组织中热休克蛋白70（Hsp70）的表达和分布。探讨其在正畸移动中的作用和机制。方法建立大鼠正畸牙移动模型,分别在受力1、15、30d处死,制备左侧上颌第一磨牙及其周围牙槽骨的石蜡标本,采用免疫组织化学法检测大鼠正畸牙移动过程中牙髓组织中Hsp70的表达情况。结果正常对照组、正畸加力1d组、正畸加力15d组和正畸加力30d组牙髓组织中Hsp70表达量分别为402±003、28．13±0．23、10．02±0．08、5．23±0．42,正畸加力1d组大白鼠牙髓组织中Hsp70表达量显著高于正常对照组（P〈0．01）,正畸加力15d组和正畸加力30d组与正常对照组的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Hsp70参与了正畸牙移动,并且保护了牙髓组织。     

正畸力作用下人牙髓组织中神经生长因子的表达

目的检测正畸力作用下人牙髓组织中神经生长因子（nerve growth factor,NGF）的表达与分布,探讨NGF在正畸加力初期疼痛中的作用及机制。方法20例采用拔除上颌双侧第一前磨牙进行固定矫治的患者随机分为5组,分别作为正常对照组,正畸加力1d、3d、7d、15d组,在受力相应时段对双侧上颌第一前磨牙进行疼痛强度问卷调查后拔除并制备石蜡标本,采用免疫组化SABC法进行染色,计算机图像分析系统检测阳性细胞的平均光密度值（average optical density,AOD）及面密度值（area density,AD）。结果1d组测试牙有轻度疼痛,3d组疼痛敏感程度最强;对照组中NGF染色呈弱阳性,加力1d组牙髓中NGF即有较高水平表达,加力3d组牙髓NGF染色呈强阳性,加力7d后NGF表达明显减弱,加力15d后表达恢复到正常水平;NGF的表达强度（AOD）与疼痛强度呈显著正相关（r=0．868,P〈0．01）。结论在正畸加力初期牙髓组织中NGF表达有所增强,且表达强度与疼痛强度密切相关。NGF可能参与了正畸加力初期疼痛过敏的调节。     

牙体脱钙法和劈牙取髓法观察牙髓组织中VEGF表达的效果比较

目的:对牙体脱钙和劈牙取髓法在牙髓血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)免疫组织化学研究中的染色效果进行比较,初步探讨牙体脱钙技术在牙髓免疫组织化学研究中的应用.方法:取因正畸治疗需要而拔除根尖孔完全闭合的健康下颌前磨牙30颗,分别通过牙体脱钙和劈牙取髓制作牙体牙髓联合切片和牙髓切片,进行VEGF免疫组织化学染色,在显微镜下观察两者的染色效果和组织结构特点.结果:牙体脱钙法制得的牙体牙髓联合切片组织染色效果良好,牙髓细胞、成牙本质细胞、牙本质小管结构清晰,VEGF阳性染色空间分布定位明确;劈牙取髓法制得的牙髓切片成牙本质细胞残缺不全,组织厚薄不一,染色对比度差.结论:牙体脱钙技术应用于牙髓免疫组织化学研究的组织染色效果良好、结构清晰,能够保全牙髓组织.     

正畸力作用下牙髓组织神经生长因子的表达及其与疼痛的关系研究

目的探讨正畸力作用下牙髓组织神经生长因子（NGF）的表达及其与疼痛的关系。方法选取口腔正畸患者26例,依据正畸计划均需拔除上颌双侧第一前磨牙（52颗牙）并进行固定矫治。患者在安装矫治器前均拔除左上颌第一前磨牙（对照组,26颗牙）,分别在安装矫治器后1、3、7、15d（7、7、6、6例）拔除右上颌第一前磨牙（观察组,26颗牙）。观察并比较两组牙齿疼痛程度、牙髓组织NGF染色阳性细胞着色面积密度（AD）、平均光密度值（AOD）,分析牙髓组织NGF表达强度与牙齿疼痛程度的相关性。结果两组牙齿疼痛程度、牙髓组织NGF染色阳性细胞AD与AOD比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,观察组安装矫治器后1、3d牙齿疼痛程度、牙髓组织NGF染色阳性细胞AD与AOD均高于对照组（均P＜0.05）,观察组安装矫治器后3d的指标均高于安装矫治器后1d（均P＜0.05）。正畸力作用下牙髓组织NGF表达强度与牙齿疼痛程度呈高度正相关（r=0.867,P＜0.05）。结论正畸力作用下牙髓组织NGF的表达上调,且其表达强度与牙齿疼痛程度呈高度正相关。     

犬正畸牙移动过程中张力侧牙周膜肌成纤维细胞的表达研究

目的 初步探讨正畸牙移动过程中牙周膜肌成纤维细胞是否存在及其表达规律.方法 Beagls犬5只,采用自制的加力装置用镍钛螺旋拉簧加力100 g,远中移动犬第一前磨牙,主动加力4周, 4周后去除加力装置,分别于加力后1、2、3、4、8周各处死1只.测量实验牙移动距离;取正畸牙张力侧牙周膜,采用免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;透射电镜观察α-SMA染色阳性区域细胞的超微结构.结果 实验牙移动距离第1周达到高峰,第2周开始牙齿移动速度减慢,到第3周降至最低,第4周又有所加快.免疫组化结果α-SMA的表达从加力开始至第2周达到最大值,到第4周基本恢复正常.透射电镜观察可见胞浆内有密体结构出现.结论 肌成纤维细胞存在于正畸牙牙周膜中,其表达改变可能是受到正畸力的刺激.肌成纤维可能起到对抗张力限制牙齿移动的作用.     

极固宁TM对全冠牙体预备后牙髓组织的影响

目的 观察极固宁TM涂布于金属烤瓷全冠活髓基牙牙预备体表面21 d对牙髓组织学形态的影响.方法 选择因正畸治疗需要而计划拔除的20颗前磨牙进行金属烤瓷全冠牙体预备,其中每2颗牙均为同颌同名牙;采用随机、双盲、自身对照设计分为2组:对照组在牙预备体上直接用氧化锌丁香酚水门汀粘固暂时冠;观察组在牙预备体上涂布极固宁TM后用氧化锌丁香酚水门汀粘固暂时冠.所有牙分别于牙体预备后21 d拔除,常规组织病理切片,H-E染色,显微镜下观察评价牙髓组织反应.结果 活髓基牙经金属烤瓷全冠牙体预备21 d时,对照组和观察组的牙髓组织反应无明显差别(P＞0.05).牙髓组织的反应程度与牙预备体的剩余牙本质厚度(RDT)有关;RDT分别为491.76,503.88和487.32 μm的3个样本观察到修复性牙本质的形成.结论 在本实验条件下,金属烤瓷全冠牙预备体表面涂布极固宁TM21 d对活髓基牙的牙髓组织无明显影响.     

正畸力作用下基质金属蛋白酶-1及金属蛋白酶组织抑制因子-1在龈沟液中的表达

目的 观察人正畸牙受力后基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在龈沟液中的表达变化,探讨MMP-1、TIMP-1在正畸牙移动过程中可能发挥的作用及其与正畸力值的关系.方法 筛选口腔正畸科24例患者.随机分为4组:A组0g力组(对照组),B组75 g力组(轻力组),C组150 g力组(中度力组),D组300 g力组(重力组)远中拉尖牙.在加力0、1、2、3、4、5和6 h收集龈沟液,应用ELISA方法测定龈沟液中MMP-1和TIMP-1的浓度.对所得数据进行统计学分析.结果 ①B组和C组MMP-1的浓度变化规律一致:加力后1 h开始升高,3 h时达到高峰,4 h时开始下降(P<0.05,0.01),5 h和6 h时恢复至0h水平(P>0.05),D组MMP-1的浓度在加力后未出现明显变化,各期差异无显著性(P>0.05).②B组和C组TIMP-1的浓度变化规律一致:加力后1 h开始升高,4h时开始下降,但5 h和6 h时停止下降,维持较高水平(P<0.05,0.01);D组TIMP-1加力后1 h即明显升高,3 h达高峰,4、5和6 h时未明显下降维持在较高水平(P<0.01).结论 ①在轻、中度正畸力作用下龈沟液内MMP-1、TIMP-1表达水平发生改变,具有时间依赖性.②在重度正畸力作用下,龈沟液内TIMP-1的表达早期便明显升高,且随时间推移维持在较高水平.而MMP-1的表达无明显变化.③推测MMP-1和TIMP-1早期即参与正畸牙周组织改建,二者的动态平衡对正畸牙移动可能起重要作用.