Molecular Epidemiology of Extended-spectrum β-lactamases producing Klebsiella pneumoniae isolated from neurosurgery patients with HAP

目的 研究脑外科医院获得性肺炎(HAP) 产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs 基因型.方法 回顾性分析41例脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌患者的临床资料,采用酶抑制剂增强法作ESBLs表型确证试验,纸片扩散法作药敏试验,聚合酶链反应(PCR)扩增ESBLs 基因.结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为85.42%;仅对亚胺培南、美罗培南敏感;几乎所有病例均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等;SHV、CTX-M和TEM基因的检出率分别为73.17%(30/41)、63.26%(26/41)和14.63%(6/41);46.34%(19/41)的菌株同时携带多个基因.结论 脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重,治疗应首选碳青霉烯类抗生素;不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受各种侵袭性操作可能是其危险因素;最常见的ESBLs基因型是SHV,其次为CTX-M.     

脑外科产ESBLs肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎相关因素分析

目的　研究脑外科医院获得性肺炎 (HAP)产超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性、危险因素 ,并试图揭示菌株间的亲缘关系。方法　回顾性分析 2 0 0 2～ 2 0 0 3年脑外科HAP下呼吸道标本分离出产ESBLs肺炎克雷伯菌的临床资料 ;药敏试验采用Kirby -Bauer琼脂扩散法 ;表型确证试验检测ESBLs ;分层聚类分析研究菌株间抗生素亲缘关系。结果　产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为 86 96 % ;仅对亚胺培南、美罗培南敏感 ;几乎所有病例均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等 ;抗生素亲缘关系分析将 2 0株菌分为 7个型。结论　脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重 ,治疗首选碳青霉烯类抗生素 ;不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作可能是其危险因素 ;抗生素亲缘关系分析结论与流行病学情况不符 ,不宜单独用于菌株间亲缘关系分析。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的研究获得性肺炎（HAP）产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法回顾性分析18例感染产ESBLs肺炎免雷伯菌患者的临床资料．采用酶抑制剂增强法作ESBLs表型确证试验．纸片扩散法作药敏试验．聚合酶链反应（PCR）扩增ESBLs基因。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为78．3％；仅对亚胺培南、美罗培南敏感；几乎所有患者均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等；SHV、CTX-M和TEM基因的阳性半分别为72．2％、61．1%和16．7％；44．4％的菌株同时携带多个基因。结论HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重．治疗应首选碳青霉烯类抗生素；不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受各种侵袭性操作可能是其危险因素；最常见的ESBLs基因型是SHV．其次为CTX—M。     

清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌药敏分析与基因研究

目的：了解清远地区产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法：按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌224株,用Etest测定其最低抑菌浓度（MIC）,分别用TEM、SHV、CTX-M通用引物进行聚合酶链反应（PCR）,并对结果进行分析。结果： 清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药,对美罗培南的敏感率最高（88.9%）,其次是亚胺培南（83.9%）,哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星的敏感率分别为72.8%和70.2%。PCR扩增结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的阳性率分别为45%、51.7%和76.3%,15.1%的菌株同时携带多个基因。结论：清远地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对美罗培南的敏感率最高;最常见的基因型是CTX-M,其次为SHV、TEM。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究与药敏分析

目的 探讨广州地区部分医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因分布规律.方法 用NCCLS推荐的表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌62株,用Etest测定其最低抑菌浓度(MIC),分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2,CTX-M-9组通用引物进行聚合酶链反应(PCR),并对结果进行分析.结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药,对亚胺培南的敏感率最高(98.2%),其次是头孢吡肟(72.7%),头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/三唑巴坦分别为69.6%和63.6%.PCR扩增结果显示TEM,SHV和CTX-M基因的阳性率分别为16.1%,50%和61.3%,21%的菌株同时携带多个基因.结论 广州地区肺炎克雷伯菌对亚胺培南酌敏感率最高,产ESBLs最常见的基因型是CTX-M型,其次是SHV,TEM型.     

血液来源肺炎克雷伯菌耐药表型及基因型分析

目的 了解临床血液来源的肺炎克雷伯菌的耐药表型和基因型分布情况.方法 收集2014年10月至2015年10月四川省人民医院检验科临床分离的37株肺炎克雷伯菌进行耐药分析,采用双纸片扩散法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),PCR扩增CTX-M、TEM和SHV耐药基因,PCR产物测序确定其基因型.结果 37株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的阳性率为27.03％(10/37).与不产ESBLs的菌株相比,产ESBLs的肺炎克雷伯菌对氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、头孢曲松、头孢他啶、环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢哌酮/他唑巴坦、妥布霉素和复方新诺明的敏感性明显下降,但对亚胺培南、厄他培南、阿米卡星、头孢吡肟和哌拉西林/他唑巴坦保持较好的敏感性;大部分产ESBLs的菌株表现出对青霉素类、头孢类和氨基糖甙类等药物的多重耐药.产ESBLs的菌株CTX-M基因阳性率为60.00％(6/10),3株为CTX-M-14型;TEM基因阳性率为80.00％(8/10),均为TEM-1型;SHV基因阳性率为90.00％(9/10),5株为SHV-11型.结论 临床血液来源的肺炎克雷伯菌产ESBLs的阳性率较高,耐药性明显高于非产ESBLs菌株,其基因型以TEM-1型和SHV-11型为主.     

124株肺炎克雷伯菌耐药性分析和产ESBLs株耐药基因分型研究

目的 探讨肺炎克雷伯菌耐药性以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型的流行状况.方法 用K-B法检测肺炎克雷伯菌对24种常用抗生素的耐药情况;用PCR扩增所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因片段,分析ESBLs各基因型的流行状况.结果 肺炎克雷伯菌除对碳青霉烯类药物敏感外,对其他抗生素耐药严重;产ESBLs肺炎克雷伯菌检出50株,检出率40.32％.ESBLs基因分型结果显示,多株同时携带2种或2种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型基因共同存在.结论 常用抗菌药物耐药严重、呈多重耐药.ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型以CTX-M为主.     

产ESBLs分离株耐药基因初步分型

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和克雷伯菌的主要基因型分布特点。方法用表型确证试验筛选出临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌114株。应用PCR方法扩增产酶株的TEM、SHV和CTX-M基因。结果PCR结果显示TEM、SHV和CTX-M基因的总阳性率分别为40.4%、20.7%和83.3%,其中大肠埃希菌分别为48.1%、1.3%和93.5%,肺炎克雷伯菌分别为24.3%、81.1%和62.2%。46.8%的大肠埃希菌和51.4%的肺炎克雷伯菌同时携带多个基因。结论产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型为CTX-M,肺炎克雷伯菌主要基因型为SHV。大多数菌株同时携带多个基因。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药谱和基因分型

目的 研究临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药谱及基因型分布情况. 方法 采用纸片扩散法对肺炎克雷伯菌进行抗菌药物的敏感性实验,并用PCR对ESBLs进行基因型分析.结果 50株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率为100%;除对头孢吡肟耐药率为22.0%外,对其他抗菌药物耐药率均>50%,其中对头孢噻肟、头孢他啶和头孢曲松的耐药率分别为84.0%、68.0%和66.0%;基因型分析显示有37株携带CTX-M基因,34株携带TEM基因,21株携带SHV基因. 结论 产ESBLs的肺炎克雷伯菌耐药严重,且以CTX-M基因型多见.     

临床分离133株肺炎克雷伯菌耐药机制和基因分型研究

目的 研究临床分离肺炎克雷伯菌的耐药机制及基因多态性.方法 用WHONET5.4分析菌株药敏情况.PCR检测菌株Ⅰ类整合酶、ISCR和ESBLs基因;ERIC-PCR检测基因型,SPSS分析其多态性.结果 除亚胺培南和美洛培南,产ESBLs菌的耐药率明显高于不产ESBLs菌(P<0.005).对Ⅰ类整合酶、ISCR、blaTEM、blaSHV、blaCTX-M,88株产ESBLs株的阳性率分别为59.1%、43.2%、69.3%、4.5%、45.5%;45株不产ESBLs株的阳性率分别为40.0%、15.6%、22.2%、4.4%、6.7%.根据指纹图谱把133株肺炎克雷伯菌分为126种,经SPSS系统聚类分析,归为20个大类.结论 南方医院产ESBLs肺炎克雷伯菌主要是CTX-M基因型,整合子和ISCR可以共存;ERIC-PCR是一种效果较好的基因分型方法,该院肺炎克雷伯菌呈散发存在.     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及对常用抗生素的耐药情况. 方法:用1999年NCCLS推荐的初筛试验从77株肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其基因型;用微量液体稀释法做药敏实验. 结果:将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法确证,用头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,77株肺炎克雷伯菌中共检出45株产ESBLs (58.1%);而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为27株. PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 19株、SHV型8株、CTX-M型36株、OXA型11株. 结论:近年来肺炎克雷伯菌产ESBLs率显著升高;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带多种耐药基因;亚胺培南仍为首选药物, 头孢哌酮/ 舒巴坦、哌拉西林/ 他唑巴坦为候选药物.     

南京地区产超广谱β-内酰胺酶菌的流行病学调查

目的:了解南京地区产ESBLs菌基因型的流行情况。方法:用TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型ESBLs的特定引物进行扩增并对扩增产物进行测序分析确定基因型。结果:30株产ESBLs大肠埃希菌和30株产ESBLs肺炎克雷伯菌未发现TEM型、SHV型、OXA型ESBLs,51株产CTX-M型ESBLs,主要为CTX-M-3、CTX-M-14。9株未扩增到ESBLs基因型。结论:南京地区产ESBLs菌基因型主要以CTX-M型为主。     

苏州地区临床产超广谱 β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药特征和耐药基因分型

目的分析苏州地区临床产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药特征和耐药基因型分布情况。方法收集苏州地区5家医院2006年至2009年间自临床标本中分离的肺炎克雷伯菌512株,按CLSI规定的ESBLs初筛和确证试验检测ESBLs,以K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验,用PCR方法对分离的产ESBLs菌株进行TEM、SHV和CTX-M基因型检测。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为35.7%（183株）,其中62.8%（115株）携带TEM型基因,36.1%（66株）携带SHV型基因,78.7%（144株）携带CTX-M基因。另外,有41.5%（76株）同时携带两种以上的基因。产酶株的耐药率均明显高于非产酶株（均P〈0.05）。产酶株除对第4代头孢菌素和对加克拉维酸或他唑巴坦等第3代头孢菌素耐药率相对较低外,对其他抗生素均有相当高的耐药率。但无论是产酶株还是非产酶株对亚胺培南的耐药率均为0。结论苏州地区临床产ESBLs肺炎克雷伯菌已达到了较高的比例,并具有多重耐药的特点,其中CTX-M型是最主要的流行基因型。临床上严格控制和合理使用第3代头孢菌素已刻不容缓。     

新生儿科产ESBLs大肠埃希菌的基因型研究

目的分析我院新生儿病房分离的大肠埃希菌产ESBLs基因型,为临床合理用药提供依据。方法ESBLs表型筛选、确证试验采用K—B法,采用PCR方法对ESBLs基因型进行检测。结果90株产ESBLs大肠埃希菌进行PCR引物扩增,TEM型引物扩增阳性79株,占87．8％;SHV型引物扩增阳性76株,占84．4％;CTX—M型引物扩增阳性90株,占100％;OXA型引物扩增阳性7株,占7．8％。而72株同时产TEM型、SHV型CTX—M型3种酶。结论在本院新生儿科分离的大肠埃希菌中流行ESBLs的基因型主要是CTX—M型,且同时存在产3种酶,应引起临床重视。     

新生儿科产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析及基因分型

目的：了解本院新生儿科送检标本中,分离的产超广谱13一内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯茵的耐药性及基因分型。方法：收集本院新生儿科送检标本中分离的肺炎克雷伯茵,采用双纸片协同试验的方法进行ESBLs初筛及表型确证试验;K—B纸片扩散法进行抗茵药物敏感性试验;聚合酶链反应（PCR）法分析ESBLs的基因分型。结果：产ESBLs肺炎克雷伯茵的检出率为71．11％（64／90）。产ESBLs肺炎克雷伯菌对第3代头孢菌素与B一内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗生素较敏感。ESBLs的基因型分析结果显示,产ESBLs肺炎克雷伯菌中SHV、TEM、CTX-M-1基因扩增阳性率分别为71．64％、37．50％、49．79％,同时携带2种或3种耐药基因的菌株分别占37．71％和12．28％。结论：新生儿科产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药现象严重,ESBLs基因型以SHV、CTX—M一1为主。     

烧伤病区产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌分离率及耐药性分析

目的了解我院特别是烧伤病区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌的流行情况,检测其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗和控制ESBLs菌感染及流行提供重要依据.方法通过中心化验室收集我院2000年3月～2001年2月住院患者送检标本中大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌共计258株,应用VITEK自动检测系统(GNS-506药敏分析卡)及双纸片扩散法筛选产ESBLs菌.根据VITEK自动检测系统药敏检测结果分析比较产ESBLs菌和非产ESBLs菌对15种抗生素的敏感性,并对其中38株产ESBLs阳性菌进行12种临床常用抗生素MIC检测.结果 258株入选菌株中产ESBLs阳性率分别为:大肠杆菌18.8%(29/154);肺炎克雷伯杆菌12.5%(13/104).按标本种类分析,分泌物标本培养产ESBLs阳性率最高,为25.5%,与其他标本培养的总阳性率间的差别有显著性意义;按病区分析,烧伤病区产ESBLs阳性率(大肠杆菌38.5%;肺炎克雷伯杆菌25.0%)与其他病区产ESBLs阳性率间差别有显著性意义.药敏结果:产ESBLs的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南、美洛培南及头孢西丁的敏感率较高,其次是氨基糖苷类抗生素,产ESBLs的肺炎克雷伯杆菌对哌拉西林/三唑巴坦敏感,对其他抗生素的敏感性下降.结论烧伤病区是产ESBLs菌的高发病区,产ESBLs菌对亚胺培南的敏感率最高,其次是美洛培南、头孢西丁和丁胺卡那.     

726株肺炎克雷伯菌的分布特征及耐药性分析

目的分析临床分离的肺炎克雷伯菌及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株的分布及药敏情况。方法采集2009年8月至2010年8月临床各科送检标本,进行肺炎克雷伯菌的分离、培养,采用Vitek-Compact系统对肺炎克雷伯菌进行鉴定和ES-BLs筛选,采用肉汤稀释法测定其对相应抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)值。结果共分离出肺炎克雷伯菌726株,在痰液中检出515株,ESBLs阳性216株,检出率为41.9%;各ICU病房共检出肺炎克雷伯菌407株,ESBLs阳性163株,检出率为40.0%。产ESBLs菌对亚胺培南敏感。结论肺炎克雷伯菌是常见的致病菌,及时监测产ESBLs菌的发生率与耐药趋势对指导临床用药有重要意义。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率及其耐药率，为临床合理使用抗生素提供依据。方法收集2007年1～12月海口市人民医院临床各类标本中分离出（非重复）的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，采用CLSI推荐的K—B法和表型确证试验分别对其进行药敏试验和ESBLs检测。采用WHO推荐的Whonct5．4软件进行耐药率统计分析。结果2007年海口市人民医院共分离出278株大肠埃希菌和220株肺炎克雷伯菌，其中产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为69．1％（192／278）和45．9％（101／220），ESBLs阳性的菌株对同一类抗生素的耐药率均高于ESBLs阴性的菌株（P〈0．05），其中产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢噻肟的耐药率分别为81．7％和64．4％，对头孢西丁的耐药率分别为39．6％和31．8％，未发现对碳青酶烯类药物（亚胺培南、美洛培南）耐药的菌株。结论开展检出菌产ESBLs的检测，以便临床根据药敏试验结果合理使用抗生素，对预防和控制ESBk的产生及传播十分重要。     

外科监护室耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的:了解外科监护室产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectram β-lactamases,ESBLs)的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌的耐药性和基因型.方法:琼脂稀释法测定临床分离株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值,分别用TEM、SHV和CTX-M的特异性引物扩增临床菌株和接合子的超广谱β-内酰胺酶基因.接合试验提取接合子质粒进行聚合酶链反应(polymerase chin reaction,PCR),产物测序,确定基因类型.结果:93.5%的菌株含CTX-M基因,38.7%的菌株含SHV基因,87.1%的菌株含TEM基因.测序明确了TEM-1,CTX-M-1,3,14,22等基因类型.结论:外科监护室大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因以CTX-M为主.