反义硫代脱氧寡核苷酸体外抑制CVB持续感染的研究

目的：了解21聚体反义硫代脱氧寡核苷酸（AODN）体外对CVB3、CVB5持续感染的抑制作用。方法：人工合成AODN，进行脂质体包埋，并按不同浓度分别加入CVB3-ECV304、CVB5-ECV304持续感染细胞模型。对药物作用后持续感染细胞模型，观察其培养上清液致Vero细胞病变能力的改变；ELISA法检测CVB3、CVB5抗原产生的抑制率：RT—PCR检测细胞内病毒RNA表达情况；ELISA检测培养上清液分泌TNF—α浓度。同时进行正义和随机寡核苷酸（SODN、RODN）抗病毒能力检测，并与AODN结果比较。结果：AODN可抑制持续感染CVB3、CVB5抗原合成，随药物浓度的增高，抗原抑制率也升高；经AODN作用后，持续感染细胞培养上清液致Vero细胞病变能力下降．上清液中病毒滴度减少；RT-PCR在经AODN作用的CVB3-ECV304、CVB5-ECV304组中未检测到病毒RNA；经AODN作用后．持续感染的CVB3-ECV304、CVB5-ECV304细胞产生TNF-α浓度升高：针对CVB3 5＇端非编码区基因组序列合成的AODN对CVB5持续感染也有较强的抑制作用；AODN对持续感染病毒的抑制作用强于SODN和RODN组。结论：AODN能体外抑制CVB3、CVB5持续感染，刺激细胞合成TNF-α。这种作用有序列特异性。但同组间病毒有交叉抑制作用，这种作用可能与CVB3、CVB5基因序列同源有关。     

CVB3感染对星形胶质细胞表达agrin的影响及意义

目的检测柯萨奇B3病毒（coxsackievirus group B type3，CVB3）感染体外培养的星形胶质细胞后集聚蛋白（agrin）的表达变化及其意义。方法采用免疫细胞化学的方法鉴定培养的星形胶质细胞，在显微镜下观察CVB3感染后的细胞形态，并用RT-PCR方法扩增CVB3RNA的正负链以确证感染成功，用RT-PCR检测CVB3感染细胞后agrin的动态表达变化。用脂质体将agrin反义质粒pcDNA3-As-AG转染到星形胶质细胞，并用RT-PCR检测转染的细胞中agrin的表达。3H-TdR掺人法测定CVB3不同感染时间点的星形胶质细胞裂解液和经agrin反义质粒pcDNA-As-AG转染细胞后的细胞裂解液对T细胞增殖的影响。结果（1）CVB3感染星形胶质细胞后agrin的表达水平下调。（2）病毒感染后随着agrin表达量的降低，星形胶质细胞裂解液对T细胞的活化增殖作用也降低。未转染和空质粒转染的细胞裂解液对T细胞的活化增殖有促进作用，而用反义核酸技术下调星形胶质细胞agrin表达后，星形胶质细胞裂解液对T细胞增殖的促进作用也随之下降，进一步证实agrin表达水平的下调可影响T细胞的活化和增殖。结论CVB3感染星形胶质细胞后agrin表达水平下凋，降低对T细胞活化增殖的能力，这可能是CVB3病毒性脑炎中，病毒逃逸机体免疫清除的一种机制。     

大黄提取液抗柯萨奇病毒B3的实验研究

采用微量细胞培养法观察细胞病变效应 (Cytopathiceffect,CPE) ,测定经不同剂量大黄提取液作用后的病毒滴度 ,用逆转录—聚合酶链反应 (RT PCR)检测药物作用后细胞冻融液中的病毒核酸(CVB RNA) ,研究大黄提取液的抗柯萨奇病毒B组 (CVB)作用 ,探讨其抗病毒作用机制。结果 :不同剂量大黄提取液和病毒作用后 ,细胞均出现CPE ;不同剂量药物作用于细胞后 ,不能阻止CVB3感染 ;当CVB3感染细胞后 ,大黄提取液能阻止病毒增殖 ,并表现出一定的量效关系 ,其治疗指数(TI) =10。提示大黄提取液不能直接杀灭CVB3,不能阻止CVB3吸附、穿入易感细胞 ,而通过阻止CVB3核酸复制或 /和以后环节发挥抗病毒作用。     

黄芪对病毒性心肌炎治疗作用浅析

黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。是中医补气要药,味甘,微温,具有益气补中、补气固表、利尿排毒、托疮生肌等作用。现代研究发现其含有苷类、黄酮、多糖、氨基酸及微量元素等多种有效成分,其临床作用广泛,具有强心、抗心肌缺血、提高免疫力、降糖、抗衰老、保护脏器等作用。近年来该药被广泛应用于病毒性心肌炎的治疗,临床效果明显。本文就其对病毒性心肌炎的治疗作用分析如下。1抗病毒作用腹腔接种柯萨奇B5病毒(CVB5)致VMC的雄性BALB/C小鼠,应用黄芪甲苷治疗后,心肌组织中的病毒滴度和细胞中病毒核糖核酸(RNA)的复制水平均降低;大鼠培养心肌细胞感染CVB5 1 h后,经黄芪注射液处理48 h,CVB5 RNA含量也显著减少,说明黄芪在体内外均有抑制CVB5病毒复制的作用。2免疫调节作用病毒性心肌炎心肌免疫损伤以T细胞介导的细胞免疫反应为主,尽管细胞免疫在机体抗病毒感染中起重要作用,但病毒感染引起宿主免疫功能和病毒感染细胞的抗原性质改变,均可造成免疫反应对宿主细胞的攻击,而引起病理性损伤。研究发现,应用黄芪治疗病毒性心肌炎小鼠后,显示黄芪可能是通过抑制急性CVB5心肌炎Th1反应及激发Th2反应,影响Th1相关细...     

心安颗粒体外抗柯萨奇病毒的药效学试验研究

目的：测定心安颗粒对柯萨奇病毒（CVB3）的体外抗病毒活性作用。方法：采用细胞培养法。结果：心安颗粒浸膏的浓度在15.5mg/ml时,若先作用于Hela细胞2小时后,再感染CVB3,可以保护Hela细胞免受病理损伤。若Hela细胞先感染CVB32小时后,再上药物,则31mg/ml的心安颗粒浸膏液可以保护Hela细胞。结论：心安颗粒用于预防CVB3的感染有较好的效果。     

清咽滴丸抗柯萨奇病毒B3,B5的实验研究

目的：探讨清咽滴丸在细胞水平及血清水平对柯萨奇病毒B3、B5（CVB3、CVB5）的抑制作用。方法：利用CPE法和MTT法在细胞水平上检验清咽滴丸抗CVB3、CVB5感染的作用;观察不同时间段的含药血清抑制CVB3、CVB5的情况,进而在血清水平上验证清咽滴丸的抗病毒作用。结果：（1）细胞水平上,清咽滴丸在7.81×10-5g/mL时对CVB3的抑制作用最好,在3.91×10-4g/mL时对CVB3的治疗作用最强。血清水平上,当血药浓度1：10且在灌胃65 min时对CVB3呈现最好的抑制作用,抑制率达到58.74%（P〈0.05）。（2）细胞水平上,清咽滴丸在7.81×10-5 g/mL时对CVB5的抑制作用最好,在3.91×10-5 g/mL时对CVB5的治疗作用最强。血清水平上,当血药浓度1：10且在灌胃85 min时对CVB5呈现最好的抑制作用,抑制率达到74.23%（P〈0.05）。结论：清咽滴丸有一定的抗柯萨奇病毒B3、B5的功效。     

小柴胡汤分解剂抗柯萨奇B3病毒感染及其对心肌炎防治作用的研究

目的 :探讨小柴胡汤分解剂在体外及体内抗柯萨奇 B3病毒 (CVB3)及保护心肌细胞的作用。方法 :用小柴胡汤分解剂通过体外微量细胞培养 ,作用于被 CVB3直接损伤的细胞模型及经腹腔感染 CVB3m Balb/ c小鼠心肌炎模型 ,分析不同浓度分解剂的效应。结果 :在体外细胞上分解剂 A、B液自 1∶ 32稀释度对 vero细胞的毒性作用已丧失 ,至 1∶ 2 5 6稀释度时 ,仍能对抗 CVB3对细胞致病变作用。在体内分解剂 A、B液治疗组小鼠 35只 ,心肌炎发生率 37.14% ;而 2 0只对照组小鼠心肌炎发生率 5 9.1% ,两者有显著性差异 (χ2 =4.6 8,P <0 .0 5 ) ,在预防给药组更为明显 (P <0 .0 1)。结论 :小柴胡汤分解剂 A、B液在体内、体外均具有抗病毒及保护心肌的作用。     

黄芩苷体外抑制柯萨奇病毒B组3型感染的机制研究

目的：探讨黄芩苷（baicalin,BA）体外抑制柯萨奇病毒B组3型（coxsackie virus B3,CVB3）感染的效用及机制。方法：CellTiter 96? AQueous 单溶液试剂检测Hela细胞存活率,病毒空斑实验检测病毒滴度,CHOD?PAP法和ACS?ACOD法分别用于检测细胞中游离脂肪酸（free fatty acids,FAA）和胆固醇（cholesterol,CHO）的含量,RT?PCR检测脂类代谢关键分子脂肪酸合成酶（fatty acid synthase,Fasn）和乙酰?CoA羧化酶（acetyl?CoA carboxylase,ACC）的mRNA表达,Western blot检测CVB3病毒衣壳蛋白VP1表达。结果：BA在低于100 μg/mL时对Hela细胞无明显毒性效用,但能呈剂量依赖地抵抗CVB3诱导细胞病变,显著减少病毒滴度和抑制CVB3/VP1的表达;CVB3感染能显著增加细胞中FFA和CHO含量以及Fasn和ACC的mRNA表达,但是经BA处理后,能显著减少这些脂类代谢物质的含量;棕榈酸预处理细胞,能恢复BA处理组中CVB3/VP1的表达。结论：BA能通过调节细胞脂类合成来发挥抗CVB3感染的效用。     

复方羌芪水提液体外抗柯萨奇病毒B3作用的研究

目的：测定复方羌芪水提液的体外抗ＣＶＢ３作用，并对其抗病毒机理进行初步的探讨。方法：用含有不同浓度复方羌芪水提液的维护液培养ＣＶＢ３感染的Ｖｅｒｏ细胞，４８ｈ后用ＭＴＴ法测定细胞活性；培养上清液滴定ＴＣＩＤ５０。结果：复方氏水提液能抑制ＣＶＢ３对Ｖｅｒｏ细胞的致病变作用（ＣＰＥ），使细胞夏活率升高，培养上清病毒滴度降低；且随药物浓度及药物与病毒作用时间的延长抑制作用增强。结论：复方羌芪水提液的抗病     

甲基强的松龙对柯萨奇病毒B3m体外作用的研究

目的：探讨甲基强的松龙体外在无免疫因素影响下与柯萨奇病毒B3m(CVB3m)作用情况。方法：首先测定甲基强的松龙对Hela细胞的毒性，并以微量法及全量法从最大无毒浓度开始2倍系列稀释后作用于感染CVB3m的Hela细胞，并收集各稀释度上清液进行病毒半数感染量（TCID50）重新滴定。结果：（1）甲基强的松龙高浓度（＞1．25mg/ml)对Hela细胞有毒性作用，最大无毒浓度为1．25mg/ml；（2）低家度甲基强的松龙可促进细胞生长，且在1．25mg/ml,0.625mg/ml有限制病毒复制作用，其细胞病变及培养上清液的TCID50均低于病毒对照孔，抑制倍数分别为249和31．8倍。结论：甲基强的松龙本身无直接促进病毒增殖作用，低浓度反而保护细胞，并可借助体内免疫系统，发挥免疫抑制作用，在柯萨奇病毒感染时，适时、适量应用激素利于病情恢复。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用

目的观察芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用。方法30只Long-Evans大鼠用动脉结扎法造成视网膜缺血模型,其中治疗组20只腹腔注射芹黄素,对照组10只注射溶媒二甲基亚酚。用视觉电生理仪检查视网膜功能恢复情况。结果芹黄素治疗组视网膜功能恢复明显好于对照组(P<0.05)。结论芹黄素能促进大鼠缺血视网膜的功能恢复。      

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

人体寄生虫学多媒体教学效果的初步评估

通过分析多媒体辅助教学方法与传统教学方法在人体寄生虫学教学中的应用,指出多媒体辅助教学对于提高教学质量效果显著,受到了绝大部分同学的赞同和欢迎.     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。