白细胞介素-17 对脱氧皮质酮/ 盐诱导的高血压 心肌纤维化大鼠巨噬细胞极化的影响

目的 探讨脱氧皮质酮（DOC）/ 盐诱导的高血压心肌纤维化（MF）大鼠中白细胞介素-17（IL-17） 对巨噬细胞极化的作用。方法 30 只雄性清洁级SD 大鼠予右肾切除处理,术后用含0.1% 氯化钾和1% 氯 化钠的饮水灌胃2 周,随机分成对照组、DOC 组、DOC+IL-17 抗体组。使用尾套法测量大鼠动脉收缩压, 1 次/2 周;天狼猩红染色法检测心肌间质纤维化程度;免疫组织化学法观察心肌组织CD11c、CD206 表 达;逆转录聚合酶链反应检测诱导性一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（Arg1）mRNA 的表达;Western blotting 检测各组IL-17、iNOS 和Arg1 蛋白表达。结果 各组收缩压比较,差异有统计学意义（P <0.05）。 DOC 组心肌间质胶原面积/ 视野总面积比值较对照组增加（P <0.05）;使用IL-17 抗体中和干预治疗后, DOC+IL-17 抗体组心肌间质胶原面积/ 视野总面积比值较DOC 组减少（P <0.05）。DOC 组iNOS、Arg1 mRNA 相对表达量和IL-17、iNOS、Arg1、CD11c、CD206 蛋白相对表达量较对照组升高（P <0.05）,使用 IL-17 抗体中和后,DOC+IL-17 抗体组iNOS、Arg1 mRNA 相对表达量较DOC 组降低（P <0.05）,IL-17、 iNOS、Arg1、CD11c 和CD206 蛋白相对表达量较DOC 组降低（P <0.05）。结论 DOC/ 盐诱导的高血压 大鼠MF 中巨噬细胞极化很可能与IL-17 有关。     

慢性炎症在X射线诱发恒河猴卵巢组织持续损伤中的潜在作用

目的:探讨在X射线诱发恒河猴卵巢损伤中慢性炎症是否发挥重要作用。方法:14只月经周期规律的成年雌性恒河猴（8～14岁）,随机分为3组（3只/组）:假照射（Sham）组（n=8）、卵巢照射（OXI） 组（n=3）、X射线照射+FTY-720（免疫抑制剂）（FTY-720）组（n=3）。Sham组给与溶剂PET+假手术（保留卵巢血管蒂,将卵巢移出腹腔）,OXI组动物卵巢移出腹腔后给与15 Gy X射线照射,FTY-720组卵巢内行0.2 mmol/L FTY-720灌注1周后给与15 Gy X射线照射。各组手术操作相同,结束后将卵巢复位,均于早卵泡期行卵巢组织取材[照射结束后第（316±7）天]。免疫组织化学染色法检测卵巢组织单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD11b和CD68的表达并计数CD11b、CD68阳性细胞,ELISA法检测照射结束后第３个月和第９个月血清MCP-1、白细胞介素（IL）-6水平。结果:OXI组卵巢组织MCP-1阳性染色强于Sham组和FTY-720组,而FTY-720组MCP-1表达与Sham组表达情况相似。与Sham组相比,OXI组CD11b阳性细胞数量明显增多（P<0.05）;而FTY-720组CD11b阳性细胞数量明显少于OXI组（P<0.05）,且其与Sham组相比较,差异无统计学意义（P>0.05）。3组间CD68阳性细胞数量差异无统计学意义（P>0.05）,但观察到OXI组卵巢组织CD68阳性细胞数量呈增高趋势,而FTY-720组变化不明显,接近Sham组水平。照射后第３个月,3组间血清MCP-1浓度差异不显著（P >0.05）;第９个月时,OXI组MCP-1浓度明显高于Sham组（P=0.031 4）,而FTY-720组明显低于OXI组（P=0.017 2）。血清IL-6仅在OXI组中检测到,照射后第３个月时为（4±1） pg/mL,９个月时为（9±6） pg/mL（P >0.05）。结论:X射线照射可诱发卵巢慢性炎症,而FTY-720能够抑制该炎症,降低恒河猴卵巢组织内MCP-1的表达、CD11b+和CD68+巨噬细胞的浸润,减少血清MCP-1、IL-6含量。     

ICAM-1、MMP-9及NF-κB在胆管癌中的表达及与外周血免疫抑制细胞的关系

  目的  探讨细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及NF-κB在胆管癌中的表达及外周血中CD14+CD11b+HAL-DR-髓源性抑制细胞（MDSC）的关系。  方法  选取昆明医科大学附属甘美医院2017年12月至2019年12月收治的胆管癌患者60例研究对象。采用免疫组化法测定胆管癌组织与癌旁正常组织ICAM-1蛋白、MMP-9蛋白及NF-κB蛋白;采用流式细胞术检测患者外周血中CD14+CD11b+HAL-DR-MDSC比例。比较胆管癌组织与癌旁组织ICAM-1蛋白、MMP-9蛋白和NF-κB蛋白表达;不同病理特征ICAM-1蛋白、MMP-9蛋白和NF-κB蛋白表达及外周血中CD14+CD11b+HAL-DR-MDSC比例;ICAM-1蛋白、MMP-9蛋白和NF-κB蛋白表达与外周血中CD14+CD11b+HAL-DR-MDSC比例相关性。  结果  胆管癌组织ICAM-1蛋白、MMP-9蛋白和NF-κB蛋白表达阳性率均高于癌旁正常组（P < 0.05）。不同性别、年龄、病理分级和淋巴结转移ICAM-1蛋白表达比较无明显差异（P > 0.05）;III～IV期ICAM-1蛋白表达阳性率高于I～II期（P < 0.05）。不同性别、年龄、病理分级和临床分期MMP-9蛋白表达比较无明显差异（P > 0.05）;淋巴结转移MMP-9蛋白表达阳性率高于无淋巴结转移（P < 0.05）。不同性别、年龄、病理分级和淋巴结转移NF-κB蛋白表达比较无明显差异（P > 0.05）;III～IV期NF-κB蛋白表达阳性率高于I～II期（P < 0.05）。不同性别、年龄、病理分级和淋巴结转移CD14+CD11b+HAL-DR-MDSC比例比较无明显差异（P > 0.05）;III～IV期CD14+CD11b+HAL-DR-MDSC比例高于I～II期（P < 0.05）。ICAM-1蛋白、MMP-9蛋白及NF-κB蛋白表达与CD14+CD11b+HAL-DR-MDSC比例呈线性正相关。  结论  ICAM-1蛋白、MMP-9蛋白及NF-κB蛋白表在胆管癌中高表达,外周血中CD14+CD11b+HAL-DR-MDSC比例升高,且ICAM-1蛋白、MMP-9蛋白及NF-κB蛋白表达与CD14+CD11b+HAL-DR-MDSC比例呈线性正相关。     

人骨髓间充质干细胞分泌的外泌体调控恶性胶质瘤相关巨噬细胞的极化

  目的  探究人骨髓间充质干细胞分泌的外泌体对肿瘤相关巨噬细胞极化的影响，并初步探讨其对胶质瘤发生发展的影响。  方法  利用试剂盒提取人骨髓间充质干细胞分泌的外泌体，通过扫描电镜及Western blot 鉴定外泌体。将胶质瘤细胞分为SHG449:SHG449细胞不做特殊处理；SHG449+M0组:SHG449细胞与M0型巨噬细胞共培养；SHG449+M0+exosome组:SHG449细胞与M0型巨噬细胞共培养后，加入标记有PKH-67的外泌体使其进入M0型巨噬细胞。  结果  （1）人骨髓间充质干细胞分泌的外泌体成功提取，且进入M0型巨噬细胞；（2）外泌体进入胶质瘤细胞SHG449诱导极化的巨噬细胞后细胞形态转化，且M2型巨噬细胞活化标志物Arginase、CD206以及CCL22，TGF-β表达下降（Arginase:P < 0.01，CD206:P < 0.05， CCL22:P < 0.05，TGF-β:P < 0.01），M1型活化标志物iNOS，CD68以及IL-1β，TNF-α表达上升（iNOS:P < 0.01，CD68:P < 0.01，L-1β:P < 0.000 1，TNF-α:P < 0.001）；（3）被外泌体诱导极化的巨噬细胞导致胶质瘤细胞增殖能力下降（P < 0.05），凋亡能力上升（P < 0.000 1）。  结论  人骨髓间质细胞分泌的外泌体可抑制肿瘤相关巨噬细胞向M2表型转化，并诱导其向M1表型转化，调节肿瘤免疫微环境，从而达到抑癌的作用。     

FLT3-ITD 突变的急性髓系白血病免疫表型 及临床特征分析

目的 讨论FLT3-ITD 突变的急性髓系白血病（AML）的免疫表型及临床特征。方法 回顾性 分析2015 年6 月—2017 年6 月中国医科大学附属第四医院收治的FLT3-ITD+ 及FLT3-ITD- AML 组患者的 免疫表型、临床资料,并对两组患者化疗后临床结局及生存状况进行比较。结果 FLT3-ITD+ AML 组患者 CD56、CD33、CD11b 及CD7 表达高于FLT3-ITD- AML 组（P <0.05）,而CD34、CD117 表达低于FLT3- ITD- AML 组（P <0.05）。与FLT3-ITD- AML 组患者比较,FLT3-ITD+ AML 组患者外周血白细胞计数及骨 髓原始细胞比例升高（P <0.05）,而血红蛋白及血小板计数比较,差异无统计学意义（P >0.05）;FLT-ITD- AML 组患者总反应率高于FLT3-ITD+ AML 组（P <0.05）;FLT3-ITD- AML 组患者无病生存率和总生存率 高于FLT3-ITD+ AML 组（P <0.05）。FLT3-ITD+ AML 组患者完全缓解患者CD56、CD34、CD11b、CD7、 CD33 及CD117 的表达水平低于未缓解患者（P <0.05）。结论 FLT3-ITD+ AML 患者白血病细胞抗原表达 紊乱,外周血白细胞及骨髓原始细胞高,完全缓解率低,预后差,是AML 预后不良因素。AML 患者早期检测 FLT3-ITD 突变及免疫分型对于指导治疗、判断预后具有重要临床意义。     

花姜酮对小鼠CD4+CD25+Treg细胞分化功能的影响及机制

目的：建立小鼠CD4+CD25+Treg细胞的体外诱导及培养方法,同时探讨花姜酮（Zerumbone）对Treg细胞的分化、分泌功能的影响及其机制。方法：从BABL/c小鼠的脾脏分离、纯化CD4+CD62L+T细胞,加入转化生长因子（transforming growth factor,TGF）? β（5 ng/mL）、 白细胞介素（interleukin,IL）?2（30 μg/mL）促进CD4+CD62L+T细胞向Treg细胞分化。Treg细胞被分为5组：正常组、模型对照组、Zerumbone（1 μmol/L）组、Zerumbone（10 μmol/L）组、Zerumbone（30 μmol/L）组。流式细胞术检测各组Treg细胞的比例,酶联免疫吸附试验（enzyme?linked immunosorbent assay,ELISA）方法检测IL?10含量,Foxp3、IL?10 mRNA的表达用实时荧光定量聚合酶链反应（RT?PCR）方法检测。结果：本实验方法使Treg细胞的诱导比例明显升高（P< 0.01）。与模型对照组相比,Zerumbone组的Treg细胞比例呈剂量依赖性升高（P均< 0.05）。IL?10蛋白的表达与模型对照组比较也呈剂量依赖性升高（P均< 0.05）,Foxp3、IL?10 mRNA的表达同样升高（P < 0.05）,其中Zerumbone（30 μmol/L）组升高最明显（P < 0.01）。结论：在体外实验中,Zerumbone可以促进BABL/c小鼠体内的CD4+CD62L+T细胞向Treg细胞分化,并促进IL?10蛋白的表达,其机制可能与诱导CD4+CD25+Treg特异性转录因子Foxp3的表达有关。     

成人骨性Ⅱ1分类错高角骨面型下颌尖牙区牙槽骨形态的锥形束CT研究

目的 通过锥形束CT（CBCT）影像学分析,探讨成人骨性Ⅱ¹分类错高角骨面型与均角骨面型下颌尖牙区牙槽骨形态结构的差异,为临床正畸治疗提供参考。方法 选取2018年6～12月安徽医科大学第一附属医院口腔科正畸治疗前的高角骨面型和低角骨面型的病例共54例,以FMA角（眶耳平面与下颌平面所成的角度）大小及前面高（鼻根点与颏下点之间的距离）和后面高（蝶鞍中心点与下颌角点之间的距离）的比值为依据分为高角组、均角组,各27例,通过CBCT获得颅颌面三维影像,测量两侧下颌尖牙的牙槽骨高度、厚度及旋转角度。结果 成人骨性Ⅱ¹分类错高角组与均角组垂直骨面型的下颌尖牙舌侧牙槽骨高度存在差异,高角组比均角组小（P<0.05）。下颌尖牙的唇侧骨皮质距离和唇侧旋转距离,高角组比均角组小。其余测量项目结果差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 成人骨性Ⅱ¹分类错患者中,高角与均角骨面型患者下颌尖牙区的牙槽骨形态存在差异,高角组的舌侧牙槽骨高度低于均角组的牙槽骨高度。     

IL －4和 IL －13基因多态性与广东惠州地区儿童哮喘发生的相关性

目的：探讨IL－13（Arg130Gln）、IL－4（－589C／T）基因位点多态性与广东惠州地区儿童哮喘发生的相关性。方法采用PCR－RFLP法对34例广东籍哮喘患儿（哮喘组）及30例健康对照儿童（对照组）进行IL－13（Arg130Gln）、IL－4（－589C／T）位点的单核苷酸多态性检测。结果哮喘组与对照组IL－13（Arg130Gln）位点的基因型和等位基因频率差异有统计学意义（P＜0.05）;哮喘组与对照组IL－4（－589C／T）位点的基因型和等位基因频率差异无统计学意义（P＞0.05）;IL－13（Arg130 Gln）基因型AA及AG致儿童哮喘发生的相对危险度要高于基因型GG（P＜0.05）。结论 IL－13（Arg130Gln）基因多态性可能与广东惠州地区儿童哮喘发生存在相关性,并且基因型AA及AG对哮喘发生相对易感。     

白介素-1β及黏附分子在急性髓性白血病中的表达及意义

目的　为探讨白介素 1β及黏附分子CD11a和CD11b在白血病细胞淤滞及向组织浸润中的作用 ,并为临床防治白血病细胞髓外浸润的发生提供实验依据。方法　用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定 5 1例初治和复发 ,且未开始化疗的急性髓性白血病 (AML)患者和 15例正常献血员血清中IL 1β的含量 ,采用免疫细胞化学法SABC -AP测定 4 0例AML的骨髓单个核细胞膜或浆中CD11a和CD11b表达百分率。结果　AML组血清中IL 1β的含量显著高于正常对照血清 (P <0 .0 1) ;AML浸润组血清中IL 1β的量显著高于非浸润组。IL 1β与外周血白细胞呈直线相关关系 (r =0 .796 ,P <0 .0 1)。在CD11a和CD11b的表达中 ,CD11b在M4 M5的表达百分率明显高于M1 M2 及M3 (P <0 .0 1)。CD11a阳性者临床特征中外周血白细胞明显高于CD11a阴性者 (P <0 .0 1) ,且容易出现浸润征。而CD11b阳性者与年龄、血小板、浸润有关。IL 1β、CD11a和CD11b之间存在两两直线相关关系 (P <0 .0 5 )。结论　黏附分子整合素包括CD11a、CD11b参与了白血病细胞组织浸润的机制 ,白血病细胞产生的细胞因子IL 1β可上调CD11a、CD11b在白血病细胞上的表达。     

M1型巨噬细胞极化在内皮细胞转分化及慢性移植肾失功中的作用

目的：探究M1型巨噬细胞极化在内皮细胞向间充质细胞转分化（endothelium?to?myofibroblast transition,EndMT）及慢性肾移植失功（chronic allograft dysfunction,CAD）中的作用。方法：从GEO公共数据库中下载GSE21374转录组测序数据,并使用Cibersort软件分析CAD患者移植肾中的免疫细胞的浸润状态。收集本中心CAD患者的移植肾切除标本,使用免疫荧光、聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）和蛋白质印迹法（Western blot,WB）等方法观察M1型巨噬细胞在移植肾组织中的浸润情况。体外脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）和干扰素?γ（interferon?γ,IFN?γ）诱导Raw264.7巨噬细胞向M1极化。Transwell小室构建M1型巨噬细胞和主动脉内皮细胞的共培养模型。使用PCR、WB和细胞免疫荧光观察共培养模型中内皮细胞的CD31与α?SMA的表达情况。结果：基于GEO公共数据库,发现单核?巨噬细胞明显浸润于CAD移植肾组织中（P＜0.05）;在本中心的CAD患者移植肾标本中,CD68（+）iNOS（+）M1型巨噬细胞亦明显浸润于肾小球及间质中,且M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）的mRNA表达量明显增加（P＜0.05）。在细胞共培养模型中发现,M1型巨噬细胞可明显促进内皮细胞发生EndMT过程。结论：M1型巨噬细胞明显浸润于CAD患者的移植肾组织中,并可能通过诱导内皮细胞发生EndMT促进CAD的进展。