Smurf2在梗阻性肾病小鼠肾小管上皮细胞转分化形成中的作用

目的:探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在小鼠单侧输尿管梗阻所致肾间质纤维化进展中的作用机制?方法:采用结扎雄性CD-1小鼠单侧输尿管(UUO)的方法建立肾间质纤维化动物模型,设假手术为对照组(Sham组)?术后3?7?14 d处死小鼠?用常规病理染色法观察两组小鼠肾组织形态和肾间质纤维化程度;以免疫蛋白印迹及免疫组织化学染色法检测两组小鼠肾组织中Smurf2?E-钙黏蛋白(E-cadherin)??琢-平滑肌肌动蛋白(?琢-SMA)和纤维连接素(FN)的表达和分布?结果:与Sham组相比,UUO术后7 d小鼠出现部分肾小管扩张?萎缩和肾间质纤维化?同时,UUO术后肾组织中Smurf2??琢-SMA和FN表达呈时间依赖性升高,E-cadherin表达则明显下降?并且,Smurf2蛋白主要分布于肾小管上皮细胞核内;?琢-SMA分布于肾小管上皮细胞和肾间质中;FN则分布于肾间质中?相关回归分析表明:UUO术后小鼠肾组织内Smurf2表达与?琢-SMA(r = 0.765,P <0.001)和FN蛋白水平呈正相关(r = 0.773,P < 0.001);与E-cadherin表达呈负相关(r = -0.656,P < 0.001)?结论:梗阻性肾病小鼠肾组织中Smurf2可能通过诱导肾小管EMT形成促进肾间质纤维化的进展?     

高糖诱导足细胞发生上皮-间叶细胞转分化

目的 通过观察高糖是否引起小鼠足细胞发生上皮-间叶细胞转分化现象,探讨糖尿病肾小球损伤的可能机制。 方法 以小鼠永生化足细胞株为研究对象,予不同浓度葡萄糖（12.5、25、50 mmol/L）处理该细胞36 h,并设低糖（5.6 mmol/L）和甘露醇（50 mmol/L）处理组为对照组。采用蛋白免疫印迹和间接免疫荧光染色方法检测α平滑肌肌动蛋白 （α-SMA）、迁连蛋白（FN）、CD2相关蛋白（CD2AP）和Wilms’肿瘤1基因（WT-1）蛋白的表达。 结果 低糖（5.6 mmol/L）和甘露醇（50 mmol/L）处理条件下小鼠足细胞表达WT-1、CD2AP,基本不表达α-SMA和FN;而予不同浓度葡萄糖处理36 h后,足细胞中α-SMA和FN表达水平呈剂量依赖性上调（P < 0.05）。间接免疫荧光染色结果也显示,与低糖组相比,高糖组中 α-SMA阳性的足细胞比例显著增加（P < 0.05）。同时,蛋白免疫印迹结果还表明高糖可呈剂量依赖性方式下调WT-1和CD2AP的表达（P < 0.05）。 结论 在高糖条件下,足细胞发生向间叶细胞表型的转分化可能是引起足细胞功能失调,进而引起糖尿病肾小球损伤发生的作用机制之一。     

肾上腺乳头状淋巴管内血管内皮瘤2例并文献复习

例1,女,49岁,因右腰部酸胀不适1个月入院。既往高血压病史20年,血压最高170/110 mmHg,规律口服降压药物治疗。20年前行声带息肉切除手术,13年前因脑垂体瘤行伽马刀治疗。入院后实验室检查无明显异常。泌尿系CT示:右侧肾上腺见多房囊性密度影(图1A),囊壁散在钙化,CT值约15 HU,增强后未见强化,较大囊截面8.4 cm×4.1 cm,双肾囊肿,左肾错构瘤,肝脏多发囊肿。     

T型钙通道α1G亚单位在慢性肾衰竭大鼠左心室心肌中的表达及钙三醇干预的研究

目的观察慢性肾衰竭(CRF)大鼠左心室心肌中T型钙通道α1G亚单位的表达与心肌肥厚的关系,研究钙三醇对其表达的影响.方法24只雄性清洁级SD大鼠随机分为三组,每组8只①CRF组;②CRF加钙三醇组(50ng/d灌胃);③假手术对照组.采用两步法5/6肾大部分切除(SNx)制备CRF动物模型;对照组施行假手术.术后12周处死大鼠,检测各组大鼠心重/体重比、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和甲状旁腺素(iPTH)水平以及内生肌酐清除率(Ccr),并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)两步法观察大鼠左心室心肌中T型钙通道α1G亚单位信使核糖核酸(mRNA)的表达.结果与对照组相比,术后12周CRF组血清BUN、SCr、iPTH和心重/体重比值明显上升(P<0.01),CCr明显降低(P<0.01),且左心室心肌中重新出现α1G亚单位mRNA的表达(P≤0.001);而钙三醇组,除血清iPTH较CRF组明显下降外(P<0.01),其血清BUN、SCr、CCr和心重/体重比值,以及左心室心肌中α1G亚单位mRNA的表达均与CRF组无明显差异(P>0.05).结论CRF大鼠心肌重量明显增加,左心室心肌出现T型钙通道的异常表达,提示T型钙通道可能在CRF心肌肥厚中起重要作用;但用钙三醇干预后虽iPTH能降低,但左心室心肌中T型钙通道α1G亚单位的表达无明显变化,提示钙三醇对心肌肥厚作用不明显,因此进一步研制针对T型钙通道的特异性阻滞剂是很有意义的.     

重组人骨桥蛋白刺激人近端肾小管上皮细胞向间质细胞转化的研究

目的 观察骨桥蛋白(OPN)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)向间质细胞转化(EMT)的影响.方法 依据加入的重组人骨桥蛋白(rhOPN)的浓度,将HK-2细胞分成6组,rhOPN的浓度依次为:0.00、0.04、0.08、0.12、0.16、0.20 mg/L,刺激时间为48h.采用共聚焦显微镜观察细胞形态学变化;实时定量聚合酶链反应(PCR)、Western blot检测E-钙黏素(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)的表达;应用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡.结果 在形态学上,rhOPN能够刺激HK-2细胞向间质细胞转变,通过实时定量PCR、Western blot分析发现上皮细胞的表面标记E-cad随着刺激浓度的增加而逐渐降低,间质细胞的标记物α-SMA、FN的表达逐渐升高,实时定量PCR检测E-cad依次为:1947.0±301.0、1114.0±187.4、668.7±180.4、436.7±121.8、242.7±105.2、223.5±73.4; α-SMA依次为:0.01465±0.003 38、0.034 28±0.01200、0.06034±0.005 65、0.09205±0.010 68、0.11360±0.018 92、0.186 30±0.021 75;FN依次为:0.000 818±0.000103、0.001 341±0.000203、0.001 708±0.000128、0.002 170±0.000161、0.003 369±0.000314、0.004961±0.000364.Western blot检测E-cad依次为:1.719±0.159、1.370±0.016、1.238±0.031、0.916±0.056、0.520±0.065、0.456±0.073;α-SMA依次为:0.623±0.127、0.640±0.031、0.865±0.045、1.015±0.107、1.290±0.103、1.381±0.040; FN依次为:0.475±0.044、0.499±0.062、0.904±0.066、0.981 ±0.052、1.272±0.093、1.614±0.056,各组之间差异有统计学意义(均P＜0.05),且随着OPN刺激浓度的增加,细胞的抗凋亡能力也逐渐增强.结论 OPN能够刺激HK-2细胞向间质细胞转化,且呈现出明显的剂量依赖性.     

泌尿系统吻合性血管瘤临床特点及诊治分析

【摘要】目的探讨泌尿系统吻合性血管瘤（AH）的临床特点及诊治经验。方法回顾性分析2015年6月至2021年11月南京医科大学第一附属医院收治的泌尿系统AH患者的一般情况、影像学检查、治疗经过、病理及随访结果等临床资料。结果共收集10例AH患者临床资料。6例为体检发现,3例因腰痛、1例因肉眼血尿就诊;输尿管AH患者有2年前行输尿管镜碎石手术史;术前CT检查见肿瘤位于左侧5例,右侧5例（左肾上腺区2例,右肾上腺区2例,左肾门旁1例,左肾盂内1例,右肾下极2例,左腹膜后1例,右输尿管1例）;肿瘤直径10～43 cm;肿瘤呈类圆形6例,形态不规则4例;CT平扫呈低密度6例,混杂密度4例;所有患者顺利完成手术治疗,开放手术1例,腹腔镜手术9例,其中机器人辅助手术3例;术后病理证实为肾脏AH4例,肾上腺AH4例,输尿管AH1例,腹膜后AH1例;术后病理与影像诊断一致率50%（5/10）,为肾肿瘤2例,肾上腺肿瘤2例,腹膜后肿瘤1例;随访11～79个月,未见肿瘤转移及复发。结论泌尿系AH是一种罕见的良性血管瘤,术前确诊困难,腹腔镜及机器人辅助腹腔镜手术切除泌尿系统AH安全有效。AH患者应予个体化诊治,注意避免过度治疗。     

慢性肾功能衰竭患者血清肌钙蛋白T/I的变化及其临床意义

大量研究表明 ,血清心脏肌钙蛋白T/I(cTnT/I)在心肌损害时升高 ,且cTnT/I可作为鉴别微小心肌损害的一个特异的生化指标。慢性肾功能衰竭患者几乎 10 0 %合并心血管疾病 ,研究发现慢性肾衰患者的cTnT/I升高。本文综述了cTnT/I的分布、结构、功能、表达特点、代谢特点、检测方法及其在慢性肾功能衰竭患者中的异常变化、发生机制以及对诊断和预后评估的价值。     

低龄儿童 DCD 单侧供肾用于成人肾移植的单中心经验

目的：分析低龄儿童单侧供肾在成人肾移植中的临床效果。方法：回顾性分析南京医科大学第一附属医院2013年11月—2016年9月期间6例低龄儿童公民逝世后器官捐献（donation after citizen’s deceased,DCD）单侧供肾肾移植的临床资料。结果：6例成人受体接受了来自5例低龄儿童DCD单侧供肾。供体中位月龄50个月（20~60个月）,中位体重15.5 kg（12.0~17.0 kg）。受体中位年龄25岁（18~31岁）,中位体重43.5 kg（34.0~55.0 kg）,中位体重指数（body mass index,BMI）18.3 kg/m2（14.7~22.0 kg/m2）。随访期间,术后受体的血肌酐水平逐渐下降,估算的肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate,eGFR）水平稳步升高,术后半年至3年内肾功能稳定在正常范围。移植肾长径在术后2周内迅速增长（P=0.042）,术后1年内进一步生长。移植肾及人6 个月及1年存活率均为100%。结论：低龄儿童单侧供肾用于成人肾移植是可行、有效的,这将为扩大供肾来源带来希望。     

硼替佐米通过下调Smurf1拮抗大鼠慢性移植肾间质纤维化

目的：通过观察硼替佐米（bortezomib）对于smad泛素化调节因子1（Smurf1）的表达及肾小管上皮细胞?间充质转分化（epithelial?mesenchymal transition,EMT）的影响,探讨硼替佐米抗移植肾纤维化的分子机制。方法：构建大鼠移植肾间质纤维化模型,并用硼替佐米进行干预。通过马松三色（Masson）染色观察硼替佐米对各组大鼠移植肾纤维化程度的影响。通过免疫组化检测硼替佐米对于肿瘤坏死因子?α（TNF?α）、Smurf1、上皮细胞钙黏蛋白（E?cadherin）及α?平滑肌蛋白（α?SMA）表达的影响。以肾小管上皮细胞（HK?2）为对象,以TNF?α作为刺激因子,通过Western blot检测Smurf1、E?cadherin和α?SMA的表达变化。通过慢病毒转染的方式敲低Smurf1在HK?2细胞中的表达,通过Western blot检测TNF?α刺激后E?cadherin和α?SMA的表达变化。将细胞分为对照组、TNF?α组、硼替佐米组及实验组,Western blot检测Smurf1、E?cadherin和α?SMA的表达变化。结果：硼替佐米治疗组大鼠移植肾间质纤维化明显且α?SMA与Smurf1的表达显著低于生理盐水治疗组（P < 0.05）,同时E?cadherin的表达显著高于生理盐水治疗组（P < 0.05）。50 ng/mL TNF?α刺激HK?2细胞24 h后Smurf1和α?SMA的表达明显高于0 h组（P < 0.05）,E?cadherin的表达则明显低于0 h组（P < 0.05）。 敲低Smurf1的表达后,sh?Smurf1组细胞在TNF?α刺激后的E?cadherin表达明显高于sh?con组细胞（P < 0.05）,而α?SMA则明显降低（P < 0.05）。硼替佐米干预后,实验组细胞的E?cadherin的表达明显高于TNF?α组（P < 0.05）,α?SMA的表达则明显低于TNF?α组（P < 0.05）。结论：硼替佐米可以通过抑制Smurf1的表达从而抑制TNF?α诱导的肾小管上皮细胞EMT现象,进而抑制移植肾间质纤维化。