M1型巨噬细胞极化在内皮细胞转分化及慢性移植肾失功中的作用

目的：探究M1型巨噬细胞极化在内皮细胞向间充质细胞转分化（endothelium?to?myofibroblast transition，EndMT）及慢性肾移植失功（chronic allograft dysfunction，CAD）中的作用。方法：从GEO公共数据库中下载GSE21374转录组测序数据，并使用Cibersort软件分析CAD患者移植肾中的免疫细胞的浸润状态。收集本中心CAD患者的移植肾切除标本，使用免疫荧光、聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）和蛋白质印迹法（Western blot，WB）等方法观察M1型巨噬细胞在移植肾组织中的浸润情况。体外脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）和干扰素?γ（interferon?γ，IFN?γ）诱导Raw264.7巨噬细胞向M1极化。Transwell小室构建M1型巨噬细胞和主动脉内皮细胞的共培养模型。使用PCR、WB和细胞免疫荧光观察共培养模型中内皮细胞的CD31与α?SMA的表达情况。结果：基于GEO公共数据库，发现单核?巨噬细胞明显浸润于CAD移植肾组织中（P＜0.05）；在本中心的CAD患者移植肾标本中，CD68（+）iNOS（+）M1型巨噬细胞亦明显浸润于肾小球及间质中，且M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）的mRNA表达量明显增加（P＜0.05）。在细胞共培养模型中发现，M1型巨噬细胞可明显促进内皮细胞发生EndMT过程。结论：M1型巨噬细胞明显浸润于CAD患者的移植肾组织中，并可能通过诱导内皮细胞发生EndMT促进CAD的进展。