肿瘤相关巨噬细胞起源的研究进展

肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）在肿瘤的发生、发展、侵袭、转移及免疫抑制微环境和血管的生成等方面发挥重要作用。近年来的研究提示,TAMs并非单一起源于骨髓单核细胞。但在不同肿瘤中,其起源、表型与功能仍存在争议。对TAMs的起源及其与M1/M2型巨噬细胞的关系和TAMs作为治疗靶点的相关研究进行综述,有助于进一步理解TAMs亚群及其在免疫治疗中意义。     

肺癌微环境中巨噬细胞的作用及免疫治疗机制

肺癌是全球最致命的恶性肿瘤。肿瘤微环境是导致肺癌进展的关键因素。肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages, TAMs)作为肿瘤微环境中的核心调控者,在肺癌发生发展中具有重要作用。TAMs分为经典激活1型(M1型)和交替激活2型(M2型)2种。M1型主要介导抗肿瘤免疫效应,M2型促进肿瘤进展。其功能的不同主要受细胞因子、趋化因子和细胞间相互作用综合调控。以TAMs作为靶点的免疫治疗是近年来肺癌研究的热点,有望成为肺癌治疗的策略之一。本篇将对TAMs在肺癌发生发展中的作用机制、相关免疫治疗的方法进行综述。     

肿瘤相关巨噬细胞的脂质代谢重编程

肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophages,TAMs）是实质肿瘤中最常见的间质细胞类型之一,且与肿瘤微环境的免疫抑制状态有着紧密联系,并促进肿瘤的恶性进展。TAMs内的代谢发生了重编程,并且参与调控其自身的极化以及相应的功能表型。本文详细论述了TAMs中包括三酰甘油、脂肪酸及其衍生物、胆固醇和磷脂在内的脂质代谢重编程以及它们对肿瘤进展的调控。然而,肿瘤细胞与肿瘤微环境间质细胞的代谢极具异质性。肿瘤细胞与间质细胞之间脂代谢重编程的异同点以及重编程如何调控细胞活性的机制值得深入探索。同时,综合考虑肿瘤不同的组织类型、不同的发展阶段,精准靶向干预TAMs脂质代谢重编程,促进TAMs向M1样巨噬细胞极化,将成为代谢调节肿瘤免疫治疗的新策略。     

肿瘤相关巨噬细胞在肿瘤侵袭转移中的作用及其中药调控述评

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)是肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中数量最多的间质细胞,是肿瘤相关免疫细胞的一种,可分为经典活化的巨噬细胞(M1)和替代性活化的巨噬细胞(M2)两种类型。TAMs通过表面分子标志物及其分泌的诱导因子与细胞因子参与肿瘤的发生发展、侵袭转移、免疫抑制等过程。扶正祛邪是中医药治疗肿瘤的基本原则,中药复方主要通过抑制M2型巨噬细胞分化、促进M2型巨噬细胞向M1型巨噬细胞转化等重塑肿瘤微环境,抑制肿瘤的侵袭转移。TAMs抑制肿瘤与促进肿瘤的对立统一的双重作用,与可实现扶正与祛邪相结合的中药复方具有内在一致性。目前,中药调节TAMs的研究主要集中在对TAMs细胞亚型、分泌因子的调节,其具体的靶向分子机制有待进一步研究。     

M1型、M2型巨噬细胞及肿瘤相关巨噬细胞中miR-146a表达的差异

目的：探讨微小RNA-146a（miR-146a）在M1型、M2型巨噬细胞及肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）中表达的差异。方法：将单核细胞系（ THP-1）细胞诱导为M1型、M2型巨噬细胞及TAMs,应用流式细胞仪检测表型后,采用实时荧光定量PCR方法分别检测THP-1、M1型和M2型巨噬细胞及TAMs中miR-146a的表达情况。结果：THP-1细胞中miR-146a的表达量为（0．838±0．030）,M1型巨噬细胞中的表达量为（1．788±0．384）,M2型巨噬细胞中的表达量为（2．760±0．561）,TAMs中的表达量为（2．974±0．661）,差异有统计学意义（F＝12．847,P＝0．002）。其中M1型（P＝0．040）、M2型（P＝0．001）巨噬细胞及TAMs（P＝0．001）中miR-146a的表达量高于THP-1细胞, TAMs（P＝0．015）与M2型巨噬细胞（P＝0．036）中的miR-146a表达量高于M1型巨噬细胞,TAMs与M2型巨噬细胞中miR-146a的表达差异无统计学意义（P＝0．595）。结论：miR-146a在M1型、M2型巨噬细胞中的差异性表达可能与其分化和（或）细胞功能相关;TAMs的表型特征可能与M2型巨噬细胞类似,同时可能具有与M2型巨噬细胞相同的细胞功能。     

CD47在肿瘤防治中的作用

免疫系统对抑制肿瘤的发生发展有重要作用。肿瘤免疫监视即通过免疫系统识别并清除肿瘤细胞。尽管多类免疫细胞介导肿瘤免疫监视,但是近年来研究才发现巨噬细胞在肿瘤的发病机制中发挥重要作用［1］。巨噬细胞的功能包括吞噬作用、抗原呈递、细胞因子的产生,它在维持细胞稳态、病原体防御及免疫应答等方面发挥重要作用。恶性肿瘤组织有大量的巨噬细胞浸润,称为肿瘤相关巨噬细胞（ tumor -associated macrophages,TAMs）。既往研究［2］认为TAMs具有重要的抗肿瘤免疫调节作用,可以直接杀伤肿瘤细胞,或者通过呈递肿瘤相关抗原诱导机体免疫应答清除肿瘤细胞。随着研究深入,学者们认识到TAMs在不同的肿瘤微环境刺激下发生不同性质的活化,包括2种类型： M1型,又称经典活化的巨噬细胞,具有抑制和杀伤肿瘤细胞的作用;M2型,又称替代性活化的巨噬细胞,主要促进肿瘤的发生发展,两者在一定条件下又可互为转换。近年来研究发现许多肿瘤细胞表面CD47表达增高,它可与巨噬细胞表面的SIRPα结合从而抑制巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬和破坏,进而促进肿瘤的形成和发展［3］。本文旨在对CD47在肿瘤发病机制中的作用及用单克隆抗体靶向阻断此通路的治疗作用作一综述。     

肿瘤相关巨噬细胞在口腔鳞状细胞癌发生发展中作用及其靶向治疗的研究进展

肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）发生发展过程中扮演重要角色。根据功能表型不同将TAMs分为M1型和M2型。M1型TAMs通过产生各种促炎因子参与炎症、清除体内病原体、参与抗肿瘤免疫而具有抗肿瘤作用,而M2型TAMs产生各种抗炎细胞因子来抑制炎症进而促进肿瘤的发生发展。大多数TAMs是M2样表型,其为OSCC的发生发展提供了有利的微环境,所以靶向TAMs在未来可成为一种新的治疗OSCC的方法。本文主要对TAMs在OSCC侵袭转移、血管生成中的作用和靶向TAMs治疗OSCC进行综述。     

宫颈癌肿瘤相关巨噬细胞的研究进展

宫颈癌是世界范围内第2常见的妇科恶性肿瘤,且发生率逐年上升。循环单核细胞由多种分子诱导招募至肿瘤微环境中,并分化为M1型和M2型肿瘤相关巨噬细胞,参与宫颈癌的肿瘤免疫和免疫逃避。不同表型的巨噬细胞在肿瘤微环境中起的作用各不相同。本文将对巨噬细胞的来源和分类、参与宫颈癌TAMs形成和活化的分子、巨噬细胞的生物学标志物、TAMs上PD-1的表达情况以及在CC研究中针对TAMs治疗的研究现状展开综述。     

过表达RIP140的肿瘤相关巨噬细胞抑制肝癌细胞的侵袭和增殖

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）中RIP140 的表达对肝癌细胞侵袭、增殖的影响。方法慢病毒介导小鼠腹腔巨 噬细胞（PMs）RIP140 的过表达,Western blot 和Real-time PCR（qRT-PCR）分别检测PMs中RIP140 蛋白以及核酸表达水平, 流式细胞仪分析慢病毒转染率;Western blot、细胞免疫荧光和qRT-PCR 检测肝癌条件培养基（HCM）刺激PMs 后TAMs中 RIP140 的表达变化;HCM刺激PMs以及HCM刺激过表达RIP140 的PMs,qRT-PCR检测TAMs极化指标以及NF-κB和IL-6 的表达;Transwell 实验和细胞流式凋亡实验检测肝癌细胞的侵袭和凋亡;肝癌细胞和PMs以4∶1 比例注射于BALB/c裸鼠皮 下,建立裸鼠皮下肝癌模型,成瘤癌组织HE染色和免疫组化评定肝癌组织大体生长情况和肝癌细胞增殖能力。结果慢病 毒介导PMs RIP140 的过表达,病毒转染效率高,RIP140 过表达明显;HCM刺激PMs后,TAMs中RIP140 呈低表达;HCM诱 导TAMs呈M2 型极化,并且与肿瘤生长密切相关的NF-κB-IL-6 轴处于活化状态;TAMs可促进肝癌细胞侵袭和增殖,抑制 肝癌细胞凋亡。TAMs过表达RIP140 可抑制HCM介导的TAMs M2 型极化并抑制NF-κB/IL-6 通路的激活,减少IL-6 的释 放;除此之外,TAMs过表达RIP140 可抑制肝癌细胞的侵袭和增殖,促进肝癌细胞的凋亡。结论过表达RIP140 的TAMs可 抑制肝癌细胞的侵袭和增殖。其机制可能与TAMs过表达RIP140后抑制TAMs M2型极化有关。     

基于肿瘤相关巨噬细胞靶向调控的抗肿瘤策略

肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages， TAMs）是肿瘤中最丰富的固有免疫细胞，TAMs常表现出抗炎性M2表型，是肿瘤发展、转移和耐药性的关键诱导因素，已经成为肿瘤免疫治疗领域的热门靶标。纳米载体的研究与应用优化了以TAMs为靶点的肿瘤治疗策略，本文根据TAMs的特性与功能，详细阐述了基于TAMs的调控策略，包括TAMs耗竭、抑制TAMs募集和TAMs复极化；同时，为了更高效地应用上述策略并克服治疗中常见的脱靶问题，分析了基于纳米载体的TAMs特异性靶向治疗策略，包括被动靶向至TAMs、巨噬细胞主动靶向策略以及M2-TAMs特异性主动靶向策略；最后，针对单独靶向TAMs疗法的局限性，介绍了纳米递送系统同时靶向TAMs和肿瘤细胞的新型治疗策略，为该策略在肿瘤免疫治疗以及与其他疗法联合治疗中的应用提供新思路。     

肿瘤相关巨噬细胞促进肿瘤血管生成和转移的研究进展

巨噬细胞起源于血液单核细胞,在不同的刺激因素作用下,巨噬细胞可分化为经典激活的巨噬细胞(M1型)和选择性激活的巨噬细胞(M2型).现在认为,肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)具有M2型巨噬细胞表型.TAM在肿瘤中大量浸润被认为是肿瘤患者预后不良的重要标志.TAM通过多种...     

肿瘤相关巨噬细胞肝X受体的激活对抗瘤应答的影响

［摘要］目的： 研究肿瘤微环境、肝X受体（ liver X receptors,LXRs）与肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophage, TAM）的形成及其功能之间的关系。方法： 提取肿瘤组织中的肿瘤相关巨噬细胞,同时提取腹腔巨噬细胞作为对照。在体外实验中巨噬细胞与肿瘤细胞共培养或者使用肿瘤上清处理巨噬细胞, 实时PCR检测巨噬细胞LXRs、IL 10、IL 12的mRNA水平;分别激活LXR和阻断LXR信号通路,观察其对TAM形成的影响。结果： 肿瘤微环境可诱导巨噬细胞LXRs受体高表达,并表现为M2型巨噬细胞的表型,激活LXRs可以促进巨噬细胞向TAM转变,而阻断LXR信号通路则抑制TAM的形成。 结论： 肿瘤微环境能激活LXRs,从而诱导TAM的形成,并促进肿瘤生长、转移和免疫逃逸。     

Oncol2012: 他莫西芬耐药乳腺癌细胞具有肿瘤干细胞特性

Background Cancer stem cells (CSCs) are the cause of cancer recurrence because they are resistant to conventional therapy and contribute to cancer growth and metastasis. Endocrinotherapy is the most common breast cancer therapy and acquired tamoxifen (TAM) resistance is the main reason for endocrinotherapy failure during such therapy. Although acquired resistance to endocrine treatment has been extensively studied, the underlying mechanisms are unclear. We hypothesized that breast CSCs played an important role in TAM-induced resistance during breast cancer therapy. Therefore, we investigated the biological characteristics of TAM-resistant (TAM-R) breast cancer cells. Methods Mammosphere formation and tumorigenicity of wild-type (WT) and TAM-R MCF7 cells were tested by a mammosphere assay and mouse tumor xenografts, respectively. Stem cell markers (SOX-2, OCT-4 and CD133) and epithelial-mesenchymal transition (EMT) markers were tested by quantitative real-time (qRT)-PCR. Morphological observation was performed to characterize EMT. Results After induction of TAM resistance, TAM-R MCF7 cells exhibited increased proliferation in the presence of TAM compared with that of WT MCF7 cells (P<0.05), indicating enhanced TAM resistance of TAM-R MCF7 cells compared with that of WT MCF7 cells. TAM-R MCF7 cells showed enhanced mammosphere formation and tumorigenicity in nude mice compared with that of WT MCF7 cells (P<0.01), demonstrating the elevated CSC properties of TAM-R MCF7 cells. Consistently, qRT-PCR revealed that TAM-R MCF7 cells expressed increased mRNA levels of stem cell markers including SOX-2, OCT-4 and CD133, compared with those of WT MCF7 cells (P<0.05). Morphologically, TAM-R MCF7 cells showed a fibroblastic phenotype, but WT MCF7 cells were epithelial-like. After induction of TAM resistance, qRT-PCR indicated that MCF7 cells expressed increased mRNA levels of Snail, vimentin and N-cadherin, and decreased levels of E-cadherin, which are considered as EMT characteristics (P<0.05). Conclusions TAM-R MCF7 cells possess CSC characteristics, and may be responsible for TAM resistance during breast cancer therapy.     

替代激活的单核细胞促进人乳腺癌细胞SKBR3的生长侵袭

目的 研究不同激活状态的单核细胞在乳腺癌发展中的作用,探索肿瘤相关巨噬细胞在乳腺癌中的作用机制.方法 体外分离培养人外周血单核细胞,分为经典激活、替代激活、空白对照3组,分别采用细菌脂多糖IL-4、培养基进行相应激活.48～72 h后,采用RT-PCR、与人乳腺癌细胞株SKBR3共培养、建立鸡胚尿膜囊血管生成模型等方法检测各组TNF-α、AMAC-1、β-actin mRNA表达的差异,观察3种不同活化状态的单核巨噬细胞对乳腺癌细胞生长的影响以及对肿瘤诱导新生血管形成的影响.结果 经典激活组高表达TNF-α,替代激活组则高表达AMAC-1,3组间分子标志物的表达差异具有统计学意义(P＜0.05).共培养实验显示经典激活的单核细胞呈现出明显抑瘤效应,3 d后效应明显高于其他两组(P＜0.05),替代激活的单核细胞则在第5天开始呈现出明显促肿瘤效应(P＜0.05).在鸡胚尿囊膜血管生成模型中,替代激活的单核细胞可以明显促进肿瘤新生血管的生成(5733±14.82),与经典激活(20.44±6.50)及未激活组(32.22±8.33)相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IL-4可以促进人外周血单核细胞向替代激活的方向分化并高表达替代激活的分子标志物AMAC-1,而替代激活的单核巨噬细胞在与肿瘤细胞的共培养中可以促进肿瘤细胞的生长以及刺激肿瘤新生血管的生成.提示肿瘤相关巨噬细胞在体内很可能主要以替代激活的方式存在,从而直接或间接地促进了肿瘤的进展.     

2-Hexyl-4-Pentylenic Acid (HPTA) Stimulates the Radiotherapy-induced Abscopal Effect on Distal Tumor through Polarization of Tumor-associated Macrophages

Objective The aim of this study was to explore the effects of 2-hexyl-4-pentylenic acid (HPTA) in combination with radiotherapy (RT) on distant unirradiated breast tumors.Methods Using a rat model of chemical carcinogen (7,12-dimethylbenz[a]anthracene,DMBA)-induced breast cancer, tumor volume was monitored and treatment response was evaluated by performing HE staining, immunohistochemistry, immunofluorescence, qRT-PCR, and western blot analyses.Results The results demonstrated that HPTA in combination with RT significantly delayed the growth of distant, unirradiated breast tumors. The mechanism of action included tumor-associated macrophage (TAM) infiltration into distant tumor tissues, M1 polarization, and inhibition of tumor angiogenesis by IFN-γ.Conclusion The results suggest that the combination of HPTA with RT has an abscopal effect on distant tumors via M1-polarized TAMs, and HPTA may be considered as a new therapeutic for amplifying the efficacy of local RT for non-targeted breast tumors.     

Relationship Between Programmed Death-ligand 1 and Clinicopathological Characteristics in Non-small Cell Lung Cancer Patients

Objective To evaluate the correlation between programmed death-ligand 1 （PD-L1） expression in primary lung cancer cells, tumor associated macrophages （TAM） and patients＇ clinicopathological characteristics. Methods From 2008 to 2010, 208 non-small cell lung cancer patients who underwent surgery or CT-guided biopsy were recruited from Huadong Hospital, Fudan University. Immunohistochemistry staining was performed to evaluate the PD-L1 expression in both primary lung cancer cells and CD68 positive TAM.     

瑞戈非尼通过CSF1-R信号通路调节肿瘤相关巨噬细胞增强PD-1抗体在结直肠癌中疗效的研究[1]

目的 探讨瑞戈非尼（Regorafenib，Reg）通过CSF1-R信号通路调节肿瘤相关巨噬细胞（Tumor-associated macrophages，TAMs）增强PD-1抗体（PD-1 antibody，anti-PD-1）在结直肠癌中的疗效，并分析其机制。方法 接种结肠癌细胞CT26于BALB/c小鼠，建立结直肠癌移植瘤模型，模型小鼠随机分为CT26组、CT26+Reg组、CT26+anti-PD-1组和CT26+Reg+anti-PD-1组，进行药物治疗后观察荷瘤小鼠移植瘤的生长情况。取肿瘤组织，通过Western Blot和免疫组化检测瘤内p-CSF1-R和CSF1-R表达，流式细胞术检测肿瘤单细胞悬液中TAMs并区分M1、M2表型。提取小鼠骨髓来源巨噬细胞（Bone marrow-derived macrophages，BMDMs），分别诱导成M1、M2型巨噬细胞，并用Reg处理细胞，qRT-PCR检测相关基因表达水平，Western Blot检测巨噬细胞表面CSF1-R蛋白表达。结果 相较于CT26组，药物处理后肿瘤体积和质量均显著减小，与单独使用Reg或anti-PD-1相比，Reg和anti-PD-1联合用药物使移植瘤的体积和重量进一步减小；Western Blot和免疫组化结果显示，Reg处理后，瘤内p-CSF1-R表达显著下调；流式结果显示Reg处理后，M2型巨噬细胞比例显著下降，M1型巨噬细胞比例显著增加；qRT-PCR结果也表明，Reg处理能增加BMDMs中M1表型比例并下调M2表型比例，同时Western Blot结果显示，Reg处理能显著下调M2型巨噬细胞表面p-CSF1-R蛋白的表达水平。结论 Reg通过CSF1-R信号通路调控TAMs，增强anti-PD-1在结直肠癌中的疗效。     

罗格列酮对耐药乳腺癌细胞影响的研究

目的：探讨罗格列酮( ROS)对耐他莫西芬( TAM)的乳腺癌细胞MCF-7/TAM体外生长的影响,及对其耐药性的逆转效果和作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝( MTT)比色分析法测定ROS作用于MCF-7/TAM细胞后的抑制率及逆转耐药的效果;采用流式细胞术检测ROS作用MCF-7/TAM细胞后的凋亡率;采用实时定量荧光 PCR 技术检测ROS作用MCF-7/TAM细胞后对FOXA1、ERα、ErbB-2和P53基因表达的影响。结果 ROS干预MCF-7/TAM细胞后,呈量-效和时-效关系抑制其增殖。半数抑制浓度(136μmol/L)的ROS对MCF-7/TAM细胞具有明显的逆转耐药效果,逆转耐药倍数为2.05倍。高浓度可诱导MCF-7/TAM细胞凋亡。半数抑制浓度(136μmol/L)的ROS作用MCF-7/TAM细胞后,能够上调FOXA1、ERα和P53基因表达水平(P<0.05),下调ErbB-2基因表达水平(P<0．05)。结论ROS可抑制MCF-7/TAM细胞增殖,高浓度ROS可诱导其凋亡,其机制可能与上调 P53基因表达有关。 ROS 可逆转MCF-7/TAM细胞的耐药性,逆转机制可能与上调FOXA1和ERα基因表达,下调ErbB-2基因表达有关。     

人参炔醇重塑巨噬细胞表型调控乳腺癌细胞生物学行为

目的: 探讨人参炔醇对巨噬细胞表型和功能的调控作用及对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法: 用人参炔醇处理4T1乳腺癌细胞,观察各项生物学行为变化;用4T1乳腺癌细胞培养上清液预处理RAW264.7 巨噬细胞系48 h,诱导其向M2型巨噬细胞极化;极化后的巨噬细胞再分别经不同浓度人参炔醇(0,8,16 μg/mL)处理24 h,用qRT PCR、蛋白质印迹、流式细胞术、ELISA法联合检测各组表型、抗原递呈相关分子MHCⅡ类分子、CD80、CD86表达改变、分泌谱变化,以及细胞系迁移、侵袭等。结果： 与0 μg/mL组相比,乳腺癌细胞系经8,16 μg/mL人参炔醇处理后,细胞增殖率明显降低(P均＜0.01),细胞凋亡率明显增加(P均＜0.05),癌细胞趋化作用减弱; M2型巨噬细胞经16 μg/mL人参炔醇刺激后,细胞表型逆转,Arg 1表达明显降低(P均＜0.01),iNOS表达明显增加(P均＜0.01),MHCⅡ、CD80、CD86表达升高;并伴随IL 1β、TNF α表达升高(P均＜0.01),IL 4、IL 8、IL 10表达降低(P均＜0.05);经人参炔醇处理的巨噬细胞能够明显减少乳腺癌细胞的迁移与侵袭。结论： 人参炔醇可重塑巨噬细胞表型和功能,从而间接改变乳腺癌细胞生物学行为。     

乳腺癌组织中巨噬细胞浸润与bcl-2,bax表达的关系

目的 :研究巨噬细胞在乳腺癌组织中的浸润状况及其与凋亡相关因子bcl 2 ,bax表达的关系 .方法 :采用抗CD6 8(MΦ标记物 )、bcl 2和baxmAb分别对 4 1例乳腺癌组织进行免疫组化染色 ,使用SPSS 10 .0统计软件进行分析 .结果 :乳腺癌癌巢及间质中均有CD6 8+ 细胞浸润 ,CD6 8+ 细胞数与bcl 2表达强度显著负相关 (rS=- 0 .4 4 1,P =0 .0 0 4 ) ,与bax表达强度正相关 (rS=0 .348,P =0 .0 2 6 ) .CD6 8+ 细胞数与患者年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移和病理学类型无关 (P值均 >0 .0 5 ) .结论 :巨噬细胞的浸润与乳腺癌组织中细胞凋亡的形成和清除关系密切 ;与乳腺癌的生长和转移无明显关系