黄连药材DNA提取及RAPD反应体系的优化

目的探索黄连药材DNA的提取并对其RAPD反应体系进行优化。方法采用目前较为流行的苯酚法、CTAB法、高盐低pH值法,通过电泳、紫外分光光度仪检测及RAPD扩增效果确定黄连药材基因组DNA提取的最佳方法。结果CTAB法为黄连药材基因组DNA提取的最佳方法,建立了适合黄连药材的RAPD反应体系:25μL体系中内含1×PCRbuffer、2mmol/LMg2 、100~150μmol/LdNTP、20ng引物、40ng模板、1UTaq酶。结论CTAB法及黄连药材的RAPD反应体系可以用于黄连药材的RAPD分析。     

金银花药材脱氧核糖核酸(DNA)提取方法的研究

目的:研究金银花药材总脱氧核糖核酸(DNA)的提取方法。方法:对经典的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法进行了改良,采用改良的CTAB法提取金银花药材的总DNA,通过紫外吸收、琼脂糖凝胶电泳检测其纯度和浓度。结果:用改良的CTAB法提取的总DNA的OD260/OD280比值在1.76-1.85之间,干药材提取率为89.8-325.4μg/g。结论:用改良CTAB法提取的基因组DNA纯度高,符合分子生物学的要求。     

味连基因组DNA提取方法研究

目的:研究从味连新鲜植株中提取的DNA与干燥药材基因组DNA的差别。方法:在改良的CTAB法基础上对味连新鲜植株与干燥药材提取总DNA,采用紫外分光光度法及琼脂糖凝胶电泳法检测DNA纯度与浓度。结果:从新鲜植株中提取的DNA浓度较高,从干燥药材中提取的DNA有降解现象。结论:味连的新鲜植株及干燥药材中均可以提取DNA,但中药材的干燥、加工、贮藏等过程会对DNA有一定的降解。     

川党参的基因组DNA提取与ISSR引物筛选

目的 筛选最适党参基因组DNA的提取方法及ISSR (inter-simple sequence repeat)引物,为研究党参种植资源遗传多样性及DNA鉴定奠定基础.方法 以党参嫩叶作为材料,采用常规SDS法、改良CTAB法和试剂盒法3种提取方法基因组DNA,用优化的ISSR-PCR反应对100条引物进行筛选.结果 以党参嫩叶为材料提取基因组DNA,改良CTAB法效果最佳.从公布的100条ISSR引物中筛选出10条引物,能扩增条带清晰、稳定性好、多态性高的DNA条带.结论 以党参嫩叶为材料提取基因组DNA进行ISSR分子标志研究遗传多样性时应采用改良CTAB法,筛选出合适的引物在ISSR分子标志中很重要.     

忍冬叶片基因组DNA的提取与分析

目的:获取高质量的忍冬基因组DNA。方法:采用改良CTAB法从忍冬叶片中提取DNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法、酶切检测其质量,并与常规CTAB法比较。结果:改良CTAB法所得DNA优于常规CTAB法,电泳条带清晰,完整性好,纯度高,能被完全酶切。结论:改良CTAB法适合忍冬基因组DNA的提取。     

玄参总DNA提取方法的比较研究

目的探讨药材玄参总DNA的最佳提取方法。方法分别采用SDS法和CTAB法提取药材玄参总DNA,并对其进行核酸含量测定和电泳检测。结果采用SDS法提取的总DNA其OD260/OD280=1.83,而采用CTAB法提取的总DNA其OD260/OD280=1.64;DNA电泳检测显示采用SDS法提取的总DNA条带清晰,而采用CTAB法提取的总DNA出现严重的拖尾现象。结论用SDS法提取药材玄参总DNA优于CTAB法。     

鼠麴草基因组DNA的提取方法及随机扩增多态性DNA分析

目的以鼠麴草的叶为材料,研究鼠麴草DNA的提取方法及对其进行随机扩增多态性DNA（RAPD）的分析。方法采用略改进的十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法、高盐低pH法、木本法和十二烷基硫酸钠（SDS）法分别提取鼠麴草叶的基因组DNA。通过RAPD分析所提取的DNA,比较所用的提取方法。结果CTAB法得到DNA的A260/A280为1.937,浓度为992.25μg/ml,优于其他3种方法。结论CTAB法是4种方法中最佳的方法。     

不同产地连翘新鲜果实DNA提取方法和质量评价研究

目的建立连翘新鲜果实中高质量DNA的提取方法,为从分子水平研究和评价连翘药材质量奠定基础。方法采用改良的CTAB法提取连翘的总DNA,应用琼脂糖凝胶电泳法、分光光度法与PCR法对连翘DNA产率和质量进行检测评价。结果 14批连翘药材核酸蛋白仪测定值A260/A280均在1.7~1.9之间,改良CTAB法提取的连翘总DNA浓度较大,干扰较小,较高质量的DNA可进行PCR扩增,1%琼脂糖凝胶电泳之后用紫外成像仪观察结果正常。结论改良CTAB法适合连翘新鲜果实中DNA的提取,方法简单可靠。     

两种提取白桂木基因组DNA方法的比较研究

[目的]寻找适合白桂木基因组DNA的提取方法。[方法]采用改良的CTAB法及试剂盒法提取白桂木基因组DNA。用紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法检测白桂木DNA纯度、浓度,比较两种方法的适用性。[结果]试剂盒法能够较好去除多糖及其他次生代谢产物。[结论]试剂盒法更适合从白桂木中提取高质量的DNA。     

土家族医药文化视角下中药化学教学的实践与思考

土家族是鄂、湘、川、黔毗连地带一支历史悠久的少数民族,具有悠久而丰富的医药文化。竹节参、味牛膝、烈叶星果草、头顶一颗珠、亮叶桦、五鹤续断等无比珍贵的土家族道地药材是土家医药文化的重要组成部分。随着恩施州的社会、经济、文化与交通     

新疆党参和潞党参对小鼠脑SOD,MDA的影响

潞党参与新疆党参体外均具有抗自由基作用 ,且 IC5 0 分别为 0 .111和 0 .10 1mg/ m L。动物体内实验发现潞党参对小鼠脑 SOD、MDA无明显影响 ,而新疆党参可使小鼠脑 SOD活性增强和使 MDA含量减少明显高于对照组 (P<0 .0 1)     

党参花粉的免疫药理作用

本文以小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、E-玫瑰花结、体内淋转、溶血空斑及血清溶血素生成试验为指标,观察了党参花粉对正常纯系小鼠和用免疫抑制剂处理小鼠的影响。结果发现:党参花粉能增强正常纯系小鼠(C_(57)BL/6)和用强的松处理小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬功能,增加空斑形成细胞数和血清溶血素抗体的生成;并能对抗环磷酰胺对E花环及淋转的抑制作用。初步提示:党参花粉对抗体的非特异性免疫功能、体液及细胞免疫功能均有一定的增强作用,尤其是当抗体免疫功能低下时,这些作用就更为明显。     

高效液相色谱法测定不同产地续断药材中木通皂苷D的含量

【目的】考察不同来源续断药材中木通皂苷D的含量,为评价续断药材质量提供参考。【方法】采用反相高效液相色谱法测定续断药材中木通皂苷D的含量,色谱柱KromasilC18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈-水梯度洗脱,检测波长212nm,流速为1．0ml／min。【结果】在实验条件下木通皂苷D分离效果良好,0．036～3．695μg范围内其线性关系良好（r=0．9999）;平均加样回收率为104．87％,RSD为1．85％。【结论】该方法准确、可靠,为续断药材的质量评价提供研究基础。     

中药多糖对红细胞膜相CD35免疫活性的调节作用

研究黄芪、灵芝、茯苓、党参、当归、天花粉等中药多糖对红细胞膜相CD35免疫活性的调节作用。方法 :采用 10 ?35单克隆抗体阻断试验 ,比较以上中药多糖在 10 ?35单克隆抗体阻断前后红细胞膜相CD35活性的变化。结果 :4 0例健康献血员和 30例恶性肿瘤患者的红细胞经以上中药多糖作用后 ,其RBC .C3bRR与对照组相比明显提高 (P <0 .0 1)。用 10 ?35单克隆抗体阻断恶性肿瘤患者的红细胞膜相CD35后 ,其RBC .C3bRR明显下降 (P <0 .0 1)。用以上中药多糖作用过的补体致敏酵母菌作红细胞RBC .3bRR试验 ,其花环率无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,而将以上中药多糖作用过的红细胞作红细胞RBC .C3bRR试验 ,其花环率明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :研究说明以上中药多糖能增强健康献血员和恶性肿瘤患者的红细胞免疫功能 ,并提示以上中药多糖调节红细胞膜相CD35免疫活性的机制 ,与补体致敏酵母菌无关 ,而与红细胞膜相CD35活性有关。     

PP333在党参生产中应用的初步研究

通过在党参生产中的应用研究，发现用150mg／Lpp333于幼苗期进行叶面喷施，可以提高党参苗叶绿素含量，抑制其茎叶生长，显著提高党参的平均根鲜重和干重，并显著增加其干成品的醇浸出物含量。因此，此技术的应用可使党参增产优质。     

RP-HPLC法测定党参内酯和党参炔苷的含量及相关性研究

目的：分析潞党参、素花党参、川党参中党参内酯和党参炔苷的含量,对实验结果进行比较,找出其相关性,以更好地控制党参的品质。方法：采用反相高效液相色谱法分析,色谱柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm,5μm）。流动相为以乙腈∶水（70∶30）,测定党参内酯的含量,检测波长为220nm;以乙腈∶0.1%HAC（26∶74）为流动相,测定党参炔苷的含量,检测波长为267.3nm。结果：党参内酯的线型范围为0.014～0.280μg（r=0.9997）,平均回收率为100.4%,RSD为1.90%（n=6）党参炔苷的线型范围为0.065～1.040μg（r=0.9999）;平均回收率为100.8%,RSD为1.60%（n=6）。在选定的色谱条件下,这两种活性成分的分离度良好。结论：党参内酯和党参炔苷含量之间有一定的相关性。     

川续断中生物碱的研究

对川续断Dipsacus asperoides C.Y.Cheng et T.M.Ai根中的二个生物碱斑点,进行跟踪分离并纯化,并经光谱学方法鉴定其结构为venoterpine(B_1)及cantleyine(B_2),并非文献中所载的龙胆碱(gentianine)。     

党参及胰岛素对小鼠神经元蛋白质组表达模式的影响

目的:全面评价党参及胰岛素对细胞的综合生物学效应,获得其蛋白质组表达模式,以应用于药物的鉴定和质量控制.方法:原代培养小鼠神经元,随机分为三组,即党参刺激组、胰岛素刺激组和空白对照组,药物作用20分钟后,裂解细胞并提取全细胞蛋白,双向电泳分离,银染,ImageMaster 2D Platinum软件进行差异蛋白质组分析,EPCLUST软件进行树状分层平均距离聚类分析,获得蛋白质组表达模式及类型.结果:在小鼠神经元双向电泳图谱上共检获并匹配差异表达蛋白质斑点共计431个,根据其表达模式分为六大类型,即全抑制型、党参刺激组单一抑制型、胰岛素刺激组单一激活型、双向调控型、党参刺激组单一激活型和全激活型.结论:①党参及胰岛素对小鼠神经元蛋白质组表达模式的影响存在一定的规律性;②党参及胰岛素作用于小鼠神经元的生物学效应存在一定的一致性,但其差异更大.因此,蛋白质组表达模式分析可以应用于药物的鉴定与质量控制.     

党参对兔胃十二指肠粘膜中胃泌素、生长抑素的影响

目的：观察党参对胃十二指肠粘膜组织中胃泌素，生长抑素含量的影响，以探索党参治疗胃炎及消化性溃疡的作用机制。方法：选择日本大耳白兔40只，随机分成实验组和对照组，分别灌喂党参煎剂或蒸馏水，每日一交，一个月后用放免法检测胃窦及十二指肠粘膜组织中的胃泌素和生长抑素浓度。结果：灌喂党参煎剂后胃窦及十二指肠粘膜组织 胃泌素浓度与对照组相比，差异不显著（P＞0．05）。灌喂党参煎剂后胃窦及十二指肠粘膜组织生长抑素浓度明显提高（P＜0．01）。结论：党参能增加兔的胃及十二指肠粘膜中生长抑素的含量，提示党参有益于消化性溃疡的治疗。     

中西医结合治疗早期先兆流产97例疗效观察

目的：观察中西医结合治疗先兆流产的临床疗效。方法：将189例先兆流产患者分为2组。对照组92例,采用维生素E、叶酸及促绒毛膜性腺激素治疗。治疗组97例,在对照组的基础上配合中药汤剂口服（处方：菟丝子、川断、桑寄生、阿胶、黄芩、党参、白术、白芍、炙甘草）。结果：治疗组治愈53例,显效22例,有效14例,总有效率为91.75%。对照组治愈7例,显效17例,有效45例,总有效率为75.00%。两组总有效率比较,差异有非常显著性意义（P〈0.01）。结论：中西医结合治疗先兆流产疗效显著。