非诺贝特治疗急性高脂血症性胰腺炎临床研究

目的探讨非诺贝特治疗急性高脂血症性胰腺炎的临床疗效。方法选取2012年重庆市璧山县人民医院消化内科诊治的轻、中度急性高脂血症性胰腺炎住院患者36例,随机分为对照组和治疗组,对照组禁食禁饮,按常规治疗,治疗组加用非诺贝特200mg口服,每天1次。结果 2组患者治疗总有效率相近。加用非诺贝特治疗急性高脂血症性胰腺炎,可以迅速降低血三酰甘油水平,促进C反应蛋白恢复正常,缩短患者腹痛缓解和肠道功能恢复所需时间,降低治疗费用。结论非诺贝特不能显著提高疗效,但可促进急性高脂血症性胰腺炎患者缩短疗程,减少人均住院时间和人均住院费用,值得临床推广。     

小鼠H22肝癌细胞中高表达膜蛋白的初步分析

目的：为了对小鼠H22肝癌细胞中高表达膜蛋白进行初步的分析并探索其与肿瘤细胞恶性行为的相关关系。方法：分别培养并裂解小鼠正常旰细胞及H22肝癌细胞株,采用疏水性裂解液分步提取膜蛋白,双向电泳分离。ImageMaster 2D Platinum软件对电泳图谱进行对比分析,选择在H22细胞中典型的高表达膜蛋白并采用MALDI-TOF—MS进行鉴定。结果：从H22细胞中提取的膜蛋白约60％表现为高表达。8个典型的在H22细胞中高表达的膜蛋白被鉴定为紧联蛋白ZO-2、HMG—CoA还原酶、囊泡蛋白分选相关蛋白52、分选和装配结构组分50、巨噬细胞清道夫受体Ⅰ／Ⅱ型、硫酸酯酶修饰因子2、PKC和CKU底物蛋白3和C90rf135蛋白。结论：H22肝癌细胞中大多数膜蛋白表现为高表达。从已鉴定的膜蛋白推测,H22细胞功能改蛮可能涉及细胞迁移、膜融合、信号转导、基因表达调摔及能量代谢等．这种改变可能与肿瘤细胞的恶性行为相关。     

中药作用后神经细胞蛋白质双向电泳技术的建立

目的：建立中药作用后神经细胞蛋白质组的双向电泳技术,提高其分辨率及重复性。方法：中药四君子汤作用小鼠神经细胞,提取蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦为第一向,再以垂直SDS-PAGE进行第二向分离,银染显色。结果：通过实验条件的多次优化获得了较为满意的四君子汤作用小鼠神经细胞蛋白质双向电泳图谱。结论：初步建立了中药四君子汤作用后小鼠神经细胞蛋白质组双向电泳分析方法,具有较好的分辨率和重复性,为进一步较为系统、全面、准确的评价中药及其复方制剂的作用机制和药效提供方法学基础。     

小鼠肝癌细胞H22膜蛋白组的双向电泳

目的 运用双向电泳及生物信息学技术,对小鼠肝癌细胞H22与正常肝细胞的膜蛋白进行比较和鉴定,以期为探索膜蛋白在肝癌发生,发展及侵袭转移过程中的作用提供实验依据.方法 运用顺序抽提法结合与双向电泳兼容的膜蛋白抽提试剂盒提取小鼠肝癌细胞H22和正常小鼠肝细胞膜蛋白,用考马斯亮蓝法定量,经双向凝胶电泳分离、银染,Image Master 2D Platinum软件分析,切取差异蛋白点,采用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱技术检测,Aldente软件检索Swiss-Prot数据库进行匹配鉴定. 结果与正常小鼠肝细胞膜蛋白双向电泳图谱对比分析鉴定了8个在小鼠肝癌细胞H22中表达明显增强的膜蛋白,分别为硫酸酯酶修饰因子2,蛋白激酶C和肌酸激酶Ⅱ底物蛋白3,序列装配结构组件50同系物,巨噬细胞清道夫受体Ⅰ/Ⅱ,非特异蛋白C9或f135同系物,紧密结合蛋白ZO-2,3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶,空泡蛋白序列相关蛋白52同系物.结论 已鉴定的8个膜蛋白的生理功能涉及细胞代谢、细胞增殖、细胞信号转导、细胞骨架等,且在肝癌细胞H22中表达明显增强,提示小鼠肝癌细胞H22发生发展及侵袭转移可能涉及相关膜蛋白生理功能的改变.     

四君子汤对小鼠神经元表达蛋白质组的影响

目的：研究四君子汤对小鼠神经元表达蛋白质组的影响。方法：培养小鼠神经元7天，随机分为两组，中药组加入500mg／ml的四君子汤，对照组加入等量的培养基，药物作用20分钟，裂解细胞，提取全细胞蛋白。双向电泳（2-DE）分离，ImageMaster 2D Platinum软件进行差异表达蛋白质组分析，基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）鉴定蛋白质。结果：在四君子汤作用于小鼠神经元表达蛋白质组的2-DE图谱上共检出蛋白质斑点410个，其中258个为表达增强的蛋白质斑点；鉴定了与四君子汤作用相关的6种蛋白质，分别是真核翻译起始因子3亚基5、锌指蛋白148、釉丛蛋白作用蛋白11、肌浆网／肌内质网钙ATP酶2、神经丝M蛋白和TRAF家族成员相关的NF-B激动子，它们均属于磷酸化蛋白质。结论：四君子汤作用于小鼠神经元的表达蛋白质组与对照组比较存在明显的差异；四君子汤对小鼠神经元的作用极有可能是通过相应的细胞信号转导网络系统来实现的。     

人参皂甙Rbl对人肾小管上皮细胞表达蛋白质组的影响

目的:研究人参皂甙Rbl对人肾小管上皮细胞表达蛋白质组的影响。方法:人肾小管上皮细胞株(HK-2)常规培养,随机分为两组,实验组加入5μg/ml的Rbl,对照组加入等量的培养基,药物作用20min,裂解细胞,提取全细胞蛋白。双向电泳(2-DE)分离,ImageMaster 2D Platinum v5.0软件进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质。结果:通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,实验组的2-DE图谱共检出蛋白斑点为429个,其中236个为表达增强的蛋白斑点;经质谱鉴定的与Rbl作用相关的4个差异表达的蛋白斑点包括:普通转录因子ⅡH亚基1变体、双链断裂修复蛋白rad-21同源物、富含亮氨酸重复序列蛋白-45、DNA依赖性蛋白激酶,它们均属于磷酸化蛋白质。结论:Rbl作用于人肾小管上皮细胞的表达蛋白质组与对照组相比较存在明显的差异;Rbl对人肾小管上皮细胞的作用极有可能是通过相应的细胞信号转导网络系统来实现的。     

抗幽门螺杆菌的序贯治疗与传统治疗的疗效观察

目的探讨阿莫西林和左氧氟沙星组成的14d序贯疗法和传统三联法治疗幽门螺杆菌感染的临床疗效。方法该院2011~2013年收治的128例由胃镜诊断的相关胃病患者,随机分为序贯治疗组和传统三联治疗组,各64例,序贯治疗组患者前7d给予兰索拉唑、阿莫西林;后7d兰索拉唑、克拉霉素、呋喃唑酮。传统三联治疗组患者采用标准三联法,用药为14d的兰索拉唑、阿莫西林、克拉霉素。结果序贯治疗组患者的幽门螺杆菌根除率(95.31%)显著高于传统三联治疗组患者(78.13%),差异有统计学意义(P0.05)。2组患者的不良反应和依从性比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论序贯治疗可作为幽门螺杆菌感染患者的首选疗法。     

研究型生物化学实验教学改革的初步探索

通过对研究型生物化学实验教学改革的尝试,初步探索了研究型生物化学实验教学项目的评价及实验考核体系,探讨了研究型实验在教学实践中对学生科研创新能力的培养。通过上述教学的探索和实践,提出了研究型生物化学实验教学中存在的一些问题。     

ERK信号转导途径具有自适应控制作用

目的 分别以ECF和mClu为刺激物来分析和比较ERK和PKC信号转导途径的作用特点和机制。方法：把两个途径所涉及的每一步生物化学反应转化成化学动力学反应方程，确定每一反应方程所对应的动力学参数，输入计算机进行模拟数学计算。结果：模拟计算的Time—[ERKPP]t曲线和[Ca^2 ]t—[PLCβ］t曲线与实验结果相符；经过ERK途径产生的活化SHC和双磷酸化ERK随时间变化的浓度曲线呈蜂形，而经过冈PKC途径产生的活化PLCβ和活化PKC随时间变化的浓度曲线则呈典型的持续激活曲线。结论：ERK信号转导途径具有自适应控制作用，故该途径中的信号分子浓度可随时间的推移而逐渐降低。