荧光定量PCR检测TTV方法学建立及临床应用

目的　建立一种灵敏度高、特异性好、操作简便的荧光实时定量PCR技术。方法　设计针对TT型肝炎病毒(TTV)基因保守序列非转录区的一对引物和一条荧光基团双标记探针。将PCR扩增所得的产物片段克隆 ,作为定量检测的标准品。对 36例丙肝患者及 12 3例不同血清标志物阳性的乙肝患者、16 6例健康体检者血清中TTVDNA定量检测 ,评估TTVDNA在不同人群中检出阳性率的差异显著性。结果　该方法检测TTVDNA的灵敏度高于普通套式PCR ELISA方法 ,线性范围为 10 2～ 7拷贝 /ml;批间CV为 13.2 %～ 16 .0 % ,批内CV为 6 .5 %～ 11.3%。健康体检者、丙肝患者、乙肝患者三组人群阳性检出率无显著性差异 ;且乙肝患者 (TTVDNA )血清ALT水平与TTVDNA载量无显著相关性 (P >0 .0 5 ) ;乙肝患者血清ALT异常与正常两组TTVDNA阳性检出率无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　该方法操作简单、灵敏度高、特异性好、结果数据化 ,适合于临床实验室进行临床标本的TTVDNA定量检测。     

南京市生殖器疱疹人群乙肝、丙肝和艾滋病检测结果分析

目的：了解南京市性病门诊中生殖器疱疹人群中乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和艾滋病病毒的携带情况。方法：收集南京市性病门诊HSV阳性血液样本266份,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV表面抗原、HCV抗体和HIV抗体。结果：266份生殖器疱疹人群血液样本中HBV、HCV及HIV的感染率分别为11.65%（31/266）、2.26%（6/266）,1.13%（3/266）。结论：HSV/HBV混合感染率高于HSV/HCV混合感染率和HSV/HIV混合感染率。HSV/HBV双重感染在通过性接触途径而感染HSV者中多见,性病门诊中感染单纯疱疹病毒（HSV）人群可易感HBV、HCV、HIV,尤其易感HBV,要引起高度重视。     

洛阳市城乡幼儿园儿童蛲虫感染情况调查

目的：了解洛阳市城乡儿童蛲虫感染情况并为该病的防治提供依据。方法：采用透明胶纸拭子法，将透明胶纸粘贴于受检者肛门周围后取下贴在玻片上显微镜下检查虫卵。结果：城市和农村儿童蛲虫感染率分别为２１７３％和６５５７％，两者有显著性差异（Ｐ＜００１）。男女儿童感染率分别为４６４５％和４３９８％，两者无显著性差异（Ｐ＞００５）。城市儿童各年龄组感染率为５７１％～２８．００％，其中４岁组儿童感染率最高为２８％。农村儿童各年龄组感染率为６２７％～６７．２％，各年龄组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：农村儿童感染率显著高于城市儿童，男女儿童之间无明显差别。     

云南省澜沧江下游地区人、鼠血清三种蚊媒病毒抗体调查

目的;对澜沧江下游地区的思茅,澜沧,景洪,勐腊,孟海5个县,市进行三种蚊媒病毒的抗体调查,了解当地蚊媒病毒的流行情况。方法：血凝抑制试验。结果：在人血清中,乙型脑炎的阳性率为46．94％,基孔肯雅的阳性率为2．63％,辛德毕斯的阳性率为1．93％;在鼠血清中,乙型脑炎的阳性率为16．15％,基孔肯雅的阳性率为0．73％,辛德毕斯的阳性率为0．73％。结论：证实澜沧江下游地区在人群和鼠间存在乙型脑炎,基孔肯雅和辛德毕斯病毒的感染。     

HBV阳性肝病者肾组织内HBSAg和HBCAg的形态研究

从尸检材料中获得３０例ＨＢＶ阳性的肝组织，观察其组织学，并进行ＨＢＳＡｇ、ＨＢＣＡｇ的免疫组化染色。根据ＨＢＡｇ的染色形态，将其分成两类：反映病毒活跃复制的第一类（１８例）；病毒可能呈整合状态的第二类（１２例）。同时检测肾组织内ＨＢＳＡｇ和ＨＢＣＡｇ的表达情况，其ＨＢＡｇ阳性者１２例，阳性率为４０．０％。其中肾小球阳性者１０例，分布主要在系膜区和沿毛细血管袢，也有核内ＨＢＣＡｇ表达；肾小管ＨＢＡｇ阳性１２例，其中ＨＢＳＡｇ阳性１１例，形态有膜型、弥漫型、周边型和包涵体样型，ＨＢＣＡｇ阳性５例，形态有弥漫型、膜型或伴间质分布及核内表达。肾小管ＨＢＡｇ表达与肾小管和肾间质病变有关。     

122例艾滋病患者合并乙肝病毒 丙肝病毒感染的临床流行病学研究

目的 研究在抗逆转录病毒药物治疗(HAART)状态下HIV/AIDS患者合并乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)的流行状况以及相关血清生化和病毒学特征.方法 对122例正在接受HAART治疗的HIV/AIDS患者采集血标本,使用酶免法(ME-IA)检测乙肝五项指标(HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc)、肝功能,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙型肝炎病毒抗体,运用RT-PCR法对丙肝病毒抗体阳性标本以及表面抗原和/或核心抗体阳性标本分别进行HCV-RNA以及HBV-DNA测定.以43名单纯HCV感染者作为对照组进行研究.结果 122名 HIV/AIDS患者,乙肝五项指标全阴性97例(78.86％),表面抗原阳性3例(2.46％),表面抗体阳性者总计19例(15.57％),单纯核心抗体阳性者3例(2.46％).HCV 抗体阳性84例(68.85％),84例HCV抗体阳性标本中HCV-RNA 阳性58例(69.05％),HIV/HCV/HBV合并感染者为0.HIV/HCV合并感染组 HCV-RNA 水平与感染者性别,CD4 +细胞数水平无明显差异(P＞0.05);HIV/HCV合并感染组与单纯HCV感染组 HCV-RNA水平、肝功能异常率无明显差异(P＞0.05).结论 HIV感染者HBsAg阳性率低于普通人群,HIV/HCV合并感染的比例显著高于普通人群.HIV/HCV合并感染与单纯HCV感染者血清生化及病毒学改变相似.     

728例急慢性肝病病因的血清学诊断分析

对728例急慢性肝病患者进行了甲、乙、丙型肝炎病毒标志物的检测。结果显示：甲型肝炎病毒（HAV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）感染率分别为25．8％、67．5％、21．6％，双重感染率为20．5％，三重感染率为1．8％，三型病毒标志物均阴者67例（9．2％），提示本地区肝病以HBV感染为主。性别与感染肝炎病毒类型关系不大（P＞0．05）。小儿HAV感染率明显高于成人（P＜0．01），成人HBV感染率高。丙型肝炎病毒抗体在各年龄组均可检出，且阳性率随年龄增加而升高。     

HIV与HBV/HCV共感染的临床研究进展

人类免疫缺陷病毒（HIV）,乙型肝炎病毒（HBV）及丙型肝炎病毒（HCV）具有相似的传播途径,均可通过血液（包括输血和输血制品）、性接触（包括同性接触和异性接触）、母婴垂直及静脉注射吸毒等途径传播.所以,HIV合并HBV/HCV感染比较常见,引起了国内外研究人员的重视,近年来的相关研究取得了一些成果.该文就目前HIV合并HBV/HCV感染的流行病学、临床治疗等方面的研究进展予以综述.     

丙型肝炎病毒母婴传播及机制研究

目的 对丙型肝炎病毒母婴传播及其机制进行研究。方法 联合检测抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ确定孕妇和婴儿丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染,分析ＨＣＶ基因型和定量检测孕妇血清中ＨＣＶ,研究ＨＣＶ的婴母传播及其影响因素。结果 对６１０名孕妇进行了研究,孕妇ＨＣＶ感染率为２．９５％（１８／６１０）,对感染ＨＣＶ的孕妇所生１８名婴儿随访１２个月,其中５名婴儿感染了ＨＣＶ,ＨＣＶ母婴传播率为２７．８％（５／１８）,所     

EB病毒血清学联合DNA定量检测在诊断婴儿传染性单核细胞增多症中的意义

目的 评估EB病毒抗体VCA-IgM、VCA-IgG、EA-IgG、EBNA-IgG及EBV-DNA载量检测在婴儿传染性单核细胞增多症（IM）中的诊断意义.方法 用ELISA法检测78例IN患儿血清中EBV四种抗体及PCR荧光定量法检测外周血单个核细胞EBV-DNA载量.结果 在IM急性期VCA-IgM阳性率在＜1岁患儿中为27.8％,而≥4岁组患儿中为83.3％.有近20％＜1岁患儿所有EBV抗体均阴性,需重复做抗体测定.EBV-DNA载量检测总阳性率为70.5％,＜1岁患儿中阳性率为61.1％,＜1岁组患儿中有5例,在1岁组患儿中3例早期检测VCA-IgM抗体是阴性,而EBV-DNA载体是阳性的,但在后来的VCA-IgG检测均是阳性的.结论 在婴儿期IM急性阶段,只用血清学方法来诊断不够灵敏,建议在VCA-IgM阴性的患儿中联合EBV-DNA载量检测,以提高婴幼儿IM临床诊断的敏感性.     

肝细胞癌组织中HBV，HCV，HGV的表达

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV) ,丙型肝炎病毒 (HCV)及庚型肝炎病毒 (HGV)在肝细胞癌 (HCC)组织中的存在状态。方法　分别采用抗 -HBVS ,抗 -HCVNS5及抗 -HGVNS5三种单克隆抗体 ,以免疫组织化学SPAB法检测 2 6例HCC患者石蜡包埋的肝癌及癌旁肝组织中HBVS抗原 (HBsAg) ,HCVNS5抗原 (HCAg)和HGVNS5抗原(HGAg)。结果　检出HBsAg 17例 ( 65 % ) ,HCAg 13例 ( 5 0 % )及HGAg 9例 ( 3 5 % ) ,其中HBV/HCV/HGV重叠感染 7例 ,HBV/HCV重叠感染 4例 ,HBV单独感染 6例 ,HCV单独感染 2例 ,HGV单独感染 2例 ,另有 5例均不表达上述三种抗原 ;HBsAg与HGAg阳性率之间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,HBsAg与HCAg及HCAg与HGAg阳性率之间差异均无显著性(P >0 0 5 ) ;HBV ,HCV及HGV均表达于肝细胞或肝癌细胞浆内 ,呈细颗粒状分布 ,癌组织表达强度均弱于癌旁组织。结论　HCC患者中有较高的HBV ,HCV及HGV感染率 ,感染率顺序为HBV >HCV >HGV ;推测HBV感染在HCC发生过程中起重要作用 ,HCV和HGV感染可能是HCC发生的相关因素。     

输血前患者血清感染性指标的检测与分析

目的:了解输血前患者血清各项感染性指标的阳性率,及早发现阳性患者,避免医疗纠纷的发生.方法:采用酶联免疫法对输血前患者7318例进行乙型肝炎表面抗原(HBsAg),抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体,及抗人类免疫缺陷病毒(HIV)检测.同时应用甲苯胺红颗粒凝集试验(TRUST)进行梅毒的筛选试验.结果:7318例患者中HBsAg阳性患者751例(10.26%),抗-HCV阳性患者210例(2.87%),梅毒阳性患者50例(0.68%),抗-HIV阳性患者5例(0.072%).结论:输血前患者血清感染性指标有一定比例的阳性率,应严加关注.     

HBVe抗原抗体系统与丁型肝炎病毒感染的关系研究

探讨ＨＢＶｅ抗原抗体系统与丁型肝炎病毒感染的关系。方法将６６７例乙肼表面抗原阳性患者分成ｅ抗原阳性、抗－ＨＢｅ阳性和两者均阴性等三级进行丁型肝炎病毒标志物的检测和分析。结果６６７例乙肝患者ＨＤＶ感染４３例（６．４％）,其中ＨＢｅＡｇ阳性组为５．３％（１１／２０６）。抗－ＨＢｅ阳性组为１０．９％（２６／２３７）,ｅ抗原抗体 性组ＨＤＶ为２．３％（６／２２５）。抗ＨＢｅ性组ＨＤＶ感染明显升高（Ｐ〈０．     

206例HIV感染者中乙肝病毒、丙肝病毒、梅毒检测结果分析

目的:了解感染了人类免疫缺陷病毒(HIV)人群中的乙肝病毒、丙肝病毒和梅毒的携带情况.方法:采用酶联免疫吸咐试验(ELISA)检测206例(男性138例,女性68例)H1v阳性血清中HBV、HCV,采用TPPA法进行梅毒试验,比较HIV感染者及不同性别感染者HBV、HCV、梅毒感染率.结杲:206例患者HCV感染率(3...     

格林-巴利综合征前驱病毒感染与临床关系研究

目的：研究格林-巴利综合征（GBS）的病前感染因素与GBS临床特征间的相关性。方弦：采用间接酶联免疫吸附实验（ELISA）与U链抗体捕捉法ELISA对29例GBS患者和40例非GBS病人行血清特异性抗巨细胞病毒（CMV）、EB病毒（EBV）、柯萨奇病毒A组（CAV）、B组（CBV）特异性IgM、IgG抗体的测定。结果：29例GBS患者CMV与EBV的近期感染率分别为34．5％和31．0％，CAV、CBV为10．3％和6．9％，GBS患者的CMV与EBV近期感染率明显高于对照组（P〈0．05），且CMV近期感染与伴有呼吸困难的GBS具有相关性（P〈0．05）。CAV与CBV在GBS患者病前感染中与对照组比较无显著性差异。结论：CMV与EBV可能是GBS的重要病前感染因素。CMV前驱感染与伴有呼吸困难的GBS有明显相关性。     

乙肝病毒C区基因变异对干扰素疗效的影响

目的：探讨乙肝病毒(HBV)C区基因变异与干扰素疗效的相互关系。方法：采用荧光定量PCR法对30例经干扰素治疗的慢性乙肝患者治疗前后病毒滴度进行检测。选取有反应、复发、无反应的患者各3例，进行基因序列分析。结果：干扰素治疗的总有反应率为26．7％(8／30)，C区的基因变异多发生于抗原表位附近，主要为点突变及缺失突变，多不引起氨基酸水平的改变。CTL表位氨基酸相对保守，总变异率约为9氨基酸／9人，而Th表位氨基酸变异相对较多，总变异率为55氨基酸／9人。结论：干扰素治疗后HBVC区核苷酸及编码的氨基酸突变率增加，且多集中于C区抗原表位，CTL表位变异可能与干扰素疗效有关。     

2007年深圳市第四人民医院流感监测结果分析

目的了解深圳市福田区2007年流感病原学和流行特征。方法每周采集流感样病例的咽拭子10～40份,用MDCK细胞培养法进行流感病毒分离,采用血凝抑制试验鉴定流感病毒型别。结果2007年全年共监测样品273份,分离出流感病毒62株,阳性率为22.8%,其中H1N1亚型2株,H3N2亚型41株,B(Victoria)亚型13株,B(Yamagata)亚型6株。6月流感分离率(51.52%)最高。结论2007年深圳市福田区流感流行情况较为平稳,有明显季节性,在6月出现流感病毒分离高峰,流行优势株为H3N2亚型,与全市流行株型相同。     

多重聚合酶链反应检测麻疹和风疹病毒感染的研究

用多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２１份临床疑似麻疹患者的血清和咽拭子标本中麻疹病毒和风疹病毒,其中麻疹阳性９份,风疹阳性６份,ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ检测麻疹ＩｇＭ抗体阳性３份,麻疹ＰＣＲ检测阴性,而风疹ＰＣＲ检测证实为风疹病毒,该法不仅简便,敏感,特异的区别麻疹和风疹病毒感染,而且为消灭麻疹野病毒监测提供了检测手段。     

蚊体内病毒检测方法的研究进展

随着蚊媒传染病对人类社会的危害性逐渐增加,对蚊体内蚊媒病毒进行准确、快速检测的需求越来越迫切。从最初的分离接种法,发展到较新的分子生物学和快速检测试剂盒,检测技术的进步为实现蚊媒病毒的快速准确检测带来可能。本文就蚊体内病毒检测方法的研究进展进行综述。     

广东和广西部分地区蝙蝠携带登革病毒及流行性乙型脑炎病毒的调查研究

目的了解广东及广西蝙蝠携带登革病毒和流行性乙型脑炎(乙脑)病毒的情况。方法2004年9月至2005年11月期间11次收集广东及广西部分地区的蝙蝠。收集的蝙蝠取脑组织标本和血清标本,采用两对登革病毒和乙脑病毒通用引物,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和细胞培养分离方法检测所采集蝙蝠标本中的登革病毒(denguevirus,DV)和乙脑病毒(Japaneseencephalitisvirus,JEV)。结果收集了4个科9个种共905只蝙蝠,其中棕果蝠154只、犬蝠395只、普通长翼蝠5只、小黄蝠52只、中菊头蝠228只、中华菊头蝠15只、小菊头蝠41只、双色蹄蝠8只、普氏蹄蝠7只。蝙蝠来源于粤中、粤西和桂东的7个县市。905只蝙蝠标本中未检测、分离到登革病毒和乙型脑炎病毒。结论未发现所调查的蝙蝠携带登革病毒和乙型脑炎病毒。