慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后外周血树突状细胞的变化

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者聚乙二醇干扰素和阿德福韦酯抗病毒治疗前后外周血树突状细胞(DC)的变化情况。方法慢性乙肝患者35例,其中聚乙二醇干扰素α-2a(40 kD)(派罗欣)治疗组18例,阿德福韦酯(贺维力)治疗组17例,采集治疗前、治疗12、24和48周时患者的外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞技术检测mDC和pDC的百分比,并分析其与ALT和HBV-DNA的相关性。结果慢性乙肝干扰素组和阿德福韦酯组在治疗前mDC和pDC的比例和绝对计数均显著低于正常对照组(P<0.01)。抗病毒治疗后两组的mDC和pDC的比例和绝对计数均较治疗前有所增多,其中干扰素治疗组在治疗12周、24周和48周时mDC和pDC的的比例、数量与治疗前相比,均有显著提高(P<0.05)。而阿德福韦酯治疗组的mDC与治疗前相比差异无显著性,pDC的数目在治疗24周和48周时较治疗前显著升高(P<0.05)。mDC、pDC与ALT和HBV-DNA无明显的相关性。结论 CHB患者外周血mDC和pDC细胞降低,聚乙二醇干扰素和阿德福韦酯抗病毒治疗能改善患者的免疫功能状态,增加DCs的比例和数量。     

干扰素诱导人肝细胞癌胸苷磷酸化酶表达和拮抗血管生成的实验研究

目的研究干扰素α(IFNα)对人肝细胞癌胸苷磷酸化酶(TP)表达水平及血管生成能力的影响。方法在体内外用一定剂量的IFNα处理人肝癌细胞SMMC7721,用RTPCR和ELISA方法分别检测细胞TPmRNA和蛋白表达水平,Boyden小室法检测诱导内皮细胞移动的能力,免疫组化法检测SMMC7721裸鼠皮下移植瘤组织中微血管密度(MVD)。结果IFNα上调SMMC7721细胞TPmRNA表达水平,呈现剂量依赖性。与未处理组相比,浓度为5000、10000U/ml的IFNα处理的细胞TPmRNA表达水平显著升高(P<0.05),但诱导内皮细胞移动的能力差异无统计学意义。随着IFNα剂量的增加,裸鼠皮下移植瘤组织中TP蛋白表达水平逐渐增加,而MVD数目先增加后下降。IFNα不同剂量时(9.0×106、1.5×107U·kg-1·d-1),肿瘤组织中TP蛋白表达水平显著高于(48ng/mg±24ng/mg)未处理组(60ng/mg±6ng/mg,P<0.01);MVD数目分别为6.0±1.8,4.0±1.5,P<0.05)。与未处理组相比IFNα(1.5×107U·kg-1·d-1)组肿瘤重量明显下降(P<0.05)。结论一定剂量的IFNα既能上调肝细胞癌TP表达水平,又能抵消TP表达上调后促进血管生成能力的增强。     

丽珠风(Famciclovir)单用及联合干扰素α-1b治疗慢性乙型肝炎临床疗效观察

目的　本研究评估单独使用丽珠风 (泛昔洛韦 )及干扰素 (IFN ,赛诺金 ) ,对慢性乙型肝炎 (CHB)的抗病毒和临床疗效及其安全性。方法　 34例HBeAg阳性的慢性乙型肝炎分为A、B两组 ,分别用泛昔洛韦与赛诺金联合治疗及单用泛昔洛韦。A组 :用泛昔洛韦 50 0mg ,3次 /d口服 ,IFN - 1b3Mμ× 14,1次 /d肌注 ,以后隔日 1次肌注均为 16周 1疗程 ;B组 :泛昔洛韦 50 0mg 3次 /d口服 ,均为 16周。两组病例治疗前、中、后均作生化指标及病毒学指标检测。结果　治疗结束时 ,ALT水平在A、B两组分别下降至 70 2± 5 76 (u/L)和 82 4±7 84 (u/L) ,较治疗前 2 86 5± 12 7 4 (u/L)和 2 70 5± 136 6 (u/L)明显下降 (P <0 0 1)。HBVDNA阴转率分别为 58 82 % (10 /17)和 4 1 12 % (7/17) ;两组HBeAg阴转率分别为 52 94 % (9/17)和 4 7 0 6 % (8/17)。结论　采用泛昔洛韦与赛诺金联合或单独用泛昔洛韦均无严重副作用 ,两种疗法均取得较好的疗效 ,联合疗法似乎优于单独治疗 ,但统计学无显著差异 (P >0 0 5)。目前 ,我们正在扩大病例观察 ,其远期、持久的疗效正在随访中 ,尚待进一步观察。     

聚乙二醇化干扰素与普通干扰素治疗慢性乙型肝炎的疗效及对骨髓抑制的比较

目的 比较聚乙二醇化干扰素(pegylated interferon,PEG-IFN)与普通干扰素(standard interferon,IFN)治疗慢性乙型肝炎(CHB)不同时间点的疗效和对骨髓抑制程度的差异.方法 回顾性队列研究分析423例CHB患者接受PEG-IFN或IFN治疗时HBV DNA阴转,HBeAg、HBsAg阴转及骨髓抑制情况.结果 317例HBeAg阳性患者中,PEG-IFN组24周(35.0% vs 23.2%,P＜0.05)、48周(69.6% vs 51.9%,P＜0.05)时HBV DNA阴转率均高于IFN组;PEG-IFN组24、48周白细胞(WBC)、中性粒细胞(Neu)和24周血小板中位数水平显著低于IFN组.106例HBeAg阴性患者中,PEG-IFN组与IFN组HBV DNA阴转率、HBeAg阴转率和血清转换率间差异均无统计学意义(P>0.05);而24周时PEG-IFN组WBC和Neu中位数水平明显低于IFN组.PEG-IFN组中≥27岁患者HBV DNA阴转率高于IFN组(77.7% vs 57.4%,P＜0.01),而<27岁患者HBsAg阴转率(16.0% vs 2.3%,P＜0.01)和血清转换率(12.0% vs 2.3%,P＜0.05)高于IFN组.结论 PEG-IFN治疗CHB时,在HBV DNA阴转率,HBsAg阴转率方面优于IFN,但骨髓抑制较明显.     

充血性心力衰竭患者外周血树突状细胞亚群的变化及意义

目的 探讨充血性心力衰竭(CHF)患者外周血树突状细胞(DC)亚群数量的变化及意义.方法 选取CHF患者100例(CHF组)及同期体检健康者50例(对照组),采用四色流式细胞仪分析外周血DC亚群髓样DC(mDC)、浆细胞样DC(pDC)所占比例,应用酶联免疫法检测外周血血清中IL-12、IL-10和TNF-α的水平,对比分析检测结果.结果 CHF组患者DC、mDC、pDC及IL-12、IL-10、TNF-α水平分别为(3.30±0.46)‰、(2.81±0.33)‰、(0.58±0.12)‰及(94.84±15.07)、(64.29±3.03)、(0.87±0.11)pg/ml;对照组分别为(2.77±0.41)‰、(1.63±0.32)‰、(1.14±0.17)‰及(45.68±5.09)、(78.10±2.0)、(0.45±0.07)pg/ml.两组间DC、mDC、pDC、IL-12、IL-10的差异均有统计学意义(P＜0.05或0.01).结论 CHF患者外周血mDC数目明显增加,IL-12水平明显升高,提示mDC可能通过介导Th1免疫应答反应而参与CHF的发生.     

长效与常规干扰素治疗慢性乙型肝炎引起骨髓抑制的特点及其对疗效的影响

目的分析聚乙二醇干扰素α(Peg-IFN-α)与干扰素α(IFN-α)治疗慢性乙型肝炎(CHB)引起骨髓抑制的特点和差别、对抗病毒疗效的影响和两类干预药物的效果。方法 252例CHB患者分别给予Peg-IFN-α或IFN-α治疗48周,比较IFN应用过程中Peg-IFN-α治疗组和IFN-α治疗组白细胞(WBC)、中性粒细胞(Neu)和血小板(PLT)的变化及差异;以IFN治疗24周内血细胞计数最低值将患者再分组,比较各亚组干扰素的疗效;比较口服升白细胞药物和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对干扰素所致Neu减少的疗效。结果 Peg-IFN-α治疗组引起骨髓抑制较IFN-α治疗组常见,两组WBC、PLT减少比率、Neu≤0.75×109/L比率差异有统计学意义(P<0.05);3.6×109/L>WBC≥2.5×109/L亚组较WBC≥3.6×109/L亚组有更高的HBeAg和HBVDNA阴转率(P<0.05),1.5×109/L>Neu≥0.75×109/L亚组较Neu≥1.5×109/L亚组有较高的HBeAg阴转率(P<0.05);与口服升白细胞药物相比,rhG-CSF对IFN引起的Neu减少疗效快速而短暂,二者升白细胞治疗1周和1月时的Neu计数及有效率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Peg-IFN-α引起骨髓抑制较IFN-α更为常见,白细胞下降幅度可一定程度预测IFN的疗效,rhG-CSF用于IFN治疗CHB引起的骨髓抑制的临床价值值得进一步探讨。     

Graves病患者外周血中树突状细胞变化

目的探讨Graves病患者外周血中浆细胞样树突状细胞(pDC)和髓样树突状细胞(mDC)与健康对照组的变化。方法利用流式细胞仪FC500检测84例Graves病患者和60名健康体检者的外周血树突状细胞亚群。Graves病患者分为3组:治疗稳定组(40例),治疗中组(25例),治疗前组(19例)。结果测定得出治疗稳定组,治疗中组,治疗前组,健康对照组的pDC值分别为(0.18±0.08)%,(0.20±0.14)%,(0.26±0.17)%,(0.15±0.07)%;治疗前组与健康对照组比较,pDC升高,差异有统计学意义(P<0.05),其他组别之间的pDC值两两比较则差异无统计学意义(P>0.05)。mDC值分别为(0.17±0.09)%,(0.21±0.15)%,(0.27±0.19)%,(0.10±0.05)%;治疗中组和治疗前组分别与健康对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Graves病未治疗的患者血树突状细胞(DC)明显升高,治疗后病情好转的患者DC明显下降,提示DC可能参与Graves病的发病机制,并有望为Graves病治疗效果检测提供依据。     

干扰素α对实验大鼠肝纤维化的治疗作用

目的探讨干扰素α(IFNα)对肝纤维化的治疗作用.方法雄性SD大鼠40只,采用复合因素造成肝硬化模型,随机取12只作为A组(模型组),余大鼠分为B组(IFNα治疗组)12只,每日肌注IFNα 1×105U共6W和C组(对照组)12只,每日肌注生理盐水共6W.取肝脏组织行光镜和电镜下观察病理变化.结果 IFNα治疗组肝纤维化程度明显减轻,激活状态的星状细胞(HSC)数量明显减少,并出现凋亡现象.结论 IFNα对肝纤维化有治疗作用.     

干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎疗效观察

探讨干扰素(IFNα-2b)单用及联合胸腺肽应用对慢性乙型肝炎(CHB)的治疗效果和不良反应.方法:58例CHB患者随机分为联合组与干扰素组.联合组28例,采用IFNα -2b和胸腺肽联合治疗;干扰素组30例,单用IFNα-2b治疗.疗程均为3个月.结果:联合组与干扰素组在治疗结束时和停药3个月时血清丙氨酸转氨酶(A LT)水平均较治疗前明显下降(P＜0.01).停药后3个月HBeAg/抗-HBe转换率分别为60.71%和33.33%(P＜0.05),HBV-DNA阴转率分别为78.57%和53.33%(P＜0.05).79.30%的患者注射IFNα-2b时出现短暂发热和流感样症状,两组不良反应无明显不同.结论:IFNα-2b单独或联合胸腺肽治疗CHB均可取得较好的疗效;联合治疗有协同作用.     

外周血中髓样树突状细胞数量在急性ST段抬高型心肌梗死患者中明显减少

目的树突状细胞(Dendritic cell,DC)是目前发现的功能最强的专职性抗原提呈细胞(APC)。近年来研究发现,DC参与动脉粥样硬化(AS)的免疫炎性反应过程。人外周循环中主要有两类DC:髓样树突细胞(mDC)和浆细胞样树突关细胞(pDC),在自身免疫系统疾病中外周血DC数量明显下降。本课题主要研究急性ST段抬高型心肌梗死患者外周血mDC和pDC数量的变化。方法入选17例ST段抬高型急性心肌梗死患者,14例冠状动脉造影证实的稳定型心绞痛患者,以及性别、年龄相匹配的15例冠状动脉造影证实的健康对照人群。采用流式细胞仪三色分析测定③组人群中外周血DC数量及其亚型的绝对数和比例,其中ST段抬高型心肌梗死患者在发作后7 d进行随访。结果ST段抬高型心肌梗死患者mDC与pDC占外周血单个核细胞的比值及其绝对值较正常对照组和稳定型心绞痛患者组均明显下降(P值均<0．01)。急性心肌梗死组、健康对照组及稳定型心绞痛组中,mDC占外周血单个核细胞的百分比分别为(0．037±0．035)％, (0．229±0．015)％和(0．223±0．016)％,③组中mDC的绝对数分别为(3．78±0．85)μL、(14．84±0．97)μL和(14．5±1．34)μL,pDC所占比例分别为(0．018±0．023)％、(0．056±0．006)％和(0．039±0．005)％,绝对数分别为(1．51±0．46)μL、(3．29±0．31)μL、(12．25±0．36)μL,稳定型心绞痛组与健康对照组间外周血mDC所占比例比较,差异无统计学意义,外周血中pDC所占比例明显下降(P<0．05)。在急性心肌梗死组,mDc及pDC所占百分比及绝对数在心肌梗死后1周明显增高(P值均<0．05)。结论与自身免疫系统疾病外周血DC数量下降相似,急性心肌梗死时外周血mDC及pDC在急性期明显降低,1周后明显上升。提示在心肌梗死急性期外周血DC数量明显下降可能参与斑块不稳定的形成,但其具体机制还需进一步研究。     

葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,对原癌基因c-fos和bc l-2蛋白质以及凝血酶受体(TR)mRNA表达的作用。方法以细胞计数法,流式细胞仪测定DNA含量,细胞周期分析法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。在凝血酶及葛根素作用24 h后,用W estern印迹法检测c-fos和bc l-2蛋白表达,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TR mRNA的表达。结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24 h末达峰值(细胞计数凝血酶组8.64×104/m l±0.12×104/m l,对照组4.20×104/m l±0.11×104/m l,P<0.05),且凝血酶浓度在0.1~1.0 U/L之间呈剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成以及VSMC c-fos和bc l-2蛋白的表达(葛根素浓度为1.5×10-3mol/L时,抑制率分别为42.6%±5.2%、58.2%±7.9%、44.5%±7.5%和39.6%±6.4%,均P<0.05);高浓度(1.5×10-3mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TR mRNA上调(抑制率为17.6%±1.7%,P<0.05)。结论葛根素能抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能与其抑制c-fos和bc l-2蛋白有关,并部分与其抑制TR mRNA表达有关。     

乙型肝炎患者外周血Ⅱ型树突状细胞表型和功能鉴定及其意义的研究

目的　探讨Ⅱ型树突状细胞 (typeII dendriticcells,DC2 )数量和功能的变化及其与乙型肝炎 (乙肝 )患者病程、淋巴细胞亚群和HBVDNA病毒载量的关系。方法　采用流式细胞分析技术对 10 3例乙肝患者 (包括HBV携带者 11例 ,慢性乙肝轻度 35例 ,中度 33例 ,重度 13例 ,急性乙肝11例 )和 2 5例健康人 (对照组 )的外周血DC2进行检测 ,同时检测患者血常规 ,计算出DC2绝对数 ;用体外灭活的 1型单纯疱疹病毒 (HSV 1)刺激外周血单个核细胞 (PBMC)并与PBMC进行 2 4h共培养 ,检测上清中DC2的α干扰素产生能力 ;统计分析DC2数量、功能变化及其临床意义。结果　对照组外周血DC2占PBMC比例为 0 32 %± 0 13% ,绝对数为 (7 2± 2 4 ) 10 6个 /L。与对照组比较 ,HBV携带者DC2的比例 (0 32 %± 0 12 % )和绝对数 (6 9± 3 4 ) 10 6个 /L无明显下降 ;急性乙肝患者的DC2比例和绝对数下降 ,但无统计学意义 ;而慢性肝炎患者DC2的比例和绝对数随病程加重而降低 ,中、重度肝炎的DC2下降较轻度更为显著。DC2产生α干扰素的功能在急、慢性乙肝患者及HBV携带者均降低 ,各组患者之间差异不显著 ;DC2的数量与HBVDNA病毒载量未发现相关性 ,但与自然杀伤 (NK)细胞及CD8+ T数量高低存在正相关。结论　慢性乙肝患者外周血DC2数量和     

辛伐他汀对鼠心脏成纤维细胞DNA合成的影响

目的探讨辛伐他汀(Sim)对新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFs)DNA合成的影响及甲羟戊酸(MVA)的干预效应。方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定DNA合成,观察不同浓度Sim及MVA分别作用不同时间对CFsDNA合成功能的影响。结果 (1)CFs的3H-TdR掺入率随着Sim干预浓度的增加而降低,其中10-6和10-5mol／L Sim组的3H-TdR掺入率分别为(1175±202．66)、(771±164．86)cpm／2000细胞, 显著低于对照组的(1608±204．32)cpm／2000细胞(均P<0．01);(2)10-5mol／L Sim作用CFs 6、12、18、24、30、36、42、48 h, 随着Sim作用时间的延长,CFs的3H-TdR掺入率呈递减趋势,与时间呈明显的负相关(r=-919,P<0．01);(3)CFs的3H-TdR 掺入率随着MVA干预浓度的增加呈进行性上升,其中10-4、10-3 mol／L MVA 10-5 mol／LSim组3H-TdR掺入率分别为 (1612±308．57)、(1995±353．83)cpm／2000细胞,显著高于对照10-5mol/L Sim组的(771±164．86)cpm／2000细胞(P<0．01); (4)10-3 mol／L MVA分别作用CFs 6-48 h,CFs的3H-TdR掺入率随着MVA作用时间的延长而逐渐增加,呈明显的正相关(r=0．968,P<0．01)。结论 Sim呈浓度-时间依赖方式抑制CFs DNA的合成且可被MVA拮抗,提示Sim可抑制CFs 增殖,延缓心肌纤维化,其作用可能通过MVA途径实现。     

白细胞介素18对豚鼠哮喘模型气道炎症作用的实验观察

目的观察白细胞介素18(IL-18)对豚鼠哮喘模型气道炎症的作用。方法采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入激发的方法复制豚鼠哮喘模型。30只豚鼠按随机数字法分成3组(每组10只)进行处理,分别为哮喘模型组(A组)、模型对照组(B组)和IL-18干预组(C组)。光镜下检测各组豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞计数及分类,用酶联免疫吸附法测定BALF中Th1细胞因子IFN-γ、IL-2和Th2细胞因子IL-4、IL-5浓度,并进行3组之间的比较。结果豚鼠BALF中嗜酸粒细胞(EOS)个数A组、B组、C组分别为(98±58)×106/L、(12±10)×106/L、(29±10)×106/L,A组与B组、C组比较差异有统计学意义(P<0.01);中性粒细胞个数A组与B组、C组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。IFN-γ和IL-2浓度A组与B组比较差异有统计学意义(P<0.05),与C组比较差异亦有统计学意义(P均<0.01)。IL-4浓度A组与B组、C组比较差异有统计学意义(P均<0.05);IL-5浓度A组与B组、C组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论IL-18可通过调节Th1/Th2细胞因子的平衡而达到控制哮喘气道炎症的作用。     

Combination chemotherapy and alpha-interferon in the treatment of Kaposi''s sarcoma associated with acquired immune deficiency syndrome.

Thirteen men with a median age of 37 (range 28 to 46) years who had extensive Kaposi's sarcoma associated with acquired immune deficiency syndrome (AIDS) were treated with combination chemotherapy and alpha-interferon. Four patients had stage III disease and nine had stage IV disease (one with pulmonary and eight with gastrointestinal involvement). Treatment consisted of monthly courses of actinomycin D, 1 mg/m2, and vinblastine sulfate, 6 mg/m2, given intravenously on day 1, bleomycin, 10 mg/m2 given intravenously on days 1 and 8, and human lymphoblastoid (alpha-) interferon, 10 million U/m2 given subcutaneously three times a week for six doses starting on day 14. Forty-one treatment cycles (median 3, range 1 to 12) were administered. The median granulocyte and platelet counts on day 14 before the start of interferon therapy were 600 X 10(9)/L and 134 X 10(9)/L respectively; the counts did not fall further during interferon therapy. There was no difference in T-cell subsets, 2',5'-oligoadenylate synthetase level or results of blastogenesis studies after interferon therapy. Four patients required admission to hospital for neutropenia-associated fever. A complete response (of 24 weeks' duration) was seen in one patient and a partial response (of 14 to 44 weeks' duration) in four. One patient had a mixed response, with regression of skin involvement but progression of pulmonary disease. The median length of survival was 48 (range 4 to 143) weeks. Eleven patients died of progressive Kaposi's sarcoma, one of lymphoma and one of Pneumocystis carinii pneumonia. The results suggest that this form of therapy is not appropriate for patients with Kaposi's sarcoma associated with AIDS.     

Thrombopoietin and interleukin-6 in children with pneumonia-associated thrombocytosis

BACKGROUND: The aim of this study was to investigate why some, but not all, children develop thrombocytosis during the course of pneumonia. METHODS: The retrospective study included 40 healthy children and 75 children with pneumonia: 17 patients with platelet count within the reference values, i.e., platelet count 450 x 10(9)/L. Erythrocyte sedimentation rate, leukocyte and platelet counts, and concentrations of hemoglobin, C-reactive protein, interleukin-6 and thrombopoietin were determined in the blood of patients and control groups of children. RESULTS: Patients with thrombocytosis were slightly younger (3.0 +/- 1.8 years and median 2.5 years, respectively) than patients with normal platelet count (3.8 +/- 2.4 years and median 4 years, respectively). Additionally, according to clinical and radiological findings, pneumonia in children with thrombocytosis had a more severe and protracted course. Serum thrombopoietin concentrations were found to be 91.2 +/- 41.7 ng/L (range: 14.3-166.7 ng/L) in patients with normal platelet count (313 +/- 70 x 10(9)/L, range: 206-428 x 10(9)/L). In patients with thrombocytosis (581 +/- 131 x 10(9)/L, range: 450-830 x 10(9)/L) serum thrombopoietin ranged from 63.6 to 1115.9 ng/L (526.6 +/- 268.4 ng/L). In these patients both concentration of hemoglobin (114 +/- 12 g/L) and iron (4.3 +/- 1.3 micromol/L) significantly decreased as compared with the control group. CONCLUSIONS: Study results suggested the possible development of reactive thrombocytosis in children with pneumonia. As platelets are involved in inflammatory reaction, reactive thrombocytosis might be part of the mechanism of defense. Reactive thrombocytosis may develop as a sequel of either anemia or inflammatory reaction (or both).     

基质金属蛋白酶9在粒细胞集落刺激因子诱导的造血干/祖细胞动员中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、外周血MMP-9蛋白及mRNA水平的变化,比较富含MMP-9的细胞系HT1080无血清培养上清孵育前后CD34+细胞表面CXCR4表达及对基质细胞衍生因子1(SDF-1)的迁移能力的变化,将rhMMP-9与rhSDF-1孵育后应用Western印迹检测MMP-9对SDF-1的降解作用,观察注射MMP-9化学抑制剂(MPI)ο-邻二氮杂菲对G-CSF动员BALB/c小鼠外周血成熟白细胞计数(WBC)和干/祖细胞的数量的影响。结果G-CSF动员第5天,骨髓上清MMP-9浓度增加了6.6倍(P<0.01),骨髓组织表达MMP-9的中性粒细胞明显增多。动员后骨髓单个核细胞MMP-9mRNA表达水平上调(P<0.05)。rhSDF-1与rhMMP-9短期孵育后可被后者降解。HT1080无血清培养上清液能够上调脐血和动员外周血富集的CD34+细胞的CXCR4表达水平(均P<0.05)及增强CD34+细胞向SDF-1浓度梯度迁移能力(均P<0.05),该效应可被MPI阻断(P<0.05)。与G-CSF共注射MPI后BALB/c小鼠外周血成熟WBC(12.3×106/L±1.2×106/L)和造血祖细胞集落形成单位(69U/2×105MNC±3U/2×105MNC)数量显著低于对照组(P<0.05)。结论MMP-9可能通过裂解SDF-1、上调CD34+细胞表面SDF-1特异性受体CXCR4的表达及增强CD34+细胞迁移能力在G-CSF介导的HSPC动员中发挥重要作用。     

HBV S-ecdCD40L融合基因修饰对树突状细胞功能的影响

目的探讨HBVS—ecdCD40L融合基因修饰对树突状细胞（DC）功能的影响。方法分离健康成人外周血单个核细胞,GM—CSF、IL-4诱导培养树突状细胞,培养第5天,以脂质体介导转染,分为pcDNA3．1-S—ecdCD40L转染组、pcD—NA3．1-S转染组、pcDNA3．1转染组及PBS对照组。转染48h收集DC及上清,流式细胞仪检测DC表面CD80、CD86、HLA—DR表达水平;CCK-8法检测混合淋巴细胞反应（MLR）中DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IL-12的分泌水平。结果与对照组比较,pcDNA3．1-S—ecdCD40L转染组DC表达CD80、CD86、HLA—DR水平增加,刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力增强,分泌IL-12水平增高。结论HBVS—ecdCD40L融合基因修饰能促进DC活化。增强DC功能,将CD40L胞外段基因与HBV抗原基因融合可能是增强乙肝疫苗免疫效果的有效方法。     

Immunodeficiency and the risk of death in HIV infection.

OBJECTIVE--To describe the rate of development of immunodeficiency in human immunodeficiency virus (HIV) infection and to relate this to the risk of death. DESIGN--Inception cohort followed up for up to 12 years from HIV seroconversion until January 1, 1992. SETTING--A regional hemophilia center based in a major teaching hospital. PATIENTS--All 111 patients with hemophilia who seroconverted to HIV-1 between 1979 and 1985 were registered at the center. Patients have been closely followed up clinically and immunologically. OUTCOME MEASURES--Development of immunodeficiency, defined by a CD4 lymphocyte count falling beneath 0.20 and 0.05 x 10(9)/L, and death. RESULTS--Kaplan-Meier estimates suggest that almost half (46%; 95% confidence interval [CI], 26% to 66%) of patients alive 12 years after seroconversion will have a CD4 lymphocyte count that has remained above 0.05 x 10(9)/L. Thirty-five percent (95% CI, 22% to 48%) remain above 0.20 x 10(9)/L. Thirty-seven patients died of HIV-related causes, and there was a 52% probability (95% CI, 35% to 69%) of HIV-related mortality by 12 years from seroconversion. Mortality risk was closely associated with severe immunodeficiency. There was only a 15% chance (95% CI, 6% to 25%) of HIV-related death occurring before a CD4 count of below 0.05 x 10(9)/L had been reached. There was an average of one HIV-related death per 96.7 patient-years of observation before the CD4 count had fallen below 0.05 x 10(9)/L, as compared with one death per 2.5 patient-years of observation after the CD4 count had fallen below this level (P < .0001). CONCLUSIONS--In patients with HIV infection who are closely followed up, the risk of death is low before the CD4 lymphocyte count has fallen to 0.05 x 10(9)/L, a count many patients remain above up to 12 years after seroconversion.     

激素对哮喘小鼠气道黏液分泌作用的研究

目的研究糖皮质激素对小鼠哮喘模型气道黏液过度分泌的作用及机制。方法将24只 BALB/c 小鼠随机分为对照组、哮喘组和哮喘+地塞米松组,每组8只。各组小鼠于末次激发24 h 后进行麻醉,留取不同标本,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞数,AB-PAS 染色了解气道杯状细胞变化,用 RT-PCR 和免疫组织化学染色分别检测肺组织黏蛋白基因MUC5AC mRNA 和蛋白、白细胞介素4(IL-4)mRNA。结果与对照组相比,哮喘组 BALF 嗜酸性粒细胞和气道杯状细胞均明显增多,而哮喘+地塞米松组明显减少;哮喘组肺组织 MUC5AC mRNA(0.5341±0.0303)和蛋白(0.1906±0.0008)、IL-4 mRNA(0.6265±0.0932)均较对照组(分别为0.1994±0.0128、0.1194±0.0007和0.2389±0.0289)明显增加(P 均<0.01),哮喘+地塞米松组(分别为0.2729±0.0345、0.1456±0.0003和0.2424±0.0260)均明显高于哮喘组(P 均<0.05),但哮喘+地塞米松组 IL-4 mRNA 和对照组差异无统计学意义(P>0.05),MUC5AC mRNA和蛋白较对照组均明显降低(P 均<0.01)。结论糖皮质激素可减轻哮喘小鼠肺组织炎症,并可能通过下调MUC5AC 和 IL-4表达在气道黏液过度分泌中起治疗作用。