电化学发光法HBsAg定量分析最适稀释度及其与HBV-DNA含量关系的探讨

目的:探讨电化学发光免疫分析法(ECLIA)常见血清学模式HBsAg定量分析最适稀释度及其与HBV-DNA含量的关系。方法:采用正常混合血清倍比稀释HBsAg(+)/HBeAg(+)/HBcAb(+)、HBsAg(+)/HBeAb(+)/HBcAb(+)和HBsAg(+)/HBcAb(+)三种模式血清,ECLIA夹心法定量测定原倍及稀释血清HBsAg的浓度,荧光定量PCR测定其HBV-DNA含量(结果以对数值表示)。结果:HBsAg阳性的三种血清学模式血清最适稀释度不同,HBsAg(+)/HBeAg(+)/HBcAb(+)模式存在HD-HOOK效应,其最适稀释度为1∶32,HBsAg测定结果与HBV-DNA含量分析无显著性相关(r=0.235,P>0.05)。HBsAg(+)/HBeAb(+)/HBcAb(+)和HBsAg(+)/HBcAb(+)模式原倍血清HBsAg测定值最高,不需进行稀释,HBsAg测定结果与HBV-DNA定量分析呈正相关(r分别为0.982,0.968;P均<0.01)。结论:ECLIA法定量测定HBsAg(+)/HBeAg(+)/HBcAb(+)模式血清中HbsAg时,应参照HBV-DNA含量分析,对其血清进行预稀释,同时测定原倍和1∶32稀释血清HBsAg含量。而HBsAg(+)/HBeAb(+)/HBcAb(+)和HBsAg(+)/HBcAb(+)模式,不需进行预稀释,其血清HBsAg结果与HBV-DNA含量变化一致。     

电化学发光与酶免疫分析检测HBsAg的比较

目的: 比较电化学发光(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg的结果。方法: 选择HBsAg阳性标准品和99例4种模式样本[①HBsAg(+)/HBeAg(+)/HBcAb(+);②HBsAg(+)/HBeAb(+)/HBcAb(+);③HBsAg(+)/HBcAb(+);④HBeAg(+) HBcAb(+)],分别采用ECLIA和ELISA一步法、二步法检测HBsAg。结果: ECLIA的日内CV比ELISA一步法、二步法分别提高3.3%和3.2%,日间CV分别提高3.5%和3.3%,敏感度各为0.063、0.5和0.25ng/ml。①②③模式3种方法HBsAg100%阳性率。④模式2例ECLIA1:50稀释和ELISA二步法为阳性,而ECLIA原倍和ELISA一步法为阴性。①模式1:50稀释后的HBsAgCOI值比原倍血清高。结论: ELISA一步法检测HBsAg,简便快速,标本的含量较低或浓度过高可出现假阴性。为避免一步法Hook效应造成的假阴性,可采用经典的两步法。ECLIA灵敏度高,但也存在Hook效应,必要时应稀释标本进行检测或进行中和确证试验。     

化学发光免疫分析技术和酶联免疫吸附试验在乙肝病毒血清学检验中的应用分析

目的 探讨乙肝病毒血清学检验中化学发光免疫分析技术(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)的应用效果.方法 分别采用ECLIA与ELISA法检测120例疑似乙肝患者血清中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb.结果 ECLIA对HBeAb、HBsAg的检出率明显高于ELISA(P<0.05);2组HBsAb、HBeAg和HBcAb的检出率比较无明显差异(P>0.05).结论 在乙肝病毒血清学检验中,化学发光免疫分析技术有着较好的灵敏度,可作为有效的标记免疫检测技术应用于临床.     

HBV-M定性与HBV-DNA定量联合检测在诊治乙型肝炎中的临床价值

目的 观察荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术在乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)定量检测中的应用价值,同时观察乙型肝炎患者血清乙肝病毒标志物(HBV-M)定性检测的价值。方法 选取2015年1月—2018年9月我院收治的900例乙型肝炎患者作为研究对象,分别采用酶联免疫吸附测定(ELISA)、FQ-PCR技术对其血液标本进行HBV-M定性、HBV-DNA定量检测。分析不同HBV-M模式下HBV-DNA检测结果。结果 HBV-M共检出8种模式。HBV-DNA检测阳性率为55.00%(495/900);HBsAg+HBeAg+HBcAb模式下HBV-DNA的阳性率高于HBsAg+HBeAb+HBcAb、HBsAg+HBeAb、HBsAb+HBeAb+HBcAb模式的阳性率(P<0.001或P<0.05)、HBsAg+HBeAg模式阳性率显著高于HBsAg+HBeAb+HBcAb、HBsAg+HBeAb、HBsAb+HBeAb+HBcAb模式(P<0.01)。HBsAg+HBeAg+HBcAb模式的HBV-DNA含量显著高于HBsAg+HBeAg、HBsAg+HBeAb+HBcAb、HBsAg+HBeAb、HBsAb+HBeAb+HBcAb模式(P<0.001)。结论 不同HBV-M模式的HBV-DNA阳性率及表达水平存在差异,故联合HBV-M定性与HBV-DNA定量检测对乙型肝炎临床诊治意义重大。     

苏州市HBV血清标志物检测室间质量评价

目的评价2001～2003年苏州市38家医院检验科参加苏州市临检中心乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物室间质控的情况。方法每年质评2次，每次发放血清标本3份，每份标本用ELISA法测定6种HBV血清标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、mcAb流(原倍血清测HBcAb)、HBcAb临(血清1：30稀释后测mcAb)，要求各单位按规定时间检测并回报结果，然后进行检测结果统计分析。结果HBsAg、HBsAb、HBeAg三个指标的检测结果符合率较高，除0206批次的HBsAg及0104批次的HBeAg外，符合率达93％以上，而HBeAb、mcAb流以及HBcAb临的符合率较低，最低只有50％。结论苏州市乙肝病毒血清标志物检测的质量较好，而HBeAb、HBcAb流、HBcAb临的检测质量有待进一步提高。     

HBV感染者血清HBV标志物与HBV DNA相关性

目的 探讨HBV感染者常见血清HBV标志物模式的临床意义及与血清HBV DNA之间的相关性。方法 应用荧光-聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测了270例HBV感染者血清HBV DNA和HBV标志物。结果 270例HBV感染者中HBV标志物以HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性，HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性与HBsAg、HBcAb阳性三组最为常见，其构成比分别为0．3296、0．2963、0.3444。HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性，HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性与HBsAg、HBcAb阳性，三组HBV DNA阳性率分别为86．5％、41.3％、37．6％。HBeAb和HBcAb阳性组及单-HBsAg阳性组亦可检出HBV DNA。结论 临床上常规测定血清HBV DNA对深入了解HBV标志物模式的意义及病情的发展与预后具有重要的价值。     

乙肝病毒五项指标TRFIA定量测定与RIA检测结果的相关性研究

目的以微粒子酶免疫分析(MEIA)为金标准,探讨时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)和放射免疫分析(RIA)技术在定量检测乙肝表面抗原(HBsAg)、表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)5项乙型肝炎血清学标志物(HBV-M)的临床应用价值.方法应用MEIA、TRFIA及RIA 3种方法,对200例乙肝病毒携带者血清进行HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb5项HBV-M指标检测.结果 TRFIA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg与MEIA结果完全符合,在HBeAb、HBcAb 2项指标中略高于MEIA法.TRFIA法及RIA法检测显示所选病例的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb二者定量测定结果阳性符合率分别为96.5%、0%、83.0%、78.0%、94.2%.与TRFIA法相比,RIA法检测HBsAg、HBeAg、HBeAb易出现漏检.TRFIA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的诊断灵敏度、诊断特异性和结果总符合率均优于RIA法.结论 TRFIA法和RIA法在定量检测的HBV-M 5项指标结果具有相关性,但两种方法之间检测结果浓度绝对值不可比.TRFIA技术用于HBV-M检测,是一种灵敏的定量检测方法,具有特异性强、灵敏度高、线性范围宽、标准曲线稳定性好、无放射污染,易于自动化.     

酶联免疫吸附测定法和电化学发光技术检测乙肝病毒236例的结果分析

目的 比较酶联免疫吸附测定法（ELISA）和电化学发光技术（ECLIA）对乙肝病毒标志物的检出率.方法 采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）和电化学发光技术（ECLIA）同时对236例乙肝患者的标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb进行检测.结果 ECLIA法对HBsAg、HBeAg、HBeAb的检出率高于ELISA法,差异有统计学意义（P＜0.05）,而两种方法对HBsAb、HBcAb的检出率无统计学意义（P＜0.05）.结论 ECLIA法较普通的ELISA法更为灵敏,可定量检测乙肝病毒,进一步提高检测的灵敏度、特异性.     

乙肝病毒前S1蛋白与DNA指标关系的探讨

目的探讨乙肝病毒前S1蛋白指标与DNA指标的相关性.方法收集393例HBsAg阳性乙肝患者的血清,采用荧光定量-PCR法检测其HBV-DNA,用ELISA法检测HBV血清标志物及HBV前S1蛋白.结果393例HBsAg阳性血清中,[HBsAg( )HBeAg( )HBcAb( )]52例,[HBsAg( )HBeAb( )HBcAb( )]263例,HB-sAg及HbcAb双阳性78例;HBV-DNA阳性99例(阳性率25.2%);前S1蛋白阳性107例(阳性率27.2%)结论[HBsAg( )HBeAg( )HBcAb( )]组,前S1蛋白与HBV-DNA指标呈显著性相关,而在[HBsAg( )HBeAb( )HB-cAb( )]及[HBsAg( )HBcAb( )]组中,前S1蛋白与HBV-DNA指标无显著性相关.     

携带HBV孕产妇血清免疫标志物含量与HBV-DNA载量分析

目的:探讨携带HBV孕产妇血清免疫标志物(HBV-M)含量与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量之间的关系.方法:应用电化学发光法(ECLIA)检测240例携带HBV孕产妇血清标本中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb含量,用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)技术同时检测HBV-DNA载量,对2组检测结果进行统计学分析.结果:ECLIA检出不常见模式47例,出现10种血清模式,模式1～5组均有HBV-DNA阳性检出,其中模式1,2,5组的检出率为100％,HBV-DNA载量分别为6E+07±9.02E+07、4.85E+06±3.01E+06、1.51E+07±2.13E+07,模式6～10组HBV-DNA载量<5E+02;HBV-DNA阳性患者HBsAg、HBsAb、HBeAg的定量结果与阴性患者差异有统计学意义(P<0.05),而HBV-DNA阳性患者HbeAb、HBcAb的定量结果与阴性患者差异无统计学意义(P>0.05).240例携带HBV孕产妇血清HBsAg、HBeAg、HBeAb含量与HBV-DNA载量呈正相关(r=0.657、0.562、0.501,P<0.05),HBsAb含量与HBV-DNA载量呈负相关(r=-0.438,P<0.05).结论:HBV-M含量和HBV-DNA载量密切相关,建议将两者相结合,合理制定HBV母婴传播的预防措施.     

乙肝HBV DNA荧光定量检测与血清标志物结果相关性分析

目的 研究乙肝血清学标志物（HBV-M）结果与HBV-DNA水平的关系，分析HBV DNA阳性率在各年龄组的分布情况。方法对深圳市部分服务行业人员血清应用荧光定量PCR检测和ELISA法检测并对结果进行分析。结果1781例乙肝血清学标志物阳性血清中有1102例HBV-DNA阳性。其中883例1．3．5阳性（俗称“大三阳”）血清中HBV-DNA的阳性率为96．15％；722例1．4．5阳性（俗称“小三阳”）血清中HBV-DNA的阳性率为24．38％；138例1．5阳性血清中HBV-DNA的阳性率为38．41％；22例1．3阳性血清中HBV-DNA的阳性率为90．91％；11例HBsAg阳性血清中HBV-DNA阳性率为36．36％。结论两种方法检测乙肝标志物有密切的相关性。荧光定量PCR是检测HBV-DNA含量较精确的方法，能正确反映乙肝病毒的复制水平和活跃程度；HBsAg和HBeAg与HBV-DNA含量有着明显的相关关系。     

乙型肝炎标志物定量检测结果与HBV-DNA含量相关性分析

目的 :研究乙型肝炎病毒标志物定量检测结果与 HBV- DNA含量的临床关系。方法 :采用时间分辨荧光免疫定量检测 (TRFIA)和荧光定量 - PCR技术 (FQ- PCR)对 341例血清标本的乙型肝炎标志物 (HBV- M)和 HBV-DNA含量进行检测。结果 :在 16 8例 HBs Ag/ HBe Ag/ Hbc Ab( ) ,10 1例 HBs Ag/ HBe Ab/ HBc Ab( ) ,72例 HBs Ag/HBc Ab( )阳性的三个组别中 HBV- DNA的平均含量分别为 7.4 0、4 .4 5、5 .0 2。把 HBs Ag和 HBe Ag按浓度的不同分为高中低三组 ,其 HBV- DNA的含量分别为 7.12 ,5 .2 3,4 .0 3,7.74 ,6 .72 ,5 .0 5。结论 :HBV- DNA的含量与 HBs Ag和HBe Ag的浓度存在一定的相关性 ,综合分析乙型肝炎标志物和 HBV- DNA的含量对疾病的诊断、治疗以及疗效的观察有较大的指导意义     

HBsAg阴性preS1Ag阳性的HBV携带者血清学标志物及其HBV DNA动态观察

目的探讨HBsAg(-)/HBeAg( )/HBcAb( )/preS1Ag( )少见血清学模式形成的原因,了解该少见模式乙肝病毒携带者体内血清学标志物及其HBVDNA变化情况。方法采用ELISA、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、巢式PCR和实时荧光定量PCR,对该少见模式乙肝病毒携带者HBV血清学标志物和HBVDNA进行检测,每隔3个月复查一次,持续15个月。结果在研究的时间内,国产ELISA试剂盒检测结果均为HBsAg(-)/HBeAg( )/HBcAb( )/preS1Ag( );电化学发光免疫分析法检测HBsAg均为阳性,并随时间延续HBsAg水平逐渐下降;巢式PCR与实时荧光定量PCR检测HBVDNA为阳性,病毒载量上下波动。结论该乙肝病毒携带者血清学少见模式HBsAg为假阴性,动态观察HBsAg与HBVDNA水平,了解HBV复制情况,可为临床诊治提供可靠的依据。     

Pre S1抗原与HBV血清学标志物和HBV DNA的相关性及临床意义

目的:分析探讨乙型肝炎病毒(HBV)pre S1与HBV血清学标志物(乙肝两对半)和HBV DNA之间的相关性及联合检测的临床意义与应用价值。方法:用酶联免疫吸附法检测pre S1和乙肝两对半,用荧光定量PCR检测HBV DNA,观察不同模式中pre S1的表达水平和HBV DNA的含量,对结果进行统计分析。结果:共收集门诊及住院受检者血清标本2 180例,在1 971例HBsAg阳性的血清标本中pre S1和HBV DNA的检出率均较高,且二者具有明显的相关性,大三阳、小三阳和HBsAg/抗-HBc(+)三种模式中pre S1的阳性率分别为94.3%、59.1%和78.9%;pre S1在HBeAg阳性组和HBV DNA阳性组中的阳性率为94.3%和84.9%,明显高于在HBeAg阴性组和HBV DNA阴性组中的62.1%和56.3%(P<0.01);且大三阳组的HBV DNA含量也远高于其他组(多数高于105copies/ml),尤其是pre S1也是阳性的同时,HBV DNA拷贝数多高于107 copies/ml,呈高拷贝复制;而正常人群(血清学标志物全阴性)pre S1检出阴性。结论:pre S1能较好的反映乙肝病毒的存在与复制情况,联合检测pre S1和乙肝两对半,结合HBV DNA定量检测,可早期发现低水平的病毒感染,是判读抗病毒治疗疗效的较好参考指标,尤其在检验条件相对较差的基层医院,对乙肝患者的临床诊断、病情判读和疗效观察都有良好的应用价值。     

HBsAg(+)/NAT(-)献血者HBsAg定量检测及血清学特征

目的探讨HBsAg(+)/核酸检测(nucleic acid test,NAT)(-)献血者的乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)定量水平和血清学特征。方法对104名HBsAg(+)/NAT(-)献血者进行HBsAg定量检测和HBV两对半检测,对HBsAg定量结果进行统计学描述,比较不同HBV血清学模式组的HBsAg定量。结果广州地区HBsAg(+)/NAT(-)献血者在无偿献血者中的占比为0.19%,在HBsAg双试剂确认阳性献血者中的占比为24.87%;HBsAg定量均处于中低水平并以低水平(HBsAg100 IU/m L)为主(97.12%,101/104),中位数为1.16 IU/m L;两对半检测均为HBeAg阴性,共出现8种血清学组合模式,以小三阳"145"模式最多(56.73%,59/104);HBsAb阳性者较单HBeAb阳性者的HBsAg定量低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论获得HBsAg(+)/NAT(-)献血者的HBsAg定量水平和血清学特征,为评价其血液安全性提供了一定的实验依据。     

HBV血清标志物e抗原假阴性的原因分析及对策

目的:分析ELISA法检测乙型肝炎病毒(HBV)标志物e抗原(HBeAg)出现假阴性的原因并探讨应对措施,防止HBeAg阳性漏检.方法:凡用ELISA法检测的HBV标志物5项指标结果为表面抗原(HBsAg)和核心抗体(抗-HBc)阳性(俗称1、5阳性)而HBeAg为阴性的,应用4家试剂2种方法联合复检HBeAg确认结果.具体措施:(1)对每天用A试剂检测的HBV标志物5项指标测得结果仅1、5阳性的样品,用A、B、C试剂(ELISA法)联合复检HBeAg.(2)无论A、B、C哪种试剂,只要HBeAg复检结果为阳性、弱阳性或样品测定D值在灰区范围的,必须用D试剂(化学发光法)进一步复检确认阳性,以D试剂复检结果为最终确认结果.结果:274份样品用A、B、C试剂复检HBeAg(室内质控值在控),A试剂结果仍然全部阴性,阳性漏检率为2.18%,B试剂结果5例阳性,阳性漏检率为0.36%,C试剂结果6例阳性(5例阳性与B试剂复检样品号码相同,1例A、B试剂复检为阴性C试剂复检为阳性),无阳性漏检.复检6例HBeAg阳性的样品用D试剂复检确认仍为阳性,无阳性漏检.结论:ELISA法A、B试剂存在比例不等的HBeAg假阴性.在日常工作中,对ELISA法测定的HBV标志物5项指标仅1、5阳性的样品结果,严格多家试剂联合复检HBeAg是非常必要的.     

聚合酶链反应在检测乙肝病毒感染中的应用

应用PCR技术对医院临床实验室检测的265例乙肝患者血清的ELISA五项结果所用血清作了复检、结果发现：ELISA五项指标全阴40例，单纯HBsAb阳性40例，单纯HBcAg阳性40例，HBsAg两项阳性40例，HBsAg、HBeAb和HBcAb三项阳性40例，HBsAg、HBeAg和HBcAb三面阳性40例，HBsAg和HBeAg均阳性15例及单纯HBsAg阳性10例，而PCR检测HBV－DNA的阳性例数分别为2，3，7，16，11，38，15和3例，ELISA法和PCR法检测的目的物本不同同，其临床意义，学者对ELISA法已有不少报道，PCR法检出HBV－DNA证明血清中有乙肝病毒存在，对PCR检测结果，结合ELISA检测结果作了讨论。     

不同乙肝检测模式中Pre-S_1抗原分析

目的:通过不同乙肝检测模式中P re-S1抗原的检测情况分析,了解P re-S1抗原与乙肝病毒复制的关系。方法:采用EL ISA法对300份乙肝阳性血清进行P re-S1抗原检测。结果;P re-S1抗原检测在HB sA g(+)、HB eA g(+)、HB cA b(+)模式的阳性率为86%,在HB sA g(+)、HB eA b(+),HB cA b(+)模式的阳性率为40%,在HB sA g(+)、HB cA b(+)模式中阳性率为25%,而在HB eA b(+)、HB cA b(+)模式中,HB sA b(+)、HB eA b(+)、HB cA b(+)模式中,HB sA b(+)、HB cA b(+)模式中及HB cA b(+)模式中阳性率都为0。结论:P re-S1抗原测定可作为检验乙肝病毒存在和复制的血清学指标。