苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织中结缔组织生长因子表达影响

目的:采用经典造模法构建阿霉素肾病大鼠动物模型,观察苦瓜总皂苷对其是否有治疗作用及其可能的治疗机理。方法:50只雄性SD大鼠,随机分为5组,分别为正常组,模型组,苦瓜总皂苷低、中和高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组经尾静脉注射阿霉素6.2 mg/kg建立肾病大鼠模型,模型建立成功后,正常组和模型组给予1 m L·kg-1·d-1生理盐水注射,苦瓜总皂苷组给予苦瓜总皂苷10、20、40 mg·kg-1·d-1灌胃,治疗8周末处死大鼠,测定24 h蛋白尿,以及BUN和Scr,此外HE染色检测其肾脏病理学,免疫组织化学、Western blot以及RTPCR检测肾脏组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果:与正常组相比,模型组和苦瓜总皂苷3个治疗组24 h尿蛋白含量明显增加(P0.05),同时BUN以及Cr也明显增加(P0.05),与模型组相比,苦瓜总皂苷3个剂量组均可以明显的减少大鼠尿蛋白(P0.05),同时降低Cr和BUN的含量(P0.05);HE染色正常组结构完整,没有任何发炎和其它病理特征,而模型组则有明显的肾小球系膜的增生,同时可见有炎性细胞浸润,而苦瓜总皂苷则可以明显的改善其症状;免疫组化、Western以及RT-PCR可见,与正常组相比,模型组肾脏组织中CTGF表达明显升高(P0.05),而给予苦瓜总皂苷则可以明显的降低其表达(P0.05),此外,苦瓜总皂苷3个剂量组有明显的剂量依赖性。结论:苦瓜总皂苷能够显著的改善阿霉素肾病大鼠肾脏损害,减少24 h尿蛋白,同时降低BUN和Cr的含量,进而达到对阿霉素肾病大鼠的保护作用,其机理可能与苦瓜总皂苷可以降低肾脏组织中CTGF的表达有关。     

苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织Smad3和Smad7 表达的影响研究

【摘要】目的 探讨苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织Smad3蛋白和Smad7蛋白表达的影响,为我国中草药的开发提供参考。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组及苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组。除正常组外,其余组大鼠静脉注射阿霉素62 mg/kg造模。造模成功后,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组分别给予苦瓜总皂苷10mg/（kg·d）,20mg/（kg·d）,40mg/（kg·d）剂量灌胃。8 周后处死大鼠,收集血及肾脏组织,检测24小时蛋白尿、血尿素氮 (Bun)以及血肌酐(Cr)含量。HE染色检测其肾脏组织病理学改变,免疫组化、Western blot以及RT PCR检测肾脏组织中Smad3和Smad7的表达。结果 与正常组比较,模型组和苦瓜总皂苷治疗组24小时尿蛋白在治疗8周后明显升高(P＜0.05),而苦瓜总皂苷3个治疗组相较于模型组有明显降低(P＜0.05)。苦瓜总皂苷治疗能明显降低阿霉素肾病大鼠的Bun和Cr。HE染色结果显示,与正常组比较,模型组出现明显的肾小球硬化同时伴有明显的肾细胞损伤,苦瓜总皂苷治疗后,上述症状均有明显的改善。免疫组化、Westernblot以及RT PCR结果显示,与正常组相比,模型组Smad3明显升高(P＜0.05),Smad7明显下降(P＜0.05);苦瓜总皂苷治疗后,Smad3表达明显下降(P＜0.05),Smad7蛋白表达升高(P＜0.05)。结论苦瓜总皂苷能明显改善糖尿病肾病已经受损的肾小球以及肾小管损伤,同时降低24小时蛋白尿,调节Bun和Cr,这可能与其可以调节Smad3和Smad7蛋白表达有关。     

苦瓜总皂苷对IgA肾病大鼠免疫调节因子TGF-β_1表达影响

目的:研究苦瓜总皂苷对IgA肾病大鼠转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)表达的影响。方法:随机选取48只雄性SD大鼠,所有大鼠均于适应性喂养1周后随机分为空白对照组、IgA肾病组以及苦瓜总皂苷治疗组,n=16,经典造模法造模成功后,治疗组给予苦瓜总皂苷20 mg/(kg·d)治疗,IgA肾病组和空白组给予等量生理盐水灌胃1 m L/(kg·d),分别在治疗4周和8后,每组处死一半大鼠,观察血清尿素氮、血肌酐、24 h蛋白尿和血清中白介素-2(IL-2)的白介素-6(IL-6)的含量,此外HE染色分析其病理学,Western Blot和RT-PCR检测TGF-β_1和RGC-32表达。结果:IgA肾病组和治疗组所有大鼠均造模成功,主要表现为有明显肉眼或镜下血尿;此外与空白组相比,IgA肾病组和治疗组血清中BUN、24 h尿蛋白、SCr、IL-2和IL-6明显升高(P0.05),苦瓜总皂苷治疗4周后,上述指标均明显降低(P0.05),治疗8周后进一步降低;病理学检查显示空白组纹理结构清晰,而IgA肾病组有明显增生反应,苦瓜总皂苷对其有一定的改善。Western Blot和RT-PCR结果显示与空白组相比,IgA肾病组肾脏组织中TGF-β_1表达明显降低(P0.05),治疗8周后进一步降低,但其对RGC-32基本没有改善作用。结论:苦瓜总皂苷可通过降低肾脏组织中TGF-β_1的表达,进而有助于炎性因子和肾功能的改善,防止其疾病的进一步进展。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏组织中细胞因子信号传导抑制蛋白1表达影响

目的:观察苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾组织中细胞因子信号传导抑制蛋白1(Suppressor of Cytokine Signaling,SOCS1)表达的影响,探讨其对肾脏的保护作用。方法:雄性SD大鼠(48只)随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组以及苦瓜总皂苷治疗组5 mg/(kg·d)治疗,左肾切除+1次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,模型建立成功后,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4、8周处死大鼠各半,测血糖、24 h尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测肾脏组织中SOCS1的变化。结果:治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高(P0.05);治疗组与模型组相比,IL-1α、IL-6和TNF-α明显降低,差异有统计学意义(P0.05);HE染色显示正常组肾脏组织结构整齐,纹理清晰,模型组肾小球基底膜增厚同时伴有一定的系膜细胞增生,苦瓜总皂苷可以明显降低肾脏的损害;免疫组化、RT-PCR和Western Blot可见:与模型组相比治疗后,苦瓜总皂苷治疗组大鼠肾脏组织SOCS1表达明显降低(P0.05)。结论:苦瓜总皂苷可以通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织SOCS1的表达,进而降低炎症反应,改善肾功能,最终调节2型糖尿病肾病的症状,可能有一定的临床应用价值。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏细胞间纤连蛋白和胶原Ⅳ蛋白表达的影响

目的：探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠细胞间纤连蛋白（ FN）和胶原Ⅳ蛋白（Ⅳ-CP）表达的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组及苦瓜总皂苷5 mg/（ kg·d）,治疗组左肾切除加1次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4、8周处死大鼠各半,测血糖、24 h尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测FN和Ⅳ-CP蛋白的表达。结果治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高（ P﹤0.05）;免疫组化、RT-PCR和Western Blot与模型组相比治疗组大鼠肾脏组织FN和Ⅳ-CP表达明显降低（ P﹤0.05）。结论苦瓜总皂苷可以通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织细胞间纤连蛋白和Ⅳ型胶原的表达,改善肾功能。     

金钗石斛多糖对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌组织中MMP 1和MMP 9表达的影响

【摘要】目的 探讨苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织Smad3蛋白和Smad7蛋白表达的影响,为我国中草药的开发提供参考。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组及苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组。除正常组外,其余组大鼠静脉注射阿霉素62 mg/kg造模。造模成功后,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组分别给予苦瓜总皂苷10mg/（kg·d）,20mg/（kg·d）,40mg/（kg·d）剂量灌胃。8 周后处死大鼠,收集血及肾脏组织,检测24小时蛋白尿、血尿素氮 (Bun)以及血肌酐(Cr)含量。HE染色检测其肾脏组织病理学改变,免疫组化、Western blot以及RT PCR检测肾脏组织中Smad3和Smad7的表达。结果 与正常组比较,模型组和苦瓜总皂苷治疗组24小时尿蛋白在治疗8周后明显升高(P＜0.05),而苦瓜总皂苷3个治疗组相较于模型组有明显降低(P＜0.05)。苦瓜总皂苷治疗能明显降低阿霉素肾病大鼠的Bun和Cr。HE染色结果显示,与正常组比较,模型组出现明显的肾小球硬化同时伴有明显的肾细胞损伤,苦瓜总皂苷治疗后,上述症状均有明显的改善。免疫组化、Westernblot以及RT PCR结果显示,与正常组相比,模型组Smad3明显升高(P＜0.05),Smad7明显下降(P＜0.05);苦瓜总皂苷治疗后,Smad3表达明显下降(P＜0.05),Smad7蛋白表达升高(P＜0.05)。结论苦瓜总皂苷能明显改善糖尿病肾病已经受损的肾小球以及肾小管损伤,同时降低24小时蛋白尿,调节Bun和Cr,这可能与其可以调节Smad3和Smad7蛋白表达有关。 目的 探讨金钗石斛多糖对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌损伤的调节作用及其机制,为金钗石斛的开发和糖尿病心肌损伤的治疗提供参考。方法 清洁级雄性SD大鼠60只在适应性喂养两周后随机分为正常组、模型组与金钗石斛多糖低、中、高剂量治疗组及阳性药物贝那普利治疗组。采用高脂高糖饮食6个月造模,造模成功后给予相应治疗,治疗结束后处死大鼠。HE染色观察心脏病理学改变,同时检测血糖、胰岛素、心功能指标以及氧化和抗氧化能力指标,实时荧光定量PCR和Western Blot检测其心脏组织中MMP-1和MMP-9的表达。结果 全程中正常组大鼠饮食均正常,活泼好动,毛发发白,而模型组则有明显的多饮、多食和多尿症状,金钗石斛多糖对改善上述症状有明显的效果;HE染色正常组心肌排列正常,细胞大小均一,而模型组则有明显的纤维断裂,同时细胞核体积增大,与模型组相比,金钗石斛多糖中剂量组和高剂量组及贝那普利组上述心肌损伤特点均有明显减轻;与正常组相比,模型组血糖、胰岛素抵抗指数、AST、a HBDH、CTnl、SOD、GSH及T AOC明显升高,MDA和胰岛素含量明显降低,金钗石斛多糖治疗后,上述指标均有明显改善,特别是氧化和抗氧化能力指标SOD、MDA、GSH以及T AOC改善最为明显;与正常组相比,模型组MMP-1和MMP-9表达明显降低,金钗石斛多糖组和贝那普利组其表达明显升高,同时金钗石斛多糖中、高剂量组明显高于贝那普利组。结论 金钗石斛多糖可以明显改善Ⅱ型糖尿病大鼠受损的心肌细胞,同时改善心功能,其效果优于目前临床中使用的保护心肌药物贝那普利。分析其作用机理,可能与金钗石斛多糖可以提高大鼠抗氧化能力,增加心脏组织中MMP-1和MMP-9的表达有关。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠肾病组织中蛋白激酶C-α和转化生长因子β表达的影响研究

目的探讨分析苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠蛋白激酶C-α(PKC-α)及转化生长因子β(TGF-β)表达的影响,为苦瓜总皂苷开发和临床2型糖尿病肾病的治疗提供参考。方法雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,大鼠左肾切除+链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,模型建立成功后,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4周、第8周处死大鼠各半,测血糖、24h尿蛋白定量;取肾组织做HE染色行肾组织病理观察、RT-PCR以及Western Blot检测肾组织PKC-α和TGF-β蛋白和mRNA表达。结果苦瓜总皂苷治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组比较明显减少,血糖明显升高,差异有显著性(P0.05);病理组织显示正常对照组肾小球基底膜完整,没有增生,肾脏组织结构整齐,纹理清晰,模型组肾小球基底膜增厚同时伴有一定的系膜细胞增生,苦瓜总皂苷组肾小球基底膜较完整,增生较少,炎症反应也较小;RT-PCR和Western Blot可见:与模型组比较,苦瓜总皂苷治疗组肾脏组织PKC-α和TGF-β蛋白和mRNA表达明显降低(P0.05)。结论苦瓜总皂苷可抑制糖尿病肾病大鼠肾组织PKC-α和TGF-β的表达,进而保护肾脏,可能有一定的临床应用价值。     

三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织ET-1蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织内皮素-1蛋白及mRNA表达的影响。方法将45只大鼠随机分为5组,正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和三七总皂苷组,手术切除大鼠右侧肾脏并腹腔注射阿霉素建立模型,10周末处死大鼠,无菌取肾脏,进行肾组织HE染色及masson染色,观察肾组织病理形态学改变,采用免疫组织化学及原位杂交方法分析肾组织内皮素-1蛋白及mRNA的表达。结果模型组大鼠肾组织肾小管上皮细胞(TEC)、肾小球系膜细胞(GMC)及肾小球上皮细胞(GEC)胞浆中ET-1蛋白及mRNA表达强阳性,三七总皂苷组大鼠肾组织ET-1蛋白及mRNA表达较模型组显著减少,有统计学意义(P<0.05)。结论三七总皂苷能够减少阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞及肾小球上皮细胞胞浆中内皮素-1蛋白及mRNA的表达,进而起到保护肾功能、延缓慢性肾衰竭的病程进展。     

苦瓜总皂苷对慢性心衰大鼠Caspase-3和MMP-2表达影响

目的:探讨分析苦瓜总皂苷对慢性心衰大鼠心脏组织中Caspase-3和MMP-2表达的影响。方法:60只SD大鼠按照随机数字法分为正常组、模型组以及苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组,每组12只,适应性喂养14d后给予注射盐酸去甲肾上腺素(ISO)构建心衰大鼠模型,模型建立成功后,苦瓜总皂苷低、中和高剂量组分别给予苦瓜总皂苷10、20和40 mg/(kg·d)皮下注射,注射时分散于500μL的生理盐水中,正常组和模型组则给予等量的生理盐水注射,8周后采用超声仪评价大鼠心功能指标,同时检测炎性因子TNF-α和IL-10含量,免疫组化、Western以及实时荧光定量PCR检测心肌组织中Caspase-3和MMP-2表达的特点。结果:在实验期内,模型组大鼠有明显精神萎靡,同时饮食量均降低,苦瓜总皂苷3个治疗组可明显改善上述症状,此外模型组有3只死亡,苦瓜总皂苷低、中和高剂量组分别死亡2只、2只和1只;与正常组相比,模型组LVDD和LVDS明显升高(P0.05),LVEF和LVFS明显降低(P0.05),与模型组相比,苦瓜总皂苷低剂量和中剂量组没有明显改善,而苦瓜总皂苷高剂量组LVDD和LVDS明显降低(P0.05),LVEF和LVFS则明显升高(P0.05);此外苦瓜总皂苷3个治疗组可以明显降低炎性因子TNF-α和IL-10的表达;与正常组相比,模型组Caspase-3和MMP-2表达明显升高(P0.05),与模型组相比,苦瓜总皂苷3个治疗组则可以明显降低其表达(P0.05)。结论:苦瓜总皂苷能够有效改善ISO所致的慢性心衰大鼠心功能,降低炎症反应,其机理可能与其可以抑制心脏组织中Caspase-3和MMP-2的表达有关。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心肌脂联素受体1表达及心功能的影响

目的 探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心功能及心肌组织中脂联素受体1 (AdipoR1)表达的影响.方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,模型建立成功后,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷(20 mg/kg.d)灌胃治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,分别于治疗4、8周后处死大鼠各半,测定血糖、胰岛素、血脂以及心功能,HE染色检测心脏病理学,RT-PCR以及Western Blot检测心脏组织中AdipoR1 mRNA和蛋白的表达.结果 造模成功后,糖尿病组大鼠血糖、血脂(TG、TC和FFA)以及心功能指标(CK、CK-MB、LDH和HBDH)明显升高(P＜0.05),胰岛素含量明显降低(P.05),治疗4周后,除胰岛素明显升高外(P＜0.05),各生化指标均明显下降(P＜0.05),治疗8周后进一步改善;HE染色可见,糖尿病大鼠心脏有轻微的损伤,苦瓜总皂苷对其有一定的调节作用;造模成功后模型组心肌AdipoR1 mRNA水平和蛋白表达相较于正常组明显升高(P.05),苦瓜总皂苷治疗后其AdipoR1表达显著降低(P＜0.05).结论 苦瓜总皂苷可通过降低2型糖尿病大鼠心脏组织中AdipoR1的表达,调节血脂,改善心脏功能,最终保护心肌细胞.     

人参皂苷Rh3预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用研究

目的:探讨分析注射7 d人参皂苷Rh3后心肌缺血再灌注大鼠心肌梗死面积以及心肌细胞凋亡的特点。方法:48只清洁级SD大鼠雌雄各半,适应性喂养两周后随即分为假手术组(标记为空白组)、缺血再灌注组(标记为模型组)以及人参皂苷Rh3治疗组(标记为治疗组);正常组大鼠予左冠脉前降支下穿线,但对血管不进行包扎,模型组和治疗组(造模前给予连续7 d,每天1次4 mg/kg注射干预)大鼠给予左冠脉前降支下穿线且包扎血管30 min再灌注120 min;之后处死大鼠,HE染色观察心肌病理学改变,TUNEL法检测心肌细胞凋亡;RT-PCR以及Western Bloting检测Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:病理学检查发现,空白组大鼠没有任何心肌细胞损伤,模型组心肌损伤程度较重,治疗组相较于模型组明显较轻;TUNEL可见,空白组几乎没有任何绿色荧光,模型组有明显的凋亡相关分泌,治疗组相较于模型组,其凋亡分泌明显较少;与空白组相比,模型组大鼠SOD明显下降(P0.05),MDA、CK和LDH明显升高(P0.05),治疗组相较于模型组SOD则明显升高(P0.05),MDA、CK和LDH则明显下降(P0.05);此外与空白组相比,模型组Bcl-2和Bax蛋白和m RNA表达明显增加(P0.05),治疗组相较于模型组,Bcl-2蛋白和m RNA明显较高(P0.05),Bax表达明显较低(P0.05)。结论:人参皂苷Rh3预处理,可以明显的减轻大鼠心肌再灌注损伤,这可能与其可以调节Bcl-2和Bax表达有关。     

罗汉果皂苷对阿霉素心肌损伤大鼠氧化应激和凋亡调节作用研究

目的 :从氧化应激和凋亡途径研究罗汉果皂苷对阿霉素心肌损伤大鼠的治疗作用,以为罗汉果皂苷治疗阿霉素心肌损伤提供基础实验理论。方法 :60只清洁级雄性SD大鼠采用一次性尾静脉注射阿霉素18 mg/kg构建阿霉素心肌损伤模型,模型构建成功后按照随机数字法将其分为正常组,模型组以及罗汉果皂苷低、中和高剂量治疗组,每组12只,罗汉果皂苷治疗4周后,收集血清和心脏,检测心肌病理学、心功能、血清SOD和MDA,同时采用Western Blotting和实时荧光定量检测心肌组织中Bax、Bcl-2蛋白和mRNA的表达特点。结果 :HE染色可见正常组心肌纤维排列整齐,模型组则有明显的心肌排列紊乱,与模型组相比,罗汉果皂苷低、中和高剂量有不同程度的减轻;与正常组相比,模型组AST、LDH、CK-MB和MDA明显升高(P0.05),罗汉果皂苷3个剂量组均可以明显降低上述几个指标(P0.05);与正常组相比,模型组SOD明显降低(P0.05),罗汉果皂苷3个剂量组相较于模型组则明显升高(P0.05);与正常组相比,模型组Bax蛋白和mRNA明显升高(P0.05),Bcl-2蛋白和mRNA明显降低(P0.05),与模型组相比,罗汉果皂苷3个剂量组均可以降低Bax(P0.05),同时升高Bcl-2表达(P0.05)。结论 :罗汉果皂苷可增强阿霉素心肌损伤大鼠抗氧化能力,抑制心肌细胞凋亡,进而改善心功能。     

普罗布考对阿霉素肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的 研究普罗布考对阿霉素大鼠足细胞相关分子nephrin及podocin表达的影响.方法 将36只SD大鼠分为正常对照组(12只)、肾病模型组(12只)和普罗布考干预模型组(12只),采用鼠尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素大鼠肾病模型.4周末检测各组大鼠24 h尿蛋白定量,光镜下观察肾脏病理学改变,Westem blot技术检测nephrin及podocin的表达.结果 肾病模型组和普罗布考干预组24 h尿蛋白定量均高于正常对照组(P＜0.05),但普罗布考干预组24 h尿蛋白定量低于肾病模型组(P＜0.05).肾病模型组和普罗布考干预组肾小球nephrin、podocin的表达均低于正常对照组(P＜0.05),且普罗布考干预组高于肾病模型组(P＜0.05).结论 普罗布考可能通过减轻足细胞损伤实现对阿霉素肾病大鼠肾脏的保护作用.     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心脏组织中MMP-9和HO-1表达影响

目的:探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心肌组织中血红素加氧酶1(Heme Oxygenase1,HO-1)和基质金属蛋白酶-9(Matrix Metallo Protein-9,MMP-9)表达的影响。方法:将60只健康雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,模型组和苦瓜总皂苷治疗组给予高脂饮食4周,腹腔一次性注射STZ 30 mg建立2型糖尿病大鼠模型,造模成功后,治疗组给予苦瓜总皂苷(20 mg/kg)灌胃治疗,其它两组给予生理盐水灌胃,分别于治疗4周和8周后处死大鼠各半,检测血糖、心功能以及心肌组织HO-1和MMP-9的表达。结果:与正常对照组相比,模型组血糖,心功能CK、CK-MB、LDH和HBDH明显升高(P0.05),治疗4周后均明显降低(P0.05),治疗8周后进一步降低。心肌组织HO-1和MMP-9免疫组化、Western以及RT-PCR可见,与正常组相比糖尿病组HO-1表达明显下降(P0.05),MMP-9明显升高(P0.05);治疗后HO-1表达明显增加(P0.05),MMP-9表达明显减少(P0.05)。结论:苦瓜总皂苷对大鼠心肌组织中MMP-9和HO-1有明显的调控作用。     

补肾活血祛风方对阿霉素肾病大鼠肾病蛋白分子表达的干预研究

目的:探讨补肾活血祛风方对阿霉素肾病大鼠足细胞裂隙隔膜分子肾病蛋白(Nephrin)表达及病理组织结构的影响.方法:两次尾静脉注射盐酸多柔比星(阿霉素),制备肾病综合征(Ne-phrotic Syndrome,NS)阿霉素大鼠模型.造模成功的大鼠再随机分为4组:模型组、激素组、补肾活血祛风方组和激素+补肾活血祛风方组.另设空白组.在造模成功后各干预组灌胃给药,模型组给予等体积蒸馏水灌胃,空白对照组不予干预.第28天测各组大鼠24 h尿蛋白定量、生化指标、免疫组化法检测肾组织Nephrin蛋白水平、PCR检测Nephrin mRNA表达水平、光镜和电镜观察肾组织病理结构变化.结果:与空白组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白升高、TC、TG升高(P<0.05);Alb、Nephrin蛋白及其mRNA表达降低(P<0.05);病理可见肾小球肿大、肾小管上皮细胞变性肿胀、间质纤维组织增生等.与模型组比较,激素+补肾活血祛风方组24 h尿蛋白降低最明显(P<0.05),Nephrin mRNA表达升高最明显(P<0.05);补肾活血袪风方组及激素+补肾活血祛风方组TC、TG降低(P<0.05),激素组TC、TG升高(P<0.05);各干预组大鼠肾脏病理不同程度改善,其中激素+补肾活血祛风方组病理病变最轻.结论:补肾活血祛风方可减轻阿霉素肾病大鼠的肾脏病理损害,升高Nephrin表达,降低24 h尿蛋白定量,改善血脂代谢异常,且与激素联合使用效果最优.     

罗汉果皂苷对阿霉素心肌损伤大鼠心肌细胞色素P4501A1表达影响

目的:此研究成功复制了阿霉素急性心肌细胞损伤大鼠模型,观察罗汉果皂苷治疗后大鼠心功能变化特点以及心肌细胞色素P4501A1表达的特点,以为罗汉果皂苷的开发和阿霉素心肌损伤的治疗提供参考。方法:雄性清洁级SD大鼠60只随机分为5组(①正常对照组;②阿霉素组;③阿霉素+罗汉果皂苷低剂量组;④阿霉素+罗汉果皂苷中剂量组;⑤阿霉素+罗汉果皂苷高剂量组),每组12只,阿霉素一次性静脉注射18 mg/kg造模,造模成功后给予相应药物治疗,4周后处死大鼠,检测心功能、血清TnI、SOD和MDA,计算心脏/体质量百分比,HE染色检测心肌病理学,Western Bloting检测心肌细胞色素P4501A1蛋白的表达变化特点。结果:心肌切片HE染色可见,正常组大鼠纤维排列整齐,细胞核分布均匀,而模型组大鼠则出现明显心肌细胞排列紊乱,与模型组相比,罗汉果皂苷3个剂量组均可以明显改善上述症状;与正常组相比,模型组心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左室内压差(△LVP)、左心室内压力上升最大速率(+dp/dt_(max))、左心室内压力下降最大速率(-dp/dt_(max))、心脏/体质量百分比和血清TnI均明显升高(P0.05),罗汉果皂苷可以明显降低上述指标,特别是中剂量和高剂量组均呈现出明显的统计学意义(P0.05);与正常组相比,模型组血清SOD明显降低(P0.05),MDA明显升高(P0.05),罗汉果3个剂量组均可以明显升高SOD(P0.05),同时降低MDA(P0.05);与正常组相比,模型组心肌细胞中细胞色素P4501A1明显升高(P0.05),罗汉果皂苷3个剂量组均明显降低其表达(P0.05)。结论:罗汉果皂苷可以明显改善阿霉素心肌损伤大鼠心肌病理学,同时改善心功能,这可能与其可以降低细胞色素P4501A1表达,进而提高机体抗氧化能力有关。     

甘草甜素对大鼠阿霉素肾病的保护作用

目的观察甘草甜素对大鼠阿霉素肾病肾组织层黏连蛋白(laminin,LN)的表达及尿蛋白排泄的影响,探讨甘草甜素对大鼠阿霉素肾病的发生、发展是否具有保护作用。方法18只SD雄性大鼠随机分为3组正常对照组、模型组、甘草甜素治疗组。模型组和甘草甜素治疗组大鼠采用尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型。甘草甜素治疗组予以甘草甜素灌胃8周,正常对照组和模型组大鼠予以等量生理盐水灌胃。检测各组大鼠24h尿蛋白定量及血清肾功能指标。观察各组大鼠肾组织病理学改变。采用免疫组织化学方法检测肾组织LN的表达水平。结果甘草甜素治疗组于用药第4、8周24h尿蛋白定量与同期模型组相比,均有明显改善,差异有统计学意义。甘草甜素治疗组大鼠肾组织病理学改变亦较模型组明显减轻,且肾组织LN的表达亦明显下降,差异有统计学意义。结论甘草甜素对大鼠阿霉素肾病具有一定的保护作用,可以减少尿蛋白的排泄、改善肾功能及减轻肾小球硬化的病理学改变。甘草甜素延缓肾小球硬化的进程,可能与降低肾组织LN的表达从而抑制细胞外基质的积聚相关。     

川芎嗪延缓大鼠慢性移植肾肾病作用及机制的研究

目的:探索川芎嚷对大鼠慢性移植肾肾病((Chronic allograft nephropathy,CAN)的治疗作用及其机制,为临床上延长移植肾的存活时间提供新的治疗途径.方法:F344近交系大鼠和Lewis近交系大鼠作为供、受体,建立大鼠慢性移植肾肾病模型.将75只肾移植大鼠分成3组,每组25只,分别为对照组(环孢素组),实验组(川芎嗪联合环胞素组)和空白组.观察各组大鼠移植肾组织病理学变化.原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡指数,免疫组化检测肾脏Bel-2和Bax蛋白的表达.结果:空白组肾移植大鼠存活均未超过2周;对照组4周最早出现CAN病理改变,并随病程进展移植肾病变逐渐加重,12周可见典型的CAN病变;而实验组出现时间晚,且病变相对较轻.实验组与对照组相比移植肾病理变化Banff总分差异有统计学意义(P<0.01).实验组肾组织细胞凋亡指数为13.2±2.7,对照组肾组织细胞凋亡指数为28.9±4.4,二者比较差异有显著性P<0.05.实验组与对照组相比,Bcl-2蛋白表达明显增强(15.32±0.22 vs6.89±0.14,P<0.05),而Bax表达明显减弱(7.12±0.11 v8 13.45±0.61,P<0.05).结论:川芎嗪对大鼠慢性移植肾肾病有延缓作用,其保护作用机制可能与Bcl-2蛋白表达增强和Bax蛋白表达减弱介导的肾脏细胞凋亡有关.     

阿霉素肾病大鼠podocin mRNA的表达及全反式维甲酸对其表达的影响

目的 观察阿霉素诱导的肾病模型大鼠肾脏podocin mRNA的表达特点和全反式维甲酸(ATRA)对其表达的影响,探讨在蛋白尿发生发展中podocin的作用以及ATRA治疗肾病的可能机制.方法 大鼠随机分为3组(对照组、模型组、干预组),建立阿霉素肾病大鼠模型,于阿霉素注射后第2天干预组每天给予20 mg/kg ATRA灌胃,每周检测24 h尿蛋白定量,4周后处死大鼠,检测血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯,RT-PCR检测podocin mRNA的表达.结果 ①模型组、干预组大鼠与对照组相比,pdocin mRNA表达明显增加(P＜0.01),干预组podocin mRNA较模型组有所降低(P＜0.01).②阿霉素诱导的大鼠于注射阿霉素后24 h尿蛋白开始逐渐升高,第28天达高峰,干预组与模型组相比大鼠尿蛋白明显减少,第28天时降低约57％,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 阿霉素肾病大鼠肾皮质podocin mRNA的表达发生了显著变化;ATRA可减少肾病大鼠尿蛋白量,同时减少肾皮质podocin mRNA的表达.     

蝉苏地黄汤对阿霉素大鼠肾脏纤维化及自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达的影响

目的观察蝉苏地黄汤对阿霉素肾病大鼠肾脏纤维化及自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达的影响。方法采用阿霉素造模,观察肾组织病理改变,以及纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、LC3和Beclin-1在肾组织的定位及分布。结果肾组织中FN、LN的表达:与空白组相比,模型组肾组织中FN、LN表达水平显著升高(P0.05);与模型组相比,蝉苏地黄汤组肾组织中FN、LN表达水平显著降低(P0.05);蝉苏地黄汤组与替米沙坦组相比,肾组织中FN、LN表达水平无统计学意义(P0.05)。肾组织中LC3、Beclin-1的表达:与空白组相比,模型组肾组织中LC3、Beclin-1表达水平显著升高(P0.05);与模型组相比,蝉苏地黄汤组肾组织中LC3、Beclin-1表达水平显著降低(P0.05);蝉苏地黄汤组与替米沙坦组相比,肾组织中LC3、Beclin-1表达水平无统计学意义(P0.05)。结论蝉苏地黄汤可通过下调阿霉素肾病大鼠LN、FN的表达而抑制肾小球纤维化,同时,通过下调LC3、Beclin-1的表达而抑制过度自噬,保护肾脏功能。