大鼠大脑皮质胆囊收缩素受体的体外结合分析法研究

用Ｂｏｌｔｏｎ－Ｈｕｎｔｅｒ试剂联结法标记胆囊收缩素（ＣＣＫ８）,得１２５Ｉ－ＢＨ－ＣＣＫ８,其比放射性为３．４ＴＢｑ／ｍｍｏｌ,放射化学纯度大于９６％。取其与自制的大鼠大脑皮质细胞膜进行受体放射分析,发现标记配体与大鼠大脑皮质ＣＣＫ受体的结合具有温度和时间依赖性,可饱和性,可逆性及特异性。经Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析获大鼠大脑皮质细胞膜ＣＣＫ受体Ｋｄ值为１．０９８ｎｍｏｌ／Ｌ,Ｂｍａｘ为１９７．５ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白。     

杏仁核内微量注射八肽胆囊收缩素对大鼠胃内压和胃运动的影响

向大鼠杏仁基底内侧核（ＢＭＡ）内微量注射八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）、ＣＣＫ受体阻断剂（Ａ型或Ｂ型），进行胃内压和胃运动的记录和分析。结果如下：ＣＣＫ－８（５０ｎｇ／１μｌ）注射后胃内压（ＩＧＰ）和胃蠕动频率（ＧＭＦ）显著下降（Ｐ＜０．０１）；单独微量注射ＣＣＫ－Ａ受体阻断剂Ｌ３６４７１８（１００ｎｇ／１μｌ）或ＣＣＫ－Ｂ受体阻断剂Ｌ３６５２６０（１００ｎｇ／１μｌ），对胃内压和胃运动无明显影响；先给Ｌ３６４７１８（１００ｎｇ／１μｌ）再给予ＣＣＫ－８，则ＩＧＰ，ＧＭＦ的抑制不再出现；先给Ｌ３６５２６０则ＣＣＫ－８对ＩＧＰ和ＧＭＦ的抑制仍出现；在ＢＭＡ附近，如终纹连合部（ＢＳＴＩＡ）和杏仁皮质核（ＰＬＣｏ）内注射ＣＣＫ－８均不出现胃内压、胃运动的抑制作用。提示，ＢＭＡ内ＣＣＫ－８对胃运动、胃内压有抑制作用，这种抑制作用与ＢＭＡ内的ＣＣＫ－Ａ受体有关，而ＣＣＫ－Ｂ受体可能不参加此抑制作用。     

胆囊收缩素cDNA探针制备及其在癫痫发病机制研究中的应用

目的 制备胆囊收缩素（ＣＣＫ）ｃＤＮＡ探针,并以此探针检测遗传性听源性癫痫易感大鼠癫痫发作后脑内ＣＣＫ－ｍＲＮＡ表达。方法 将含０．５ｋｂｐ Ｒａｔ ＣＣＫ－ｍＲＮＡ的质粒ＰＵＣ１３扩增、回收和纯化,用随机引物标记法,得到地高辛精（Ｄｉｇ）标记ＣＣＫ－ｃＤＮＡ探针。用原位杂交技术,原癫痫发作后大鼠海马和大脑皮层ＣＣＫ－ｍＲＮＡ表达进行研究。③结果 ＣＣＫ－ｃＤＮＡ探针标记效率为５０ｍｇ／Ｌ;遗传性     

大鼠脑神经生长因子受体分布的实验研究

本文报道了一种测定脑内神经生长因子（ＮＧＦ）受体的竞争性结合分析法。应用１２５Ｉ－ＮＧＦ作为放射配基，在含有过量未标记ＮＧＦ条件下，１２５Ｉ－ＮＧＦ与不同脑组织细胞膜于３７℃下孵育３０ｍｉｎ达到可逆的平衡状态的。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析，根据其与配体亲和力的不同分为高亲和力（Ⅰ型）与低亲和力（Ⅱ型）结合位点两种受体亚型，平衡解离常数（Ｋｄ）分别约为４ｐｍｏｌＬ－１及１．６ｎｍｏｌＬ－１，最大结合能力（Ｂｍａｘ）约为０．５ｆｍｏｌ／Ｌｍｇ－１（蛋白）及２４ｆｍｏｌ／Ｌｍｇ－１（蛋白）。脑内各分区ＮＧＦ受体的结合容量依次为中隔、小脑、脑干、大脑皮质、下丘脑、嗅脑。     

大鼠伏核中胆囊收缩素对学习记忆的影响机制

目的研究大鼠伏核中胆囊收缩素（ＣＣＫ）调节学习记忆的受体机制。②方法采用行为和脑核团内微量注射相结合的方法，利用三等分辐射式迷宫模型观察大鼠伏核中胆囊收缩素对分辨学习（ＤＬ）和条件性回避反应（ＣＡＲ）的影响。③结果双侧伏核中后区注射ＣＣＫ－Ａ受体阻断剂Ｌ－３６４，７１８对ＤＬ和ＣＡＲ有明显的抑制效应（ｔ＝６．５０，８．５５，Ｐ＜０．０１），而ＣＣＫ－Ｂ受体阻断剂Ｌ－３６５，２６０对ＤＬ和ＣＡＲ无影响（ｔ＝２．１４，２．１４，Ｐ＞０．０５）。④结论伏核中后区内ＣＣＫ－Ａ受体参与对ＤＬ和ＣＡＲ的调节，提示伏核中后区内源性ＣＣＫ对学习记忆过程具有促进作用，并且是通过ＣＣＫ－Ａ受体实现的，而ＣＣＫ－Ｂ受体不起作用     

胆囊收缩素对大鼠催乳素释放的调节及其机理

给清醒自由活动的大鼠第三脑室内微量注射０．０５和０．５μｇ胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）观察到，可显著兴奋前叶垂体催乳素（ＰＲＬ）的静息分泌，并进一步促进限制性应激引起的ＰＲＬ释放。０．０５μｇＣＣＫ－８的上述两种作用较０．５μｇＣＣＫ－８的效应更强。在体外培养的前叶垂体细胞中，分别加入０．０５、０．５、１．０μｇＣＣＫ－８，孵育１ｈ，看到３种剂量的ＣＣＫ－８均显著兴奋ＰＲＬ释放，兴奋效应依ＣＣＫ－８的剂量增加而增大；２×１０－４ｍｏｌ／ＬＣＣＫ－８可使前叶垂体细胞的胞内Ｃａ２＋浓度显著升高，而１０－６～１０－８ｍｏｌ／Ｌ的ＣＣＫ－８不影响其胞内ｃＡＭＰ的含量。     

牛肾上腺皮质细胞成纤维细胞生长因子受体观测

目的：检查基础培养条件下牛肾上腺皮质束、网状带细胞（ＢＡＣ细胞）碱性成纤维细胞生长因子（ＢＦＧＦ）受体的分布情况。方法：ＢＡＣ细胞培养，＾１２５Ｉ－ｂＦＧＦ放射怀受体结构标记：γ－计数仪放射活性测定；Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析。结果：在该培养条件下，ＢＡＣ细胞表达的ｂＦＧＦ受体分为高、低两个亚型。它们的数目分别为４５００个／细胞和２８０００个／细胞，它们的平衡解离常数（ＫＤ）分别为２３．５和３８１．９     

八肽胆囊收缩素对谷氨酸神经毒性的拮抗作用

目的：探讨八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对谷氨酸神经兴奋毒性的作用。方法：采用神经元原代分离培养技术，应用电镜观察经不同药物处理后的大鼠大脑皮层神经元的形态学变化，同时测定细胞上清液中ＬＤＨ活性值，并进行ｔ检验等统计学分析。结果：ＣＣＫ－８能明显改善由谷氨酸诱导的神经元结构的破坏和减少神经元损伤后ＬＤＨ的释放，该作用可被ＣＣＫ＿Ｂ受体拮抗剂阻断。结论：ＣＣＫ－８可通过Ｂ受体介导产生对谷氨酸神经毒性的拮抗作用。     

八肽胆囊收缩素对谷氨酸诱导神经元死亡的损坏抗作用及机制研究

以谷氨酸、ＮＭＤＡ作用原代培养的大鼠大脑皮层神经元，随药物浓度递增，作用时间延长，细胞存活率逐渐下降。八肽胆囊收缩素对谷氨酸、ＮＭＤＡ诱导的神经元死亡具有明显的拮抗作用，在其浓度为１×１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ时其拮抗率为７７．８±４．４％和７５．４±６．７％，ＣＣＫＢ受体拮抗剂Ｌ－３６５２６０可完全阻断八肽胆囊收缩素的保护作用，而ＣＣＫＡ受体拮抗剂Ｌ－３６４７１８无此作用。应用Ｆｕｒａ－２荧光技术测定     

八肽胆囊收缩对谷氨酸神经毒性的拮抗作用

目的；探讨八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对谷氨酸神经兴奋毒性的作用。方法；采神经元原代分离培养技术，应用电镜观察经不同药物处理后的大鼠大脑皮层神经元的形态学变化，同时测定细胞上清液中ＬＤＨ活性值，并进行ｔ检验等统计学分析。结果；ＣＣＫ－８能明显改善由谷氨酸诱导的神经元结构的破坏和减少神经元损伤后的ＬＤＨ的释放，该作用可被ＣＣＫＢ受体拮抗剂阻断。结论；ＣＣＫ－８可通过Ｂ受体介导产生对谷氨酸神经毒性的所     

CCK—A及CCK—B受体mRNA在SD大鼠肺组织中的表达

ＣＣＫＡ及ＣＣＫＢ受体ｍＲＮＡ在ＳＤ大鼠肺组织中的表达丛斌凌亦凌谷振勇黄善生左敏基础医学院病理生理学教研室（０５００１７）王俊霞姚玉霞彭郁葱分子生物学研究室关键词受体，免疫；核糖核苷类／代谢；肺／代谢中图号Ｒ３２２．３５胆囊收缩素（Ｃｈｏｌｅｃ...     

血清肌酸激酶同功酶BB和神经元特异性烯醇酶用于小细胞肺癌的临床价值

用层析荧光法和ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测了２０例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ），３０例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），２５例良性肺疾病和３０例正常对照者血清中肌酸激酶同功酶ＢＢ（ＣＫ－ＢＢ）和神经元特异性烯醇酶（ＮＳＥ）。结果表明：ＳＣＬＣ组血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ含量高于其它３组（Ｐ＜０．００１）；４组血清的ＣＫ－ＢＢ均值分别为３０．２、８．４、６．３和４．３ＩＵ／Ｌ，ＮＳＥ分别为５２．２、１２．７、１０．３、和９．２ｎｇ／ｍｌ．以９．５ＩＵ／Ｌ（ＣＫ－ＢＢ）和２０．８ｎｇ／ｍｌ（ＮＳＥ）为正常值上限，ＳＣＬＣ组的阳性率分别是７０％（ＣＫ－ＢＢ）和８０％（ＮＳＥ），高于ＮＳＣＬＣ组（Ｐ＜０．００５）。ＳＣＬＣ血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ显著相关（ｒ＝０．７９３４，Ｐ＜０．００１），联合检测可使敏感性提高到９０％，特异性提高到９４％。因此，作者认为血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ可以作为ＳＣＬＣ的诊断指标，联合检测可提高临床应用价值。     

大鼠海马内微量注射八肽胆囊收缩素及其受体阻断剂对胃内压和胃运动的影响

应用核团内微量注射方法，向大鼠海马内注入八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）及ＣＣＫ－Ａ受体阻断剂（Ｌ３６４７１８），观察其对胃内压（ＩＧＰ）和胃蠕动频率（ＧＭＦ）的影响。结果表明，双侧海马（ＣＡ３）内注射ＣＣＫ－８可降低ＩＧＰ和ＧＭＦ．在双侧ＣＡ３内注射Ｌ３６４７１８的基础上，双侧ＣＡ３内注射ＣＣＫ－８，其降低ＩＧＰ和ＧＭＦ的作用不再出现。双侧ＣＡ１内微量注射ＣＣＫ－８，不出现ＩＧＰ及ＧＭＦ的抑制现象。双侧ＣＡ３内注射同容积生理盐水也无此类抑制作用。提示海马ＣＡ３内ＣＣＫ－８可抑制胃内压和胃的运动，该作用是通过激活ＣＣＫ－Ａ受体实现的。     

胆囊收缩素八肽对帕金森病大鼠旋转行为的调节作用

胆囊收缩素八肽（ＣＣＫ－８）对中枢神经系统的神经元有强烈的兴奋作用,它不仅对痛觉、摄食行为、内分泌、学习和记忆有重要的调节作用,还对中脑－边缘系统多巴胺（ＤＡ）能神经元的功能活动产生重要影响。腹侧中脑富含ＣＣＫ受体,主要位于ＣＣＫ－８与ＤＡ共存神经元上。本实验在制备帕金森病（ＰＤ）大鼠模型的基础上,观察静脉、腹侧被盖区（ＶＴＡ）和伏核（Ａｃｂ）注射ＣＣＫ－８及其受体拮抗剂对阿朴吗啡（ＡＰＯ）诱导的ＰＤ大鼠旋转行为的影响。材料和方法一、实验动物：成年雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,体重２００～３００ｇ,２…     

猪胰细胞膜缩胆囊肽结合蛋白的纯化

从猪胰细胞膜提取、纯化得到一种缩胆囊肽（ＣＣＫ）结合蛋白，达电泳纯。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），其亚基分子量为４３．１×１０＾－２２ｋｇ。此结合蛋白与不同的ＣＣＫ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ作用时显示，其与硫酸化ＣＣＫ－８、ＣＣＫ－８、硫酸化亮氨酸脑啡肽（Ｌｅｕ－ｅｎｋ）结合活性较大，而与ＣＣＫ－６、ＣＣＫ－４及Ｌｅｕ－ｅｎｋ结合活性较弱。说明ＣＣＫ羧基末端第七位上酪氨酸的硫酸     

猪胰细胞膜缩胆囊肽结合蛋白的纯化

从猪胰细胞膜提取、纯化得到一种缩胆囊肽（ＣＣＫ）结合蛋白，达电泳纯。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），其亚基分子量为４３．１×１０－２２ｋｇ。此结合蛋白与不同的ＣＣＫ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ作用时显示，其与硫酸化ＣＣＫ－８、ＣＣＫ－８、硫酸化亮氨酸脑啡肽（Ｌｅｕ－ｅｎｋ）结合活性较大，而与ＣＣＫ－６、ＣＣＫ－４及Ｌｅｕ－ｅｎｋ结合活性较弱。说明ＣＣＫ羧基末端第七位上酪氨酸的硫酸化对ＣＣＫ结合活性有较大影响。并与ＣＣＫ肽链的长度有关。     

WKY大鼠与SHR血管平滑肌神经肽Y受体数量及其亲和力的对照研究

目的：了解Ｗｉｓｔａｒ－Ｋｙｏｔｏ大鼠（Ｗｉｓｔａｒ－Ｋｙｏｔｏｒａｔｓ,ＷＫＹ）、自发性高血压大鼠（Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａｔｓ,ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（Ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ,ＶＳＭＣ）上神经肽Ｙ（ＮｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ,ＮＰＹ）受体的表达水平及其差异。方法：应用Ｉｏｄｏｇｅｎ法对ＮＰＹ受体进行了测定。结果：ＮＰＹ蛋白质标记率为７０％,比活度为３．３６ＭＢｑ／μｇＶＳＭＣ在（１．０～５．０）×１０６细胞／ｍｌ的范围内,１２５Ｉ－ＮＰＹ的特异性结合量与ＶＳＭＣ细胞数之间呈线性关系;ＳＨＲ的ＮＰＹ受体最大结合量（Ｂｍａｘ）和受体复合物解离常数（Ｋｄ）均明显高于ＷＫＹ,相关分析显示Ｂｍａｘ,Ｋｄ与血压增高程度呈正相关。结论：ＮＰＹ受体数目和亲和力的增加可能在高血压的发病机制中占有重要的地位     

~（99m）Tc－新半乳糖白蛋白体外受体介导结合特性的研究

本文报道￣９９ｍＴｃ－新半乳糖白蛋白（￣９９ｍＴｃ－ＮＧＡ）与大鼠肝细胞膜进行体外结合试验。结果表明：￣９９ｍＴｃ－ＮＧＡ系与肝细胞膜上的高亲和力低容量（Ｋ＿１：８．４０８９×１０￣９Ｌ／ｍｏｌ；Ｒ＿１：１．７３５０×１０￣（－１２）ｍｏｌ／ｍｇ）和低亲和力高容量（Ｋ＿２：２．０８２７×１０￣８Ｌ／ｍｏｌ；Ｒ＿２：６．９５３０×１０￣（－１２）ｍｏｌ／ｍｇ）２个结合位点相结合，其结合表现出高特异性、可饱和性及对细胞膜蛋白浓度的线性依赖性，具备受体介导结合的基本特征。￣（９９ｍ）Ｔｃ－ＮＧＡ是一个很有希望的肝受体显像剂。     

肌酸激酶同功酶MB与肌酸激酶总酶的比值对急性心肌梗死的诊断价值

目的研究血清肌酸激酶同功酶ＭＢ（ＣＫ－ＭＢ）与肌酸激酶总酶（ＣＫ）的比值对急性心肌梗死（ＡＭＩ）的诊断价值。方法比较非心脏病组（血清ＣＫ＞４００ｕ／Ｌ和（或）ＣＫ－ＭＢ＞５０ｕ／Ｌ）７５例和ＡＭＩ组４２例患者ＣＫ－ＭＢ／ＣＫ＞５％病例的阳性率,评价ＣＫ－ＭＢ／ＣＫ＞５％对ＡＭＩ的诊断价值。结果ＡＭＩ组ＣＫ－ＭＢ／ＣＫ＞５％的阳性率为７８．６％,显著高于非心脏病组的２２．７％（Ｐ＜０．０１）。ＣＫ－ＭＢ／ＣＫ＞５％对ＡＭＩ诊断的准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为７７．８％,６６．０％和８６．６％。恶性肿瘤患者ＣＫ－ＭＢ／ＣＫ（４１．９±２９．６）显著高于ＡＭＩ患者（８．９±７．４）,Ｐ＜０．０１。结论ＣＫ－ＭＢ／ＣＫ＞５％指标对ＡＭＩ的诊断价值较有限,但若能排除致ＣＫ－ＭＢ假性升高的病例,则可使诊断价值明显提高。     

膀胱肿瘤细胞膜肿瘤坏死因子受体测定及其意义

目的探讨膀胱肿瘤细胞膜肿瘤坏死因子受体（ＴＮＦ－Ｒ）的表达情况。方法用放射配基结合分析法测定了体外培养的膀胱癌ＢＩＵ－８７细胞膜ＴＮＦ－Ｒ。结果膀胱肿瘤细胞膜存在ＴＮＦ－Ｒ，当肿瘤细胞１．６×１０６个、ｐＨ７．０～８．０、４℃条件下反应１２０ｍｉｎ时，１２５Ｉ－ＴＮＦ与受体结合反应良好，受体解离常数为０．１５ｎｍｏｌ／Ｌ，数目为８６９个结合位点／细胞。结论由于肿瘤细胞存在ＴＮＦ－Ｒ，因此对膀胱肿瘤进行免疫治疗时，ＴＮＦ可以和受体结合发挥生物学效应以杀灭肿瘤细胞