桃儿七组织培养体系的建立及鬼臼毒素的检测

目的 建立桃儿七组织培养体系及其鬼臼毒素的提取检测方法。方法 以桃儿七成熟分离胚为材料,研究了不同浓度激素、活性炭(AC)对无菌苗诱导的影响;以桃儿七无菌苗切除后约 2.0 cm 的根茎为材料,考察不同浓度激素对根继代及生长发育的影响,并定期对继代根、叶(叶柄)及培养基进行鬼臼毒素的提取及 HPLC 法检测。结果 分离胚在 MS+2.0% 蔗糖+0.4% 琼脂+1.0 mg/mL GA3+1.0 g/LAC 的培养基培养 20 d 后,无菌苗诱导率为 92.0%,无菌苗生长发育良好;切除后约 2 cm 的根茎接种在 MS+2.0% 蔗糖+0.4% 琼脂+1.0 g/L AC+1.0 mg/mL IBA 继代 40 d 后,根长 11.59 cm,植株生长发育良好;对继代根、叶(叶柄)及培养基进行鬼臼毒素的提取及 HPLC 法检测显示,鬼臼毒素量大小依次为根＞培养基＞叶(叶柄),50 d 后分别为 33.17、12.97、4.55 μg/mL。     

高效液相色谱法测定马兜铃酸A在细胞培养基中含量变化*

[目的]建立细胞培养基中马兜铃酸A高效液相色谱(HPLC)法的测定方法,考察在细胞培养条件下马兜铃酸A在培养基中的稳定性。[方法]样品经甲醇沉淀蛋白,10 000 r/min,离心5 min,取上清液进样。采用HPLC法,Waters C18柱(150 nm×4.6 nm,5μm),甲醇-水(含3%的冰醋酸)(70∶30,V/V)为流动相;检测波长260 nm,柱温30℃,流速1 mL/min。[结果]马兜铃酸A在0.5~50 mg/L范围内线性良好,相关系数r=0.999 8;日内、日间精密度相对标准偏差(RSD)分别为0.96%、1.92%;回收率为94.01%~104.34%。[结论]马兜铃酸A在培养基中3 d内含量稳定,该法简便、灵敏、特异性强,适用于细胞培养基中马兜铃酸A含量的测定。     

HPLC法测定马兜铃蜜炙过程中马兜铃酸A的含量变化

目的采用高效液相色谱法测定马兜铃蜜炙过程中马兜铃酸A的含量变化。方法色谱柱:Hypersil ODS2C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-0.05%H3PO4溶液(体积比40∶60),柱温:25℃,流速:1.0 mL.min-1;检测波长:260 nm。结果马兜铃酸A线性范围为0.021 2～0.424 0μg,r=0.999 9,平均加样回收率98.80%,RSD值为2.10%(n=6)。结论该含量测定方法简单、准确、可靠;马兜铃经蜜炙后马兜铃酸A的含量下降,说明蜜制马兜铃能起到降低毒性的作用。     

小青龙膏贴中马兜铃酸A限量检查和盐酸麻黄碱含量测定

目的建立小青龙膏贴中马兜铃酸A限量检查和盐酸麻黄碱含量测定方法。方法薄层色谱法检查马兜铃酸A限量。HPLC法测定盐酸麻黄碱含量,采用Zorbax TC-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以甲醇-0.1%磷酸(10∶90)为流动相;流速:1mL/min;检测波长:207nm。结果细辛药材及制剂中未检出马兜铃酸A。盐酸麻黄碱含量线性范围0.0404-0.404μg(r=0.9999),平均回收率和RSD分别为100.21%和1.82%。3批样品中,盐酸麻黄碱含量分别为4.7273mg/贴、4.7137mg/贴、4.7195mg/贴。结论该方法简便、可靠,可用于小青龙膏贴中马兜铃酸A限量检查和盐酸麻黄碱含量测定。     

不同产地贯叶金丝桃全草中总黄酮的含量测定

目的:用AlCl3-醋酸缓冲液(pH4.5)、NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法测定不同产地贯叶金丝桃药材中总黄酮的含量。方法:利用黄酮类化合物在不同条件下与铝离子络合形成有色物质,在不同波长下测定其吸收度,按线性方程计算其含量。结果:金丝桃苷浓度为0.005736~0.034416mg/m l(r=0.9998)及12.688~76.128μg/m l(r=0.9999)时与峰面积呈良好的线性关系,方法平均回收率分别为98.3%、99.8%。结论:两种比色法都可用于贯叶金丝桃药材中总黄酮的含量测定,AlCl3-醋酸缓冲液更能真实准确地反映贯叶金丝桃中总黄酮的含量。     

高效液相色谱法测定酸模各部位大黄素含量

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法测定酸模大黄素含量的方法,并对酸模各部位的大黄素含量进行比较.方法 采用超声提取法制备供试品溶液,运用HPLC法测定酸模大黄素含量.Zorbax XDB-C18色谱柱;流动相为甲醇:1%冰醋酸=70:30(V:V);检测波长:254 nm;流速:1.5 mL·min-1;柱温:40℃;进样量:20μL.结果 大黄素进样在1～500μg·mL -1浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9995),加样回收率为97.52%,RSD为2.40%(n=6).酸模根、根茎与叶中大黄素含量分别为2.7204、2.5966和0.0580 mg·g-1.结论 本法适用于酸模中大黄素含量的检测.酸模根与根茎中大黄素含量高于叶中大黄素含量.     

HPLC法测定新疆不同产地石榴皮中鞣花酸含量

目的建立测定新疆不同产地石榴皮中鞣花酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法检测石榴皮中鞣花酸的含量:ZORBAX SB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇∶乙酸乙酯∶磷酸二氢钾/磷酸(0.05mol/L)(32∶2∶66)为流动相;流速为0.8mL/min,检测波长254nm,柱温30℃。结果石榴皮中鞣花酸的线性范围为1.018 8～1 273.44μg/mL(r=0.999 9),平均回收率(n=9)为101.0%,RSD为1.15%。经测定喀什市酸石榴皮中鞣花酸含量最高。结论 HPLC法简便、准确、重复性好,可用于石榴皮中鞣花酸含量的测定,为药材基原选择与石榴皮的质量控制提供了一定的依据。     

RP-HPLC法测定苯噻啶片含量

目的:建立苯噻啶片的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法选用S inoChrom OPS-AP(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,检测波长为200nm,流动相为0.05m o l/L磷酸二氢钠缓冲液-乙腈-甲醇(50∶41∶9)(含1.5%三乙胺,磷酸调pH 3.0),流速为0.8 m l/m in,β-萘酚作为内标物。结果:苯噻啶在7~112μg/m l范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.46%(RSD=0.53%,n=3)。结论:本法可用于该片的含量测定,操作简便,结果准确。     

细辛不同药用部位马兜铃酸的含量测定

通过高效液相色谱法,优化色谱条件,测定细辛不同批次、不同药用部位马兜铃酸的含量,为细辛药材的质量控制提供依据。方法采用高效液相色谱法,0.1%甲酸乙腈-水(40∶60)为流动相,C18色谱柱(4.6mm×150mm,5 m),流速1.0mL/min,检测波长320nm,柱温35℃,检测其限量成分马兜铃酸的含量。结果马兜铃酸在上述检测条件下检测限为0.4ng/mL,在0.001～0.200 g/mL范围内与峰面积有良好的线性关系(r=0.9985),平均加样回收率为98.09%,RSD为2.19%。检测结果显示不同批次细辛药材中地上部分均测出有痕量马兜铃酸,地下部分未能测出。结论该方法快速、准确,操作简单,专属性强,可为细辛药材的质量控制提供参考依据。     

HPLC法测定氯霉素搽剂中氯霉素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定氯霉素搽剂中氯霉素的含量。方法:采用Kromasil C18柱,流动相为乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调节pH值至3.5)(30∶70),检测波长278 nm。结果:氯霉素在25~1 000μg/m l(r=1.000 0,n=6)浓度呈线性关系,平均回收率为99.8%,RSD=0.29%。结论:本方法操作快速、准确、线性范围宽,可有效测定氯霉素的含量。     

HPLC法测定丹七合提物中三七皂苷R1的含量

目的:建立HPLC法测定丹七合提物中三七皂苷R1的方法.方法:采用HPLC方法,Discovery C18色谱柱(25cm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水(20:80),流速为1ml/min,检测波长为203nm.结果:三七皂苷R1的线性范围为0.09257-1.18223 μg(r=0.9997...     

炮制前后知母中芒果苷和新芒果苷的含量变化

目的:考察炮制前后知母(Anemarrhena asphodeioides Bge.)中黄酮类成分芒果苷和新芒果苷的含量变化.方法:采用HPLC法测定知母、炒知母中芒果苷和新芒果苷的含量,流动相为乙腈-25 mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)梯度洗脱.应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A版(国家药典委员会)对3个批号的知母炮制前后的色谱图进行评价.结果:3个批号的知母炮制前后芒果苷的含量升高,而新芒果苷的含量下降;炮制前后图谱的相似度均有所下降(<1).结论:炮制后知母中黄酮类成分芒果苷和新芒果苷的含量发生了变化.     

高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度

目的:用高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度。方法:采用转篮法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度,以高效液相色谱法定量。色谱柱为RP-C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相为0.033 mol/L,磷酸二氢钾-乙腈(60∶40);流速为1.0 mL/min;检测波长265 nm;进样量为10μL。结果:盐酸小檗碱在0.992~9.920μg/mL范围内有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为100.2%,RSD=0.38%(n=9),3批样品45 min溶出度均在75%以上。结论:高效液相法测定溶出度简便、准确、灵敏度高,可用于复方黄连素片中盐酸小檗碱溶出度的测定。     

反向离子对色谱法测定益母草药材中水苏碱和益母草碱的含量

OBJECTIVE: To establish a high-performance liquid chromatography (HPLC) for determining stachydrine and leonurine contents in the crude drug of Yimu Cao, a Chinese motherwort herb(Herba Leonuri, the aerial part of Leonurus japonicus). METHODS: The sample was obtained from the crude drug by ultrasonic extraction with ethanol after decolorization with ethyl acetate. YMC-Park CN column (250.0 mm x 4.6 mm) was used with the mobile phase for stachydrine of 0.00125 mol/L SDS:C2H5CN (90:10) at the flow rate of 1.5 ml/min with the wavelength for detection of 201.7 nm, and that for leonurine of 0.00125 mol/L SDS (containing 0.05% HClO4):CH4OH(90:10) at the flow rate of 1 ml/min with the wavelength for detection of 282 nm. The sensitivity was 0.1 AUFs and the column temperature was 20 degrees Celsius;. RESULTS: With the injection amount (mg) as the abscissa and the peak area as the ordinate, the regression equation of the calibration curve for stachydrine was Y=1,187.542 3X-168.9822, and that for leonurine was Y=5,202.654X-221.141 (r=0.9998) with the linearity scope of 2.5-12.5 mg, detective limit of 0.15 mg, and recovery of (99.03+/-2.744) %. The analysis of extracted drug samples from 18 regions indicated that the alkaloids contents in Yimu Cao varied significantly, i.e. stachydrine within a range of 0.1%-0.2% while leonurine content, which was much lower, within 0.01%-0.05%. In general, the alkaloid contents were higher in the drug produced in northern China than in those produced in southern China. L. japonicus and the variant L. japonicus albiflorus had total alkaloid contents around 0.3%, which was higher than the contents of other species. CONCLUSION: As a convenient and feasible means for determining the alkaloid contents in Yimu Cao, HPLC produces accurate and reliable results and can be more effective than the formerly used methods.     

反向离子对色谱法测定益母草药材中水苏碱和益母草碱的含量

目的建立益母草中水苏碱、益母草碱含量测定的高效液相色谱法。方法生药经乙酸乙酯脱色后,用乙醇超声提取,得样品。采用YMC-Park CN 柱(250.0 mm×4.6 mm);水苏碱测定用流动相为0.001 25 mol/L SDS(含0.05%高氯酸) ∶乙腈(90∶10),流速1.5 ml/min,检测波长201.7nm;益母草碱测定用流动相为0.001 25 mol/L SDS(含0.05%高氯酸)∶甲醇(50∶50),流速1 ml/min,检测波长282 nm;灵敏度0.1AUFs,柱温20 ℃。外标法定量。结果以进样量( mg )为横坐标,峰面积为纵坐标,水苏碱回归方程为Y=1187.542 3X-168.982 2;益母草碱回归方程为Y=5202.654X-221.141(r=0.9998),线性范围2.5~12.5 mg,最小检出限0.15 mg,加样回收率为(99.030±2.744)%。18个不同地区样品分析结果显示,不同产地的药材中两种生物碱的含量差异甚大,水苏碱约在0.1%~0.2%,益母草碱在生药中含量很低,约在0.01%~0.05%之间。总体而言,产于北方者生物碱含量较高,而产于南方者普遍较低。益母草及其变种白花益母草总生物碱含量在0.3%左右,高于其他品种。结论用高效液相色谱法测定益母草中生物碱含量,简便易行,结果准确可靠,优于以前的方法。     

芩术四物汤中黄芩苷和芍药苷的含量测定

目的:建立芩术四物汤中黄芩苷、芍药苷的含量测定方法,控制其质量。方法:采用Dia-monsil C18(250 mm×4.6 mm,5 m)色谱柱;流动相分别为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2),乙腈-水-磷酸(14∶86∶0.1);检测波长为280 nm及230 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:25℃。结果:复方中黄芩苷在0.03147～1.007 mg/mL范围内线性关系良好,回归方程为Y=3E-08X-0.0037(r=0.9999),平均回收率为98.17%,RSD%=1.14%。芍药苷在0.03116～0.997 mg/mL范围内线性关系良好,回归方程为Y=8E-0.8X+0.0011(r=0.9999),平均回收率为97.83%,RSD%=1.24%。结论:该方法简便、快速、准确、重复性好,为芩术四物汤的质量控制提供了理论依据。     

高效液相色谱法测定急支糖浆中盐酸麻黄碱含量

目的:采用高效液相色谱(HPLC)法测定急支糖浆盐酸麻黄碱的含量。方法:采用Kromasil C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相0.05mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调节pH=3)-甲醇(80:20),流速为1mL/min,检测波长210nm;柱温室温。结果:盐酸麻黄碱质量浓度的线性范围为25～75μg/mL,r=0.9993,平均回收率为97.53%,RSD=0.92%。结论:HPLC法简便、快速、灵敏度高,可用于测定盐酸麻黄碱含量,进行控制药品质量。     

哌嗪雌酚酮的含量测定方法研究

目的 采用非水滴定法和HPLC-UV法测定哌嗪雌酚酮原料药含量，建立柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法测定狗血浆中哌嗪雌酚酮含量。方法 分别采用无水冰醋酸为溶剂，0．1mol／L高氯酸为滴定液，结晶紫指示液指示终点的非水滴定法和HPLC-UV法测定哌嗪雌酚酮原料药含量；以FMOC-CL为衍生化试剂，采用柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法测定狗血浆中哌嗪雌酚酮含量。结果非水滴定法日内精密度(RSD)及日间精密度(RSD)分别为0．28％、0．21％；HPLC-UV法中哌嗪雌酚酮在1．001～5．005μg范围内呈良好的线性关系和重现性，方法的检测限为4ng(S／N=3)；柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法中线性范围为8．4～420ng／mL，净化回收率为77．24％～83．10％，方法回收率为98．33％～103．3％，日内精密度(RSD)及日间精密度(RSD)分别小于7．7％和7．3％，方法的检测限为1ng(S／N=3)。结论 以上三种方法简便、准确、重现性好，分别为哌嗪雌酚酮原料药及狗血浆中的哌嗪雌酚酮的含量测定提供了方法。     

何首乌不同炮制品中大黄酸的含量测定

目的：通过HPLC法比较何首乌不同炮制品中大黄酸的含量。方法：采用Shim-pack VP-ODS（150mm×4．6mm,5μm）色谱柱;流动相为甲醇：水（70：30,磷酸调至pH=3）;柱温：24℃;流速：1．0mL／min;检测波长：437nm。按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积积分值对进样量进行线性回归。结果：回归方程Y=673755．99X-33059．11,r=0．9991,大黄酸线性范围为0．0132～0．132mg,r=0．9991。大黄酸在不同何首乌含量分别为生首乌8．231mg／g,黑豆制首乌5．166mg／g,酒制首乌4．977mg／g,蒸制首乌5．023mg／g。结论：何首乌的不同炮制品中大黄酸的含量不同,以生首乌中大黄酸的含量最多,酒制何首乌中大黄酸的含量最少。     

逍遥胶囊的质量标准研究

目的制订逍遥胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱（TLC）对处方中柴胡、当归、白芍、炒白术、茯苓、炙甘草、薄荷、生姜8味中药进行定性鉴别,采用高效液相色谱法（HPLC）对制剂中的阿魏酸、芍药苷含量进行定量测定。结果 TLC法能定性检出柴胡、当归、白术、白芍、生姜、炙甘草,斑点清晰,且阴性对照无干扰;HPLC法测定阿魏酸在0.166～2.075 mg,芍药苷在0.106～1.330μg;范围内线性关系良好,r分别为0.999 5与0.999 9;阿魏酸平均加样回收率为99.09%、RSD=1.37%,芍药苷98.02%、RSD=1.74%。结论定性、定量检测方法操作简便、结果准确可靠、重现性好,可有效地控制逍遥胶囊的质量。