基质金属蛋白酶抑制剂Marimastat抑制胃癌生长和转移的作用

目的:观察基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂Marimastat对人胃癌在裸鼠体内生长和转移的抑制作用。方法:人胃腺癌细胞株SGC-7901完整组织块裸鼠原位种植,建立类似于临床的胃癌转移模型。移植7 d后,治疗组开始腹腔内注射Mari-mastat,隔天1次,剂量为10、30、60 mg/kg,每个剂量组13只裸鼠,对照组13只裸鼠给予相同量的生理盐水,8周后处死动物,测量原位肿瘤大小,计算抑瘤率,免疫组织化学法检测肿瘤微血管密度(MVD)、MMP-9的表达率,并观察肿瘤转移情况。结果:对照组和治疗组Marimastat剂量为10、30、60mg/kg时,原位肿瘤质量分别为(1.63±0.53)、(0.71±0.28)、(0.33±0.17)、(0.14±0.09)g;抑瘤率分别为0、56.4％、79.8％、91.4％;MVD分别为(1.36±4.56)、(8.74±2.22)、(3.25±1.29)、(0.92±0.76);MMP-9的表达率分别为81.8％、38.5％、23.1％、0;腹膜转移率分别为81.8％、30.8％、15.4％、0;肝脏转移率分别为90.9％、38.5％、23.1％、0。治疗组与对照组相比,胃癌的生长和转移受到明显抑制(P<0.05),且与Marimastat的剂量呈正相关。结论:Marimastat对体内胃癌的生长及转移均有抑制作用。     

气腹对裸鼠腹腔恶性肿瘤细胞种植和生长的影响

目的 :探讨CO2 及N2 气腹对裸鼠腹腔恶性肿瘤细胞种植和生长的影响。 方法 :30只裸鼠分为 3组 ,即开腹组、CO2气腹组、N2 气腹组 ,每组 10只动物。术前 30min每只裸鼠腹腔注入 5× 10 5SHZ88细胞 ,术后 1h、4 8h取 3组裸鼠的前腹膜行透射电镜检查 ,术后 30d处死所有裸鼠 ,打开腹腔对比腹腔生长的肿瘤平均质量。 结果 :CO2 气腹组与N2 气腹组腹膜电镜下表现为间皮细胞变性、间皮细胞间连接断裂、基底膜裸露以及完整性破坏 ,开腹组腹膜的微观结构没有明显改变。术后30d开腹组腹腔生长的肿瘤平均质量为 (0 .736 8± 0 .1895 )g ,CO2 气腹组为 (1.786 1± 0 .0 399)g ,N2 气腹组为 (0 .82 6 0±0 .35 5 9) g ,其中CO2 气腹组腹腔生长的肿瘤平均质量与开腹组和N2 气腹组有显著性区别 (P <0 .0 1) ,开腹组与N2 气腹组腹腔生长的肿瘤的平均质量无显著性差别。 结论 :N2 气腹对裸鼠腹腔恶性肿瘤的生长无明显促进作用 ,CO2 气腹有明显促进作用 ,其主要原因可能在于CO2 气体本身。     

与胃癌腹膜高转移细胞表面受体特异性结合的多肽片段的研究

目的利用噬菌体随机肽库筛选与胃癌腹膜高转移细胞特异性结合的多肽,为肿瘤细胞的靶向性治疗筛选药物和载体。方法利用噬菌体随机十二肽库对人胃癌细胞系GC9811和其腹膜高转移亚系GC9811P进行3轮差异筛选、富集,获得与胃癌腹膜高转移细胞亲和的噬菌体克隆。酶联免疫吸附实验(ELISA)测定其与GC9811P和GC9811细胞的亲和力,提取阳性噬菌体DNA并进行DNA序列测定,获得与胃癌腹膜高转移细胞亲和的多肽序列并予合成。利用荧光染色和流式细胞仪鉴定噬菌体克隆和合成肽与胃癌腹膜高转移细胞的体内外的结合特异性。结果筛选及ELISA结果显示得到与GC9811P细胞特异性结合并内化入癌细胞的噬菌体克隆,测序结果示45%的被检噬菌体展示相同的多肽序列SMSIASPYIALE,推测SMSI是胃癌腹膜高转移细胞特异性结合肽的基序。合成的多肽与细胞共孵育48h或多肽药物浓度达5μmol/L时,显示出明显的结合能力。平均荧光强度分别为17.19±0.42和16.89±0.31(每组实验为3个样本均值),与对照组无关肽PC的平均荧光强度(4.33±0.53)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。合成的多肽与细胞共孵育72h或多肽药物浓度达10μmol/L时细胞的平均荧光强度为23.58±0.71和24.95±0.15(每组实验为3个样本均值),与对照组无关肽PC的平均荧光强度(4.16±0.24)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。裸鼠体内试验说明合成的多肽可与GC9811P细胞成瘤的组织结合而不与GC9811及其他细胞成瘤的组织结合。结论筛选噬菌体随机肽库获得能与胃癌腹膜高转移细胞特异性结合的多肽序列SMSIASPYIALE;合成的多肽与胃癌腹膜高转移细胞有特异亲和力,为进一步临床胃癌早期腹膜转移诊断和治疗提供高度特异性和敏感性的理想标志物和靶向载体。     

胃癌患者腹腔液中透明质酸的分泌水平及其临床意义

目的:探讨胃癌患者腹腔液中透明质酸(HA)分泌水平及其与胃癌侵袭、扩散之间的关系.方法:对48例胃癌患者和23例非肿瘤患者腹腔液HA含量进行放射免疫测定.结果:胃癌患者腹腔液HA水平[(913.01±170.69) μg/μg]明显高于非肿瘤患者[(362.39±168.82) μg/μg],pTNM Ⅲ、Ⅳ期胃癌组患者腹腔液HA水平[(1 094.42±127.65) μg/μg]明显高于pTNM Ⅰ、Ⅱ期组[(814.03±232.22) μg/μg],差异均有显著性意义(P<0.01).行根治性切除术的胃癌患者(n=25)手术后1个月的腹腔液HA水平较术前明显降低,而姑息性切除术者(n=23)术后无明显变化.结论:胃癌患者腹腔液HA水平明显升高,可能与肿瘤腹腔内转移密切相关;根治性胃癌切除术后腹腔液HA水平较术前有明显降低倾向.     

消痰散结方抑制胃癌生长和转移的实验研究

目的　探讨消痰散结方对胃癌生长和转移的抑制作用。方法　将人低分化胃腺癌SGC -790 1完整组织块裸鼠原位种植 ,建立胃癌转移模型。种植后 1周分别给予生理盐水 (对照组 ,0 2mL)、5 -FU (5 -FU组 ,0 2mL ,6 0mg/kg w)、消痰散结方 (消方组 ,0 2mL ,2 5g/kg d ,)、 5 -Fu与消方联合应用 (5 -FU +消方组 )腹腔注射 ,5 -Fu每周 1次 ,余每天 1次 ,连续 3周。于第 1 2周处死动物 ,测定原位肿瘤体积、瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度 ,观察肿瘤肝、腹膜及其它脏器转移及腹水情况。结果　对照组、 5 -FU组、消方组、 5 -FU +消方组瘤重分别为 (2 2 6± 0 78) g、 (1 1 0± 0 96 ) g、(0 6 3± 0 4 1 ) g、 (0 6 1± 0 4 9) g ;抑瘤率分别为 0 %、 4 9 3%、 72 0 %、 75 0 % ;MVD分别为 (1 5 2± 3 3)、 (1 1 5± 1 6 )、 (5 7± 2 1 )、 (4 5± 1 3) ;肝转移率分别为 75 0 %、 4 1 7%、 2 5 0 %、 1 6 7% ;消方组与对照组相比 ,具有显著性差异 (P <0 0 1 ) ,与 5 -Fu组相比 ,消方组和 5 -FU +消方组在瘤重、抑瘤率、MVD亦具有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,但肝转移率无明显差异。结论　消痰散结方对体内胃癌的生长和转移具有一定的抑制作用 ,且与化疗药物联用能起到协同作用。其机理可能     

噬菌体多肽phage20抗胃癌肝转移作用的实验研究

目的　鉴定选择性噬菌体多肽phage2 0是否具有抗胃癌肝高转移细胞XGC9811-L肝转移的作用。方法　采用胃浆膜下裸鼠原位接种转移模型 ,观察phage2 0对胃癌细胞XGC9811-L肝转移能力的影响。裸鼠随机分为实验组 (phage2 0孵育组 12只 ) ,对照组 (XGC9811-L组 12只、M13wt孵育组 12只 ) ,原位接种后 10天、5周解剖裸鼠 ,观察肝转移率、转移瘤的数目及原发瘤的体积。结果　在原位接种后 10天 ,各组未发现肝转移灶 ,接种后5周phage2 0孵育组、XGC9811-L未孵育组、M13孵育组肝转移率分别为 :2 0 % ,10 0 % ,80 % ;肝转移灶的数目为 0 ,9.5± 2 .8,7.1± 4 .71;原发瘤的体积为 0 .6 5± 0 .4 32 ,0 .5 2 8± 0 .2 96 ,0 .5 82± 0 .348。与对照组相比phage2 0孵育组的肝转移率和转移灶的数目明显减少 ,P <0 .0 5 ,但在原发瘤的体积方面 3者间无显著差别 P >0 .0 5。结论　phage2 0可抑制胃癌肝高转移潜能细胞XGC9811-L肝转移能力 ,但对其生长无影响。     

小分子三肽CMS024对转移性人肝癌裸鼠模型的抑制作用

目的研究小分子三肽CMS024对人肝癌裸鼠转移模型肿瘤生长和转移的抑制作用.方法将高转移性人肝癌细胞株HCCLM6接种于裸小鼠皮下,成瘤后移植于20只裸鼠肝脏,制成原位移植自发性多向转移肝癌模型,随机分为治疗组和对照组,各10只.治疗组按300 μg/kg剂量腹腔内注射CMS024 0.1 ml,对照组注射等体积的0.85%氯化钠注射液.每日1次,共治疗35 d.观察荷瘤裸鼠的体重变化、腹腔内转移和肺转移的发生率和转移灶的数目,并测量血液学和血液生化指标.结果至观察期35 d时,治疗组10只裸鼠全部存活,对照组存活9只.治疗组肿瘤的平均重量1.9 g±0.5 g,对照组2.3 g±0.8 g,差异无显著意义.腹壁转移和腹腔内转移的发生率对照组均为100%,而治疗组则分别为60%和50%(P<0.05);血性腹水和肝内肉眼可见转移结节的发生率对照组分别是70%和90%,治疗组分别是20%和40%(P>0.05).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级肺转移灶的中位数对照组分别是92、24、15、16个,治疗组分别是24、20、10、8个,两组Ⅰ级肺转移灶差异有显著意义(P<0.05).两组裸鼠的体重变化、外周血常规指标和血生化指标的差异均无显著意义.未观察到与药物相关的毒副作用.结论小分子三肽CMS024对裸鼠人肝癌转移模型有一定的抑瘤抗转移作用,无明显毒副作用.     

腹腔内注射羟基喜树碱治疗腹膜转移癌的实验研究

目的:研究腹腔内注射羟基喜树碱(HCPT)对腹膜腔转移癌模型的疗效和安全性。方法:将高转移性人肝癌细胞株HCCLM3接种于30只裸鼠腹腔内,制成腹膜转移癌模型,随机分为治疗组和对照组各15只;前者组按2 mg/kg剂量腹腔内注射HCPT,后者注射等体积的0.85%氯化钠溶液;于第2,4,6周连续注射7 d,观察8周。监测荷瘤裸鼠的体重和腹膜癌的变化,测量血液学和血清学指标。结果:至研究终点时,治疗组14只裸鼠存活,对照组存活5只;治疗组的平均生存期是(55±1)d(95%CI:54-57 d),对照组的平均生存期是(43±4)d(95%CI:34-51 d)(P=0.002)。治疗组的肿瘤重量明显小于对照组。治疗组未观察到血性腹水和腹腔内弥漫性种植灶,对照组有4只裸鼠出现血性腹水,6只出现腹膜腔内弥漫性种植灶(P<0.001)。外周血白细胞计数在治疗组低于对照组(P<0.05),血清甲胎蛋白浓度在治疗组低于对照组(P<0.05),γ-谷氨酰转肽酶活性在治疗组低于对照组(P<0.05)。两组裸鼠的体重、血常规和血生化其他指标均无统计学差异。未观察到明显的药物相关毒副作用。结论:腹腔内注射HCPT治疗腹膜癌模型,能抑制肿瘤生长,减轻腹膜癌病情,延长荷瘤宿主生存期。     

NS-398对人胃癌裸鼠移植瘤血管生成的影响

目的探讨NS-398对裸鼠胃癌移植瘤血管生成的影响.方法12只裸鼠随机分为2组,以人胃癌细胞株SGC7901建立荷瘤裸鼠动物模型.治疗组于接种第2 d开始给予10 mg/kg NS-398腹腔注射,隔d给药;对照组隔d腹腔注射同体积PBS,连续20 d,观察抑瘤率,应用免疫组织化学技术检测2组肿瘤组织环氧合酶-2(COX-2)、VEGF表达及微血管密度(MVD).结果NS-398抑瘤率达88.7%,COX-2、VEGF及MVD在治疗组分别为2.6±0.8,2.3±1.2和21.2±4.8,显著低于对照组的5.0±0.6,5.8±0.4和41.3±2.6(P均＜0.05).结论NS-398可能通过抑制COX-2、减少VEGF的表达抑制裸鼠胃癌移植瘤血管生成.     

抗黏附药物对人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型sICAM-1表达的影响

目的　探讨术后早期给予抗黏附药物丹参、蛇毒对人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型sICAM 1表达的影响。方法　采用Balbc/c裸鼠 2 4只 ,用保脾法建立人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型 ,随机分为 4组 ,分别自腹腔注射生理盐水 (A组 ) ,丹参 0 .7ml/只 (B组 )、蛇毒 3.12 5× 10 2 单位 /只 (C组 )、丹参 0 .7ml和蛇毒 3.12 5× 10 2 单位 /只 (D组 )。 5周时处死小鼠 ,观察原位移植瘤生长情况、肝转移情况 ,计数各肝脏表面转移结节数 ,并经病理组织学证实。测定血清和腹水中sICAM 1的含量。肝脏表面转移结节数采用秩和检验、sICAM 1的含量采用t检验。结果　实验各组均有脾内原位移植瘤生长 ,生理盐水组、丹参加蛇毒组各有 5只裸鼠发生肝转移 (5 / 6 )、丹参、蛇毒组各有 4只裸鼠发生肝转移 (4/ 6 )。对照组血清和腹水中sICAM 1的含量均高于丹参组 (P <0 .0 1)、蛇毒组 (P <0 .0 1)及丹参加蛇毒组 (P <0 .0 1)。结论　抗黏附药物可降低血清和腹水中sICAM 1的含量 ,抗黏附治疗可能是治疗恶性肿瘤转移的一个新方向。     

反义整合素β6基因对结肠癌细胞作用的研究

目的研究反义整合素β6基因对结肠癌细胞生长增殖的作用。方法先构建反义β6基因的表达载体,然后转染结肠癌细胞,使其稳定表达。应用RT—PCR检测细胞中β6mRNA的表达量;应用流式细胞技术检测细胞表面β6蛋白的表达量;检测分析各组细胞与纤连蛋白结合力的改变;检测分析各组细胞增殖能力的改变;将转染细胞及正常细胞分别种植于裸鼠皮下,观察细胞的成瘤能力。将实验组与对照组的检测结果进行比较。结果与对照组相比,转染了反义β6基因的结肠癌细胞,其β6mRNA的量及细胞表面β6蛋白的表达量（30％）均明显减少（P〈0．01）;其与纤连蛋白的结合力降低;其生长及增殖的能力较对照组细胞明显减弱;其在裸鼠皮下的成瘤能力明显减弱（P〈0．01）。结论反义β6基因可以在转录和翻译水平明显抑制β6基因的表达,从而抑制结肠癌细胞的生长增殖,证实了整合素β6对结肠癌细胞的生长增殖具有重要的调控作用。     

靶向HER-2 mRNA反义寡核苷酸抗乳腺癌增殖的体内研究

目的观察以HER-2mRNA为靶点的反义寡核苷酸HA6722体内抗乳腺癌的作用及其与细胞毒药物多西紫杉醇联合应用时抗肿瘤活性的变化。方法以SK-BR-3乳腺癌细胞株为移植实验细胞株,以BALB/C裸鼠为移植动物,建立HER-2过表达乳腺癌动物模型,观察不同剂量反义寡核苷酸HA6722及其对照序列单用或/和细胞毒药物多西紫杉醇联合应用时的抗肿瘤活性,并设空白对照组。结果在5mg·kg-1·d-1的剂量下单药反义寡核苷酸HA6722连续多次注射(1次/d,×12)可对乳腺癌的体内生长具有显著的抑制作用,抑瘤率达76·3%;联合应用多西紫杉醇时抗乳腺癌增殖作用明显加强,中等剂量HA6722(5mg·kg-1·d-1)联合多西紫杉醇(7·5mg·kg-1·d-1)与高剂量多西紫杉醇(15mg·kg-1·d-1)单独注射具有可比拟的抑瘤活性,两组抑瘤率分别为88·3%和88·7%(P>0·05);而中剂量的Scramble6722+多西紫杉醇(7·5mg·kg-1·d-1)则未见抗肿瘤活性有进一步的增强(P>0·05)。结论中等剂量的HA6722与多西紫杉醇联合应用,可以明显增强后者的抗肿瘤活性,其抗瘤活性可与高剂量的多西紫杉醇相比拟。     

腹腔冲洗化疗对人卵巢上皮癌细胞株裸鼠腹腔荷瘤疗效的形态学观察

研究持续腹腔冲洗化疗对裸小鼠人卵巢上皮癌腹腔荷瘤模型的疗效及其副作用。方法用卵巢浆液性囊腺癌细胞株Skov3和裸小鼠建立腹腔荷瘤模型,分对照组、常规CDDP腹腔化疗组(常规组)和CDDP腹腔持续冲洗化疗组(冲洗组)进行观察。于移瘤后3w开始治疗,间隔4d,共2个疗程。结果冲洗组动物的体重在治疗后虽有所下降,但远未达到毒性反应的程度,与常规组相比,无显著差异。冲洗组腹腔瘤的体积明显小于常规组,抑瘤率和细胞凋亡率明显增高,差异十分显著。病理组织学和超微病理学检查也显示,腹腔冲洗化疗效果优于常规化疗,对肾脏也没有大的病理损伤。结论对裸小鼠腹腔荷瘤,持续腹腔冲洗化疗较常规腹腔化疗疗效显著,无明显的毒副作用。     

趋化因子基质细胞衍生因子-1及其受体对胃癌腹膜转移潜能的影响

目的 探讨趋化因子基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及趋化因子受体4(CXCR4)对胃癌腹膜转移潜能的影响.方法 采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌细胞NUGC4及间皮细胞HMrSV中CXCR4和SDF-1 mRNA的表达.采用MTT实验检测NUGC4细胞增殖能力的变化,采用间皮细胞黏附实验及间皮细胞迁移实验评价体外培养的NUGC4细胞与间皮细胞发生黏附的能力及其穿越间皮细胞发生迁移的能力.通过建立裸鼠胃癌腹膜种植瘤模型,评价NUGCA细胞腹膜肿瘤生成能力及荷瘤裸鼠生存时间的变化.结果 NUGC4细胞表达较高强度的CXCR4mRNA,而间皮细胞表达高强度的SDF-1 mRNA.抗CXCR4单抗对NUGC4细胞增殖具有显著的抑制作用(P＜0.05);SDF-1可促进NUGC4细胞与间皮细胞黏附及穿越间皮细胞发生迁移,抗CXCR4单抗处理可显著抑制NUGC4细胞的黏附及迁移能力(P＜0.05).体内实验结果显示,CXCR4拮抗剂AMD3100治疗组裸鼠的平均生存时间显著长于对照组[(43.8±2.8)vs(28.2±2.5)d,P＜0.01],瘤结节数目显著低于对照组[(64.6±8.2)vs(103±12.4),P＜0.01].结论 趋化因子SDF-1及其受体CXCR4参与胃癌腹膜转移过程,与肿瘤细胞增殖、肿瘤细胞-问皮细胞问的黏附和肿瘤细胞迁移等步骤密切相关;干扰SDF-1/CXCR4生物学轴可以作为胃癌腹膜转移的潜在治疗策略.     

腹腔镜肌壁间子宫肌瘤剔除术中不同止血方法的评价

目的 评价临床常用腹腔镜肌瘤剔除术中止血方法的有效性和安全性,寻找简便有效的止血方法.方法 将有手术指征的肌壁间子宫肌瘤患者280例随机分成4组,每组70例,分别采用肌瘤蒂部套扎、肌瘤周围肌层注射12 IU垂体后叶素、肌瘤周围肌层注射20 IU缩宫素加蒂部套扎及合用垂体后叶素和蒂部套扎4种止血方法.结果 4组患者术中出血量分别为(171±146)、(115±70)、(184±140)和(106±73)ml,使用垂体后叶素12 IU局部注射的2组患者术中出血量明显少于单独套扎或注射缩宫素组(P＜0.01).合用垂体后叶素和蒂部套扎法术后住院时间明显短于其他3组[(2.9±0.5)d比(3.1±0.7)d、(3.6±0.8)d和(3.3±0.7)d,P＜0.05].合用垂体后叶素和蒂部套扎法组比缩宫素组术后肛门排气时间短[(19.7±5.8)h比(25.9±8.6)h,P＜0.05],血红蛋白含量下降较少[(1.1±0.9)g/L比(1.5±1.0)g/L,P＜0.05].结论 12 IU垂体后叶素肌瘤蒂部注射联合肌瘤蒂部套扎可以明显减少术中出血,加快术后恢复,无明显全身副作用,是简单有效的腹腔镜下肌壁间肌瘤剔除术辅助止血方法.     

TGF-β1及其信号蛋白在大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织中的表达及可能作用

目的了解TGFβ1/Smads信号蛋白在高浓度葡萄糖透析液及炎症所致大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织中的表达及在腹膜纤维化发生中的可能作用。方法24只SD雄性大鼠(180～200g)随机分为4组,每组6只。正常对照组,大鼠不做任何处理;LPS组,LPS用生理盐水稀释为0.6mg/100ml,在第1、3、5、7日按0.6mg/kg体重腹腔注射;4.25%透析液组,大鼠给予每日腹腔注射100ml/kg体重高糖透析液;LPS+4.25%透析液组,除每日腹腔注射100ml/kg体重高糖透析液外,LPS用4.25%透析液稀释为0.6mg/100ml,在第1、3、5、7日按0.6mg/kg体重腹腔注射;于实验第28天杀检动物,取壁层和脏层腹膜组织行光镜及电镜检查。用RTPCR及间接免疫荧光、Western杂交的方法检测αSMA、TGFβ1、Smad3、Smad7、pSmad2/3、ColⅠmRNA和蛋白的表达水平。结果Masson染色显示,与正常对照组比较,4W时各组壁层腹膜组织明显增厚,有大量胶原沉积,其中LPS+4.25%透析液组厚度最为显著(vsLPS组:42μm±3μmvs35μm±4μm,P=0.007,vs4.25%透析液组,42μm±3μmvs20μm±4μm,P=0.000);与正常对照组比较,三组αSMA、ColⅠ和TGFβ1、Smad3、pSmad2/3在脏层腹膜组织中的表达水平显著上调,上述变化以LPS+4.25%透析液组改变最为显著,TGFβ1mRNA为正常对照组的2倍,Smad3mRNA为正常对照组的1.8倍;与正常对照组比较,抑制性信号蛋白Smad7mRNA和蛋白表达水平在其他三组也有不同程度的上调,但Western杂交结果显示,pSmad/Smad7蛋白比值仍明显升高;电镜结果显示,除正常对照组外,各组间皮细胞均有损伤,LPS+4.25%透析液组的间皮细胞损伤最为明显,而且胞浆中出现明显的肌丝和密体。结论TGFβ1/Smads信号蛋白的活化是高浓度葡萄糖透析液和LPS导致大鼠腹膜发生纤维化的共同作用途径。高浓度葡萄糖透析液和LPS可能协同作用通过TGFβ1/Smads通路刺激腹膜间皮细胞转分化,介导腹膜纤维化的发生。     

醋酸甲羟孕酮对卵巢癌裸鼠移植瘤的抗血管生成作用

OBJECTIVE: To investigate the effects of medroxyprogesterone acetate (MPA) on angiogenesis and growth of transplanted human ovarian cancer cells in nude mice. METHODS: Ovarian cancer cell line COCI derived from human ovarian serous adenocarcinoma was transplanted into 30 nude mice, which were then randomized equally into 3 groups consisting of two treatment groups (in which MPA was administered at 60 and 120 mg/kg, respectively, twice a week for 4 weeks) and a control group. Six weeks later, the body mass of the nude mice was recorded and the morphology of tumor cells observed by electron microscope. The microvascular density (MVD) was examined by immunohistochemical staining with anti-human factor VIII antibody. RESULTS: Compared with the control group, the growth inhibitory rate in the two treatment groups were 23.76% and 43.80%, respectively, corresponding to the doses of 60 and 120 mg/kg. MVD of 60 mg/kg MPA group (3.64+/-0.02) and 120 mg/kg MPA group (2.11+/-0.12) was lower than that of the control group (5.14+/-0.74) (P<0.05 and P<0.01, respectively), and there was also significant difference between the two treatment groups (P<0.01). The morphological changes including compaction and margination of the nuclear chromatin, apoptotic bodies, and cell necrosis were significantly increased in the two treatment groups. CONCLUSIONS: MPA can inhibit the angiogenesis and growth of transplanted human ovarian cancer cells in nude mice in a dose-dependent manner, and its anticancer effect may involve induction of cell apoptosis as the result of its effect against angiogenesis.     

分选卵巢癌腹水中癌细胞的实验研究

目的 探讨免疫荧光细胞化学法（ICC）联合荧光原位杂交法（FISH）分离卵巢癌腹水中癌细 胞的可行性。方法 复制卵巢癌腹水模型,分阴性对照组和4 个阳性组（A、B、C、D 组）,即4 ml 良性腹 腔冲洗液中分别有0、5、10、20 和40 个标记线粒体绿色荧光（Mito-Tracker Green）的卵巢癌SKOV3 细胞, 每组样本制备3 份。复制卵巢癌裸鼠原位移植模型,分阳性组和阴性对照组,每组6 只BALB/c 裸鼠,阳性组 裸鼠在卵巢接种SKOV3 细胞,各组分别在接种后4、6 和8 周取2 只裸鼠收集腹水。采用磁激活细胞分选法 富集癌细胞,用ICC-FISH 鉴别分离样本中的癌细胞,以8 号染色体探针（CEP8）信号>2 个为FISH 阳性标准, 规定DAPI+/EBA-1+/Mito-Tracker Green+/CEP8+ 细胞为检测癌细胞。结果 腹水模型：阴性对照组和阳 性组均可见EBA-1 阳性细胞,阳性组均有标记的SKOV3 细胞,癌细胞的回收率为20% ～ 50%,12 个阳性样 本中9 个样本的检测率为100%。裸鼠模型：在200 倍显微镜视野下,4、6 和8 周每个视野的SKOV3 细胞数 最多分别为3、8 和15 个。结论 将卵巢癌腹水磁富集后,ICC-FISH 可以准确地识别其中的癌细胞,该方法 为研究和治疗卵巢癌提供了新思路。