诱导性多能干细胞研究进展

2006年日本京都大学Yamanaka从与小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES)增生分化的24个候选因子中筛选出Oct4、 Sox2、 c-Myc、 Klf4等4个转录因子将成纤维细胞诱导为ES类似的细胞,将其命名为iPS细胞(inducedpluripotent stem cell)[1].从此,人们对iPS细胞的研究便迅速开展起来.     

诱导多能干细胞技术及应用前景

诱导多能干细胞( induced pluripotent stem cells,iPS)自2006年问世,已成为当今干细胞乃至生命科学领域研究的热点。本文就诱导多能干细胞的研究技术进展、应用前景以及存在的问题作一综述。     

诱导神经干细胞的研究进展及应用前景

诱导神经干细胞(induced neural stem cells,i NSCs)是通过在成体细胞内转入特定外源因子而获得。目前主要有两种途径获得i NSCs,即直接诱导法和间接诱导法(需经历重编程过程中不稳定的中间状态)。与诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)、胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)比较,i NSCs直接将成体细胞重编程为神经干细胞,而不经过i PSCs再分化为神经干细胞,可减少其致瘤性,缩短诱导周期,提高转分化效率,这将使其更适于临床应用。本文就i NSCs的研究进展,应用前景加以综述。     

体外诱导人胚胎干细胞定向分化为神经干细胞

目的:探讨体外定向诱导人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)生成高纯度神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的方法.方法:模拟体内神经细胞分化发育的不同阶段及微环境,分三阶段诱导hESCs定向生成NSCs.形态学观察结合免疫荧光细胞化学、流式细胞术和RT-PCR检测胚胎干细胞标志和神经干细胞标志;NSCs分化实验对所诱导的NSCs的分化潜能进行检测.结果:体外培养的hESCs在胚胎成纤维细胞饲养层上连续传代培养50代,仍保持SSEA-4,TRA-1-81阳性,表达Nanog基因,流式细胞术检测SSEA-4阳性表达率为83.44%;经三步法最终可诱导形成纯度高达90%以上的nestin阳性细胞,表达nestin基因,流式细胞术检测nestin阳性表达率为89.38%;诱导生成的细胞反复传代,仍表现为nestin阳性,并可进一步分化为神经元、星形神经胶质细胞和少突胶质细胞.结论:模拟体内神经分化过程的三步诱导法,可诱导hESCs生成较高纯度的NSCs,并能较好维持其干细胞特性和具有进一步分化的能力.     

人类胚胎干细胞研究的伦理学思考

胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)是从早期胚胎中发现的能在体外培养的一种高度未分化细胞,具有多向分化潜能,可无限增殖及诱导分化成几乎机体所有类型的细胞,按组织来源可分为由早期胚胎内细胞团(inner cell mass,ICM)分离的ESCs和胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EGCs),通常所讲的ESCs即由早期胚胎     

牙髓干细胞的体外分离培养与鉴定

干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,具有两个基本性质:(1)自我更新能力;(2)分化能力.干细胞包括胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)和成体干细胞(adult stem cells,AS细胞).牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)存在于牙髓中,是AS细胞的一种,现已成为牙组织工程新的种子细胞.本文综述了DPSCs的提出、分离培养、鉴别、影响因素及研究前景.     

鼠星形胶质细胞重编程为诱导多潜能干细胞的研究

目的研究星形胶质细胞重编程为诱导多潜能(iPS)干细胞的可行性,为进一步研究iPS细胞诱导技术奠定基础。方法用分别含Oct4,Sox2,Klf4和c-myc因子的4种逆转录病毒载体病毒颗粒感染星形胶质细胞,获得iPS细胞并进行鉴定。结果感染后第28天具有胚胎干细胞形态的克隆出现,诱导效率为(0.015±0.005)%,且碱性磷酸酶(AP)染色及SSEA-1和Oct4免疫荧光染色均显阳性。结论星形胶质细胞可以重编程为iPS细胞,进一步证明了iPS细胞诱导技术的普遍适用性。     

急性肺损伤患者诱导性多能干细胞系的建立

目的利用急性肺损伤患者皮肤成纤维细胞构建诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells, iPSCs）系。方法采用
慢病毒介导逆转录的方法,将含有Oct4、Sox2、Klf4和Nanog四个因子的混合慢病毒转染人皮肤成纤维细胞,诱导出胚胎干细胞
样克隆。根据人胚胎干细胞的特性,利用AP染色、实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术、免疫荧光、畸胎瘤形成实验对获得的iPS
细胞进行鉴定。结果获得的iPS细胞镜下观察呈典型的ES样克隆状生长,圆形或椭圆形,与饲养层细胞分界清楚;AP染色阳
性,RT-PCR及免疫荧光检测iPS细胞高表达人胚胎干细胞标志性基因及蛋白,移植到免疫缺陷鼠体内能够形成向三胚层分化的
畸胎瘤。结论成功建立了急性肺损伤患者iPS细胞系,可为急性肺损伤的发病机制研究和临床药物筛选提供良好的细胞模型。
     

骨髓间充质干细胞的旁分泌作用

近年来,干细胞已经从实验室研究逐渐过渡到临床.目前用于临床的移植干细胞类型包括胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)、造血干细胞(hemopoietic stem cells,HSC)、骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)、脂肪源性间充质干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)及内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)等.     

诱导多能干细胞在肝脏疾病中的研究进展

干细胞,特别是诱导多能干细胞(iPS细胞)可分化为有功能的肝细胞,同时避开了胚胎干细胞的伦理问题,为终末期肝病的替代治疗提供了新的种子细胞.文章对iPS细胞在肝脏疾病研究中的实验方法、研究结果以及临床应用前景予以阐述,为iPS细胞在肝病治疗方面的实验和临床应用提供借鉴.     

胚胎干细胞诱导的内皮细胞对自身向成骨细胞分化的影响

目的探讨由胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）诱导的内皮细胞（endothelial cells,Ec）与自体胚胎干细胞联合培养时对ESCs成骨作用的影响。方法提取小鼠的胚胎干细胞和胚胎成纤维细胞,诱导胚胎干细胞生成Ec,培养细胞分为四组。A组：胚胎干细胞诱导组;B组：胚胎干细胞诱导组;C组：胚胎干细胞诱导生成的内皮细胞（Ec）诱导组;D组：ESCs和诱导的EC联合培养诱导组。通过干细胞形态的观察、免疫荧光、细胞的增值、碱性磷酸酶以及骨钙素含量的测定从酶学、组织学及生化学等不同方面观测骨髓基质细胞对胚胎干细胞向成骨细胞诱导转化的影响。结果通过细胞免疫荧光染色证实C组培养诱导的细胞为EC。D组ESCs和诱导的Ec联合培养组MTT检测结果各组细胞生长差异没有显著意义（p〉0.05）,骨钙素和碱性磷酸酶测定D组有明显差异高于其他3组（p〈0.05）。结论以胚胎干细胞诱导生成的内皮细胞对胚胎干细胞的成骨有明显的促进作用。     

间充质干细胞的恶性转化与肿瘤间质形成

干细胞是具有高度自我更新能力且在适宜微环境下具有多系分化潜能的原始细胞.近年来,对胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)的研究不断深入,对成体干细胞(adult stem cells,ATC)生物学特性的认识随之进一步加深.     

干细胞治疗男性勃起功能障碍的进展与展望

干细胞的自我更新和定向分化的能力,使其在再生医学的研究中有广阔的运用前景。目前,干细胞可以分为胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)和成体干细胞(adult stem cells,ASCs)。一般认为,ESCs能够分化成人体内的所有细胞类型,ASCs只能分化为某一特定胚层的细胞类型,然而,越来越多的研究发现,     

干细胞的研究进展

干细胞是在生物个体的生长和发育中起源头作用的原始细胞，具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体。也就是说，干细胞可以通过细胞分裂维持自身细胞群的大小，同时又可以进一步分化成为各种不同的组织细胞，从而构成机体各种复杂的组织器官。根据其发展阶段和来源不同，干细胞可分为胚胎于细胞（Embryonic stem cells，ES cells）和成体干细胞（Adult stem cells，ASCs）。胚胎干细胞可以分化、发育成完整的动物个体，属于全能干细胞。     

诱导性多能干细胞形成过程中转录因子的研究进展

诱导性多能干细胞(iPS)是以反转录病毒为载体将胚胎特异性转录因子导入体细胞,使其诱导分化为具有胚胎干细胞(ESCs)特性的细胞。这种多能干细胞在细胞形态、增殖速率、致瘤性、基因表达以及形成嵌合小鼠的能力上与ESCs有许多相似之处,将来可能成为ESCs在临床应用中的替代。现对iPS细胞相关的几种转录因子及其在重编程过程中的作用,以及转导基因的选择予以综述。     

全反式维甲酸诱导胚胎干细胞分化为神经细胞的研究进展

干细胞是一类具有自我复制和分化潜能的细胞,它包括胚胎干细胞和成体干细胞.胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)是由早期胚胎内细胞团或胎儿原始生殖细胞分离克隆出的具有无限增殖和全能化潜力的细胞.在合适的条件下,胚胎干细胞可以定向诱导形成多种细胞类型.近年来发现可以定向诱导ES分化为神经细胞,这使移植ESC治疗中风、新生儿缺氧缺血性脑病成为可能.准确的分化诱导是应用胚胎干细胞移植促进脑功能重建的基础.目前在体外较多的使用全反式维甲酸(retinoic acid,RA)诱导ESC分化为神经细胞.现将这方面研究进展综述如下.     

科学审慎地对待成体组织干细胞的"可塑性"或"横向分化"

近5年来干细胞之所以再次成为人们关注的焦点和热点,其一是因为人胚胎性干细胞系(embryonic stem and germ cells,ESCs和EGCs)终于在1998年分别从人胚胎细胞及生殖嵴细胞中被分离、克隆培养成功,证明它们在体外仍保持未分化状态、具有无限的增殖能力及可分化为三胚层各种细胞类型的广泛潜能。其二是因为1995年有学者首次报道源自成体骨髓的黏附细胞亦可分化成为在发育上无关的其他胚层的细胞类型,即成体组织干细胞(adult stem cells,ASCs)具有“可塑性”(plasticity)抑或“横向分化”(transdifferentiation)潜能。     

胚胎干细胞体外定向诱导分化为神经细胞的方法

胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)是从着床前胚胎(孕3~5 d)的内细胞群(inner cell mass,ICM)或原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)等分离得到的能在体外培养的一种高度未分化细胞。早在1981年Evans及Martin分别成功分离培养了小鼠的胚胎干细胞系。1998年Thomoson     

人类胚胎干细胞的建系与维持

胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)来源于哺乳动物囊胚的内细胞团(inner cell mass,ICM),在体外有自我更新和全能分化的能力,并保持完整的染色体结构.自从建立小鼠胚胎干细胞(murine embryonic stem cells,MESC)系以来[1],ESC的研究引起了广泛的关注.1998年Thomerson从植入前囊胚建立了人类胚胎干细胞(humanESC,HESC)系[2],此后,有关HESC的研究取得了极大的进展.     

胚胎干细胞定向分化为神经细胞的研究进展

最近研究表明胚胎干细胞(embryonic stem cells，ESC)在体内外均可以发育分化出神经组织细胞，这对于了解神经发育的机制和研究神经组织退化性或者脑组织损伤性疾病的治疗具有重要的意义。本文就胚胎干细胞定向分化为神经组织细胞及其基因表达特点作一综述。