HPLC法测定降糖宁胶囊中格列本脲含量的不确定度分析

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定掺入降糖宁中的格列苯脲含量的不确定度评定方法。方法建立数学模型,对含量测定过程中各影响因素进行分析评估。结果通过不确定度来源的识别及量化分析,计算各变量的不确定度和合成不确定度,得出测定结果的扩展不确定度。结论该评定方法适用于HPLC法测定中药中非法掺入的格列苯脲含量的不确定度评定。 关键词:高效液相色谱法;格列苯脲;不确定度     

盐酸二甲双胍格列本脲片中格列本脲的含量测定

目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定盐酸二甲双胍格列本脲片中格列本脲含量。方法采用SymmetryC18为色谱柱,流动相为为甲醇-2mmol/l-磷酸二氢铵溶液（5：3）,流速1.0ml/min,检测波长274nm。结果格列本脲在0.02-0.12mg/ml（r=0.9995）范围内线性关系良好,线性回归方程为：Y=-0.04158＋4.9816C,平均方法回收率为99.25%（RSD=1.18%,n=9）。结论 HPLC法测定盐酸二甲双胍格列本脲片中格列本脲含量简单、快捷、灵敏,可以作为复方盐酸二甲双胍格列本脲片格列本脲含量的测定方法。     

复方盐酸二甲双胍片中格列本脲和二甲双胍溶出度的考察

目的考察并比较自制复方二甲双胍片中格列本脲、二甲双胍与对照药格列本脲片、二甲双胍片的溶出度.方法以HPLC法测定含量,用转篮法测定溶出度,并就溶出度进行比较.结果经检测制剂工艺不同的格列本脲、二甲双胍体外溶出度均符合<中国药典>2005年版的规定,但溶出参数各不相同.结论经统计学处理,因制剂工艺不同,复方二甲双胍片中格列本脲溶出度有显著性差异而二甲双胍溶出度差异不显著.     

高效液相色谱法测定消渴灵胶囊中格列本脲的含量

消渴灵胶囊是由地黄、黄芪、红参等十余味中药及西药格列本脲(Glibenclamide)精制而成的无糖型胶囊制剂,具有滋补肾阴、生津止渴、益气降糖的功效,用于糖尿病的治疗。格列本脲是通过刺激胰岛功能细胞的胰岛素释放而发挥急性降糖作用,是制剂中的主要有效成分。西药格列本脲的含量测定方法有参考文献[1]。消渴灵胶囊为我们新开发的中西结合制剂,为制定其质量标准,我们建立了高效液相色谱法测定消渴灵胶囊中格列本脲含量的方法,取得了满意的结果。此法快速、准确,可作为该制剂的质量控制方法。1仪器与试药Waters-510高效液相色谱仪,Waters-51…     

采用反相高效液相色谱法测定降糖类保健食品非法添加降糖化学药品检验方法的研究

目的 建立同时测定降糖类保健食品中非法添加盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、甲苯磺丁脲、格列吡嗪、格列齐特、马来酸罗格列酮、盐酸吡格列酮、格列本脲、格列美脲、格列喹酮和瑞格列奈11种化学药品含量的反相高效液相法.方法 采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-20mmol乙酸铵水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0-4 min:30%A;4-10 min:30%A→50%A;10～30 min:50%A→70%A;30～35 min:70% A;35～40 min:70% A→85% A;40～45 min:85%A;45～50 min:85% A→30% A;50～60min:30%A),流速为0.8 mL/min,紫外检测波长230 nm.柱温35 ℃.结果 在50 min内可同时分离检测11种成分,11种对照品的浓度在1～50 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,均r>0.9995,平均回收率均在96.0%~104.0%.结论 该方法简便、准确、稳定、重现性好,可用于该类保健食品中非法添加化学药品的定量检测.     

消糖灵胶囊含量测定方法的建立

目的:建立消糖灵胶囊的含量测定方法。方法:用高效液相色谱法(HPLC)对盐酸小檗碱和格列本脲进行含量测定。结果:盐酸小檗碱在14.6～175.2μg/ml范围内线性关系较好r=0.9999,回收率=100.03%,RSD=1.44%。格列本脲在7.8～62.4μg/ml范围内线性关系较好r=0.9999,回收率=99.60%,RSD=1.54%。结论:所建立的方法简便可行,重现性好,可以作为消糖灵胶囊的含量控制的方法。     

2010年我院门诊口服降糖药的使用分析

目的了解我院门诊口服降糖药的应用现状及趋势。方法回顾性分析及统计我院门诊2010年1～12月口服降糖药的消耗金额、用药频度及限定日费用等。结果我院门诊口服降糖药DDDs排序前五位的分别为盐酸二甲双胍缓释片、格列齐特缓释片（达美康）、吡格列酮（卡司平）、阿卡波糖片（拜唐苹）、格列美脲。销售金额排序前五位的分别为格列齐特缓释片（达美康）、阿卡波糖片（拜唐苹）、格列美脲、吡格列酮（卡司平）、盐酸二甲双胍缓释片。结论双胍类盐酸二甲双胍缓释片、磺酰脲类格列齐特缓释片（达美康）、噻唑烷二酮类吡格列酮（卡司平）、α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖片（拜唐苹）为我院目前首选口服降糖药,药品每日药费对我医院门诊降糖药的用药频度影响不大。     

TLC联合MS技术鉴定降糖中药制剂及保健品中的化学添加物

【目的】建立一种快速准确鉴定降糖中药中非法添加化学药品的方法。【方法】用TLC法对可能含有非法降糖类化学药品的4种中药制剂进行筛查,根据薄层色谱图找出可疑斑点,将可疑斑点分离后直接进行质谱检测,再与相应化学对照品的一二级质谱图进行比较。【结果】在可疑斑点质谱图中有与格列本脲、格列美脲、苯乙双胍对照品一致的准分子离子峰与碎片离子峰。【结论】应用TLC联合MS技术可快速准确鉴定出降糖中药制剂及保健品中是否含有非法添加的化学药品。     

格列本脲和二甲双胍复方制剂治疗2型糖尿病的疗效观察

目的：探讨格列本脲和二甲双胍复方制剂治疗2型糖尿病患者对糖化血红蛋白（GHbA1c）、空腹血糖（FPG）以及标准餐后2h血糖（2hPG）的影响。方法：把口服降糖药控制血糖效果不佳的患者86例随机分成治疗组、对照组,治疗观察12周,比较治疗组和对照组的疗效。结果：治疗组显效的病例有32例（71.11%）、总有效率为95.55%,对照组显效的病例有23例（56.10%）、总有效率为80.49%;两组比较具有显著性差异（P〈0.05）,说明格列本脲和盐酸二甲双胍复合片疗效优于达美康。结论：格列本脲和盐酸二甲双胍可以相互补充,协同发挥作用,从而改善2型糖尿病患者的代谢缺陷,最终改善人体对血糖的控制。该制剂尤其对单纯使用盐酸二甲双胍或格列本脲再次治疗无效的患者,具有良好的效果。     

LC-MS和HPLC法测定人血浆中格列本脲和二甲双胍方法的建立

目的建立人血浆中盐酸二甲双胍的高效液相色谱和格列本脲的液相色谱-质谱测定方法.方法二甲双胍血浆样品经乙腈直接沉淀蛋白进样.分析柱:EC 250/4.6 NUCLEOSIL 100-5(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.03 mol/L(NH4)H2P04:乙腈(75:25,pH 7.0),流速1.0 ml/min;检测波长240 nm.格列本脲血浆中加入格列吡嗪为内标,经乙酸乙酯提取,进行LC-MS测定.色谱柱为ORBAX SB300C18柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈:0.1%乙酸铵(55:45),流速为0.2 ml/min;ESI选择性正离子检测.结果格列本脲浓度为2～200 ng/ml线性关系良好(r=0.999 8),盐酸二甲双胍浓度为6.25～4 000 ng/ml线性关系良好(r=0.999 9).二甲双胍和格列本脲方法的日内和日间RSD＜5%.结论所建立的人血浆中格列本脲的HPLC-MS测定方法和二甲双胍的HPLC测定方法灵敏、准确、简便,可用于格列本脲、二甲双胍的人体药代动力学研究.     

菊苣化学成分的LC-MS／MS定性分析与HPLC含量测定

目的建立菊苣化学成分的定性、定量分析方法,完善药材质量控制手段。方法以HPLCDAD-ESI-MS方法,对菊苣化学成分进行定性鉴定,并采用HPLC方法同时测定菊苣中5种化学成分含量。结果从菊苣中共鉴定了10个化学成分,其中6个成分的保留时间和质谱碎片离子信息与对照品一致,分别为秦皮甲素、绿原酸、秦皮乙素、菊苣酸、异绿原酸B、异绿原酸A;根据质谱碎片信息并结合文献数据初步确定了另外4个成分的化学结构。建立了菊苣中绿原酸、秦皮乙素、菊苣酸、异绿原酸B、异绿原酸A的回归方程,线性关系均良好(r0.999 5),加样回收率为95.94%~104.41%,采用此方法成功检测了10个菊苣样品中上述5种成分的含量。结论研究建立的方法可定性、定量分析菊苣中的主要化学成分,可用于菊苣药材的质量分析。     

肾复康胶囊质量标准研究

目的 探讨肾复康胶囊的质量标准。方法 采用薄层色谱法对肾复康胶囊中益母草、土茯苓进行了定性鉴别。以芦丁为指标，运用高效液相法进行了含量测定。结果 平均回收率100．6％，RSD为0．98％。结论 用薄层色谱法鉴别土茯苓和益母草方法可行；用高效液相色谱法测定肾复康胶囊中的芦丁含量方法准确、重复性好；所建立的肾复康胶囊质量标准可以控制本品的质量。     

High-performance liquid chromatography combined with mass spectrum analysis for chromatographic fingerprinting of compound dandelion enema]

OBJECTIVE: To identify the active components of compound dandelion enema, a preparation from 7 traditional Chinese herbal drugs for treatment of gynecological diseases. METHODS: Three-dimensional high-performance liquid chromatography (3D-HPLC) was employed to separate the ethyl acetate extract of compound dandelion Enema, and HPLC combined with mass spectrum (MS) analysis used for chromatographic fingerprinting. RESULT: By comparing the ionic fragments of MS and retention time of each peak, the main active components in compound dandelion enema were determined, including caffeic acid, ferulic acid and protocatechualdehyde. CONCLUSION: HPLC coupled with mass spectroscopy can be used for qualitative analysis of compound dandelion enema.     

奥美拉唑肠溶胶囊的生物等效性研究

目的:研究奥美拉唑肠溶胶囊在健康人体的药代动力学,并评价其与同剂量制剂间的生物等效性。方法:采用双交叉试验设计,18名健康志愿者口服奥美拉唑肠溶胶囊试验和参比制剂40 mg,服药后0~12 h内间隔取血,用HPLC法测定血药浓度。计算主要药代动力学参数,并以参比制剂计算奥美拉唑肠溶胶囊的相对生物利用度,判断其生物等效性。结果:奥美拉唑肠溶胶囊试验和参比制剂的体内药代动力学参数Cmax(0.632±0.383)mg/L和(0.626±0.415)mg/L、5Tmax(2.39±0.40)h和(2.33±0.42)h、T1/2(1.92±0.64)h和(2.01±0.73)h、Vd/F(81.21±46.68)L和(94.07±89.46)L、CL/F(32.99±20.92)L/h和(31.68±20.41)L/h、AUC0→12(2.03±1.99)mg/(h.L)-1和(1.89±1.62)mg/(h.L)-1;受试奥美拉唑肠溶胶囊的相对生物利用度F=(104.7±17.7)%。结论:2种制剂具有生物等效性。     

人全血他克莫司浓度高效液相色谱-质谱法检测方法学的建立及性能评价

目的 建立全血他克莫司高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)的检测方法.方法 液液萃取的方法从血中提取出他克莫司,然后用高效液相色谱-质谱的方法分离并检测他克莫司的浓度;同时进行标准曲线、线性范围、最低检测限、精密度、回收率及比对实验.结果 方法标准曲线回归方程为Y=0.2464x+0.0082,R2=0.9996;线性范围为0.100～40.000 ng/ml,回归方程为Y=1.0294x-0.035,R2=0.9998;最低检测限为0.100 ng/ml;以浓度为0.300、4.004、8.008、16.016 ng/ml的4种浓度样本测定不精密度(CV),其批内CV分别为4.67%、2.78%、3.22%、3.58%,其总CV分别为5.67%、3.16%、3.97%、4.29%;用浓度为0.300、4.004、8.008、16.016 ng/ml 4种标准品进行回收实验,其回收率分别为95.67%、97.00%、95.88%、98.30%;与酶联免疫吸附试验(ELISA)方法进行比对,回归方程为y=1.0172x+0.3742,相关系数R2=0.9630,2种方法相关性较好,ELISA方法的测定值较HPLC-MS方法的测定值高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 HPLC-MS方法具有方便、快速、准确和成本低的优点,可用于对全血中他克莫司的临床监测和实验研究.     

液质联用技术对复方蒲公英灌肠液的色谱指纹图谱的分析

目的 确定复方蒲公英灌肠液中的活性成分。方法 利用三维高效液相色谱对复方蒲公英灌肠液的乙酸乙酯部分分离分析,采用液相色谱‐质谱联用技术对其色谱图谱进行确定。结果 通过质谱的质荷比(M/Z)及色谱保留时间的相互比较,确定了咖啡酸、阿魏酸和原儿茶醛3种活性成分。结论 液质联用技术可用于复方蒲公英灌肠液的定性分析。     

氟康唑胶囊的人体药动学及其生物等效性研究

目的:研究氟康唑胶囊受试制剂与参比制剂在健康志愿者体内的药代动力学和生物等效性。方法:18名健康男性受试者随机双周期交叉单剂量口服氟康唑胶囊受试制剂和参比制剂200 mg,用HPLC法测定氟康唑的血药浓度,求得有关药动学参数。结果:氟康唑胶囊受试制剂和参比制剂的AUC0~120 h分别为(224.977±39.361)和(211.212±36.221)mg/h.L-1,Cmax分别为(5.811±1.202)和(5.705±1.092)mg/L,Tmax分别为(1.056±0.466)和(1.375±0.884)h,t1/2分别为(32.559±5.072)和(30.162±7.257)h。受试制剂相对于参比制剂的生物利用度(F)为(107.41±14.79)%。氟康唑AUC0~120 h和Cmax经对数转换后双单侧t检验均P>0.05,受试制剂AUC0~120 h90%可信限度在参比制剂100.7%~112.6%内,Cmax 90%可信限度在参比制剂92.8%~111.1%区间内。结论:氟康唑胶囊的受试制剂与参比制剂具有生物等效性。     

脑得生片物质基础的HPLC-DAD-MS~n分析

目的:明确脑得生片的化学物质基础。方法:采用高效液相-二极管阵列-质谱(HPLC-DAD-MSn)联用技术检测并鉴定其主要化学成分。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×250mm,i.d,5μm),流动相为0.05%甲酸-水和乙腈,流速为0.5 ml.min-1。结果:在脑得生片中共检测到43个化学成分,通过比对紫外吸收图谱、标准品ESI-MSn质谱图提供的分子量及结构式,并结合文献报道,推断鉴定出其中22个化合物,分别为羟基红花黄色素A、4’-O-葡萄糖基葛根素、3’-羟基葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖基(1-6)葡萄糖苷、葛根素、6″-O-木糖基葛根素、6″-O-芹菜糖基葛根素、3’-甲氧基葛根素、3’-甲氧基-6″-O-木糖葛根素、大豆苷、5,7-三羟基异黄酮-7-糖苷、葛根苷A、三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、大豆苷元、鹰嘴豆素A、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rd。结论:初步明确了脑得生片的化学物质基础,为进一步提高脑得生片的质量控制标准提供了科学数据。     

Systematic screening and structural characterization of dipeptides using offline 2D LC-LTQ-Orbitrap MS: A case study of Cordyceps sinensis

Cordyceps sinensis (C. sinensis) is a widely used and highly valuable traditional Chinese medicine. Several dipeptides have been detected in C. sinensis, but current scientific knowledge of its chemical makeup remains limited. In this study, an improved approach that integrates offline two-dimensional liquid chromatography (2D LC) separation, precursor ion list, library screening, and diagnostic ion filtering was established to systematically screen and characterize dipeptides in C. sinensis. Offline 2D LC integrating hydrophilic interaction LC and reverse phase separations was established to eliminate interference and identify the target dipeptides. A library containing the potential 400 dipeptides was created, and a precursor ion list with all theoretical precursor ions was adopted to trigger the MS/MS scan with high sensitivity. To identify dipeptides, the type and connection sequence of amino acids were determined according to the product ions. Ile and Leu residues were differentiated for the first time according to the characteristic ion at m/z 69.07. Ultimately, 170 dipeptides were identified or tentatively characterized from C. sinensis, and most are reported for the first time in this species herein. In addition, the identified dipeptides were also applied for discrimination among the three Cordyceps species, and 11 markers were identified. The obtained results provide a deeper understanding of the chemical basis of C. sinensis.     

昆明山海棠在中药复方制剂中的定性与定量分析

目的 对中药复方制剂因宁片中的君药昆明山海棠药材进行定性及定量分析。方法 采用薄层色谱（TLC）法对因宁片中昆明山海棠药材进行定性分析并对其分析方法进行优化；采用高效液相色谱（HPLC）法对因宁片中的君药昆明山海棠药材主要成分雷公藤甲素进行定量分析并确定其含量的限量标准。结果 TLC法定性研究表明：因宁片供试品和阳性对照品均在相应色谱位置显色，且分离度好、斑点清晰，阴性无干扰，对不同厂家薄层板、温度、湿度的影响因素考察表明：耐用性良好；HPLC定量分析雷公藤甲素浓度1~100 μg/mL内，以峰面积对雷公藤甲素浓度进行线性拟合，得回归方程A=22.219C-19.165，r=0.9999，线性关系良好；测得3批因宁片试验品雷公藤甲素含量分别为0.34 μg/片、0.34 μg/片、0.28 μg/片，范围0.28~0.34 μg/片，最终确定因宁片中每片含雷公藤甲素含量不得高于0.6 μg。结论 TLC法和HPLC法对中药复方制剂因宁片中昆明山海棠药材进行定性与定量分析研究，该技术稳定、方法简便、准确、系统耐用性良好、专属性强，可为其药材在中药复方制剂中的定性与定量研究提供参考与借鉴。