中国地鼠基因组微卫星富集文库的构建与分析

目的筛选中国地鼠微卫星位点,为中国地鼠种质资源的分类、进化等遗传研究奠定基础。方法中国地鼠基因组DNA经超声打碎,用2%琼脂糖凝胶电泳回收500～1000 bp的DNA片段,与SNX连接头连接,连接产物与生物素标记的14种微卫星探针变性及退火,再通过链亲和素偶联磁珠亲和捕捉,经吸附、洗涤及洗脱,然后以洗脱产物为模板,通过PCR扩增,与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌DH10B,构建中国地鼠微卫星DNA富集文库。结果测序结果发现,微卫星DNA序列的阳性克隆占70.3%。结论中国地鼠微卫星文库的建立和微卫星的筛选将为下一步进行中国地鼠遗传连锁图谱的构建、分子进化和系统发育研究提供大量的微卫星标记。     

山医群体中国地鼠近交E家系RAPD分析

目的　分析山医群体中国地鼠E家系的遗传纯度。方法　应用经过筛选的 3 1条随机引物对中国地鼠E家系 12只个体基因组DNA进行RAPD扩增 ,计算近交个体间的相似系数。结果　所有样品的相似系数0 943 1到 0 9978之间变动 ,平均相似系数为 0 9749,聚类分析得到了这些个体的同源树资料。结论　山医群体E家系有较高的遗传纯度     

中国地鼠线粒体基因组的序列分析与分子进化

目的获得中国地鼠线粒体基因组序列,为线粒体疾病模型提供分子数据。 方法参照近缘物种的线粒体基因组序列,设计27对特异引物,采用TD-PCR及测序技术获得了中国地鼠的线粒体全基因组序列,分析了其基因组特点和各基因的定位。还结合GenBank中已发表的其他5种啮齿类动物的线粒体基因组序列,探讨啮齿类动物不同科间的系统进化关系。 结果中国地鼠线粒体基因组全长为16 283 bp,碱基组成为33.53 % A、30.50% T、12.98 %G、22.80% C,包括13个蛋白质编码基因、2个rRNA基因、22个tRNA基因和1个非编码基因控制区。中国地鼠和金黄地鼠亲缘关系最近。结论中国地鼠线粒体基因组各基因长度、位置与典型的啮齿类动物相似,其编码蛋白质区域和rRNA基因与其他啮齿类动物具有很高的同源性,显示线粒体基因组在进化上十分保守。5种动物的分子系统进化树与传统分类地位一致。     

中国地鼠微循环观察模型的建立

中国地鼠巳用于遗传、糖尿病、肿瘤移植和病毒细菌感染等研究中。无菌条件下将小室植入中国地鼠背部皮肤,术后25℃温室饲养,24h后即可行微循环活体观察。     

中国地鼠资源开发利用的研究进展

中国地鼠是我国具有研究价值的特色实验动物资源,在医学、遗传学和生物制药等研究领域都发挥着重要作用。随着研究的深入,越来越多的中国地鼠生物学特性被发现,目前建立了诸多的中国地鼠模型。本文对中国地鼠的开发研究过程及其在分类学和医学研究中的应用作简要概述。     

近交系中国地鼠山医群体遗传结构的随机扩增多态分析

目的应用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对近交系中国地鼠山医群体的遗传结构进行多态分析。方法采用30条10bp引物对中国地鼠山医群体的A家系和E家系共24个个体进行RAPD扩增,分析家系的遗传纯度,探讨两个家系的亲缘关系。结果30条随机引物对供试的24个个体产生255条谱带。单个引物扩增的谱带数是2~17条,平均8条。所有样品的相似系数0.9431~0.9955之间变动,平均相似系数为0.9749。根据扩增出的RAPD图谱,运用SPSS软件包中的Wardmethod法进行聚类分析。结论供试中国地鼠A家系和E家系两个家系间存在一定程度的差异,中国地鼠A家系和E家系分别先聚为一类,中国地鼠群体间的分子聚类关系与各群体间的亲缘关系基本一致。     

金黄地鼠与白化地鼠遗传生化基因位点概貌

目的 建立金黄地鼠和白化地鼠遗传生化基因位点.方法 选用小鼠和大鼠的遗传生化基因位点,采用蛋白质和同工酶醋酸纤维电泳的方法,对金黄地鼠和白化地鼠进行生化基因位点检测.结果 建立了金黄地鼠和白化地鼠25个生化基因位点,分析金黄地鼠和白化地鼠遗传生化基因位点的多态性,为进一步研究金黄地鼠白化突变系的遗传机理奠定基础.结论 金黄地鼠生化基因位点存在多态性,白化地鼠与金黄地鼠生化基因位点存在差异.     

中国地鼠线粒体Cyt b基因测序及其分子进化

目的 测定中国地鼠线粒体DNA细胞色素b基因部分序列,分析其分子系统进化关系.方法 提取中国地鼠肝脏的总基因组DNA.设计合成特异引物进行PCR扩增,经检测进行测序.用Blast与GenBank中啮齿类其他常用实验动物的物种细胞色素b基因进行同源序列比较,分析其碱基组成及变异情况,并用邻接法、最大简约法、最小进化法构建了分子系统树,在分子水平上探讨中国地鼠和常用啮齿类实验动物的进化关系.结果 获得了中国地鼠线粒体Cyt b基因的部分序列,共 936 bp.结论 中国地鼠和金黄地鼠的亲缘关系最近,与小鼠、大鼠存在的差异相对大,与豚鼠的亲缘关系最远 ,与传统的分类地位基本吻合.     

山医群体中国地鼠骨髓细胞染色体标本的制备及其核型分析

山医群体中国地鼠自发糖尿病和某些诱发肿瘤的频率均较高，其染色体数为２ｎ＝２２，细胞株易于获得，二倍体细胞株稳定，其染色体结构的研究对阐明发育、遗传、变异起重大作用。     

影响中国地鼠主要繁殖性状的非遗传因素研究

目的探讨影响中国地鼠的主要繁殖性状的非遗传因素。方法对2001-2010年的中国地鼠山医群体生产繁育数据库中的数据采用方差分析方法,利用SAS软件进行处理。结果出生年份和胎次对产仔数的影响有统计学意义(P<0.01),而其他固定效应对产仔数的影响均无统计学意义;胎次对离乳数的影响有统计学意义(P<0.01),而其他固定效应对离乳数的影响均无统计学意义。结论出生年份和胎次对中国地鼠的主要繁殖性状影响较为明显,为改善中国地鼠山医群体繁殖状况提供一定的依据。     

中国地鼠山医群体近交系E繁殖性状的遗传力估计

目的 对中国地鼠山医群体近交系E的一些繁殖性状进行遗传力估计分析.方法 采用平均信息约束最大似然法(AIREML),利用WOMBAT软件进行处理.结果 产仔数、离乳数、胎间隔2-1和胎间隔3-2的遗传力均较低,分别为0.05、0.096、0.182和0.116.结论 中国地鼠山医群体近交系E繁殖性状的遗传力均属于低遗传力.     

金黄地鼠封闭群SPF化后的微卫星遗传学检测

目的检测和评估金黄地鼠封闭群SPF化后的遗传学变化,为SPF金黄地鼠遗传质量的控制提供技术资料。方法应用小鼠和大鼠的微卫星标记筛选适于金黄地鼠遗传检测的微卫星标记,并结合微卫星荧光标记-半自动基因分型技术,对成都生物制品研究所的SPF级金黄地鼠及其来源的普通级金黄地鼠进行遗传检测,计算其群体遗传学参数。结果对18个小鼠和6个大鼠微卫星标记进行了筛选,分别有2个小鼠和2个大鼠微卫星标记在金黄地鼠种群中具PCR扩增多态性。4个检测的微卫星位点在普通级金黄地鼠和SPF金黄地鼠种群分别发现25和20个等位基因,两群体的期望杂合度分别为0.4979和0.5048,其群体遗传多样性无显著差异;群体间的不同微卫星位点FST范围从0.0095到0.0367,平均为0.0315,表明两群体间的遗传分化很弱,其遗传多样性主要存在于群体内;Nei(1972)遗传距离和Nei(1978)无偏遗传距离分别为0.0678和0.0570,表明了2群体之间很高的遗传相似度和非常近的亲缘关系;Hardy-Weinberg平衡检验表明普通级和SPF金黄地鼠分别有2个和3个位点偏离遗传平衡,且偏离位点均表现为杂合子缺陷。结论该SPF金黄地鼠基本保持了其来源普通级黄地鼠的遗传多样性,两群体间遗传分化程度和遗传差异很小,但应进一步加强其封闭群的繁育控制,保持其遗传稳定性。     

山医群体近交系中国地鼠的G-显带核型和自发畸变率的研究

目的　阐明山医群体近交系中国地鼠G 显带核型和自发畸变率 ,完善中国地鼠的背景资料。方法　采用地鼠骨髓制备和G 显带法。结果　从 14只地鼠的 30个G 显带细胞中 ,7个G 显带细胞被选作模型分析。根据特有带型来识别各号染色体 ,绘制了模式图。此外 ,用常规Giemsa染色分析了 80 0个中期细胞 ,发现染色体断裂为 0 2 5 % ,无着丝粒畸变和不平衡易位均为 0 0 5 % ,自发畸变率很低。结论　山医群体近交系中国地鼠G 显带的识别为结构异常和基因作图提供了科学依据。     

微卫星标记技术及其应用

微卫星标记具有数量多、在基因组中分布广、多态性丰富、呈孟德尔共显性遗性、检测快速方便等特点.本文简述了微卫星技术基本原理、优点和检测方法以及在实验动物科技等领域中的应用,例如遗传连锁图谱、分子标记辅助育种、遗传多样性分析、遗传质量检测等.     

广东省茂名市2017—2018年空肠弯曲菌食品分离株病原特征

目的 采集2017—2018年茂名市禽类和畜类食品（仅宰杀切割）,了解空肠弯曲菌携带率,分析其病原学特征。方法 对茂名市禽类和畜类食品（仅宰杀切割）监测过程中分离的空肠弯曲菌进行了抗生素敏感性检测、耐药基因检测和全基因组测序,并基于全基因测序进行遗传进化分析。结果 2017—2018年共检出空肠弯曲菌食品分离株14株,对链霉素、环丙沙星、克林霉素、萘啶酸、阿奇霉素、强力霉素、四环素等抗生素高度耐药,携带着多种耐药基因;基于全基因组的遗传进化分析显示,茂名市检出的12株空肠弯曲菌分离株处在不同进化分支上,显示出多样遗传性。结论 在茂名地区,家禽和畜牧类食品的空肠弯曲菌感染率很高,具有多种抗药性,对畜牧农场和饲料中这种细菌抗药性的监测需要加强,以便为有效防治空肠弯曲菌引起的相关疾病提供参考。     

AN ATTEMPT TO IMMUNISE HAMSTERS AGAINST KALA AZAR

The difficulty connected with the study of immunity in human infections caused by protozoan microorganisms may be attributed partly to the lack of animals succeptible to these parasites. In ttiis respect kala azar represents, however, a very fortunate exception. Beside other animaIs, Chinese field mouse or hamster (Cricehdu griseus) is an animal now becoming well-known for its high suscepti bility to the inoculations of flagellate or non-flagellate forms of Le8honania donovani. This fact has already been extensive7y exploited in the study of various aspects of experimental kala azar in hamster (1, 2, 3). But to our knowledge no investigations have been done dealing with the possibility of increasing the resistance of these animals to kala azar through specific immunisation.     

温石棉及其代用纤维对鼠细胞EGFR及Survivin表达的影响

目的 探讨温石棉及其代用纤维对鼠细胞表皮生长因子受体（EGFR）及凋亡抑制基因（Survivin）表达的影响.方法 将温石棉及其代用品暴露于中国仓鼠肺细胞（Chinese hamster lung cell,V79）,根据不同实验粉体（A～F组以及阴性对照组）以及不同粉体浓度（1～10 mg/L）分为37组,使用免疫组织化学法检测EGFR及Survivin的表达,并使用SPSS 21.0对肿瘤基因EGFR及Survivin的前后表达进行对比分析.结果 A组和B组的仓鼠肺细胞中肿瘤基因EGFR及Survivin的表达增强较为显著,与其他组相比,差异有统计学意义（P＜ 0.05）;Survivin以及EGFR表达随着粉体浓度的增加,其OD值也呈上升趋势.结论 温石棉及其代用纤维对于鼠细胞肿瘤基因EGFR及Survivin表达有显著的增强作用.     

双遗传标记细胞系Wg3h—neo的建立

利用基因转移技术可以把选择标记基因导入哺乳动物的细胞中,使其带有某种选择标记.neo基因是最常用的选择标记基因,摄取了这一基因的细胞能在含有G 418的培养基中生长,缺少这一基因的细胞在含有G 418的培养基中死亡.本文利用DNA—磷酸钙共沉淀法,把含有neo基因的PSV_2-neo质粒转移到HGPRT缺陷的中国仓鼠成纤维细胞系Wg 3 h中,得到了稳定的双遗传标记细胞系Wg 3h-neo,并对这一细胞系进行了初步鉴定.