基于荧光定量PCR技术的当归不同炮制品中大肠埃希菌数量测定方法开发及比较研究

目的对当归不同炮制品中大肠埃希菌变化进行定量分析。方法建立荧光定量PCR方法,对当归不同炮制品、不同产地、不同收集企业、不同储藏时间的大肠埃希菌进行定量分析。结果不同炮制品中大肠埃希菌数量变化为生当归土炒当归酒当归;在不同产地的当归中以甘肃岷县地区所含的大肠埃希菌的数量最少;与零售企业相比,生产销售企业的当归和酒当归中大肠埃希菌的数量较少;不同储藏时间对当归和酒当归中大肠埃希菌数量有一定影响,随储藏时间的增加,大肠埃希菌的数量也在增加。对部分代表性样品进行平板计数法与荧光定量PCR法比较时发现,平板计数法结果多呈阴性,荧光定量PCR结果均呈阳性。结论所建立的荧光定量PCR法特异性、灵敏度、可靠性以及报告周期均优于平板计数法,可为当归不同炮制品中大肠埃希菌的快速、准确定量检测提供有效手段。     

黄芩不同炮制品的体外抑菌作用研究

目的:探讨黄芩不同炮制品的体外抑菌作用,为临床应用黄芩提供理论依据。方法:用试管二倍稀释法检测黄芩不同炮制品对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、绿脓杆菌、流感杆菌、白喉杆菌、大肠杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎链球菌的抑菌作用。结果:黄芩不同炮制品对上述细菌均有不同的抑菌作用。结论:黄芩片与酒黄芩的体外抑菌作用优于生黄芩。     

当归不同炮制工艺的比较

目的:比较当归不同炮制工艺有效成分的含量,确定最佳的炮制工艺。方法:采用HPLC测定当归不同炮制品中阿魏酸和藁本内酯的含量,采用水蒸气蒸馏法测定其总挥发油的含量,并比较不同炮制品有效成分的含量。结果:当归经炮制后,阿魏酸、藁本内酯和总挥发油的含量均有不同程度的降低,其含量的大小顺序为:当归片﹥微波炮制品﹥酒炙当归﹥土炒当归﹥油炒当归当归炭。结论:当归微波炮制法具一定的科学性,可作为当归新的炮制工艺。     

炮制对当归中糖含量的影响

目的 :探讨炮制对当归药材中糖含量影响。方法 :用硫酸 苯酚法测定了当归及其不同炮制品还原性糖、水溶性糖和多糖的含量。结果 :酒炒当归中上述糖类高于生当归 ,而其余炮制品中糖类的含量均低于生当归。结论 :不同的炮制方法对当归中的糖类含量有显著影响 ,这对阐述当归炮制理论具有一定意义。     

不同炮制方法对大黄中没食子酸含量的影响

目的建立大黄及其炮制品中没食子酸含量的测定方法,考察大黄在不同方法炮制过程中没食子酸含量的变化情况。方法采用HPLC法测定大黄及其炮制品中没食子酸的含量,色谱柱:DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.01%磷酸(10∶90);流速:1mL·min-1;柱温:30℃;检测波长:273nm。结果大黄不同炮制品中没食子酸含量与生品比较有较大差异,酒大黄(酒炙)中没食子酸含量下降,熟大黄(酒蒸、酒炖)、大黄炭中没食子酸含量增加。结论不同的炮制工艺对大黄中没食子酸的含量有一定影响。     

SYBR Green荧光定量PCR检测293A细胞UCP2基因表达方法的建立

目的:建立验证293A细胞UCP2基因表达情况的SYBR Green荧光定量PCR方法。方法:2μg 293A细胞总RNA用于逆转录,所需的反应体系为20L,其中包含2μg RNA,1mM dNTP,1U/L RNA酶抑制剂,2.5pmol/L Olig(dT)18引物,0.5U/L AMV逆转录酶。PCR最佳反应条件为:95℃5min,95℃30s,60℃60s(40个循环),72℃延伸3min。结果与结论:根据溶解曲线分析,扩增产物中无引物二聚体的影响,说明所设计引物特异,退火温度合适。这表明本研究建立的SYBR Green荧光定量检测方法灵敏度高、定量范围广。     

不同种类酒炙对牛膝饮片甜菜碱含量的影响

目的:比较牛膝不同种类、不同乙醇浓度酒炮制品中甜菜碱含量,探讨酒炙对牛膝甜菜碱含量的影响。方法:高效液相色谱-蒸发光散射检测器分析法。结果:不同种类、不同乙醇浓度酒炮炙的牛膝饮片中甜菜碱的含量从高到低趋势为:生品>白酒炙品>花雕酒炙品>加饭酒炙品>河南黄酒炙品。结论:牛膝不同种类、不同浓度酒炮制品中甜菜碱的含量发生变化,酒炙后甜菜碱的含量有减低的趋势,但酒的乙醇含量与甜菜碱的含量变化之间没有明显规律性。     

不同种类酒炮炙对牛膝饮片齐墩果酸含量的影响

目的: 比较牛膝不同种类酒(乙醇浓度不同)炙品、水炙品及生品中齐墩果酸的含量,确定乙醇含量对牛膝齐墩果酸含量的影响。 方法: 按酒炙法制备牛膝炮制品,用高效液相色谱法测定其中齐墩果酸的含量。 结果: 不同种类酒(乙醇浓度不同)炮炙后的牛膝饮片中齐墩果酸的含量有升高的趋势,且高乙醇浓度的白酒炮炙的牛膝中齐墩果酸含量最高。 结论: 不同辅料用酒对牛膝饮片中齐墩果酸的含量有一定影响,齐墩果酸的含量整体上随着炮炙用酒的含醇量的升高而增大。     

当归及其炮制品多糖含量的测定

目的测定当归及其炮制品中的多糖含量。方法用硫酸-苯酚法测定当归及其炮制品中的水溶性糖、还原性糖的含量。结果酒炒当归中的上述糖类含量均高于生当归,而其它3种炮制品中的上述糖类含量均低于生当归。结论不同炮制方法对当归中的糖类含量有显著影响。     

HPLC法对不同黄芩炮制品中黄芩苷含量的测定

目的：比较黄芩不同炮制品的成分含量差异,探讨科学合理地调剂黄芩饮片。方法采用HPLC法,测定黄芩片、酒黄芩、黄芩炭中所含黄芩苷的含量。色谱柱为Thermo C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2),柱温为35℃,检测波长为280 nm。结果黄芩中黄芩苷的含量随炮制时间及加热程度而降低,黄芩炭中黄芩苷含量最低。结论了解黄芩不同炮制品中黄芩苷含量的差异,有利于临床合理科学地调剂黄芩炮制品。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

老年股骨颈骨折术后的护理

股骨颈骨折是发生于老年人的常见骨科病，以女性多见。因老年人骨质疏松，有机质少，应变力差，所以只需较小扭转暴力就能引起骨折。骨折后，由于骨折部位血供差，骨折不愈合的可能性大，加之患者年老体弱、长期卧床，易发生危及生命的并发症，因此恰当的护理非常重要，现将护理体会介绍如下。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。     

《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变

目的:探讨《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变。结果:1963年版《中华人民共和国药典》中石斛来源为兰科石斛属Dendrobium植物的新鲜或干燥茎;1977—2000年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、环草石斛、马鞭石斛、黄草石斛或铁皮石斛;2005年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、铁皮石斛或马鞭石斛;2010年版《中华人民共和国药典》石斛的来源为金钗石斛、鼓槌石斛或流苏石斛,铁皮石斛也从石斛项下都单列出来。讨论:石斛药材基源的变化、铁皮石斛的单列体现出石斛用药的科学性。但铁皮石斛与石斛的性味、功效一致,值得商榷;DNA条形码、分子标记技术等新方法可以应用到石斛药材的鉴别中。     

往来寒热证58例辨证论治探讨

收集我院门诊自2000年10月至2003年9月接诊的往来寒热证患者58例,实验室检查排除疟疾(血涂片均未找见疟原虫),分别从少阳辨证论治33例,从膜原辨证论治25例,疗效满意。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

姜黄根茎不同部位的理化指标分析

目的：研究姜黄根茎不同部位外在物理性状和内在化学成分的差异，为姜黄药材的等级划分提供数据基础。方法：在姜黄道地产区收集样品，每份样品按母姜、子姜一级、子姜二级进行分类，分别测定根茎的长度、宽度、厚度、质量、颜色值［明亮度（L*）、红绿度（a*）和黄蓝度（b*）］及双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、挥发油含量。结果：不同部位姜黄根茎的长度、宽度、厚度、质量、折干率差异较大，其中宽度、厚度、质量在鲜品和干品间差异均有统计学意义；子姜二级的折干率显著低于母姜与子姜一级。姜黄不同部位颜色值表现出相同的变化趋势，姜黄鲜品断面颜色值a*的变异系数最大，颜色值b*次之，颜色值L*最小，姜黄干品粉末颜色值b*的变异系数最大，颜色值L*、a*变异系数较小。姜黄不同部位的姜黄素类成分含量存在差异，子姜一级的双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素含量均高于母姜和子姜二级。结论：综合以上指标，姜黄子姜一级的理化品质最佳。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。