基于GC-MS技术的甘草总黄酮对伊立替康致肠炎小鼠的血浆代谢组学的影响研究

目的评价甘草总黄酮对伊立替康致肠炎小鼠的药效学影响,采用代谢组学方法分析伊立替康致肠炎模型小鼠血浆内源性代谢物的变化,观察甘草总黄酮对差异性代谢物的调节作用,对甘草总黄酮减轻伊立替康胃肠道毒性的作用机制进行初步探索。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药(环丙沙星)组和甘草总黄酮组,ip伊立替康制备肠炎模型,通过体质量、结肠长度、病理观察评价甘草总黄酮减轻伊立替康胃肠道毒性的作用,同时采用GC-MS技术进行非靶向代谢组学研究,寻找伊立替康致肠炎小鼠血浆内变化的相关差异性代谢物,并使用MetaboAnalyst软件构建代谢通路,从代谢组学的角度评价甘草总黄酮对伊立替康的减毒效应。结果甘草总黄酮可显著改善伊立替康给药后导致的小鼠体质量减轻、结肠变短及肠道损伤等现象,且有效地逆转了伊立替康导致的小鼠血浆代谢紊乱,主要包括脂肪酸代谢、氨基酸代谢及糖类代谢,显著回调了月桂酸、棕榈酸、亚油酸、油酸、α-亚麻酸、棕榈酸单甘油酯和油酸单甘油酯等7种中长链脂肪酸。结论甘草总黄酮主要通过调节亚油酸及α-亚麻酸代谢起到减轻伊立替康胃肠道毒性作用。     

基于肝-肠轴探讨“实脾法”治疗肝癌的科学内涵

肝和脾在生理、病理上有密切的联系,"实脾法"治疗肝癌是中医整体观念和"治未病"的重要体现,历代医家在此基础上论治肝病成效显著。随着肝-肠轴学说研究的深入,发现通过胃肠道多种途径调节肝-肠轴上行通道,如肠道黏膜屏障、内毒素、肠道菌群等对肝功能均具有调节作用。大量的证据表明,调节肠道稳态是治疗肝癌等肝病的潜在途径,从中医理论出发,结合临床应用,并联系肝-肠轴学说,探讨"实脾法"在原发性肝癌治疗中的科学内涵。     

高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体酶孵育体系中伊立替康及其代谢产物的浓度

 目的 建立大鼠肝微粒体酶孵育体系中伊立替康（CPT-11）及其活性代谢产物7-乙基-10羟基喜树碱（SN-38）的HPLC检测方法,并对体外孵育条件进行优化。方法 采用HPLC测定微粒体酶孵育体系中伊立替康及其代谢产物的浓度,用单因素法对各孵育条件进行优化,采用Lineweaver-Burk双倒数法研究羧酸酯酶(CES)的酶促动力学。结果 伊立替康、7-乙基-10羟基喜树碱分别在20~4 000、2~400 ng·mL^-1内线性关系良好。体外酶孵育条件为：伊立替康 10 μmol·L^-1,肝微粒体蛋白含量0.02 mg,孵育时间为15 min。结论 本实验建立的HPLC的方法快捷、灵敏,适用于伊立替康及其代谢产物的测定。体外酶孵育条件的优化,同时也为研究其他多种经羧酸酯酶代谢的药物对伊立替康代谢影响及相互作用的体外研究奠定了基础。     

基于肠-肾轴学说探究肠道菌群失调与慢性肾脏病的交互影响

肠道菌群参与疾病的进展、诊断、代谢、康复等多个重要环节,且已证实肠道菌群紊乱与慢性肾脏病发生率的增加直接相关。且在慢性肾脏病期间,菌群多样性改变伴不同程度内稳态失衡,可进一步加剧肾功能损伤并诱发病理恶变态势。此外,慢性肾脏病所引发的免疫失调、代谢紊乱、炎症应激亦被证实与肠道菌群失调存在密切关联,且这一特性具备双向结构关系。肠-肾轴理念地提出明确了肠道微生物失衡、肠屏障受损与毒素产物蓄积损害肾功能的可能,为急慢性肾损伤、肠道菌群失调及相关病理机制的阐释与研究提供了微观生物学基础,并不断衍生出“肾病治肠”的医疗干预靶标。慢性肾脏病与肠道菌群的交互作用将有利于机体微生态失衡回调和肾功能损伤的改善。因此,文章重点梳理肠道菌群与慢性肾脏病之间复杂的交互作用与代谢通路,总结肠道菌群与慢性肾脏病互相影响的内源性作用机制,以期通过肠-肾轴揭示菌群微生态失调在慢性肾脏病发生发展进程中的重要地位,以及二者之间维持动态平衡的策略与途径,进一步丰富肠-肾轴学说的科学内涵与物质基础,不断为肠道菌群失调及慢性肾病的预防及控制提供新思路与新方法。     

基于千金子与甘草对肠道菌群/屏障系统的影响探讨其配伍禁忌机制

该研究基于课题组前期发现的"藻戟遂芫"与甘草配伍致毒增毒特点,以肠道及其菌群为研究对象,从肠道屏障功能、运动功能、肠道菌群结构稳态、肠道菌群代谢基因等角度,进一步拓展表征功效相似、基原相近、化学成分类型类同的中药千金子与甘草合用可能导致的毒副作用。结果显示千金子与甘草合用导致肠黏膜损伤标记物血清二胺氧化酶含量升高,并且使肠道菌群组成结构发生异常改变,增加S24_7_ukn,Candidatus arthromitus等与内毒素合成、肠道免疫相关菌属的含量增加至对照组2倍左右,同时使肠道菌群宏基因组结构发生异常,提高芳香氨基酸降解功能和黏液降解功能相关基因含量,从而可能增强这些基因功能,继而增加肠源尿毒素等毒性物质的产生,引发或加重机体患病风险。该实验以肠道菌群作为研究药物相互作用的重要靶点,并将"药物-肠道菌群-代谢产物-毒性"应用于实验之中,为中药配伍禁忌提供了研究思路。     

从肠-肝轴角度浅析中满分消丸对NAFLD的调节作用

分析非酒精性脂肪肝(NAFLDA)"肠-肝轴"紊乱的原因,以及中满分消丸的干预作用及可能机制。NAFLD异常"肠-肝轴",导致肠道细菌及其产物移位到肝脏,引起一系列免疫系统改变和炎症反应,是促进NAFLD发生发展的关键因素;改善肠道功能、肠道菌群,保护肠黏膜屏障,是防治NAFLD的有效途径之一。中满分消丸是临床常用方剂,对NAFLD具有良好的临床疗效,这可能与改善NAFLD中异常的"肠-肝轴"有关。     

疏肝健脾法调节脑-肠-菌轴治疗肝郁脾虚型慢性乙型肝炎

慢性乙型肝炎的形成和进展与肠道菌群密切相关,肠道菌群分泌物质信息分子通过脉络丛和肠上皮细胞膜上的受体,将信号转导到细胞内引起联动反应。肠道神经元又与脑迷走神经的突触相连,直接接触联络肠道菌群,构成“脑-神经系统-肠道菌群”的信息传导。基于“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”理念的疏肝健脾法,通过调节“脑-肠-菌”功能轴发挥治疗作用,调节“肝主疏泄”功能失调的状态,在改善肝郁脾虚证慢性乙型肝炎患者的临床症状的同时,还可以对脑-肠轴产生一定的影响。     

从肠道菌群论“上下交损,当治其中”的科学内涵

"上下交损,当治其中"由叶天士提出,体现了中医学的整体观念与重视脾胃的学术思想。基于肠道菌群分析中医学"上下交损,当治其中"治法的理论依据,从心-肾轴、脑-肠轴、肺-肠轴、肝-肠轴对肠道菌群在"上下交损"疾病中的作用进行科学阐释,并从"治中"入手,论述调节肠道菌群在慢性、多系统、复杂疾病防治中的应用,以期运用微生物组学阐释中医学理论与作用机制。     

从“微生物-脑-肠轴”谈中医“脑肠同治”防治结直肠癌

结直肠癌（CRC）是我国发病率和死亡率较高的消化道恶性疾病之一,“微生物-脑-肠轴”包括肠道菌群微生物及其代谢产物、肠神经系统、自主神经系统、神经免疫学、神经内分泌系统和中枢神经系统，“微生物-脑-肠轴”在CRC肿瘤细胞的生长、增殖、侵袭和转移方面起重要作用。中医药凭借中医思维优势，以中医整体观认识CRC，脑肠同治，在脑-心-神及肠-脾-肝2个方面对机体进行调节，维持“微生物-脑-肠轴”的相对平衡，进而防治结直肠癌。     

基于肠-肝轴与肝病实脾理论探讨脂肪肝的发病与治疗思路

近年现代医学研究表明,肠-肝轴参与脂肪肝的发病机制。胡世平教授将肠-肝轴和中医肝病实脾理论相结合,探讨脂肪肝的中医发病机理与治疗,指出脂肪肝主要责之肝脾同病,以脾虚调节脂代谢失常为本,肠道菌群失衡属脾虚的微观表现,肠-肝轴或为肝脾同病的病理基础;肝病实脾理论指导脂肪肝治疗的核心在于调脾,其机理或通过调节肠-肝轴,促进恢复肠道菌群稳态和肝功能,以延缓、阻止疾病发展。     

Biotransformation of Glucoaurantio‐Obtusin Towards Aurantio‐Obtusin Increases the Toxicity of Irinotecan Through Increased Inhibition Towards SN‐38 Glucuronidation

The present study aims to investigate the influence of irinotecan's toxicity by the biotransformation of glucoaurantio‐obtusin to aurantio‐obtusin. Intraperitoneal administration (i.p.) of 100 mg/kg aurantio‐obtusin significantly increased the toxicity of irinotecan, but the i.p. administration of 100 mg/kg glucoaurantio‐obtusin showed negligible influence towards irinotecan's toxicity. Furthermore, the mechanism was explained through determining the inhibition potential of glucoaurantio‐obtusin and aurantio‐obtusin towards the glucuronidation metabolism of SN‐38 that has been regarded to be the major active product responsible for the toxicity of irinotecan. The results showed that aurantio‐obtusin exhibited strong competitive inhibition towards the glucuronidation of SN‐38, but negligible inhibition potential of glucoaurantio‐obtusin towards SN‐38 glucuronidation was observed. These results showed that biotransformation of glucoaurantio‐obtusin towards aurantio‐obtusin increased the toxicity of irinotecan through increased inhibition of SN‐38 glucuronidation. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

中药方剂创新研究的启示与思考———从《科学转化医学》首次发表中医方剂研究论文谈起

2010年《科学转化医学》杂志首次发表了耶鲁大学研究人员关于中药古方黄芩汤来源的实验室配方PHY906用于减轻化疗药物伊立替康胃肠道副作用的论文.该研究对于中药尤其是方剂的创新研究提供了新的研究模式和经验借鉴.笔者试图就该研究对未来中药(方剂)研究的意义与启示做一点粗浅的探讨.     

基于糖代谢、脂代谢和能量代谢探讨脾脏与阿尔茨海默病的关系

阿尔茨海默病(AD)是一种慢性神经退行性疾病,严重影响着人们的生活。到目前为止,AD的病因尚不明确,使得其预防和治疗成为世界性的难题。已有研究表明AD可能是一种代谢性疾病,与糖脂代谢和能量代谢有关。中医认为,"脾为后天之本,气血生化之源",不仅与机体物质代谢、能量代谢密切相关,还与人体的衰老密切联系。该文拟分析代谢与AD,脾与代谢之间的关系,以及健脾方对AD的作用,旨在从调控代谢的角度,分析中医"从脾论治"治疗AD的可能机制,挖掘健脾中药在治疗或预防AD中的潜在价值,为探索AD的药物研制和中医疗法提供新思路。     

热性中药附子调节机体内源性代谢产物的分子作用机制研究

目的 采用代谢组学技术观察附子Aconiti Lateralis Radix Praeparata对小鼠血清内源性代谢物的影响，寻找其相关生物标志物和可能表征附子临床治疗作用的代谢途径及相关靶点，探讨其发挥疗效的分子机制。方法 将20只雄性小鼠随机分为2组，分别ig附子水煎液和蒸馏水，小鼠给药量为15 mL/（kg·d），连续ig 4 d；采集各组血样，利用UPLC-MS/MS技术进行分析，主成分分析（PCA）、偏最小二乘判别分析（PLS-DA）等分析方法进行数据模式识别，并根据变异权重系数（VIP）大于1和手动积分计算筛选出差异代谢物；利用差异代谢物进行通路分析；运用Cytoscape和MetScape对差异代谢物进行网络模块化分析并筛选靶标。结果 通过数据模式识别，附子组与对照组均能完全分离；共筛选出18个差异代谢物，其含量都呈上调趋势；通过通路分析，得出5条相关通路，分别为亚油酸代谢、花生四烯酸代谢、淀粉和蔗糖代谢、烟酸和烟酰胺代谢和磷酸肌醇代谢通路；网络模块化分析共得到14个模块，其中最大的2个模块是花生四烯酸代谢通路和亚油酸代谢通路；在整个网络中，花生四烯酸（59）、亚油酸（55）、烟酰胺（26）和棕榈酸（11）节点度值大于均值（8.010），涉及的通路分别为花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢和饱和脂肪酸β-氧化通路；共筛选出26个相关基因，同属于细胞色素P450（CYP450）酶系。结论 附子可能通过作用于CYP450，影响花生四烯酸代谢等途径，进而调节机体能量代谢，从而发挥临床治疗作用。     

Protective effects of Ginkgo biloba L. against natural toxins,chemical toxicities,and radiation: A comprehensive review

Nowadays in our developing and industrial world, humans' health or even their life is threatened by exposure to poisons. In this situation, detecting a protective compound could be helpful and interesting. In the present article, we collected and reviewed all studies, which have been conducted so far about the protective effects of Ginkgo biloba L. (GB), one of the most ancient medicinal tree species, against toxicities induced by chemical toxic agents, natural toxins, and also radiation. In overall, investigations showed that GB exerts the antioxidant, antiinflammatory, antiapoptotic, and antigenotoxicity effects in different toxicities. There are also some special mechanisms about its protective effects against some specific toxic agents, such as acetylcholine esterase inhibition in the aluminium neurotoxicity or membrane‐bond phosphodiesterase activation in the triethyltin toxicity. Ginkgolide A was the most investigated active ingredient of G. biloba leaf extract as a protective compound against toxicities, which had the similar effects of total extract. A few clinical studies have been conducted in this field, which demonstrated the beneficial effects of GB against toxic agents. However, the promising effects of this valuable herbal extract will practically remain useless without carrying out more clinical studies and proving its effects on human beings.     

铁皮石斛水提物对胃癌前病变作用的尿液代谢组学分析

目的:研究铁皮石斛水提物对胃癌前病变大鼠尿液内源性代谢物的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、铁皮石斛水提物(DOE)组、模型组及N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)+DOE低、中、高剂量组。DOE组和MNNG+DOE低、中、高剂量组大鼠预防性给予DOE 2周后开始给予自由饮100 mg·L-1MNNG水溶液,边给药边造模,并在前6周,每3 d灌胃给予10%Na Cl 1 m L诱导。造模7个月后代谢笼收集大鼠尿液并处死大鼠取胃组织。采用UPLC-Q-TOF-MS检测大鼠尿液代谢谱的变化。结果:对比各组胃组织病理结果发现DOE能够减少肠化生,使病理程度停留在轻度至中度异型增生和轻度肠化生阶段。在正、负离子模式下分别筛选出6个和15个差异性标志化合物;代谢产物主要与卟啉代谢、色氨酸代谢、叶酸和蝶呤生物合成代谢、半乳糖代谢和花生四烯酸代谢有关,其中以卟啉代谢最为相关。结论:DOE能够阻断胃癌前病变的恶化,其机制可能与卟啉代谢、色氨酸代谢、叶酸和蝶呤生物合成代谢、半乳糖代谢和花生四烯酸代谢有关。     

西红花苷和西红花酸的药动学及制剂学研究进展

西红花苷来源于西红花Crocus sativus柱头和栀子Gardenia jasminoides果实,是一类具长共轭独特水溶性类胡萝卜素,具有显著神经保护、心血管保护及抗肿瘤等药理活性。西红花苷口服不能以原型吸收入血,而是在胃肠道水解为西红花酸后吸收进入血液循环,之后转变为葡萄糖醛酸缀合物,而代谢产物西红花酸主要分布到心、肝、脾、肺等血液充盈组织中。由于西红花苷及代谢物西红花酸体内生物利用度较低、稳定性差,可采用新型递药系统应用于西红花苷(酸),提高其稳定性、生物利用度及药理活性。综述近年西红花苷和西红花酸的体内代谢及制剂学相关研究进展,为该类天然产物进一步深入研究与开发利用提供参考。     

基于代谢组学分析注射用丹参多酚酸治疗缺血性脑卒中作用机制

[目的] 利用代谢组学方法探究注射用丹参多酚酸治疗缺血性脑卒中恢复期的作用机制。[方法] 采用超高效液相色谱质谱联用仪（UHPLC-Q-Orbitrap MS）对39例符合相应纳入、排除标准的缺血性脑卒中恢复期患者的血液样本进行代谢组学检测,通过无监督的主成分分析（PCA）、有监督模式的正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）对患者用药治疗前后的血浆进行分析。[结果] 代谢组学共筛选出42个与治疗疾病相关的生物标记物,涉及22种代谢通路,其中磷脂生物合成、磷脂酰胆碱生物合成、卟啉代谢、组氨酸代谢、类固醇生成、嘧啶代谢为变化最显著的6条代谢通路。[结论] 通过代谢组学方法证实,注射用丹参多酚酸可能通过调节磷脂代谢、氨基酸代谢、核酸代谢及能量代谢,进而发挥治疗缺血性脑卒中恢复期的作用。表明代谢组学对指导中医临床及机制研究方面的可行性。