RP-HPLC测定不同产地不同采集期天山雪莲中绿原酸和芦丁

天山雪莲为菊科植物雪莲Saussureainvolucrata(Kar.et Kir.)Sch.-Bip.的干燥地上部分,系维吾尔族习用药材。维吾尔语名称为“塔格来丽斯”,汉语名称为雪莲或雪莲花,在我国仅分布于新疆维吾尔自治区天山、阿尔泰山,海拔2100～4100m雪先富金石滩石缝中,国外俄罗斯、蒙古、哈萨克斯坦及吉尔吉斯坦也有分布[1～3]。由于雪莲采挖严重,数量日益稀少,已列入国家三级保护植物目录[4]。天山雪莲能补肾活血,强筋骨,温肾助阳,祛风胜湿,用于风湿性关节炎、肺寒咳嗽、月经不调、小腹冷痛等病症的治疗[3～6]。天山雪莲主要含芦丁等黄酮类、紫丁香苷等木…     

天山雪莲提取物磷脂复合物溶解度及稳定性的考察

目的通过溶解度比较考察天山雪莲提取物磷脂复合物稳定性。方法分别测定天山雪莲提取物和天山雪莲提取物磷脂复合物在水和不同p H的缓冲溶液中平衡溶解度,不同p H的饱和正辛醇/水中表观油水分配系数,和强光照射、高温、高湿环境下,考察天山雪莲提取物磷脂复合物的质量及其有效成分(绿原酸和芦丁)的质量分数变化。结果磷脂复合物可明显提高天山雪莲提取物中活性成分(绿原酸和芦丁)平衡溶解度和表观油水分配系数,而且具有一定的抗光照性,但高温下,磷脂复合物稳定性较差,易吸湿。结论本研究将天山雪莲提取物磷脂复合物能不同程度改善天山雪莲提取物中活性成分的水溶性和脂溶性,同时以固体形式保存其稳定性较好。     

天山雪莲的开发与应用

本文总结了近年来天山雪莲在人工种植研究、天山雪莲培养物研发、药物制剂开发及临床应用方面的研究成果,为新疆特色药材天山雪莲的产业化研究提供参考。     

藏药雪莲花与天山雪莲抗炎活性的比较

比较西藏雪莲花、天山雪莲经超临界CO2萃取所得浸膏对实验性致炎小鼠的抗炎活性,结果表明：西藏雪莲浸膏的抗炎活性优于天山雪莲浸膏。     

天山雪莲培养物对小鼠免疫功能的影响

目的：探讨天山雪莲培养物的免疫作用。方法：小鼠灌胃给予天山雪莲培养物,剂量分别为75、150、300mg/kg,连续给药7天,观察天山雪莲培养物对小鼠碳粒廓清、对DNCB致小鼠迟发型超敏反应和对小鼠溶血素形成的影响。结果：与空白给药组相比,天山雪莲培养物（150mg/kg）对非特异性免疫功能有一定抑制作用;300mg/kg的天山雪莲培养物对小鼠迟发超敏反应有抑制作用,对绵羊红细胞所致小鼠特灵性抗体生成有增强作用。结论：天山雪莲培养物具有调节免疫功能作用。     

不同理化因素对天山雪莲组培苗生长及总黄酮量的影响

目的研究不同理化因素对天山雪莲组培苗生长和总黄酮生物合成的影响。方法测定不同理化因素影响下天山雪莲组培苗干质量和总黄酮量。结果利于天山雪莲生长及黄酮积累的培养条件:MS培养基附加6-BA 0.5 mg/L,NAA 0.05mg/L,氮源浓度40 mmol/L,NH4+-NO3比例为15︰25,碳源蔗糖质量浓度40 g/L,pH值5.0～6.0,光照强度2 500 lx,温度25℃。结论各项最佳培养条件的组合总体上可以促进天山雪莲生长和总黄酮生物合成,氮源、碳源和温度对天山雪莲生长及总黄酮量的影响最为明显。     

天山雪莲细胞培养物化学成分研究

 目的研究天山雪莲细胞培养物的化学成分。方法对天山雪莲细胞培养物乙醇提取物的各个萃取部位进行反复柱色谱,根据光谱数据和理化性质确定化合物结构。结果从天山雪莲细胞培养物中分离得到5个化合物,分别为β-谷甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、3-羟基丁酸八聚体(3)、琥珀酸(4)、紫丁香苷(5)。结论化合物1～5均为首次在天山雪莲细胞培养物中分离得到。     

天山雪莲培养物的毒性实验研究

急性毒性实验:一次性灌胃天山雪莲培养物后,小鼠最大耐受量相当于311.52g/kg生药量。大鼠长期毒性实验结果表明天山雪莲培养物没有明显毒性。给药组与对照组结果均无明显差异(P≥0.05)。结果提示天山雪莲培养物在本实验条件下对小鼠和大鼠均无明显的毒性反应。     

天山雪莲对乳腺癌的潜在治疗作用及基于网络药理学的机制探讨

女性乳腺癌作为全球最常见癌症,其发病主要受体内雌激素的影响。天山雪莲作为妇科常用中药,对雌激素所致的疾病具有一定调节作用,然而目前尚未有研究报道天山雪莲对乳腺癌的治疗作用。因此,该研究基于体外实验结合网络药理学探讨天山雪莲对乳腺癌的潜在治疗作用。研究测定了天山雪莲水提物对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖及迁移的抑制活性,结果显示天山雪莲水提物可显著抑制乳腺癌细胞的增殖(IC_(50)=6.47 mg·mL~(-1)),对乳腺癌细胞的迁移也具有抑制作用。研究通过TCMD数据库获得天山雪莲化学成分39个,利用反向找靶技术筛选获取天山雪莲的潜在作用靶点160个,借助OMIM数据库收集乳腺癌疾病靶点1 001个,对两者取交集获得天山雪莲治疗乳腺癌潜在靶点45个;将交集靶点导入STRING数据库中获得交集靶点互作关系并运用Cytoscape构建交集靶点蛋白互作网络;对蛋白互作网络进行拓扑、GO、KEGG分析,获得天山雪莲治疗乳腺癌关键作用靶点8个、关键通路101条、生物过程85条。结果表明,天山雪莲可能通过调控细胞周期,抑制癌细胞增殖、迁移、黏附,以及调节雌激素受体发挥抗乳腺癌的作用。该研究利用体外实验及网络药理学探究了天山雪莲对乳腺癌的潜在治疗作用机制,为天山雪莲的进一步开发提供新的方向。     

天山雪莲HPLC指纹图谱研究

目的 建立天山雪莲药材的HPLC指纹图谱,为雪莲药材的快速质量控制提供依据.方法 以绿原酸、紫丁香苷、芦丁、木犀草素、芹菜素5种对照品为对照,采用HPLC法,测定了10批次不同产地天山雪莲的色谱图,确立参照指纹图谱.色谱条件:色谱柱DiamonsilTMC18(250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-水(0.8%醋酸,0.2%三乙胺,pH3.5～4.0)线性梯度洗脱,柱温30℃,检测波长270 nm,记录时间30 min,体积流量1.0 mL/min.结果 标示出天山雪莲的13个特征指纹峰.结论 该方法 准确、重现性好,为天山雪莲的指纹图谱质量控制提供了参考.     

天山雪莲传递体包封率测定方法的研究

目的 建立维药天山雪莲传递体包封率的测定方法.方法 采用高效液相色谱法同时测定天山雪莲中芦丁和绿原酸,采用反相透析法分离传递体和游离药物芦丁和绿原酸,测定天山雪莲传递体中有效成分芦丁和绿原酸的包封率.结果 反相透析法能将天山雪莲传递体与游离药物芦丁和绿原酸有效分离,反透析平衡时间为10 h,反透析芦丁和绿原酸的回收率分别为(l00.07±0.58)％,(99.83±0.65)％;反透析芦丁和绿原酸加样回收率分别为(99.99±0.56)％,(99.68±0.46)％.以芦丁和绿原酸计的3批天山雪莲传递体样品的平均包封率为(77.63±1.57)％,(69.36±1.73)％.结论 反透析法便捷、准确,适用于天山雪莲传递体的包封率测定.     

天山雪莲细胞培养技术、化学成分和药理作用研究进展

天山雪莲是我国传统中药材,对于风寒湿痹痛、类风湿性关节炎及小腹冷痛、月经不调有良好的疗效。然而,该药材生境特异,自然繁殖率低,生长慢,长期掠夺性采挖使其野生资源濒临灭绝。应用植物细胞培养技术,通过培养愈伤组织、悬浮细胞和毛状根可获得天山雪莲细胞,是天山雪莲药材的一个新来源。培养技术方面,作者重点综述了反应器类型、培养体系、生物合成前体、诱导子类型以及光谱特性等对雪莲细胞悬浮培养的影响。天山雪莲细胞的化学成分主要有苯丙素类、黄酮类、木脂素类和甾体类等,其中以苯丙素类物质种类最为丰富。药理方面,天山雪莲细胞具有抗炎镇痛、活血化瘀、免疫调节、增加骨密度、降血脂、抗缺氧、抗运动性疲劳、抗辐射、抗肥胖、抗氧化以及治疗再生障碍性贫血等多方面的作用。该研究对天山雪莲细胞的培养技术、化学成分和药理作用进行了综述,为其深入研究和开发利用提供依据。     

天山雪莲细胞培养物对RANKL诱导破骨细胞的影响

目的研究天山雪莲细胞培养物对破骨细胞形成以及成熟破骨细胞活性的影响。方法小鼠巨噬细胞RAW264.7在核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导下形成破骨细胞,诱导过程中加入天山雪莲细胞培养物(以天山雪莲总黄酮计算),通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和Hoechst 33342染色观察破骨细胞形成,以对硝基苯磷酸酯作底物检测TRAP活性;对诱导形成的破骨细胞进行乳酸脱氢酶(LDH)活性检测和Annexin V-PI双染流式细胞术进行细胞凋亡检测,RT-PCR检测Trap和基质金属蛋白酶(Mmp9)m RNA的表达。结果天山雪莲细胞培养物能够显著抑制破骨细胞的形成以及TRAP酶活;天山雪莲总黄酮小于125μg/m L时,对破骨前体细胞RAW264.7无细胞毒性,但会破坏成熟破骨细胞细胞膜,显著提高胞外LDH酶活性,并诱导破骨细胞凋亡;62.5μg/m L天山雪莲总黄酮会显著下调破骨细胞的标志物Trap和Mmp9 mRNA表达。结论天山雪莲细胞培养物对破骨细胞形成有抑制作用,并能破坏已形成的破骨细胞,降低骨吸收活性。     

天山雪莲微乳小鼠局部药代动力学的研究

制备天山雪莲微乳,考察天山雪莲在小鼠腹部皮肤的滞留量与时间的关系及其局部经皮给药的药动学,探讨微乳促进药物的经皮吸收的作用。方法：测定制备样品的平均粒径、粒径分布等理化性质;以绿原酸、芦丁为指标性成分,采用HPLC法测定不同时间给药皮肤中绿原酸、芦丁生物滞留量,DAS软件拟合药物动力学参数。结果：天山雪莲微乳平均粒径为 54.51 nm,多分散系数(PDI)为0.281,Zeta电位为-0.687 mV;在小鼠皮肤中滞留量的动力学过程符合二室模型。结论：天山雪莲微乳中有效成分能较快渗透进入皮肤,并在皮肤局部较长时间蓄积。     

哈密“雪山花王”——天山雪莲的研究现状

雪莲是我国西部地区的珍稀名贵药材之一,在中医、维吾尔医中常用的草药。它有补肾活血,强筋骨,营养神经,调节异常体液等功效。在临床上主要用于治疗风寒湿痹痛,小腹疼痛,月经不调等。雪莲的主要化学成分生物碱类、黄酮类、苯丙素类化合物,这与他的药用价值密切相关。雪莲对生长环境有特殊的要求,这决定了它主要生长在新疆天山。但现在雪莲的研究开发上存在一些问题。哈密作为天山雪莲的主要产地,采取了相应的管理措施,以满足市场对雪莲的需求,更重要的是避免雪莲的灭绝。     

天山雪莲微乳的小鼠局部药代动力学

目的:制备天山雪莲微乳,考察天山雪莲微乳在小鼠腹部皮肤滞留量与时间的关系及其局部经皮给药的药代动力学,探讨其皮肤吸收作用。方法:测定制备样品的Zeta电位、多分散指数、粒径分布等理化指标;以绿原酸、芦丁为指标性成分,采用HPLC测定不同给药时间皮肤中绿原酸、芦丁生物滞留量,DAS软件拟合药物动力学参数。结果:天山雪莲微乳平均粒径54.51 nm,多分散系数0.281,Zeta电位-0.687 mV;在小鼠皮肤中滞留量的动力学过程符合二室模型。结论:天山雪莲微乳中有效成分能较快渗透进入皮肤,并在皮肤局部较长时间蓄积。     

HPLC测定不同产地天山雪莲药材中紫丁香苷的含量

天山雪莲为菊科植物雪莲Saussurea involucrate（Kar．etKir．）Sch．Bip．的干燥地上部分，系维吾尔族习用药材。收载于《中国药典》2005年版一部，能补肾活血，强筋骨，温肾助阳，祛风胜湿，用于治疗风湿性关节炎，肺寒咳嗽，月经不调，小腹冷痛等症状。天山雪莲化学成分有芦丁等黄铜类、紫丁香苷等木脂素类、大苞雪莲内酯，大苞雪莲碱等生物碱类、多糖类等。采用高效液相色谱法测定雪莲注射液中紫丁香苷含量，以紫丁香苷为参照物研究雪莲和雪莲注射液指纹图谱及不同种雪莲中紫丁香苷含量测定的报道已见，     

天山雪莲组培苗与原药材中芦丁及紫丁香苷含量的比较

目的:比较天山雪莲组培苗与原药材中芦丁及紫丁香苷含量的差异。方法:采用HPLC,Hydro-RP C18柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(5∶95),流速1 mL.m in-1,柱温25℃,检测波长220 nm。结果:天山雪莲组培苗含有多种与原药材相同的有效化学成分,其中紫丁香苷的含量比原药材提高了近4.35倍。结论:利用组织培养方法提高天山雪莲苗质量具有良好的开发前景。     

正交设计法优选天山雪莲凝胶剂基质处方

目的:优选天山雪莲凝胶剂基质处方。方法:采用正交设计法,以凝胶剂基质在室温下的黏度和屈服值、在体表温度下的黏度和屈服值、触变性为指标,优化处方中卡波姆940、氮酮、丙二醇和无水乙醇的用量。结果:天山雪莲凝胶剂基质处方最佳配比为卡波姆-氮酮-丙二醇-无水乙醇(2.0∶2.0∶15.0∶30.0)。结论:采用该优选处方制备的天山雪莲凝胶剂均匀透明,黏度适中,触变性良好。     

天山雪莲透皮微乳制备处方优化

目的:优化天山雪莲水包油型微乳处方.方法:以芦丁及绿原酸为指标,采用HPLC测定天山雪莲提取物在各溶媒中的溶解度,初步确定处方组成,绘制伪三元相图对处方进行优化,测定优化处方的黏度、平均粒径、粒径分布等理化性质.结果:Km =1∶2时,伪三元相图形成的微乳区域最大,微乳最佳处方为RH40-1,2-丙二醇-油酸的比例4∶2∶1,微乳平均粒径及黏度符合透皮微乳的要求,在高温、强光下无分层,无絮凝或药物析出.结论:天山雪莲微乳增加了天山雪莲提取物的溶解度,具有粒径小、稳定性好、黏度适宜的特点.