多成分同时比较芫花及芫花叶化学组成

目的:多成分比较芫花花蕾和芫花叶的化学组成。方法:以芹菜素、木犀草素、羟基芫花素、芫花素为对照品,采用RP-HPLC方法测定芫花花蕾及芫花叶中4个成分的含量,比较2个药用部位的成分组成差异。Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(58∶42∶0.5),流速0.8 mL·min-1,检测波长350 nm(木犀草素、羟基芫花素)、338 nm(芹菜素、芫花素),柱温35℃。结果:芫花花蕾中这4个成分的质量分数依次为0.017%,0.088 4%,0.069 9%,0.059 3%,芫花叶中这4个成分质量分数依次为0.011 8%,未检测到,0.012 3%,未检测到。结论:芫花叶和芫花花蕾含有两个相同成分,但含量不同;而花蕾中的两个成分在叶中未检测到,表明叶与花蕾成分不同,可根据临床治病目的分别入药。     

HPLC-MS测定芫花炮制前后5种成分含量变化

目的： 建立HPLC-MS同时测定芫花中木犀草素、芹菜素、羟基芫花素、芫花素以及芫花酯甲5种化学成分含量的方法,分析炮制前后含量的变化。方法： 采用液质联用法,质谱采用大气压电喷雾离子源,选择性负离子模式监测。色谱柱为Agilent Zorbax C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,流动相为0.05%甲酸乙腈（A）-0.05%甲酸水（B）,流速0.6 mL·min^-1,柱温30℃,进样量2 μL。结果： 芫花炮制后5种毒效成分均发生了一定程度的变化。3种黄酮类有效成分木犀草素、羟基芫花素以及芫花素炮制后含量升高,二萜原酸酯甲代表成分芫花酯甲炮制后含量降低,黄酮类成分芹菜素经炮制后含量也发生了下降。结论： 该方法简单、灵敏、准确,为芫花及其炮制品的质量评价提供了有效的方法。     

不同炮制方法对紫苏子中咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素和芹菜素含量变化的影响

目的:比较紫苏子5种不同炮制品[阴干炮制品、烘干炮制品(60℃)、烘干炮制品(80℃)、清炒炮制品、微波炮制品(12 min)]中4种活性成分含量.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Thermo ODS-2 Hy-persil(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸,咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素和芹菜素的检测波长分别为320、330、350和340 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL.结果:HPLC法同时测定紫苏子中咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素和芹菜素的含量,分别在2.4825～74.4750 μg/mL(R2=0.9994)、57.7584～1732.752 μg/mL(R2=0.9992)、4.5672～ 137.016 μg/mL(R2=0.9998)、3.3804～101.412 μg/mL(R2=0.9997)范围之内,被测活性成分的峰面积与浓度呈良好线性关系;紫苏子5种不同炮制品中的活性成分咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素和芹菜素含量不同,其中阴干炮制品样品中的咖啡酸和迷迭香酸含量最高,清炒泡制品样品中木犀草素和芹菜素含量最高,说明炮制工艺对紫苏子中4种有效成分影响各不相同.结论:建立了检测紫苏子5种不同炮制品中4种活性成分(咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素和芹菜素)含量的方法,该方法为阐明紫苏子不同炮制品药理活性研究提供科学依据,可以作为提升紫苏子药材质量标准的指导方法,也可作为中药紫苏子及其不同炮制品药材质量控制方法.     

RP-HPLC法同时测定芫花中芹菜素、羟基芫花素、芫花素的含量

目的 对芫花中芹菜素(Ⅰ)、3'-羟基芫花素(Ⅱ)和芫花素(Ⅲ)3种黄酮苷元进行含量测定.方法 采用反相高效液相色谱法,使用大连依利特Hypersn C18柱250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%醋酸水溶液(60:40),流速1.0 mL·min-1,检测波长340nm,柱温25℃.结果 化合物Ⅰ～Ⅲ的线性范围(n=6)依次为0.1～5.0μg(r=0.9999).0.1～1.0 μg(r=0.9999),0.1～5.0μg(r=0.9999).化合物Ⅰ～Ⅲ平均回收率(n=6)分别为99.6%、102.8%,100.2%;RsD分别为1.8%、1.5%,1.1%.结论 本方法可准确地同时测定芫花中3个黄酮苷元的含量,方法精密度高、简便、快速.     

芫花化学成分研究

目的 研究芫花Daphne genkwa的化学成分.方法 使用色谱技术对芫花醇提物进行分离和纯化,根据理化常数和波谱数据对化合物的结构进行鉴定.结果 共鉴定出10个化合物,分别为芫花素(genkwanin,1)、3'-羟基芫花素(3'-hydroxygenkwanin,2)、芹菜素(apigenin,3)、山柰酚-3-O-β-D-(6"-P-香豆酰)-吡喃葡萄糖苷[kaempferol-3-O-β-D-(6"-P-coumaroyl)-glucopyranoside,4]、芫根苷(yuenkanin,5)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucoside,6)、木犀草素-7-甲氧基-3,-O-β-D葡萄糖苷(luteolin-7-O-methylether-3' -O-β-D-glu-eoside,7)、芫花素-5-O-β-D-葡萄糖苷(genkwanin-5-O-β-D-glucoside,8)、β-谷甾醇(β-sitosterol,9)、胡萝卜苷(daucosterol,10).结论 化合物6～8为首次从该植物中分得.     

薄层扫描法测定芫花中芫花素含量

采用薄层扫描法对芫花不同工艺炮制品中的芫花素进行了含量测定,结果表明芫花不同工艺的炮制品中其含量为0.128%～0.389%,回收率为98.8%,为芫花的最佳炮制工艺筛选提供了部分参考依据。     

芫花药材物质基础研究

目的: 研究生芫花的物质基础,为进一步研究芫花及醋芫花提供对照物质。 方法: 采用溶剂法得到芫花的80%乙醇提取物,以大孔树脂HP-20、硅胶、羟丙基葡聚糖凝胶LH-20柱色谱进行分离,根据化合物的理化性质和NMR谱数据鉴定化合物结构。 结果: 从芫花的乙醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为芫花素(1)、芹菜素(2)、木犀草素(3)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(4)、槲皮素(5)、双白瑞香素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、椴苷(7)、洋芹素-4',7-二甲醚(8)、双白瑞香素(9)、β-谷甾醇(10)、胡萝卜苷(11)。 结论: 其中化合物4,5,6为首次从芫花中分离得到。     

HPLC法分析炮制对芫花中芫花素的影响

用HPLC法分析了芫花各种炮制品中芫花素的含量变化。结果表明:芫花经不同方法炮制后芫花素的含量均有所降低,以醋炙降低最少。并对各大区芫花饮片的芫花素含量进行了定量分析,为制订芫花饮片的质量标准提供了实验依据。     

薄层扫描法测定芫花中芫花素含量

采用薄层扫描法对芫花不同工艺炮制品中的芫花素进行了含量测定，结果表明芫花不同工艺的炮制品中其含量为０．１２８％～０．３８９％，回收率为９８．８％，为芫花的最佳炮制工艺筛选提供了部分参考依据。     

炮制对芫花中芫花素含量的影响

采用薄层扫描法对芫花不同工艺炮制品和全国各大区芫花样品中的芫花素以及将芫花素单体经不同模拟炮制工艺处理的样品进行了含量测定。     

芫花不同药用部位芫花素和芫花酯甲含量比较

目的比较芫花根、叶、花蕾中芜花素和芫花酯甲含量差异,为该植物资源的可持续发展提供试验数据。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil C18柱（4．6mm×250mm,5μm）,芫花素流动相为甲醇-水-冰醋酸（65：35：0．5）,流速0．8mL／min,柱温为40℃,检测波长338nm;芜花酯甲流动相为甲醇-水（82：18）,柱温为40℃,流速1．0mL／min,检测波长233nm。结果芫花素在3个部位中的含量从高到低依次为：花蕾（0．30％）、叶（0．038％）,根申未检测到该成分;芫花酯甲在3个部位中的含量从高到低依次为：叶（0．028％）、根（0．025％）、花蕾（0．0039％）。结论以叶代根、花蕾提取芫花酯甲,可以拓宽药源,实现植物资源的可持续发展。     

芫花枝条木脂素化学成分研究

目的：研究芫花枝条中木脂素类化学成分。方法：采用硅胶、凝胶、反相硅胶、制备薄层色谱等方法对芫花枝条中的木脂素类成分进行分离纯化,通过谱学分析技术进行化合物结构鉴定。结果：分离鉴定了8个木脂素类化合物,分别鉴定为：芝麻脂素（1）、紫丁香树脂酚（2）、落叶松脂醇（3）、左旋松脂醇（4）、荛花酚（5）、salicifoliol（6）、vladinol D（7）、异落叶松脂醇（8）。结论：化合物8为首次从芫花枝条中分离得到,化合物1、5、6、7为首次从瑞香科植物中分离得到。     

芫花根质量标准研究

目的建立芫花根中芫花酯甲的定性鉴别和定量分析方法。方法采用薄层色谱法对芫花根中芜花酯甲进行定性鉴别，采用高效液相色谱法测定芫花酯甲的含量。色谱条件：KromasilC18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-水（85：15），流速1．0mL／min；柱温40℃；检测波长为238nm；记录时间40min。结果芫花根中芫花酯甲的薄层色谱鉴别特征明显、专属性强；含量测定线性范围为0．047-0．282btg（r=0．9996）；平均回收率为99．2％，RSD=2．00％（n=6）。结论该方法操作简便，结果准确，能够对芜花根中的芜花酯甲进行定性鉴别和定量分析，提高了该药材的质量控制水平。     

Isolation of flavonoids, a biscoumarin and an amide from the flower buds of Daphne genkwa and the evaluation of their anti-complement activity

As part of an ongoing study aimed at identifying the anti-complement active compound from the flower buds of Daphne genkwa, ten flavonoids, one biscoumarin and one amide were isolated. Their structures were identified from spectroscopic and physicochemical data as genkwanin 5-O-beta-d-primveroside (1), apigenin 7-O-beta-d-glucuronide (2), genkwanin 5-O-beta-d-glucopyranoside (3), apigenin 5-O-beta-d-glucopyranoside (4), genkwanin (5), apigenin (6), luteolin 7-methyl ether (7), luteolin (8), daphnoretin (9), velutin (10), 7-methoxyacacetin (11) and aurantiamide acetate (12). Among them, compounds 9, 10 and 12 were isolated from this plant for the first time. The anti-complement activity of these compounds was tested against the classical pathway of the complement system. Among the compounds, daphnoretin (9) exhibited significant anti-complement activity with an IC(50) value of 11.4 microm, whereas the other compounds were not active in the assay.     

藏药独一味地上部分的化学成分

目的：研究独一味地上部分的化学成分。方法：应用多种色谱技术分离纯化，根据理化性质及波谱分析鉴定化合物的结构。结果：从独一味地上部分的乙醇提取物中分离得到了12个化合物，分别鉴定为木犀草素（1）、木犀草素7-O-β-吡喃葡萄糖苷（2）、芹菜素（3）、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）、芹菜素7-O-（6″-反式-对-香豆酰基）-β-D-半乳糖苷（5）、小麦黄素（6）、刺槐素（7）、芫花素（8）、独一味素A（9）、独一味素B（10）、山栀苷甲酯（11）及丁香酸（12）。结论：化合物5-8及12为首次从该植物中分离得到，化合物1和6具有显著抑制小鼠巨噬细胞RAW 264．7释放NO的活性。     

紫芫花化学成分研究

 目的 研究瑞香科植物紫芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)干燥花蕾的化学成分。方法 对紫芫花的体积分数95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、凝胶Sephadex LH-20等色谱手段进行化学成分的分离纯化,通过理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果 分离得到12个化合物,鉴定了其中10个化合物,分别为芹菜素(apigenin, 1)、芫花素(genkwanin, 2)、刺槐素(4′-O-methylapigenin, 3)、椴苷[kaempferol,3-O-β-D-(6-O-trans-p-coumaroyl)- glucopyranoside,4]、对羟基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde, 5)、对羟基桂皮酸甲酯(trans-p-hydroxy cinnamic methyl ester, 6)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid, 7)、对羟基桂皮酸(p-hydroxy cinnamic acid, 8)、苄基葡萄糖苷（benzyl-glucopyranoside, 9）和苯乙基葡萄糖苷（phenylethyl-glucopyranoside,10）。结论 化合物5~10为首次从该植物中分离得到。     

浙产虎杖根茎与根中大黄素含量比较

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定浙产虎杖根茎与根中大黄素含量的方法,并比较根茎与根中的大黄素含量。方法:采用超声提取法制备供试品溶液,运用高效液相色谱法测定虎杖根茎与根中大黄素含量。Zorbax XDB-C18色谱柱;流动相为甲醇-1%冰醋酸(70∶30);检测波长:254nm;流速:1.5 mL.min-1;柱温:40℃;进样量:20μL。结果:大黄素进样在1μg.mL-1～500μg.mL-1浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9995),加样回收率为97.56%,RSD为2.72%(n=6)。浙产虎杖根茎与根中大黄素含量分别为22.965mg.g-1和16.285mg.g-1。结论:本法适用于虎杖中大黄素含量的检测。浙产虎杖根茎与根中大黄素含量丰富且存在差异。     

舒肺贴提取工艺优选研究

目的：优选复方制剂舒肺贴中芫花、延胡索等药物的提取工艺。方法：采用单因素考察、正交试验,以高效液相色谱法测定提取液中芫花素的含量,优选最佳提取工艺。结果：70%乙醇10倍量回流提取3次,每次1 h为最佳提取工艺。结论：优化后的工艺合理、稳定、可行,适于舒肺贴中芫花等药物的精制提取。     

山茱萸的化学成分

目的：对山茱萸的化学成分进行分离和鉴定。方法：运用硅胶、Sephadex LH-20柱层析和重结晶等方法分离纯化化合物，通过波谱解析和理化鉴别进行结构鉴定。结果：分离鉴定了12个化合物，分别为：对羟基桂皮酸（1），山柰酚（2），槲皮素（3），山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷（4），柚皮素（5），7-脱氢马钱苷（6），马钱苷（7），阿江榄仁树葡糖苷Ⅱ（8），山茱萸新苷（9），熊果酸（10），苹果酸甲酯（11），没食子酸（12）。结论：化合物1-5和8为首次从该植物中分离得到。     

Antioxidant effects of Genkwa flos flavonoids on Freund׳s adjuvant-induced rheumatoid arthritis in rats

Ethnopharmacological relevance

Genkwa flos (Daphne genkwa Sieb. et Zucc.), a Chinese herbal medicine, has been traditionally used for over two thousand years in China for inflammation related symptoms, including joint pain. To evaluate the antioxidative effects of flavonoid aglycones (FA) isolated from Genkwa flos on adjuvant arthritis in rats and to identify the relationship between antioxidant potential and whole blood viscosity (WBV).

Materials and methods

FA compounds were identified using LC–MS and the content was assayed by HPLC. Arthritis was induced by an intradermal injection of Freund?s complete adjuvant in the footpad. The effects of FA on paw volumes, secondary arthritis scores, histopathology of joints, and body and organ weights were measured. The antioxidant effects of FA and WBV were determined.

Results

LC–MS analysis showed that the FA contained four major compounds: luteolin, apigenin, hydroxygenkwanin and genkwanin. FA significantly decreased paw edema, arthritis scores, and weight loss. These observations were consistent with the reduction of oxidative stress and the improvement of the WBV.

Conclusion

FA significantly decreased arthritis in a rat model through antioxidant and hemorheological modulatory mechanisms. The Genkwa flos flavonoids may have clinical potential for the treatment of rheumatoid arthritis.