芫花根质量标准研究

目的建立芫花根中芫花酯甲的定性鉴别和定量分析方法。方法采用薄层色谱法对芫花根中芜花酯甲进行定性鉴别，采用高效液相色谱法测定芫花酯甲的含量。色谱条件：KromasilC18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-水（85：15），流速1．0mL／min；柱温40℃；检测波长为238nm；记录时间40min。结果芫花根中芫花酯甲的薄层色谱鉴别特征明显、专属性强；含量测定线性范围为0．047-0．282btg（r=0．9996）；平均回收率为99．2％，RSD=2．00％（n=6）。结论该方法操作简便，结果准确，能够对芜花根中的芜花酯甲进行定性鉴别和定量分析，提高了该药材的质量控制水平。     

多成分同时比较芫花及芫花叶化学组成

目的:多成分比较芫花花蕾和芫花叶的化学组成。方法:以芹菜素、木犀草素、羟基芫花素、芫花素为对照品,采用RP-HPLC方法测定芫花花蕾及芫花叶中4个成分的含量,比较2个药用部位的成分组成差异。Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(58∶42∶0.5),流速0.8 mL·min-1,检测波长350 nm(木犀草素、羟基芫花素)、338 nm(芹菜素、芫花素),柱温35℃。结果:芫花花蕾中这4个成分的质量分数依次为0.017%,0.088 4%,0.069 9%,0.059 3%,芫花叶中这4个成分质量分数依次为0.011 8%,未检测到,0.012 3%,未检测到。结论:芫花叶和芫花花蕾含有两个相同成分,但含量不同;而花蕾中的两个成分在叶中未检测到,表明叶与花蕾成分不同,可根据临床治病目的分别入药。     

HPLC法测定芫花中芫花素的含量

采用Lichrosorb5RP-18柱,甲醇-水-冰乙酸(65:35:5)为流动相,332nm检测,建立了HPLC测定芫花中芫花素含量的方法,加样回收率为95.46%,RSD为1.15%,测得芫花中芫花素的含量为0.1555%。     

芫花药材中芫花酯甲和芫花酯乙UPLC-MS含量测定方法

目的：对芫花药材中含量较低的毒效成分芫花酯甲和芫花酯乙建立相关含量测定方法,为芫花的临床使用安全性及进一步研究提供参考。方法：采用UPLC MS,选择离子扫描法建立相关检测方法。结果：建立了芫花药材中芫花酯甲和芫花酯乙含量测定方法,得到芫花酯甲的线性回归方程为Y=1048X 1 234,r=0998,芫花酯乙的线性回归方程为Y=1092X 1 997,r=0995。结论：所建立的芫花药材UPLC MS含量测定方法灵敏性高,操作简便,耐用性好,测定结果可靠,能较好地测定芫花药材中微量二萜类成分。     

HPLC法测定沉香叶中芫花素含量研究

目的:测定沉香叶中黄酮类化合物主要成分芫花素的含量。方法:采用HPLC法测定沉香叶中芫花素的含量,色谱条件为:Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇:水=85:15,二级管阵列检测器波长扫描范围200~200nm,确定337 nm为检测波长,流速:1.0 ml/min,柱温:25℃,进样量10μl。结果:测得沉香叶中芫花素含量为:0.147%(n=6),RSD%=2.72%,平均回收率95.37%,RSD%=1.28%。结论:本法简便,准确,可用于沉香叶中芫花素的含量测定。     

了哥王中芫花素含量的高效液相色谱法测定

目的 建立了哥王中芫花素含量测定方法,为了哥王的质量评价提供依据.方法 采用HPLC法测定其芫花素的含量,色谱柱:Alltech ODS (4.6 mm ×250 mm, 5 μm);流动相:甲醇-0.2 %磷酸水溶液 (体积比55∶45);流速为1.0 ml·min-1;检测波长346 nm,柱温为35 ℃;进样量10 μl.结果 芫花素在0.24～2.40 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,其回归方程为Y=84 069X+34.648,r=0.999 8.平均回收率为100.57%,RSD=1.76%(n=5).结论 该法具有操作简便准确,回收率好,精密度、重复性高,分析快速的优点,可作为了哥王药材的质量控制方法.     

不同炮制方法对芫花中4种黄酮苷元含量的影响

目的:采用高效液相色谱法分析芫花不同炮制品中4种黄酮苷元成分的含量,研究不同炮制方法对4种成分的影响。方法:采用Hanbon Hedera C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相甲醇-0.4%醋酸水溶液(70∶30),流速1.0mL.min-1,柱温30℃,检测波长338nm。结果:在线性范围内,木犀草素、芹菜素、3'-羟基芫花素、芫花素4种化合物分离度良好。在相应浓度范围内,4种化合物线性关系良好,r均在0.999 8以上;精密度RSD≤1.64%;平均加样回收率为99.69%～101.70%。结论:该方法快速、准确,适用于芫花不同炮制品中4种化学成分的定量分析。在7种炮制方法中,醋制法(药典)较其他6种方法能明显提高木犀草素、芹菜素、3'-羟基芫花素、芫花素的含量,同时能提高总黄酮苷元含量。     

HPLC-MS测定芫花炮制前后5种成分含量变化

目的： 建立HPLC-MS同时测定芫花中木犀草素、芹菜素、羟基芫花素、芫花素以及芫花酯甲5种化学成分含量的方法,分析炮制前后含量的变化。方法： 采用液质联用法,质谱采用大气压电喷雾离子源,选择性负离子模式监测。色谱柱为Agilent Zorbax C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,流动相为0.05%甲酸乙腈（A）-0.05%甲酸水（B）,流速0.6 mL·min^-1,柱温30℃,进样量2 μL。结果： 芫花炮制后5种毒效成分均发生了一定程度的变化。3种黄酮类有效成分木犀草素、羟基芫花素以及芫花素炮制后含量升高,二萜原酸酯甲代表成分芫花酯甲炮制后含量降低,黄酮类成分芹菜素经炮制后含量也发生了下降。结论： 该方法简单、灵敏、准确,为芫花及其炮制品的质量评价提供了有效的方法。     

高效液相色谱法测定五柴颗粒中五昧子甲素的含量

目的：研究五柴颗粒中五味子甲素含量的测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱C18（4．6mm×250mm,5um）;流动相为甲醇;流速1．0m1．mm-1;柱温40℃：检测波长250nm。结果：五味子甲素线性范围是0．043-0．431,r=0．9999,平均回收率99．5％,RSD=0．67％（n=6）。结论：该法可用于测定五柴颗粒中五味子甲素的含量。     

火把花药材中不同部位雷公藤甲素的含量测定

目的：应用高效液相色谱法测定火把花药材中不同部位雷公藤甲素的含量。方法：采用Diamonsil—TMC18色谱柱（5μm,250mmx4．6ram）,雷公藤甲素的流动相为乙腈一水（25：75）,流速1．0mlMmin,检测波长220nm。结果：雷公藤甲素在进样量0．01251xg～0．37501xg范围内线性关系良好（r=0．9997）;平均加样回收率为98．54％,RSD=O．58％（rl=7）。结论：火把花药材不同部位雷公藤甲素的含量差异明显：皮〉根〉茎〉叶。可为火把花药材的选材、质量评价与控制以及进一步开发利用提供依据。     

芫花枝条木脂素化学成分研究

目的：研究芫花枝条中木脂素类化学成分。方法：采用硅胶、凝胶、反相硅胶、制备薄层色谱等方法对芫花枝条中的木脂素类成分进行分离纯化,通过谱学分析技术进行化合物结构鉴定。结果：分离鉴定了8个木脂素类化合物,分别鉴定为：芝麻脂素（1）、紫丁香树脂酚（2）、落叶松脂醇（3）、左旋松脂醇（4）、荛花酚（5）、salicifoliol（6）、vladinol D（7）、异落叶松脂醇（8）。结论：化合物8为首次从芫花枝条中分离得到,化合物1、5、6、7为首次从瑞香科植物中分离得到。     

浙产虎杖根茎与根中大黄素含量比较

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定浙产虎杖根茎与根中大黄素含量的方法,并比较根茎与根中的大黄素含量。方法:采用超声提取法制备供试品溶液,运用高效液相色谱法测定虎杖根茎与根中大黄素含量。Zorbax XDB-C18色谱柱;流动相为甲醇-1%冰醋酸(70∶30);检测波长:254nm;流速:1.5 mL.min-1;柱温:40℃;进样量:20μL。结果:大黄素进样在1μg.mL-1～500μg.mL-1浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9995),加样回收率为97.56%,RSD为2.72%(n=6)。浙产虎杖根茎与根中大黄素含量分别为22.965mg.g-1和16.285mg.g-1。结论:本法适用于虎杖中大黄素含量的检测。浙产虎杖根茎与根中大黄素含量丰富且存在差异。     

Isolation of flavonoids, a biscoumarin and an amide from the flower buds of Daphne genkwa and the evaluation of their anti-complement activity

As part of an ongoing study aimed at identifying the anti-complement active compound from the flower buds of Daphne genkwa, ten flavonoids, one biscoumarin and one amide were isolated. Their structures were identified from spectroscopic and physicochemical data as genkwanin 5-O-beta-d-primveroside (1), apigenin 7-O-beta-d-glucuronide (2), genkwanin 5-O-beta-d-glucopyranoside (3), apigenin 5-O-beta-d-glucopyranoside (4), genkwanin (5), apigenin (6), luteolin 7-methyl ether (7), luteolin (8), daphnoretin (9), velutin (10), 7-methoxyacacetin (11) and aurantiamide acetate (12). Among them, compounds 9, 10 and 12 were isolated from this plant for the first time. The anti-complement activity of these compounds was tested against the classical pathway of the complement system. Among the compounds, daphnoretin (9) exhibited significant anti-complement activity with an IC(50) value of 11.4 microm, whereas the other compounds were not active in the assay.     

Daphnane diterpene esters isolated from flower buds of Daphne genkwa induce apoptosis in human myelocytic HL-60 cells and suppress tumor growth in Lewis lung carcinoma (LLC)-inoculated mouse model

In this study, two daphnane diterpene esters isolated from the flower buds of Daphne genkwa, genkwadaphnin (1) and yuanhuacine (2), were assessed with regard to their apoptotic activity in human promyelocytic HL-60 cells. Both 1 and 2 were demonstrated to activate the apoptotic process, including DNA fragmentation, chromatin condensation, and sub-G1 hypodiploidy. In our immunoblotting analysis, treatment with compounds 1 and 2 resulted in the cleavage of procaspase-3 and poly(ADP-ribose)polymerase (PARP) into active forms, and the expression of Bcl-2 proteins was shifted toward apoptosis; the expression of the pro-apoptotic protein, Bax, was increased, and the expression of Bcl-2 and Bcl-XL, both anti-apoptotic proteins, were suppressed in a dose-dependent manner. The administration (ip) of the compounds to Lewis lung carcinoma (LLC)-inoculated mice evidenced a significant inhibition of tumor growth (volume), with reductions of 47.9% and 63.1% (1), and 24.2% and 45.8% (2) at concentrations of 0.1 mg/kg and 0.5 mg/kg, as compared with the control mice. These results indicate that compounds 1 and 2 are potent apoptotic constituents of Daphne genkwa, and might be potent as anti-tumoric agents.     

炮制对芫花毒性和药效的影响

芫花为毒性较强的中药，为保证临床用药安全有效，须炮制后供用。本文探讨炮制对芫花毒性和药效的影响。结果表明：醋炙品毒性较小，利尿作用较强。芫花素及其模拟醋炙品均有镇咳祛痰作用，作用强度二者无显著差异。芫花酯甲及其模拟醋炙品１∶１×１０^－５～１×１０^－６浓度均可引起离体子宫及肠管收缩，但二者作用强度未见明显差异。对未孕大鼠及妊娠子宫作用比较，妊娠大鼠子宫更敏感。     

舒肺贴提取工艺优选研究

目的：优选复方制剂舒肺贴中芫花、延胡索等药物的提取工艺。方法：采用单因素考察、正交试验,以高效液相色谱法测定提取液中芫花素的含量,优选最佳提取工艺。结果：70%乙醇10倍量回流提取3次,每次1 h为最佳提取工艺。结论：优化后的工艺合理、稳定、可行,适于舒肺贴中芫花等药物的精制提取。     

6种蓼科植物药材大黄素含量比较

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定大黄素含量的方法,并比较6种蓼科植物大黄素含量。方法:采用超声提取法制备供试品溶液,运用高效液相色谱法测定蓼科植物中大黄素含量。Zorbax XDB-C18色谱柱;流动相为甲醇-1%冰醋酸(70∶30);检测波长:254nm;流速:1.5 mL.min-1;柱温:40℃;进样量:20μL。结果:大黄素进样在1μg.mL-1～500μg.mL-1浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9995),加样回收率为97.52%,RSD为2.40%(n=6)。虎杖根茎与根中大黄素含量分别为22.965mg.g-1和16.285mg.g-1。酸模根茎与根中大黄素含量分别为2.5966mg.g-1和2.7204mg.g-1。金荞麦根茎与根中大黄素含量分别为0.029mg.g-1和0.0682mg.g-1。羊蹄根茎与根中大黄素含量分别为1.4634mg.g-1和1.5796mg.g-1。首乌藤(3年)大黄素含量为3.367mg.g-1。何首乌根大黄素含量为2.0947mg.g-1。结论:本法适用于蓼科植物药材中大黄素含量的检测。虎杖根茎与根中大黄素含量最高,是提取大黄素的理想原料药材。     

紫芫花化学成分研究

 目的 研究瑞香科植物紫芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)干燥花蕾的化学成分。方法 对紫芫花的体积分数95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、凝胶Sephadex LH-20等色谱手段进行化学成分的分离纯化,通过理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果 分离得到12个化合物,鉴定了其中10个化合物,分别为芹菜素(apigenin, 1)、芫花素(genkwanin, 2)、刺槐素(4′-O-methylapigenin, 3)、椴苷[kaempferol,3-O-β-D-(6-O-trans-p-coumaroyl)- glucopyranoside,4]、对羟基苯甲醛(4-hydroxybenzaldehyde, 5)、对羟基桂皮酸甲酯(trans-p-hydroxy cinnamic methyl ester, 6)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid, 7)、对羟基桂皮酸(p-hydroxy cinnamic acid, 8)、苄基葡萄糖苷（benzyl-glucopyranoside, 9）和苯乙基葡萄糖苷（phenylethyl-glucopyranoside,10）。结论 化合物5~10为首次从该植物中分离得到。