以电针对照观察针刀干预对膝骨关节炎兔股直肌的修复作用

目的:探讨针刀对于膝骨关节炎(KOA)兔股直肌萎缩的修复作用。方法:雄兔随机分为针刀组(A)、电针组(EA)、正常组(N)和模型组(M),各9只。采用左后肢膝关节制动6周制备退行性膝骨关节炎模型。N组、M组不予干预,A组、EA组各干预4周。测量兔大腿围度并用Western Blot法观测兔股直肌中Akt、mTOR、p70s6k蛋白含量。结果:腹股沟下缘大腿围度M组显著小于N组(P 0. 01),A组大于M组(P 0. 05); M组较N组股直肌中mTOR、p70s6k、Akt蛋白的表达水平明显下降(P 0. 01或P 0. 05);股直肌Akt蛋白表达:A组与EA组相比M组显著升高(P 0. 01);股直肌mTOR蛋白表达:相比M组,A组与EA组升高(P 0. 01或P 0. 05);股直肌p70s6k蛋白表达:A组较M组显著升高(P 0. 05),而EA组与M组比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:针刀通过修复萎缩的股直肌,改善膝周软组织的生物力学,促进膝关节的恢复。     

针刀干预对膝骨关节炎模型兔股直肌p16、p21表达的影响

目的:观察针刀治疗后膝骨关节炎(KOA)兔股直肌内p16、p21蛋白表达的变化，探讨针刀治疗对KOA兔股直肌细胞衰老的抑制作用。方法:清洁级新西兰雄兔24只随机分为针刀组、电针组、正常组和模型组，每组6只。采用改良Videman左后肢膝关节制动制备KOA兔模型。针刀组和电针组各干预3周后，用改良Lequesne MG指数评分和膝关节被动活动度(PROM)进行行为学评价，HE染色法观察光镜下股直肌肌肉及肌腱病理学变化并用Western blot法检测股直肌中p21、p16的蛋白表达。结果:与正常组相比，模型组兔Lequesne MG评分显著升高，PROM显著降低(P <0.01);光镜下股直肌肌束排列紊乱，有炎细胞浸润，肌纤维横截面积显著减少(P <0.01)，肌细胞数量显著增多(P <0.01); p16和p21的蛋白表达上调(P <0.01,P <0.05)。与模型组相比，针刀组与电针组Lequesne MG评分显著降低，PROM显著升高(P <0.01);光镜下见肌细胞再生，炎细胞浸润减轻，肌纤维横截面积显著增多，肌细胞数量显著减少(P <0.01)。p16和p21蛋白均呈不同程度降低(P <0.01,P <0.05)。结论:针刀干预可改善膝关节周围骨骼肌力学性能，促进KOA的恢复，其机制可能与下调p16、p21表达和抑制股直肌细胞衰老以修复萎缩的股直肌有关。     

针刀干预对KOA兔关节软骨病理学及股四头肌收缩性能的影响

目的:通过观察针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔HE染色及Mankin评分、股四头肌收缩性能的影响,探讨针刀治疗KOA的作用机制。方法:28只清洁级新西兰雄兔,随机分成正常组、模型组、电针组和针刀组。采用改良Videman左后肢伸直位固定制动法复制KOA模型,针刀组、电针组分别采用针刀和电针疗法治疗4周。采用光镜、电生理的方法对软骨形态学情况、股四头肌收缩性能进行检测。结果:造模后,模型组兔膝关节软骨HE染色显示软骨结构紊乱、破坏,Mankin评分较正常组明显升高(P 0. 01),股四头肌单收缩幅度和强直收缩幅度较正常均显著降低(P 0. 05或P 0. 01)。电针、针刀干预后,电针组兔膝关节软骨HE染色较模型组有所改善,Mankin评分较模型组显著降低(P 0. 01),股四头肌单收缩幅度和强直收缩幅度较模型组无显著差异(P 0. 05);针刀组兔膝关节软骨HE染色较模型组改善明显,Mankin评分较模型组显著降低(P 0. 01),股四头肌单收缩幅度和强直收缩幅度较模型组显著升高(P 0. 05或P 0. 01),且与电针组相比Mankin评分显著降低(P 0. 05),股四头肌单收缩幅度和强直收缩幅度较电针组显著升高(P 0. 05)。结论:针刀干预能改善关节软骨退变,促进关节软骨修复,并能提高股四头肌的收缩性能。提高股四头肌的收缩性能是针刀干预KOA的重要机制。     

膝关节炎模型体重与病理形态相关性及针刀干预的实验研究

目的:观察膝骨关节炎(KOA)兔模型以及针刀治疗前后体重与软骨病理形态的改变及相关性,预期初步揭示针刀治疗KOA的相关机制。方法:40只6月龄雄性新西兰兔,按随机数字表法分成空白组、模型组、针刀组和电针组,每组10只。以改良后Videman左后肢伸直位固定制动法制备KOA模型。针刀组针刺同侧股内侧肌肌腱止点、股外侧肌肌腱止点进行松解,每周2次,连续3周;电针组针刺同侧"血海""梁丘""内膝眼"和"外膝眼",每次20 min,每周3次,连续3周。分别于造模前1天、造模后1天及治疗结束后1天监测体重,随即取材进行HE染色光镜观察关节软骨病理形态学改变。结果:解剖及HE染色显示:模型组关节软骨明显失去原有光泽,甚至缺损,关节边缘纤维性粘连,关节液量明显增多;电针及针刀组均明显改善关节炎性症状;且针刀组较电针组改善更明显;其中与空白组比较,模型组、针刀组、电针组病理改变的Mankin评分显著升高(P 0. 01);与模型组对比,针刀组、电针组的Mankin评分均显著降低(P 0. 01);与电针组对比,针刀组Mankin评分显著降低(P 0. 05)。体重比较:与造模前比较,各组造模后体重均显著升高(P 0. 01);而各组造模期体重增长率组间比较未见显著差异(P 0. 05);与干预前比较,各组体重干预后均显著升高(P 0. 01);其中,与空白组比较,模型组、电针组及针刀组的体重增长率显著降低(P 0. 05);与模型组比较,针刀组的体重增长率显著降低(P 0. 05);造模期与干预期比较:空白组、模型组期间均未见显著统计学差异(P 0. 05),电针组、针刀组干预期增长率均比造模期显著降低(P 0. 05或P 0. 01)。体重比较:膝关节炎模型体重与病理形态改变存在相关趋势(P 0. 05)。结论:针刀和电针均可改善KOA兔模型膝关节早期炎性病理改变,该效应可能与其对体重增长的控制有关。     

针刀、电针对制动4周KOA兔模型股直肌-股二头肌肌肉状态及拉伸生物力学的影响

摘要：目的：探索针刀、电针治疗对早期膝骨关节炎（KOA）兔模型股直肌-股二头肌肌肉状态及拉伸生物力学的影响。方法：30只新西兰兔按体质量随机分为空白组（6只）及KOA造模组（24只）,KOA造模组应用过伸位固定制动法（改良Videman法）制动4周建立早期KOA兔模型,拆除固定后根据Lequesne评分再随机分为模型组、针刀组、电针组和西药组（每组各6只）;各组分别进行干预治疗4周。治疗结束后,应用Lequesne评分进行行为学评价,兔股直肌、股二头肌分别进行HE染色及拉伸弹性模量检测。结果：（1）与模型组相比,针刀组、电针组和西药组能明显降低Lequesne评分（P<0.01）。（2）与模型组相比,针刀组显著改善股直肌、股二头肌萎缩状态,固定视野内肌纤维数量显著减少（P<0.01）、平均横截面积显著增加（P<0.01）;电针组显著改善股二头肌萎缩状态,固定视野内肌纤维数量显著减少（P<0.01）、平均横截面积显著增加（P<0.01）。（3）与模型组相比,针刀组、电针组股直肌弹性模量（EM）显著降低（P<0.01）,股二头肌EM值减低但无统计学意义（P>0.05）。结论：针刀、电针干预早期KOA兔改善膝关节功能,减轻股直肌、股二头肌萎缩状态,促进股直肌、股二头肌拉伸生物力学的改善（尤其是股直肌）。     

针刀对膝关节骨关节炎兔软骨细胞早衰标志物p16Ink4a和p21Waf1/Cip1表达的影响

目的:观察针刀对膝关节骨关节炎(KOA)兔软骨细胞早衰标志物p16^Ink4a、p21^Waf1/Cip1表达的影响，分析针刀是否可通过抑制软骨细胞早衰治疗KOA。方法:新西兰兔随机分为正常组、模型组、针刀组和电针组，每组6只。采用改良Videman法左后肢伸直位制动制备KOA模型。针刀组选取兔左后肢膝关节股内外侧肌肌腱止点、股直肌肌腱止点、股二头肌肌腱止点及鹅足滑囊等高应力点行针刀松解治疗，1次/周，治疗3周。电针组选取兔左后肢“血海”“梁丘”“内膝眼”和“外膝眼”进行电针治疗，20 min/次，隔日1次，治疗3周。治疗前后，各组兔进行患侧膝关节Lequesne MG评分和膝关节被动活动度(PROM)检测。治疗结束后采用免疫组织化学法和Western blot法分别检测患侧膝关节软骨组织p16^Ink4a、p21^Waf1/Cip1的阳性表达和蛋白表达水平。结果:治疗前后，与正常组相比，模型组兔患侧膝关节Lequesne MG评分显著升高(P<0.01),PROM显著减小(P<0.01)。治疗...     

针刀干预对膝骨关节炎兔股二头肌细胞凋亡的影响

目的:探讨针刀松解股二头肌对膝骨关节炎(KOA)兔肌细胞凋亡的影响。方法:6月龄新西兰兔48只随机分为正常组(N)、模型组(M)、电针组(EA)和针刀组(A),KOA模型采用改良后维德曼左后肢伸直位固定制动法制动8周,于造模成功1周后分别对A组、EA组进行针刀和电针干预3周。干预结束1周后取股二头肌进行HE染色观察、TUNEL检测阳性凋亡细胞核数和Western blot检测Bax、 Caspase-3蛋白表达水平。结果:A组细胞核和间质组织的水肿、炎性肌细胞与M组相比显著改善,改善程度优于EA组。M组兔股二头肌阳性细胞核数较N组明显升高(P0.01);EA组较N组明显升高(P0.01);EA组较M组有所降低(P0.05);A组较N组明显升高(P0.01);A组较M组明显降低(P0.01);A组较EA组明显降低(P0.05)。M组兔股二头肌Caspase-3蛋白表达水平较N组明显升高(P0.01);EA组与N组比较差异无统计学意义(P0.05);A组与N组比较差异无统计学意义(P0.05);EA组较M组有所降低(P0.05);A组较M组明显降低(P0.01);A组与EA组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刀干预对KOA股二头肌细胞的凋亡有良好的调节作用,为针刀“调筋治骨”提供了新的理论依据。     

从AMPK/mTOR通路探讨人参-三七-川芎提取物对糖尿病小鼠心脏老化的保护作用机制

目的:从AMP激活的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的活化及心脏病理形态学变化、相关衰老蛋白的改变,探讨人参-三七-川芎提取物(GNC)对糖尿病小鼠心脏老化的保护作用机制。方法:C57BL/6雄性小鼠,SPF级,随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合喂食高脂饲料,造模成功后再次随机分为模型组,GNC低剂量组(0. 819 g·kg~(-1)),GNC高剂量组(1. 638 g·kg~(-1))及二甲双胍组(150 mg·kg~(-1))。每天1次,灌胃给药,连续9周,监测血糖变化。4周龄雄性C57BL/6小鼠正常喂养1周,为青年组。观察小鼠一般情况,苏木素-伊红(HE)染色结合透射电镜(TEM)观察小鼠心脏病理形态学变化,冯库萨(Von Kossa)染色判断小鼠心脏微血管钙盐沉积程度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心脏组织中AMPK/mTOR信号通路活化状态,以及衰老相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2),抑癌基因p53(p53),磷酸化抑癌基因p53(p-p53)表达。结果:与正常组比较,模型组血糖显著升高(P 0. 01);与模型组比较,各给药组血糖明显下降(P 0. 05,P 0. 01)。HE,TEM,Von Kossa 3个病理形态学实验结果显示:与正常组比较,模型组小鼠心肌细胞肥大,心肌纤维排列紊乱、灶性溶解坏死,线粒体肿胀、变性、嵴断裂、空泡变,心脏微血管结构紊乱、染色不均匀、中内膜有大量钙盐沉积;与模型组比较,各给药组小鼠病理形态学变化均有不同程度的改善。与正常组比较,模型组MMP-2,p53和p-p53蛋白表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01),p-肝激酶B1 (LKB1)/LKB1,p-AMPK/AMPK蛋白明显降低(P 0. 05,P 0. 01),p-mTOR/mTOR,p-核糖体蛋白S6激酶p70S6K/p70S6k蛋白显著升高(P 0. 01);与模型组比较,各给药组MMP-2,p53和p-p53蛋白表达明显降低(P 0. 05,P 0. 01),p-LKB1/LKB1,p-AMPK/AMPK蛋白明显升高(P 0. 05,P 0. 01),p-mTOR/mTOR,p-p70S6k/p70S6k蛋白明显降低(P 0. 05,P 0. 01)。结论:STZ联合高脂饲料能够诱导小鼠心脏老化,GNC能够改善糖尿病小鼠心脏老化,其作用机制可能与调控AMPK/mTOR通路相关蛋白表达有关。     

针刀、电针和圆利针对膝骨关节炎模型兔股直肌Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响

目的:从细胞凋亡角度探讨不同干预方法对制动致关节损伤的治疗机制。方法:6月龄新西兰兔随机分为正常组、模型组、针刀组、电针组和圆利针组,每组9只,用改良的Videman左后肢伸直位固定制动法建立兔膝关节损伤模型。电针组电针左侧"阳陵泉"-"阴陵泉""内膝眼"-"外膝眼",每次20min,隔日1次,每周3次,共3周;针刀组从兔左侧内、外侧副韧带及髌韧带的中点前缘进针,刀口线与韧带方向平行,分别松解5次,每周1次,共3次;圆利针进针点与针刀组一致,分别松解5次,每周1次,共3次。分别于造模后4、8和12周各时间窗评定各组兔双侧膝关节被动活动范围。采用Western blot法检测各组兔患肢股直肌B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关的X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果:造模后4周出现稳定的实验性膝骨关节炎兔模型。造模后4、8、12周时,与正常组比较,模型组兔患侧膝关节被动活动度明显降低(P0.01);治疗结束后,与模型组相比,针刀组、电针组和圆利针组兔患侧膝关节被动活动度显著提高(P0.01)。各组患肢股直肌Bcl-2蛋白表达的变化差异无统计学意义(P0.05)。模型组患肢股直肌Bax、Caspase-3蛋白表达较正常组明显升高(P0.05),Bcl-2/Bax比值明显降低(P0.05);针刀组、圆利针组Bax、Caspase-3蛋白表达较模型组明显降低(P0.05),Bcl-2/Bax比值明显升高(P0.05);电针组上述各指标的变化与模型组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刀、圆利针和电针干预膝骨关节炎兔均有治疗效果,针刀和圆利针可通过下调Bax、Caspase-3蛋白表达,升高Bcl-2/Bax比值抑制膝骨关节炎兔股直肌细胞凋亡,从而发挥治疗作用,这与电针治疗关节损伤的机制存在差异。     

基于Wnt3a/β-catenin信号通路探讨针刀对膝骨关节炎兔股直肌纤维化的影响

目的:观察针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔股直肌Wnt3a/β-catenin信号通路调控作用及纤维化的影响,探讨针刀治疗KOA的可能作用机制.方法:24只健康雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组,每组8只.改良Videman法左后肢伸直位石膏固定制动6周复制KOA模型,Lequesne MG膝关节级别评分、X线...     

蠲痛饮对子宫内膜异位症大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的影响

目的:探讨蠲痛饮对子宫内膜异位症(EMS)大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶分子(mTOR)信号通路蛋白的影响。方法:采用自体子宫内膜移植法建立EMS大鼠模型,随机将48只大鼠分为正常组、模型组、蠲痛饮低、中、高剂量组、通路阻滞剂组(LY294002) 6组,分别给予蠲痛饮高、中、低剂量(42. 9,14. 3,4. 8 g·kg~(-1))灌胃,通路阻滞剂组予PI3K通路阻滞剂LY294002(0. 04 g·kg~(-1))腹腔注射,正常组及模型组每天按照10 mL·kg~(-1)给予生理盐水灌胃,各组持续用药28 d。应用透射电镜观察大鼠异位内膜组织超微结构,免疫组化法检测异位内膜组织PI3K,Akt,mTOR蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测核糖体蛋白S6激酶(p70S6K) mRNA相对含量。结果:与正常组比较,模型组异位内膜PI3K,Akt,mTOR蛋白和p70S6K mRNA的表达都明显升高(P 0. 05);与模型组比较,蠲痛饮中、高剂量、通路阻滞剂组干预后PI3K,Akt,mTOR蛋白和p70S6K mRNA的表达明显降低(P 0. 05)。透射电镜下可见蠲痛饮低、中、高剂量组和通路阻滞剂组均能促进腺上皮细胞萎缩或欠整齐,微绒毛减少或消失,胞核固缩,胞内线粒体肿胀或减少,间质细胞凋亡。结论:PI3K/Akt/mTOR信号通路参与子宫内膜异位症发生;蠲痛饮可能通过下调PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达及p70S6K mRNA表达,从而抑制上皮间质细胞活性,促进细胞凋亡,治疗子宫内膜异位症。     

不同针刺干预膝骨关节炎模型大鼠对NF-κB信号通路的调控影响

目的:探讨不同针刺治疗KOA的作用机制及对NF-κB信号通路的调控状态。方法:木瓜蛋白酶法建立KOA模型,将40只大鼠随机分为正常组、造模组、针刀组、圆利针组,每组10只。正常组正常饲养,不做任何干预;造模组造模后不做任何干预;针刀组采用针刀干预;圆利针组采用与针刀相同直径的圆利针干预,两种干预均每周1次,共治4周。治疗前后对各组大鼠进行行为学评价。治疗结束后,取出右后膝滑膜组织,用于PCR检测,另取软骨,评价软骨破坏情况。结果:干预前各组间行为学评分造模组、针刀组、圆利针组均显著高于正常组(P 0. 01);干预后针刀组、圆利针组均显著低于造模组(P 0. 01)。软骨组织学评分针刀组与圆利针组差异无统计学意义(P 0. 05),造模组、针刀组、圆利针组均显著高于正常组(P 0. 01),针刀组、圆利针组均显著低于造模组(P 0. 01)。PCR表达水平:NF-κBp65 mRNA表达在针刀组、圆利针组和造模组均显著高于正常组(P 0. 01),IKB-αmRNA表达在针刀组、圆利针组均高于造模组(P 0. 05),针刀组高于圆利针组和造模组(P 0. 05)。结论:针刀干预可改善滑膜组织NF-κB信号通路的高调控状态,从而抑制滑膜炎性因子和介质的合成与分泌,这有可能是针刀实现其治疗KOA的作用机制之一。     

针刀、电针和圆利针对实验性膝骨关节炎兔关节软骨病理和超微结构的影响

目的从形态学角度探讨不同干预方法对制动致关节损伤的治疗机理,观察针刀、电针和圆利针干预对关节软骨形态学的影响。方法 6月龄新西兰兔随机分为正常组、模型组、针刀组、电针组和圆利针组,每组9只,用改良的Videman法左后肢伸直位固定制动法建立兔膝关节损伤模型。电针组电针KOA兔左侧"阳陵泉—阴陵泉""内膝眼—外膝眼",疏密波,连续波,频率2/100 Hz,强度3 mA,每次20 min,隔日1次,1周3次,共6周;针刀组KOA兔左侧内、外侧副韧带及髌韧带的中点前缘、起、止点进入,刀口线与韧带方向平行,分别松解5次,每周1次,共6次;圆利针进针点与针刀组一致,分别松解5次,每周1次,共6次。通过HE染色在普通光学显微镜下观察实验性KOA兔关节软骨潮线及间隙、钙化层及深层软骨改变情况;并于扫描电镜下观察关节软骨表面超微结构变化。结果关节软骨HE染色切片显示,针刀、电针和圆利针有效抑制了软骨基质的退变,促进了软骨的再生修复,且针刀组效果优于电针组和圆利针组,圆利针组优于电针组;扫描电镜下,可见三种疗法均有效改善了软骨表面结构的破坏,且针刀组优于电针组和圆利针组,圆利针组优于电针组。结论针刀、电针和圆利针均能有效改善实验性KOA模型兔软骨组织的损伤情况,并促进软骨细胞的再生修复,进而恢复组织的正常结构和功能,以松解法为主的针刀和圆利针的疗效优于电针。     

针刀干预对膝骨关节炎兔滑膜纤维化的影响

目的：探讨针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔滑膜纤维化的影响。方法：新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组、电针组,各8只。采用改良Videman左后肢伸直位固定法制动4周,制备模型。空白、模型组不干预,针刀、电针组各干预3周。测量被动活动范围(PROM)；天狼猩红染色观察滑膜胶原沉积的情况；Western Blot法检测膝关节滑膜组织TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达情况。结果：与模型组比较,针刀、电针组PROM明显增大(P＜0.01),针刀组大于电针组(P＜0.05)。与模型组比较,针刀、电针组滑膜组织胶原沉积减轻。模型组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达显著高于正常组(P＜0.01)；针刀、电针组可明显抑制TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ的表达(P＜0.01)；与电针组比较,针刀组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。结论：针刀通过调控TGF-β1的表达,从而下调α-SMA和COL-Ⅰ的表达,减轻滑膜纤维化达到治疗KOA的目的。     

针刀对膝骨关节炎兔韧带细胞中TGF-β1/Smads信号通路的影响

摘要：目的:探讨针刀松解股二头肌对膝骨关节炎（KOA）兔肌细胞凋亡的影响。方法:6月龄新西兰兔48只随机分为正常组（N）、模型组（M）、电针组（EA）和针刀组（A）,KOA模型采用改良后维德曼左后肢伸直位固定制动法制动8周,于造模成功1周后分别对A组、EA组进行针刀和电针干预3周。干预结束1周后取股二头肌进行HE染色观察、TUNEL检测阳性凋亡细胞核数和Western blot检测Bax、 Caspase-3蛋白表达水平。结果:A组细胞核和间质组织的水肿、炎性肌细胞与M组相比显著改善,改善程度优于EA组。M组兔股二头肌阳性细胞核数较N组明显升高（P<0.01）;EA组较N组明显升高（P<0.01）;EA组较M组有所降低（P<0.05）;A组较N组明显升高（P<0.01）;A组较M组明显降低（P<0.01）;A组较EA组明显降低（P<0.05）。M组兔股二头肌Caspase-3蛋白表达水平较N组明显升高（P<0.01）;EA组与N组比较差异无统计学意义（P>0.05）;A组与N组比较差异无统计学意义（P>0.05）;EA组较M组有所降低（P<0.05）;A组较M组明显降低（P<0.01）;A组与EA组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:针刀干预对KOA股二头肌细胞的凋亡有良好的调节作用,为针刀“调筋治骨”提供了新的理论依据。     

电针对PTEN/mTOR信号通路在脊髓损伤中表达的影响

目的观察电针对脊髓损伤小鼠PTEN/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。方法 64只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组、针刺组和电针组(疏密波2/100 Hz,强度0. 2 mA,15 min),每组16只,选择督脉大椎、命门穴进行治疗,1次/d,治疗28 d,免疫荧光,蛋白印迹法测定脊髓PTEN、pmTOR蛋白表达。结果与脊髓损伤组同期比较,电针组3、7、14 d小鼠脊髓中PTEN的表达降低(P 0. 05,P 0. 01,P 0. 01)。针刺组3、7、14 d小鼠脊髓中PTEN的表达降低(P 0. 05,P 0. 05,P 0. 05);电针组3 d、7 d、14 d、28 d小鼠脊髓中mTOR磷酸化水平增高(P 0. 01,P 0. 05,P0. 01,P 0. 01);针刺组3 d、7 d、28 d小鼠脊髓中mTOR磷酸化水平增高(P 0. 01,P 0. 05,P 0. 05)。结论督脉电针可促进脊髓损伤小鼠pmTOR水平,抑制PTEN蛋白的表达。     

参芪复方介导IGF-1/PI3K/Akt通路干预糖尿病大鼠骨骼肌病变的实验研究

目的:观察参芪复方对2型糖尿病大鼠骨骼肌的保护作用及其分子机制探索。方法:GK大鼠40只,随机分为模型组、参芪复方组及西格列汀组,另设Wistar大鼠10只作为正常对照组。除正常对照组给予普通饮食外,其余各组给予高脂饮食,连续8周,建立2型糖尿病模型。造模同时开始分组给药,期间监测动物一般情况及血糖水平,试验结束后腹主动脉采血,分离血清,检测IGF-1含量,取腓肠肌称取湿重及观察其病理形态学改变,Western blot法检测腓肠肌PI3K,Akt及p70s6k蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠腓肠肌湿重、IGF-1、PI3K、Akt以及p70s6k明显降低(P0.05),且病理观察发现腓肠肌细胞萎缩,有较大面积水肿,肌间淋巴细胞浸润。经参芪复方治疗后,GK大鼠腓肠肌湿重、IGF-1、PI3K、Akt以及p70s6k均有明显升高,差异有统计学意义(P0.05),且病理观察未见明显肌细胞萎缩、水肿,炎细胞浸润少。结论:参芪复方对糖尿病骨骼肌有保护作用,其可能的机制是激活IGF-1/PI3K/Akt蛋白质合成代谢相关通路。     

针刀松解法对膝骨性关节炎兔软骨基质金属蛋白酶-3和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响

目的观察针刀松解法对膝骨关节炎(KOA)兔软骨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)的影响,探讨针刀治疗KOA的机制。方法将40只清洁级6月龄健康新西兰兔随机取10只为空白组,剩余30只统一造模,关节制动方法制造KOA模型,造模成功后将30只兔随机分为模型组、针刀组和电针组,每组10只。针刀组以膝关节内外侧副韧带及髌韧带为松解对象,以纵疏、横剥法进行针刀松解,每星期1次,共治疗3次;电针组取阴陵泉、阳陵泉、内膝眼、犊鼻穴,电针频率2~100 Hz,强度为3 m A,每次电针20 min,每星期治疗3次,共治疗3星期。光镜观察软骨形态改变,Western blot法检测膝关节软骨Col-Ⅱ、MMP-3蛋白表达水平。结果 HE染色模型组家兔膝关节滑膜存在不同程度增生、水肿,光镜下见模型组关节软骨呈明显退行性变。电针组和针刀组软骨组织损伤减轻,且有修复趋势。针刀组兔膝关节软骨破坏程度明显减轻。针刀组Col-Ⅱ蛋白表达较模型组明显升高(P0.01);针刀组Col-Ⅱ蛋白表达与电针组比较,差异具有统计学意义(P0.05);模型组Col-Ⅱ蛋白表达水平降低,与其他各组比较差异均有统计学意义(P0.05)。模型组MMP-3蛋白表达较空白组明显升高(P0.01);针刀组MMP-3蛋白表达较空白组降低,但无统计学意义(P0.05);针刀组MMP-3蛋白表达与模型组和电针组比较,差异均具有统计学意义(P0.01,P0.05)。结论针刀松解治疗KOA兔,能够使软骨MMP-3水平下降,Col-Ⅱ表达水平升高,从而阻抑软骨退变,起到治疗作用。     

SWE评估针刀松解法对膝骨关节炎模型兔MCL、LCL弹性模量的影响

目的:观察针刀干预腘绳肌对KOA模型兔膝关节内外侧副韧带超声弹性模量的变化,探讨针刀松解法对内外侧副韧带力学性能的影响。方法:6月龄新西兰雄兔28只,随机数字表法分为正常组、模型组、针刀组、电针组共4组,每组7只。采用改良Videman左后肢伸直位固定法制备KOA模型,制动8周。电针组取穴“曲泉”“委阳”“内膝眼”“外膝眼”,隔天治疗1次,针刀组干预腘绳肌,每周治疗1次,两组各干预3周。采用HE染色光镜观察内外侧副韧带的形态变化、实时剪切波超声弹性成像技术量化评估内外侧副韧带的超声弹性模量。结果:MCL超声弹性模量比较:对比正常组,模型组MCL超声弹性模量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);对比模型组,针刀组、电针组MCL超声弹性模量上升,差异无统计学意义(P>0.05);对比电针组,针刀组MCL超声弹性模量上升,差异无统计学意义(P>0.05),但上升趋势更接近正常组。LCL超声弹性模量比较:对比正常组,模型组LCL超声弹性模量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);对比模型组,针刀组、电针组LCL超声弹性模量上升,差异具有统计学意义(P<0.05);对比电针组,针刀组LCL超声弹性模量上升,差异无统计学意义(P>0.05),但上升趋势更接近正常组。结论:针刀干预腘绳肌可提高KOA兔膝关节内外侧副韧带的超声弹性模量,改善KOA兔内外侧副韧带的力学性能。     

针刀干预对膝骨关节炎兔关节腔内压和滑膜血管增生的影响

目的：探讨针刀对于膝骨关节炎(KOA)兔关节腔内压和滑膜血管增生的作用。方法：新西兰雄兔随机分为正常组、模型组、针刀组和电针组,各7只。左后肢膝关节制动6周制备退行性膝骨关节炎模型。正常组、模型组不予干预,针刀组、电针组各干预3周。测量兔关节腔内压,用HE染色法观察兔滑膜形态学,并用Western Blot技术观测兔滑膜中HIF-1α、VEGF蛋白含量。结果：与正常组相比,模型组关节腔内压显著升高（P<0.01）,滑膜HE染色出现血管增生改变,滑膜HIF-1α、VEGF蛋白含量显著升高（P<0.01）;干预结果表明,与模型组相比,针刀组、电针组关节腔内压显著降低（P<0.01）,滑膜HE染色血管增生减轻,滑膜HIF-1α、VEGF蛋白含量显著降低（P<0.01或P<0.05）;与电针组相比,针刀组关节腔内压显著降低（P<0.01）,滑膜HE染色血管增生减少明显,滑膜VEGF蛋白含量明显降低（P<0.05）,HIF-1α蛋白含量有下降趋势,无统计学差异（P>0.05）。结论：针刀通过降低关节腔内压,进而减少滑膜血管增生,发挥对KOA治疗作用。