针刀干预对KOA兔关节软骨病理学及股四头肌收缩性能的影响

目的:通过观察针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔HE染色及Mankin评分、股四头肌收缩性能的影响,探讨针刀治疗KOA的作用机制。方法:28只清洁级新西兰雄兔,随机分成正常组、模型组、电针组和针刀组。采用改良Videman左后肢伸直位固定制动法复制KOA模型,针刀组、电针组分别采用针刀和电针疗法治疗4周。采用光镜、电生理的方法对软骨形态学情况、股四头肌收缩性能进行检测。结果:造模后,模型组兔膝关节软骨HE染色显示软骨结构紊乱、破坏,Mankin评分较正常组明显升高(P 0. 01),股四头肌单收缩幅度和强直收缩幅度较正常均显著降低(P 0. 05或P 0. 01)。电针、针刀干预后,电针组兔膝关节软骨HE染色较模型组有所改善,Mankin评分较模型组显著降低(P 0. 01),股四头肌单收缩幅度和强直收缩幅度较模型组无显著差异(P 0. 05);针刀组兔膝关节软骨HE染色较模型组改善明显,Mankin评分较模型组显著降低(P 0. 01),股四头肌单收缩幅度和强直收缩幅度较模型组显著升高(P 0. 05或P 0. 01),且与电针组相比Mankin评分显著降低(P 0. 05),股四头肌单收缩幅度和强直收缩幅度较电针组显著升高(P 0. 05)。结论:针刀干预能改善关节软骨退变,促进关节软骨修复,并能提高股四头肌的收缩性能。提高股四头肌的收缩性能是针刀干预KOA的重要机制。     

针刀干预对膝骨性关节炎模型兔股直肌Akt/mTOR通路的调控作用

目的:观察针刀治疗后Akt/mTOR及4E-BP1、p70s6k的基因表达变化,分析针刀修复膝骨性关节炎(KOA)模型兔股直肌细胞的机制。方法:SPF级新西兰兔随机分为正常组、模型组、针刀组和电针组,每组9只。正常组不予处理,其余3组参照改良的Videman左后腿伸直位固定制动法造模。针刀组和电针组分别治疗4周后,通过实时荧光定量PCR法检测股直肌细胞中的Akt、mTOR、4E-BP1、p70s6k基因表达。结果:造模后模型组Akt、mTOR、4E-BP1、p70s6k基因表达较正常组均明显下降(P 0. 05或P 0. 01);电针、针刀干预后,电针组mTOR、p70s6k基因表达较模型组明显上升(P 0. 01),但Akt基因表达无显著差异(P 0. 05);针刀组Akt、mTOR、p70s6k基因表达较模型组均明显上升(P 0. 05或P 0. 01)。正常组、模型组、针刀组和电针组4EBP1基因表达均无显著差异(P0. 05)。结论:针刀干预可通过上调股直肌Akt、mTOR和p70s6k的基因表达对兔KOA发挥治疗作用。     

针刀对膝骨性关节炎兔软骨细胞外基质Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖相关蛋白表达的影响

目的:观察针刀对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)兔软骨细胞外基质Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)相关蛋白表达的影响,探讨针刀治疗KOA的相关机制。方法:新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组和电针组,每组10只,以左后肢伸直位固定制动法制备KOA模型。针刀组以膝关节内、外侧副韧带及髌韧带为松解对象,以纵疏横剥法进行针刀松解,每周1次,共治疗3周;电针组电针左后肢"阴陵泉""阳陵泉""内膝眼""外膝眼",每次20min,每周治疗3次,共3周。X线观察膝关节影像学改变,光镜观察关节软骨形态学改变,Western blot法分别检测膝关节整合素β1(Integrinβ1)、Col-Ⅱ、基质金属蛋白酶3(MMP-3)及Aggrecan的蛋白表达水平。结果:X线结果显示,造模后,模型制备成功,关节病损情况属于早中期膝骨关节炎。光镜结果显示,模型组关节软骨层表面粗糙不平,表层软骨细胞稀少,细胞排列紊乱,部分软骨细胞坏死,潮线模糊或扭曲不完整,部分软骨有血管通过或血管翳生成,电针组及针刀组关节软骨组织结构均较模型组明显改善,针刀组较电针组改善更明显。Mankin评分比较,模型组较空白组明显升高(P0.01),针刀组较模型组明显降低(P0.01)。Western blot结果显示,模型组膝关节组织中Integrinβ1、Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达较空白组显著降低(P0.01),MMP-3蛋白表达显著升高(P0.01);针刀组Integrinβ1、Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达较模型组显著升高(P0.01,P0.05),MMP-3蛋白表达较模型组显著降低(P0.01);电针组Integrinβ1蛋白表达较模型组明显升高(P0.05),其它指标与模型组的差异均无统计学意义(P0.05)。结论:针刀可能通过对软骨力学环境的影响,激活整合素力学信号转导通路,促进细胞外基质Col-Ⅱ、Aggrecan蛋白表达,下调MMP-3的蛋白表达水平,阻抑软骨细胞外基质的降解,延缓软骨损伤与关节退变程度,达到治疗KOA的目的。     

针刀松解法对膝骨性关节炎兔软骨基质金属蛋白酶-3和Ⅱ型胶原蛋白表达的影响

目的观察针刀松解法对膝骨关节炎(KOA)兔软骨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)的影响,探讨针刀治疗KOA的机制。方法将40只清洁级6月龄健康新西兰兔随机取10只为空白组,剩余30只统一造模,关节制动方法制造KOA模型,造模成功后将30只兔随机分为模型组、针刀组和电针组,每组10只。针刀组以膝关节内外侧副韧带及髌韧带为松解对象,以纵疏、横剥法进行针刀松解,每星期1次,共治疗3次;电针组取阴陵泉、阳陵泉、内膝眼、犊鼻穴,电针频率2~100 Hz,强度为3 m A,每次电针20 min,每星期治疗3次,共治疗3星期。光镜观察软骨形态改变,Western blot法检测膝关节软骨Col-Ⅱ、MMP-3蛋白表达水平。结果 HE染色模型组家兔膝关节滑膜存在不同程度增生、水肿,光镜下见模型组关节软骨呈明显退行性变。电针组和针刀组软骨组织损伤减轻,且有修复趋势。针刀组兔膝关节软骨破坏程度明显减轻。针刀组Col-Ⅱ蛋白表达较模型组明显升高(P0.01);针刀组Col-Ⅱ蛋白表达与电针组比较,差异具有统计学意义(P0.05);模型组Col-Ⅱ蛋白表达水平降低,与其他各组比较差异均有统计学意义(P0.05)。模型组MMP-3蛋白表达较空白组明显升高(P0.01);针刀组MMP-3蛋白表达较空白组降低,但无统计学意义(P0.05);针刀组MMP-3蛋白表达与模型组和电针组比较,差异均具有统计学意义(P0.01,P0.05)。结论针刀松解治疗KOA兔,能够使软骨MMP-3水平下降,Col-Ⅱ表达水平升高,从而阻抑软骨退变,起到治疗作用。     

针刀治疗膝骨关节炎的实验研究

目的通过观察针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔行为学、髌韧带(PT)力学特性及膝关节软骨白介素4(IL-4)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)表达的影响,探讨针刀"调筋治骨"法治疗KOA的作用机制。方法将40只新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组和电针组,每组10只。模型组、针刀组和电针组采用改良后Videman伸直位固定法建立兔KOA模型。针刀组和电针组造模后分别给予针刀、电针治疗。造模后及治疗后采用改良Lequesne MG的膝关节级别评估法对各组进行行为学评价。治疗后取材,应用Bose Electro Force 3300疲劳试验机对PT进行拉伸、应力松弛和蠕变力学测试,应用ELISA方法检查软骨细胞IL-4表达,应用Real-time PCR法检测MMP-3、Aggrecan m RNA表达水平。结果造模后,模型组Lequesne MG评分与空白组比较,差异具有统计学意义(P0.01);针刀组、电针组Lequesne MG评分与模型组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。针刀组和电针组治疗后Lequesne MG评分与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01,P0.05);针刀组治疗后Lequesne MG评分与电针组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。模型组PT最大应力、最大位移、弹性模量及应力松弛率、蠕变率与空白组比较,差异均具有统计学意义(P0.01,P0.05)。针刀组治疗后PT最大应力、最大位移、弹性模量及应力松弛率、蠕变率与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01,P0.05);电针组治疗后弹性模量与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01)。模型组造模后IL-4含量、Aggrecan m RNA表达均显著下降,MMP-3 m RNA表达显著上升,与空白组比较差异均有统计学意义(P0.01,P0.05);针刀组及电针组治疗后IL-4含量较模型组明显升高(P0.01,P0.05),两组Aggrecan m RNA表达均有上升趋势,MMP-3 m RNA表达均有下降趋势,针刀组在调整Aggrecan、MMP-3 m RNA表达方面优于电针组,但与模型组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论针刀治疗KOA的作用机制可能是通过改善韧带力学特性,调整关节内应力环境,通过IL-4力学信号通路,调整Aggrecan、MMP-3 m RNA表达,阻抑软骨退变,从而起到"调筋治骨"的治疗作用。     

以电针对照观察针刀干预对膝骨关节炎兔股直肌的修复作用

目的:探讨针刀对于膝骨关节炎(KOA)兔股直肌萎缩的修复作用。方法:雄兔随机分为针刀组(A)、电针组(EA)、正常组(N)和模型组(M),各9只。采用左后肢膝关节制动6周制备退行性膝骨关节炎模型。N组、M组不予干预,A组、EA组各干预4周。测量兔大腿围度并用Western Blot法观测兔股直肌中Akt、mTOR、p70s6k蛋白含量。结果:腹股沟下缘大腿围度M组显著小于N组(P 0. 01),A组大于M组(P 0. 05); M组较N组股直肌中mTOR、p70s6k、Akt蛋白的表达水平明显下降(P 0. 01或P 0. 05);股直肌Akt蛋白表达:A组与EA组相比M组显著升高(P 0. 01);股直肌mTOR蛋白表达:相比M组,A组与EA组升高(P 0. 01或P 0. 05);股直肌p70s6k蛋白表达:A组较M组显著升高(P 0. 05),而EA组与M组比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:针刀通过修复萎缩的股直肌,改善膝周软组织的生物力学,促进膝关节的恢复。     

针刀治疗对颈椎病兔椎间盘软骨细胞凋亡的影响

目的:观察针刀干预对颈椎病兔椎间盘软骨细胞凋亡的影响,探讨针刀治疗颈椎病可能的疗效机制。方法:将40只新西兰兔随机分为空白组、模型组、电针组及针刀组,使用自制低头位造模装置建立颈椎病兔模型,行针刀及电针干预,针刀组选取C2～C7棘突旁开1～1.5 cm处和C2～C7棘突点的条索状物进行松解、剥离,电针组选取双侧天柱、百劳、大杼穴,进行电针干预,干预结束后观察颈椎间盘形态学改变,并采用TUNEL法检测各组动物颈椎间盘阳性细胞核数。结果:与空白组比较,模型组TUNEL阳性细胞核数目显著增加(P0.05);与模型组比较,针刀组阳性细胞核数明显减少(P0.05),电针组阳性细胞核数减少(P0.05)。结论:低头位法可增加颈椎病模型兔软骨终板凋亡细胞数目,针刀干预可显著减少颈椎间盘软骨细胞凋亡数目,这可能是针刀治疗颈椎病的疗效机制之一。     

针刀“解结法”对膝骨关节炎兔软骨形态学及影像学的影响

目的:观察针刀"解结法"对膝骨关节炎(KOA)兔软骨形态学及影像学的影响,为临床针刀治疗KOA提供实验依据。方法:健康雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组,每组8只。采用改良Videman法左后肢伸直位石膏固定制动6周复制KOA模型。针刀组采用针刀"解结法"治疗,治疗点包括"鹤顶次""髌内下""髌外下""成腓间""委阳次""阴陵次",每7 d干预1次,共干预4次。干预结束后1周,用Lequesne膝关节级别评估法评价兔左膝关节Lequesne评分;用X线和MRI影像学观察兔左膝关节间隙、积液、软骨光滑度,并进行MOAKS评分;肉眼观察左膝关节软骨表面光滑度并进行软骨肉眼观评分;用HE染色及Mankin评分评价软骨病理改变。结果:与空白组比较,模型组左膝关节Lequesne评分明显增高(P<0.05),关节间隙变窄,关节腔内积液增多、软骨面欠光滑,MOAKS评分、软骨肉眼观评分、Mankin评分均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,针刀组Lequesne评分明显降低(P<0.05),关节间隙增宽(P<0.05),关节腔积液减少,软骨面变光滑,MOAKS评分、软骨肉眼观评分、Mankin评分均明显降低(P<0.05)。结论:基于经筋理论针刀"解结法"能有效提高KOA兔模型膝关节行为能力,并修复软骨病理形态,其作用机制可能与调整关节间隙、减少关节腔积液有关。     

电针足三里对腹泻型肠易激综合征大鼠内脏敏感性及腹泻情况的影响

目的:观察电针足三里对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠内脏敏感性及腹泻情况的影响。方法:将30只SD大鼠随机分为空白组、模型组及电针组,每组10只。模型组和电针组均采用慢性束缚应激联合番泻叶煎剂灌胃的方法建立IBS-D模型,造模2w。造模成功后,电针组采用电针足三里穴干预。观察各组大鼠的的精神状态、活动情况、毛发光泽度以及体重增长等情况,测算腹泻指数,并评估所有大鼠的内脏敏感性情况。结果:与空白组相比较,模型组及电针组干预前体重增长幅度较小(P 0. 01),干预期之后电针组大鼠体重增长情况得到一定改善(P 0. 01)。与空白组相比,模型组大鼠的结直肠扩张的容量阈值显著降低(P 0. 01),与模型组相比,电针组大鼠的结直肠扩张容量阈值在电针干预后有所提高(P 0. 05),且电针组大鼠的腹泻情况也有所好转(P 0. 01)。结论:电针足三里穴能够改善IBS-D大鼠的易激惹、倦怠、体重增长缓慢的情况,改善大鼠的腹泻情况,降低内脏高敏感性。     

针刀配合手法治疗对兔膝关节炎关节软骨形体结构的影响

目的观察兔膝关节软骨形态结构的变化,探讨针刀配合手法对膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用及机理。方法将4～6月龄的新西兰兔50只,随机分为5组:治疗组、针剂组、模型组、假模组和正常组。造模1周后开始治疗。治疗组使用小针刀配合捏拿手法治疗,按针刀四步进针法对局部压痛点或病理性条索状物进行切割松解。捏拿手法由上而下捏拿兔右下肢股四头肌,每只兔子每次施术10分钟,每周1次,连续治疗5周,共5次。针剂组每周每只兔子右膝关节内注射玻璃酸钠注射液0. 6 mL,注射后屈伸膝关节20次,连用5周。模型组、假模组及正常组不作任何处理。于造模后12周末取材。肉眼观察关节软骨组织大体变化;再光镜观察软骨组织形态结构。结果以彭太平组织病理学分级标准分级评分,治疗组与针剂组的关节软骨组织病理形态改变对比,差异具有统计学意义(P 0. 05);治疗组跟针剂组的软骨细胞形态学Mankin’s评分变化对比,比较差异有统计学意义(P 0. 01)。结论针刀配合手法治疗KOA具有良好的效果,其作用机制可能是降低膝关节内骨内压,调节膝关节内血清中炎性细胞因子含量,抑制氧自由基对软骨细胞的损伤。     

不同针刺干预膝骨关节炎模型大鼠对NF-κB信号通路的调控影响

目的:探讨不同针刺治疗KOA的作用机制及对NF-κB信号通路的调控状态。方法:木瓜蛋白酶法建立KOA模型,将40只大鼠随机分为正常组、造模组、针刀组、圆利针组,每组10只。正常组正常饲养,不做任何干预;造模组造模后不做任何干预;针刀组采用针刀干预;圆利针组采用与针刀相同直径的圆利针干预,两种干预均每周1次,共治4周。治疗前后对各组大鼠进行行为学评价。治疗结束后,取出右后膝滑膜组织,用于PCR检测,另取软骨,评价软骨破坏情况。结果:干预前各组间行为学评分造模组、针刀组、圆利针组均显著高于正常组(P 0. 01);干预后针刀组、圆利针组均显著低于造模组(P 0. 01)。软骨组织学评分针刀组与圆利针组差异无统计学意义(P 0. 05),造模组、针刀组、圆利针组均显著高于正常组(P 0. 01),针刀组、圆利针组均显著低于造模组(P 0. 01)。PCR表达水平:NF-κBp65 mRNA表达在针刀组、圆利针组和造模组均显著高于正常组(P 0. 01),IKB-αmRNA表达在针刀组、圆利针组均高于造模组(P 0. 05),针刀组高于圆利针组和造模组(P 0. 05)。结论:针刀干预可改善滑膜组织NF-κB信号通路的高调控状态,从而抑制滑膜炎性因子和介质的合成与分泌,这有可能是针刀实现其治疗KOA的作用机制之一。     

针刀疗法对膝骨关节炎模型兔血清中MMP-3和MMP-13浓度的影响

目的:研究针刀对膝骨关节炎兔模型血清中基质金属蛋白酶MMP-3和MMP-13远期含量变化的影响,探讨针刀治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:将48只健康清洁6月龄新西兰兔按随机数字表法随机分为4组,每组各12只,4组分别为空白组、模型组、电针组和针刀组。空白组不参加造模,其余3组用左后肢伸直位固定制动法造成实验性膝骨关节炎的家兔模型。模型组不进行干预,电针组每周干预3次,针刀组每周干预治疗1次,两组均干预3周。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测模型兔血清中MMP-3和MMP-13的浓度。结果:模型组MMP-3、MMP-13含量明显增加,与其它组相比差异有统计学意义(P<0.05);针刀组中MMP-3、MMP-13含量降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针刀疗法能够降低膝骨关节炎模型兔血清中MMP-3和MMP-13的浓度,因此可能抑制关节软骨的破坏,控制软骨的退行性改变,达到改善膝骨关节炎的症状、治疗KOA的作用。     

电针介入时机对腰多裂肌损伤模型大鼠Foxo1、Myostatin、Myod蛋白表达的影响

目的:观察不同电针介入时机对腰多裂肌损伤大鼠多裂肌叉头蛋白(Foxo1)、肌肉生长抑制素(Myostatin)、成肌分化因子(Myod)蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、即刻电针组、24 h电针组、48 h电针组,每组8只。以多裂肌肌注0. 5%布比卡因复制腰多裂肌损伤模型。各电针组分别在造模后即刻、24 h、48 h开始电针双侧"委中""肾俞",连续干预7 d。以Western blot检测各组多裂肌Foxo1、Myostatin、Myod蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组Foxo1、Myod蛋白表达水平显著升高(P 0. 01);与模型组比较,即刻电针组、48 h电针组Foxo1、Myostatin蛋白表达水平降低(P 0. 01,P 0. 05),24 h电针组Foxo1、Myostatin蛋白表达水平显著降低(P 0. 01),Myod蛋白表达水平显著升高(P 0. 01);与24 h电针组比较,即刻电针组Myostatin蛋白表达水平升高(P 0. 05)、Myod蛋白表达水平显著降低(P 0. 01),48 h电针组Foxo1蛋白表达水平显著升高(P 0. 01)、Myod蛋白表达水平显著降低(P 0. 01)。结论:电针促进多裂肌修复的最佳介入时机可能为损伤后24 h。     

针刀干预对膝骨关节炎兔软骨细胞整合素β1表达的长期影响

目的:探讨针刀对KOA的长期作用。方法:按随机数字表法将48只兔分为空白组、模型组、针刀组、电针组各12只,后3组用伸直位固定制动法造模,治疗后取材检测软骨整合素β1mRNA、蛋白。结果:模型组整合素mRNA水平降低,较空白组比较差异有统计学意义;针刀组整合素mRNA水平上升,较空白组比较差异无统计学意义;电针组整合素蛋白水平上升,较空白组差异显著。结论:针刀可上调整合素β1基因和蛋白水平,长期观察发现其含量接近正常,即针刀的长期疗效是显著的。     

针刀干预对膝骨关节炎兔滑膜纤维化的影响

目的：探讨针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔滑膜纤维化的影响。方法：新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组、电针组,各8只。采用改良Videman左后肢伸直位固定法制动4周,制备模型。空白、模型组不干预,针刀、电针组各干预3周。测量被动活动范围(PROM)；天狼猩红染色观察滑膜胶原沉积的情况；Western Blot法检测膝关节滑膜组织TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达情况。结果：与模型组比较,针刀、电针组PROM明显增大(P＜0.01),针刀组大于电针组(P＜0.05)。与模型组比较,针刀、电针组滑膜组织胶原沉积减轻。模型组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达显著高于正常组(P＜0.01)；针刀、电针组可明显抑制TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ的表达(P＜0.01)；与电针组比较,针刀组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。结论：针刀通过调控TGF-β1的表达,从而下调α-SMA和COL-Ⅰ的表达,减轻滑膜纤维化达到治疗KOA的目的。     

针刀干预对颈椎病兔颈肌细胞凋亡的影响

目的:观察针刀干预对颈椎病兔劳损颈肌细胞凋亡的影响,揭示针刀治疗颈椎病可能的疗效机制。方法:6月龄新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组、电针组,每组各6只,采用长期低头位方法制备颈椎病模型。造模后针刀组于斜方肌起点、胸锁乳突肌乳突附着点、颈椎关节突及局部硬结或条索状物,每次选2~3个点定为针刀进针部位,针刀干预每周1次,共3次;电针组取双侧"天柱""颈百劳""大杼",毫针针刺,同侧"天柱""大杼"穴接韩氏穴位神经刺激仪,每次治疗20min,隔天1次,共3周。干预结束1周后取颈肌行TUNEL检测和Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达水平。结果:颈肌TUNEL阳性细胞核计数模型组较空白组明显升高(P0.01),针刀组较模型组、电针组明显降低(P0.01)。Western blot结果显示,各组Bcl-2蛋白表达水平差异无统计学意义(P0.05);模型组Bax蛋白表达水平较空白组明显升高(P0.01),针刀组Bax蛋白表达水平较模型组降低(P0.05);模型组Bcl-2/Bax蛋白比值较空白组降低(P0.05),针刀组Bcl-2/Bax蛋白比值较模型组、电针组升高(P0.05)。电针组各项指标与模型组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:针刀干预颈椎病可降低颈肌细胞凋亡,这可能是针刀治疗颈椎病的疗效机制之一。     

针刀干预对膝骨关节炎兔软骨血管分布及CD34、CD105、VEGF表达的影响

目的 观察针刀干预对膝骨关节炎（KOA）兔软骨血管分布及CD34、CD105、血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨其治疗KOA的机制。方法 采用改良后Videman左后肢伸直位固定法制备KOA兔模型,将28只新西兰雄兔随机等分为空白组、模型组、电针组和针刀组,每组7只。空白组不予处理,干预3周后,取软骨-软骨下骨复合体组织块进行苏木素-伊红（HE）染色观察组织学变化;免疫组织化学法观察CD34、CD105表达来计算微血管密度（MVD）;酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清及滑液VEGF蛋白表达水平。结果HE染色：软骨下骨血管异常生成,突破潮线到达非钙化软骨层。免疫组化：与空白组相比,其余3组兔CD34、CD105蛋白表达及MVD值均显著上升（P<0.01）;与模型组相比,电针组和针刀组均显著降低（P<0.01）,针刀组显著低于电针组（P <0.05）。ELISA检测：与空白组相比,模型组血清及滑液中VEGF表达水平显著增加（P <0.01）;与模型组相比,电针组和针刀组显著减少（P<0.01）,针刀组显著低于电针组（P<0.05）。结论 针刀...     

针刀干预对膝骨关节炎模型兔股直肌p16、p21表达的影响

目的:观察针刀治疗后膝骨关节炎(KOA)兔股直肌内p16、p21蛋白表达的变化，探讨针刀治疗对KOA兔股直肌细胞衰老的抑制作用。方法:清洁级新西兰雄兔24只随机分为针刀组、电针组、正常组和模型组，每组6只。采用改良Videman左后肢膝关节制动制备KOA兔模型。针刀组和电针组各干预3周后，用改良Lequesne MG指数评分和膝关节被动活动度(PROM)进行行为学评价，HE染色法观察光镜下股直肌肌肉及肌腱病理学变化并用Western blot法检测股直肌中p21、p16的蛋白表达。结果:与正常组相比，模型组兔Lequesne MG评分显著升高，PROM显著降低(P <0.01);光镜下股直肌肌束排列紊乱，有炎细胞浸润，肌纤维横截面积显著减少(P <0.01)，肌细胞数量显著增多(P <0.01); p16和p21的蛋白表达上调(P <0.01,P <0.05)。与模型组相比，针刀组与电针组Lequesne MG评分显著降低，PROM显著升高(P <0.01);光镜下见肌细胞再生，炎细胞浸润减轻，肌纤维横截面积显著增多，肌细胞数量显著减少(P <0.01)。p16和p21蛋白均呈不同程度降低(P <0.01,P <0.05)。结论:针刀干预可改善膝关节周围骨骼肌力学性能，促进KOA的恢复，其机制可能与下调p16、p21表达和抑制股直肌细胞衰老以修复萎缩的股直肌有关。     

针刀干预对膝骨关节炎兔股二头肌细胞凋亡的影响

目的:探讨针刀松解股二头肌对膝骨关节炎(KOA)兔肌细胞凋亡的影响。方法:6月龄新西兰兔48只随机分为正常组(N)、模型组(M)、电针组(EA)和针刀组(A),KOA模型采用改良后维德曼左后肢伸直位固定制动法制动8周,于造模成功1周后分别对A组、EA组进行针刀和电针干预3周。干预结束1周后取股二头肌进行HE染色观察、TUNEL检测阳性凋亡细胞核数和Western blot检测Bax、 Caspase-3蛋白表达水平。结果:A组细胞核和间质组织的水肿、炎性肌细胞与M组相比显著改善,改善程度优于EA组。M组兔股二头肌阳性细胞核数较N组明显升高(P0.01);EA组较N组明显升高(P0.01);EA组较M组有所降低(P0.05);A组较N组明显升高(P0.01);A组较M组明显降低(P0.01);A组较EA组明显降低(P0.05)。M组兔股二头肌Caspase-3蛋白表达水平较N组明显升高(P0.01);EA组与N组比较差异无统计学意义(P0.05);A组与N组比较差异无统计学意义(P0.05);EA组较M组有所降低(P0.05);A组较M组明显降低(P0.01);A组与EA组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刀干预对KOA股二头肌细胞的凋亡有良好的调节作用,为针刀“调筋治骨”提供了新的理论依据。     

针刀松解术对膝骨性关节炎软骨细胞作用分子机制实验研究

目的:本实验采用针刀松解术治疗膝骨性关节炎模型白兔,通过观察白兔对治疗的反应以及各种膝骨关节炎(KOA)相关作用分子的变化,评价针刀松解术的治疗效果,探究针刀治疗的作用靶点及相应理论依据。方法:实验动物均选用同一品种且月龄、体重基本一致的白兔共32只,其中雌兔16只,雄兔16只,并随机平均分为四组:空白组、模型组、电针组、针刀松解组。利用木瓜蛋白酶注射造KOA模型法进行造模。针刀松解组每周治疗1次,共治疗3次。电针组:电针组运用中医经络针刺理论,通电刺激时间保留在20分钟左右,共治疗1周时间。模型组:造模成功后不做任何治疗,正常饲养。空白组:不进行造模,同期正常饲养。对膝关节损坏级别的评估采用膝骨关节炎严重程度指数统一进行评估。结果:在治疗前和治疗后对实验兔的行为进行观察,对比不同治疗组经过治疗后的行为差异。对差异进行统计学分析,以统计使用针刀松解组及其他治疗组之间是否具有明显差异。结论:应用针刀松解术治疗膝骨性关节炎效果明显,其作用机制可能与IL-1、TNF-a、MMP-3等软骨细胞作用因子有关。