益气养阴方抗血管生成抑制肿瘤转移作用的研究

[目的]研究益气养阴方抗血管生成抑制肿瘤转移的效应.[方法]制备接种肿瘤细胞的鸡胚尿囊膜(CAM)模型,采用血清药理学方法制备含药血清.观察含药血清对肿瘤细胞诱导CAM血管生成的影响,并与生理盐水血清组对照.另用小鼠经肌肉接种U14子宫颈癌细胞悬液,观察小鼠实体瘤的瘤质量、抑瘤率、肺部转移率、肺部转移瘤生长情况.[结果]益气养阴方含药血清可抑制肿瘤细胞诱导CAM血管生成,与生理盐水组比较差异具显著性.益气养阴方组的肺部转移结节较模型组明显减少,并且明显改善化疗对机体的免疫损伤.[结论] 益气养阴方对肿瘤细胞诱导的CAM血管生成有明显抑制作用,并且益气养阴方对自发性转移模型有一定的抑制作用.     

益气养阴方抗肿瘤诱导CAM血管生成及分子机制的研究

目的：研究益气养阴方抗肿瘤诱导CAM血管生成及对CAM移植瘤细胞血管内皮生长因子（VEGF）和细胞基质金属蛋白酶2（MMP2）表达的效应。方法：应用免疫组织化学及其组织形态学定量分析方法对VEGF和MMP2在CAM移植瘤中的表达进行研究。结果：益气养阴方组VEGF和MMP2的表达均明显低于对照组,差异有显著性（P〈0.01）。结论：益气养阴方对肿瘤诱导的CAM血管生成有明显抑制作用,降低VEGF和MMP2的表达可能是其抑制肿瘤血管生成的主要机制之一。     

应用肿瘤双植入模型技术研究扶正消癥方的抑瘤作用及对IL-12,MMP-9表达的影响

目的:研究扶正消癥方(含药血清)对肝癌H22荷瘤小鼠的抑制肿瘤血管生成及抗肿瘤转移的作用。方法:昆明种小鼠制备正常小鼠含药血清、正常小鼠对照血清、荷瘤小鼠含药血清、荷瘤小鼠对照血清,应用肿瘤双植入模型技术建立小鼠H22肝癌移植瘤模型,除空白组外,把已制备好的各组血清分别于第4,5,6天向右侧肿瘤内注射,观察双侧肿瘤的变化并分别计算出抑瘤率,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中白细胞介素-12(IL-12)的含量,用免疫组化法结合图像分析技术检测肿瘤组织中基质蛋白金属酶-9(MMP-9)的含量。结果:扶正消癥方含药血清可使荷瘤小鼠双侧肿瘤明显缩小,与对照血清组比较(P0.01);正常动物血清与模型动物病理血清对肿瘤作用的差异无统计学意义。扶正消癥方可提高IL-12的水平并降低肿瘤组织中MMP-9的表达,与对照血清组比较(P0.01)。结论:扶正消癥方具有抑制肿瘤血管生成和抗肿瘤转移的作用,调节IL-12的水平并抑制MMP-9的表达可能是其机制之一。     

益气养阴方对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响

目的：评价益气养阴方鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。方法：制备CAM模型，比较大鼠含药血清和无药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响情况。结果：含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成产生明显抑制作用。结论：益气养阴方对活体血管的生成具有抑制作用，在肿瘤和其他病理情况下的血管形成治疗中具有一定的应用价值。     

益气化瘀解毒方及其单味药对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤血管拟态相关因子的影响

目的探讨益气化瘀解毒方及其单味药对人肝癌移植瘤血管拟态相关因子表达的影响。方法瘤细胞接种建立人肝癌移植瘤模型,随机分为益气化瘀解毒方组(全方组)、黄芪组、莪术组、重楼组、壁虎组、顺铂组及模型组,除模型组外,各给药组予相应药物干预。21d后,采用免疫组化法检测瘤组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、E-钙黏附蛋白(E-cad)表达,免疫荧光法观察血管生成拟态结构,实时荧光定量PCR检测瘤组织Twist1、Bcl-2表达。结果与模型组比较,给药后各给药组瘤体积减小(P0.05),全方组优于黄芪组、重楼组、壁虎组(P0.05);各组血管生成拟态结构荧光表达稀少,模型组、顺铂组最为明显;除黄芪组外,各给药组HIF-1α及MMP-9、MMP-2表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),全方组最为明显;全方组、黄芪组E-cad表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);全方组、重楼组、壁虎组与模型组比较Bcl-2表达明显降低(P0.05),其中全方组Bcl-2表达明显优于其他给药组(P0.05);全方组、莪术组、重楼组、顺铂组Twist1表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气化瘀解毒方及其单味药通过下调HIF-1α、Twist1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9及上调E-cad表达,从而抑制血管生成拟态形成。     

清热解毒法对小鼠Lewis肺癌瘤组织MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的：观察清热解毒中药对小鼠Lewis肺癌瘤组织金属蛋白酶基因MMP-9及其抑制基因TIMP-1表达的影响。方法：将荷Lewis瘤肺癌小鼠随机分为5组,分别给予清热药、养阴药、补肾药、健脾药,对照组予生理盐水灌胃,连续20天,第22天处死小鼠,检测不同治法的抑瘤率,对小鼠的移植瘤体积、重量和肺部转移灶数目的影响,并采用RT-PCR法检测MMP-9、TIMP-1值。结果：各给药组与对照组相比,在抑瘤率、移植瘤体积、肿瘤重量方面无明显差别;各给药组转移灶数目低于对照组,且有统计学差异;清热组具有下调MMP-9表达及上调TIMP-1表达的作用,与对照组相比有显著性差异。结论：清热解毒法能降低肺癌组织MMP-9表达,上调TIMP-1表达,从而抑制小鼠Lewis肺癌的转移;各组药物均能不同程度地抑制荷瘤小鼠肺转移灶数目,但其作用机理有待进一步研究。     

白鹤方对人胃癌裸小鼠原位移植瘤微血管密度、MMP-9表达的影响

目的观察白鹤方对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用,以及对移植瘤组织微血管密度(MVD)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 60只裸鼠建立人胃癌BGC-823原位移植瘤模型,随机分为白鹤方组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、白鹤方与5-FU联合治疗组和模型组,每组15只。白鹤方组给予白鹤方(0.2 g/ml) 0.5 ml灌胃,1次/d; 5-FU组予5-FU稀释液(6 mg/ml) 0.2 ml腹腔注射,1次/周;白鹤方与5-FU联合治疗组,予白鹤方(0.2 g/ml) 0.5 ml灌胃,1次/d,同时予5-FU稀释液(6 mg/ml) 0.2 ml腹腔注射,1次/周。模型组予0.9%NaCl溶液0.5 ml/d灌胃,1次/d。用药6周后结束实验,观察各组裸鼠原位移植瘤生长和转移情况,测瘤体质量,计算抑瘤率;电镜下观察移植瘤超微结构;免疫组化检测各组裸鼠移植瘤组织MVD和MMP-9表达情况。结果白鹤方组、5-FU组、白鹤方与5-FU联合治疗组移植瘤体质量明显低于模型组,抑瘤率分别为48.65%、47.64%和54.39%;电镜下观察发现,白鹤方组、5-FU组、白鹤方与5-FU联合治疗组胃癌细胞均出现凋亡表现;白鹤方组、白鹤方与5-FU联合治疗组移植瘤组织MVD和MMP-9表达低于5-FU组和模型组(P0.05)。结论白鹤方对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤生长和转移具有抑制作用,能降低移植瘤组织MVD,抑制微血管生成;可能是通过下调MMP-9表达而发挥作用。     

消癌解毒方对H22荷瘤小鼠血管生成相关因子的影响

目的 探讨消癌解毒方对H22荷瘤小鼠移植瘤血管生成相关因子及蛋白的影响。方法 建立H22荷瘤小鼠腹水瘤株体内移植肿瘤模型,空白组每日生理盐水灌胃,消癌解毒方低、中、高剂量组每日10,30,90 g?kg _-1灌胃,顺铂组每日1 g?kg _-1腹腔注射给药,连续给药10 d,记录瘤体体积及移植鼠体重。给药结束,取瘤体组织,称重,计算各给药组的肿瘤抑制率;通过肿瘤组织的全基因组表达谱芯片,Elisa、qRT-PCR、Western-blot观察各给药组对移植瘤的血管生成因子及相关基因STAT1、VEGF、MMP2、TGF-β、CXCL2的影响。结果 与空白组比较,顺铂组及消癌解毒方低、中、高剂量组移植瘤小鼠瘤体重量显著降低（P < 0.05）,VEGF、MMP2、TGF-β、CXCL2细胞因子水平显著降低（P < 0.05）;qPCR、western-blot实验结果表明,与空白组比较,消癌解毒方各剂量组STAT1基因及蛋白表达能够显著升高,VEGF、MMP2、TGF-β、CXCL2基因、蛋白的表达显著下降,差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论 消癌解毒方能够有效抑制H22荷瘤小鼠移植瘤生长,其中抑制肿瘤血管新生是其可能的作用机制之一。     

大黄虫丸对鸡胚尿囊膜血管新生的影响

目的:观察大黄虫丸对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生的影响。方法:采用血清药理学方法制备含药血清,观察含药血清对培养5～7 d鸡胚CAM血管生成的影响,并与生理盐水及正常血清组对照。结果:大黄虫丸含药血清可抑制CAM血管的生成,与生理盐水组比较,大黄虫丸含药血清组的血管指数明显降低(P<0.01)。结论:大黄虫丸具有抑制CAM血管新生的作用。     

益气养阴解毒方对K562/A02裸鼠移植瘤逆转作用研究

目的:研究益气养阴解毒方对K562/A02多药耐药移植瘤的逆转作用。方法:建立K562/A02裸鼠移植瘤多药耐药模型;选用维拉帕米作阳性对照,用流式细胞仪(FCM)检测各组移植瘤耐药细胞P糖蛋白(P-gp)与bcl-2的表达情况和移植瘤细胞内注射用盐酸多柔比星(ADM)蓄积浓度及移植瘤耐药细胞的凋亡情况。结果:移植瘤P-gp表达与维拉帕米组相比,生理盐水组与中药小剂量组有差异(P<0.05);bcl-2的表达与维拉帕米组相比,中药大剂量组有差异(P<0.05);益气养阴解毒方能使移植瘤耐药细胞内ADM的浓度升高。结论:益气养阴解毒方具有部份逆转白血病K562/A02移植瘤多药耐药性的作用,其逆转移植瘤裸鼠多药耐药性的机制不是通过下调肿瘤细胞膜上P-gp的表达实现的,而与降低bcl-2的表达、促进耐药细胞凋亡有关。     

养阴清热理气方及其拆方对食管癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 研究养阴清热理气方及其养阴、清热、理气3个拆方对食管癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 将57只BALB/c雌性裸鼠随机分为模型组、全方组、清热组、理气组、养阴组各10只,空白组7只,用人食管癌细胞株EC9706细胞植入裸鼠右胁皮下制造荷瘤裸鼠模型,造模后第2天开始灌胃,各用药组分别给予养阴清热理气方及其拆方,每日1次,共90d.观察各组裸鼠饮食量、体重及移植瘤体积的变化;实验结束后称量各组移植瘤重量并计算抑瘤率.结果 各用药组与模型组比较均可增强荷瘤裸鼠精神和活动状态,增加体重(P<0.01),全方组、清热组和养阴组还可提高动物食量(P<0.05).各用药组对裸鼠皮下移植瘤生长均有不同的抑制作用,瘤体体积、重量与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).各组抑瘤率依次为全方组>养阴组>清热组>理气组,全方组、养阴组抑瘤率与清热组、理气组差异有统计学意义(P<0.05).结论 养阴清热理气方及其拆方具有改善荷瘤裸鼠生存状态和抑制肿瘤生长的作用.     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后血管生成的影响

目的从血管生成的角度探讨益气养阴活血法及其代表方芪棱汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机理。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、芪棱汤去养阴药组(对照组)、芪棱汤组(治疗组)。采用颈内动脉线栓法复制大鼠脑缺血再灌注(MCAO/Reperfusion)模型。在再灌注不同时点采用免疫组织化学法测血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素(Ang)-2,CD34标记微血管计数。结果假手术组VEGF表达、Ang-2表达极弱;除缺血再灌注6h外,各相应再灌注时间点12h、1d、3d、7d,治疗组及对照组VEGF表达、Ang-2表达较模型组明显增多,且治疗组与对照组比较有显著差异。CD34标记微血管计数再灌注各时间点,治疗组、对照组与模型组比较均有显著差异;治疗组与对照组比较有显著差异。结论芪棱汤通过促进VEGF、Ang-2表达的上调,促进微血管新生,可能是其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制之一;益气养阴活血法优于益气活血法。     

益气养阴活血方治疗糖尿病肾病30例临床研究

目的：观察益气养阴活血方药治疗糖尿病肾病（DN）的疗效。方法：在常规治疗基础上以益气养阴活血方药治疗DN30例，并设对照组30例进行比较观察。结果：治疗组总有效率（76．7％）明显高于对照组（50％）。治疗组治疗后，尿蛋白排泄率、24小时尿蛋白定量明显减少（P〈0．05或P〈0．01），低密度脂蛋白胆固醇明显降低（P〈0．01）。结论：益气养阴活血方药治疗DN具有调整脂代谢、减少蛋白尿、改善肾功能及主要临床症状、延缓肾功能减退进程等作用。     

益气养阴解毒法治疗急性病毒性心肌炎

目的 观察益气养阴解毒法治疗急性病毒性心肌炎的临床疗效。方法 选择急性病毒性心肌炎门诊及住院患者60例，随机分为治疗组40例，对照组20例，治疗组采用益气养阴解毒方药，配合西医治疗，对照组采用西医常规治疗。结果 治疗组总有效率95％，对照组总有效率65％，且两组总疗效差异有显著性（P〈0．05），两组临床症状、心电图疗效差异有显著性，治疗组明显优于对照组。结论 益气养阴解毒法治疗急性病毒性心肌炎有较好的临床疗效。     

益气滋阴方治疗气阴两虚型经期延长临床观察

目的探讨益气滋阴方治疗气阴两虚型经期延长的临床意义。方法选取2018年1月—2019年1月在沈阳市第二中医医院就诊的80例经中医辨证为气阴两虚型经期延长患者,随机分为试验组和对照组。对照组40例采取常规治疗,试验组40例在对照组的基础上使用益气滋阴方进行治疗,比较2组患者的临床有效率。结果试验组临床有效率为100.0%,对照组临床有效率为85.0%,试验组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对气阴两虚型经期延长患者采取益气滋阴方进行治疗,改善临床症状,效果显著,值得推广。     

益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠模型降糖降脂作用研究

目的观察益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠模型降糖、降脂作用研究。方法将50只SPF级雄性SD大鼠随机取10只作为空白对照组,其余大鼠随机分为模型4周组、模型12周组、给药4周组、给药12周组,每组10只大鼠。模型对照组、空白组灌胃给予蒸馏水,益气养阴活血方组每天上午灌服用蒸馏水稀释的益气养阴活血方,给予18 g生药/kg,10 mL,分别于给药后4周,于干预治疗后第4周末,模型对照4周组及益气养阴活血方4周组进行标本采集,模型12周组和给药12周组给药12周后于第12周末用同样的方法进行血液标本采集。结果益气养阴活血中药对用药12周糖尿病大鼠具有降糖作用(P<0.001);给药4、12周能降低糖尿病大鼠三酰甘油含量水平(P<0.05),对胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白含量水平的影响不明显(P>0.05)。结论益气养阴活血方可通过降低血糖、三酰甘油来控制2型糖尿病及其并发症的发生发展,需要长期服用,短期服用治疗效果不明显。     

养阴益气凉血合剂及方中各组中药对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用

目的：观察养阴益气凉血合剂及方中各组药物对外源性糖皮质激素免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法：将合剂拆方分为养阴组（玄参、天花粉、黄精）、益气组（黄芪、人参）和凉血组（紫草）。用外源性糖皮质激素肌肉注射造成CRI小鼠免疫抑制后，灌服养阴药、益气药、凉血药和全方的水煎液，每组药物水煎液给药浓度均为5g生药／kg体重。测定小鼠淋巴细胞增殖功能、腹腔巨噬细胞吞噬活力和自然杀伤细胞（NK细胞）活性。结果：与模型组比较，全方组、益气组、养阴组和凉组对免疫抑制小鼠的T、B淋巴细胞增殖功能均有明显提高作用（P〈0．01）；除凉血廊组外，其余各组对免疫抑制小鼠的NK细胞杀伤活性及巨噬细胞吞噬活力均有显著提高（P〈0．01）；各组对免疫抑制小鼠的脾指数亦有提高作用，但差异无显著性意义。结论：养阴益气凉血合剂及拆方后的益气药、养阴药对免疫抑制小鼠的特异性和非特异性免疫功能都有不同程度的提高作用。其中对益气组的作用在某些方面接近全方组，其次为养阴药组。     

益气养阴活血通腑法对继发性磺脲类失效Ⅱ型糖尿病患者外周胰岛素抵抗的影响

目的：观察益气养阴活血通腑法对继发性磺脲类失效Ⅱ型糖尿病患者外周血胰岛素抵抗的影响。方法：78例患者随机分为中药组和西药组，在原磺脲类降糖药剂量不变的情况下，中药组予益气益阴活血通腑方药的水煎剂治疗，西药组服二甲双胍治疗，疗程2个月。治疗前后作标准镘头餐试验，并计算外周胰岛素敏感度（SI）、胰岛素释放率（IRG）及胰岛素敏感性指数（IAI）。结果：①中药组改善外周胰素抵抗疗效的总有效率为75．6％（其中逆转率为24．4％），降糖疗效的总有效率为73．2％，均与二甲双胍组的疗效相仿（P＞0．05）；但中药组证侯的改善较为明显。②中药组的SI与IAI显著改善（P＜0．05），而空腹胰岛素明显降低（P＜0．05），但IRG无明显改善。结论：益气养阴活血通腑法可减轻继发性磺脲类失效Ⅱ型糖尿病患者的外周胰岛素抵抗。     

益气养阴法治疗慢性疲劳综合征30例疗效观察

[目的]观察益气养阴法治疗慢性疲劳综合征(CFS)的疗效。[方法]将58例患者随机分为两组,治疗组30例,口服益气养阴基础方(黄芪、太子参、白术、茯苓、当归、白芍、生地等)治疗,对照组28例,口服三磷酸腺苷(ATP) 维生素C治疗。两组均以1个月为1个疗程,连续治疗3个疗程。[结果]显效率治疗组为60.00%,对照组为21.43%,两组比较有显著性差异(P<0.01)。[结论]中医药对慢性疲劳综合征较好的治疗作用。