冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾通道的影响

目的 观察中药复方冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾（ATP-sensitive potassium channel,KATP）通道的影响,进一步探讨冠心康保护心血管、抗心肌缺血可能的作用机制。 方法 随机选取Wistar大鼠分为正常组、模拟缺血再灌注损伤模型组、模型加格列苯脲组、模型加吡那地尔组、模型加冠心康组、模型加冠心康加格列苯脲组,每组8只。用无钙台式液灌流10 min,停灌30 min再灌注45 min模拟心肌缺血再灌注损伤模型。检测各组心肌细胞钙-镁-ATP（Ca2+-Mg2+-ATP）酶、钠-钾-ATP（Na+-K+-ATP）酶活性及全细胞膜片钳技术的电流电压钳模式记录各组心室肌细胞的ATP敏感钾通道（KATP通道）电流变化。 结果 在缺血的基础上,中药复方冠心康可使KATP通道进一步开放,通道电流明显增大,与KATP通道开放剂吡那地尔具有同等开放效应（P >0.05）。与模型组比较,冠心康组Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶含量明显增高（P <0.05）。 结论 中药复方冠心康对于心肌缺血再灌注损伤具有一定的干预作用,促进KATP通道开放,减轻Ca2+内流,抑制Ca2+超载可能是冠心康在心肌缺血过程中发挥干预作用的有效途径。     

冠心康对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞形态结构和Caspase-3活性的影响

目的观察冠心康对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞形态结构和Caspase-3活性的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型组、冠心康组、盐酸地尔硫卓组,每组10只。冠心康组灌胃给予冠心康,盐酸地尔硫卓组灌胃给予盐酸地尔硫卓,假手术组和MIRI模型组于相同时间分别灌胃给予等容积的0.9%NaCl溶液,各组术前灌胃均每天1次,连续7天。灌胃7天后,采用结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支30 min、再灌注2 h复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。造模后,在MIRI结扎线以下区域至心尖取材,运用常规苏木素-伊红(HE)染色,光镜下用图形分析系统定量观察单位视野全部心肌细胞核染色部分的面积、积分光密度,采用生化法检测Caspase-3活性。结果 MIRI模型组大鼠心肌细胞结构破坏,冠心康组大鼠心肌细胞保持完好。与假手术组比较,MIRI模型组大鼠单位视野全部心肌细胞核染色部分的面积和积分光密度显著降低(P0.01);冠心康组和盐酸地尔硫卓组则显著升高,与MIRI模型组比较差异有统计学意义(P0.01);MIRI模型组大鼠心肌组织Caspase-3活性较假手术组明显升高(P0.01),冠心康组和盐酸地尔硫卓组Caspase-3活性则较MIRI模型组明显降低(P0.01)。结论冠心康对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织具有保护作用,其机制与冠心康抑制心肌组织Caspase-3活性有关。     

炙甘草汤对缺血缺氧心室乳头肌细胞电生理效应的研究

目的:探讨炙甘草汤对豚鼠缺血缺氧心室肌细胞动作电位的影响及对心肌的保护作用。方法:豚鼠随机分为正常对照组、缺血缺氧组和缺血缺氧+炙甘草汤组。用玻璃微电极细胞内记录的方法,描记正常灌流液、缺血缺氧灌流液和缺血缺氧+炙甘草汤(40mg/ml)灌流液灌流时的豚鼠心室乳头肌细胞动作电位,测量其RP、APA、Vmax、APD50、APD90和APD。分别描记5min、10min、15min和20min四个时间点的动作电位。结果:与正常对照相比,缺血缺氧条件下豚鼠离体心室肌细胞动作电位的0相最大除极速率、复极50%和90%时间及动作电位时程均明显减小(p<0.05或0.001);而在缺血缺氧灌流液中加入炙甘草汤可明显减小APD50、APD90和APD的缩短速度(P<0.05或0.01)。结论:炙甘草汤可减慢缺血缺氧状态下心室肌细胞动作电位时程的缩短速度。     

中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的观察中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤（MIRI）心肌细胞相关凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法 40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、MIRI模型组、冠心康组、盐酸地尔硫卓组。采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注2h复制大鼠MIRI模型,分别以HE染色、TUNEL法及免疫组织化学法检测心肌组织病理学、心肌细胞凋亡指数、心肌细胞Bcl-2、Bax的阳性表达。结果 MIRI组与假手术组比较心肌细胞凋亡指数值显著升高（P〈0.01）,而冠心康组明显降低（P〈0.01）;抑凋亡因子Bcl-2在MIRI后表达明显降低,而促凋亡因子Bax表达则明显升高,冠心康可明显升高Bcl-2的表达,同时降低Bax的表达（P〈0.01）。结论中药复方冠心康对大鼠MIRI心肌细胞具有明显的保护作用,其作用机制与调控心肌细胞的凋亡因子Bcl-2、Bax的表达有关。     

冠心康对大鼠缺血再灌注损伤心肌氯通道ClC-2、ClC-3、CFTR表达的影响

目的观察中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤（MIRI）心肌细胞氯通道ClC-2、ClC-3、CFTR表达的影响.方法 40只SD雄性大鼠随机分为4组：假手术组、MIRI模型组、冠心康组、盐酸地尔硫卓组.冠心康按生药13 g/（kg·d）灌胃给药,盐酸地尔硫卓按30 mg/（kg·d）灌胃给药,假手术组和MIRI模型组分别于相同时间给予等容积的生理盐水灌胃,术前灌胃7 d,每日1次.采用结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h复制大鼠MIRI模型,造模成功后,在MIRI结扎线以下区域至心尖取材,运用RT-PCR法检测ClC-2、ClC-3、CFTR mRNA表达水平和蛋白质印迹法检测ClC-2、ClC-3、CFTR蛋白的表达.结果氯通道相关基因ClC-2、ClC-3、CFTR mRNA相对表达量在MIRI模型组明显升高,冠心康组和盐酸地尔硫卓治疗组mRNA相对表达量则明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.01）;氯通道相关基因ClC-2、ClC-3和CFTR蛋白相对表达量在MIRI模型组明显升高,冠心康组和盐酸地尔硫卓治疗组蛋白表达量则明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论冠心康对大鼠MIRI心肌组织具有明显的保护作用,其作用机制可能与调控心肌细胞氯通道相关蛋白的表达有关.     

冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾通道亚基Kir6.1、Kir6.2、SUR2A和SUR2B表达的影响

目的:通过观察中药复方冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾(ATP-sensitive potassium,K_(ATP))通道亚基的影响,探讨冠心康保护心血管、抗心肌缺血的可能作用机制。方法:48只SPF级Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、格列本脲组、吡那地尔组、冠心康组、冠心康加格列本脲组。采用酶解法分离大鼠心室肌细胞,用无钙台式液灌流10 min、停灌30 min、再灌注45 min模拟心肌缺血再灌注损伤。将药物直接加入细胞液中(格列本脲10μmol/L、吡那地尔50μmol/L、冠心康注射液1 ml/L)充分作用后,4℃放置24 h。采用实时荧光定量多聚酶链式反应法及蛋白质印迹法检测各组心肌细胞K_(ATP)亚基Kir6.1、Kir6.2、SUR2A和SUR2B的mRNA表达及蛋白含量。结果:正常大鼠心肌细胞可见SUR2A、Kir6.1和Kir6.2蛋白及mRNA的表达,而SUR2B蛋白几乎不表达。模型组K_(ATP)各个亚基蛋白及mRNA的表达均较正常组有一定程度的增加。与模型组比较,吡那地尔可显著增加K_(ATP)各亚基mRNA及蛋白的表达,格列本脲可阻断这一作用;冠心康可明显增加K_(ATP)通道各亚基mRNA及蛋白的表达。结论:复方冠心康具有明显的促进K_(ATP)开放的作用,从而起到心血管保护作用。     

蝙蝠葛多酚类生物碱对心肌细胞动作电位的影响

目的:研究蝙蝠葛多酚类生物碱(phenolic alkaloids of Menispermum dauricum,PAMD)对豚鼠乳头肌和兔窦房结优势起搏细胞动作电位的影响。方法:运用玻璃微电极记录豚鼠心室乳头肌动作电位,研究不同浓度PMAD(1,3,10μmol·L-1)对心室乳头肌动作电位时程(action potential duration,APD),有效不应期(effective refractory period,ERP),最大除极化速度(maximum upstroke velocity,Vmax),动作电位幅度(amplitude,APA),超射(overshoot,OS)的影响;运用玻璃微电极记录兔窦房结优势起搏细胞动作电位,研究不同浓度PAMD(1,3,10μmol·L-1)对窦房结细胞APD、最大舒张期电位(maximal diastolic potential,MDP),APA,Vmax,自发放电频率(rate of pacemaker firing,RPF)和舒张期去极化速度[velocity of diastolic(phase 4)depolarization,VDD]的影响。结果:在豚鼠右心室心肌乳头肌细胞中研究发现,PAMD可以剂量依赖性的显著延长APD和ERP,延缓Vmax。当浓度为10μmol·L-1时,PAMD对窦房结自律性具有轻度影响,这种作用与对照组比有显著差异。结论:PAMD对心室肌的作用强于其对窦房结的作用,这表明其具有成为理想的抗室性心律失常的药物的潜力。     

附子理中汤对脾阳虚证模型大鼠心肌电生理的影响

目的观察并讨论附子理中汤对脾阳虚证模型大鼠心肌电生理的影响。方法50只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、附子理中汤低剂量组、中剂量组、高剂量组5组,每组10只。对照组常规饲养,其余大鼠组采用“肩胛骨间棕色脂肪组织（BAT）切除术＋高脂饲料喂养＋隔日寒冷环境刺激”方法造模。附子理中汤低、中、高剂量组分别以5、10、20g／kg附子理中汤灌胃,对照组及模型组给予等量的生理盐水。观察心率（HR）,动作电位时程（APD）,动作电位0相幅值（APA）,动作电位50％复极化时程（APD50）,90％复极化时程（APD。）的变化。结果和对照组比较,模型组HR、APD50均降低（P〈0．05）,APD、APD‰APA均显著降低（P〈0．01）。和模型组比较,中剂量组HR、APD、APD。均升高（P〈0．05）;和模型组比较,高剂量组HR升高（P〈0．05）,APD、APD50,APD90、APA均显著升高（P〈0．01）。结论附子理中汤能提高HR,延长APD和升高APA的效果与剂量有关,能改善心肌电生理病理变化。     

稳心颗粒对异丙肾上腺素诱发豚鼠心律失常的电生理影响

目的探讨稳心颗粒对异丙肾上腺素（Iso）诱发心律失常的电生理影响。方法用标准微电极细胞内记录技术,观测稳心颗粒对异丙肾上腺素诱发豚鼠心律失常的影响。观测指标：最大舒张电位（maxi mal diastolic potential,MDP）、动作电位幅度（am-plitude of action potential,APA）、0相最大去极速度（maxi mal rate of depolarization,Vmax）、4相自动去极速度（velocity of diastolicdepolarization,VDD）、复极50%和90%时间（50%and90%of duration of action potential,APD50and APD90）以及自发放电频率（rate of pacemaker firing,RPF）。结果用100μmol/LIso灌流后左心室流出道自律细胞出现了心律失常,用Iso＋稳心颗粒灌胃组血浆灌流后,与Iso模型组和Iso＋生理盐水灌胃血浆比较,RPF和VDD减慢（P〈0.01）,APA和MDP的绝对值显著减小（P〈0.01）,Vmax明显减慢（P〈0.01）,APD80和APD90明显延长（P〈0.01）。结论稳心颗粒能降低自发放电频率,拮抗异丙肾上腺素诱发的心律失常。     

二乙酰基莲心碱对心室肌细胞电生理的影响

目的:探讨二乙酰基莲心碱(Diacetyl-linesinine)对兔心室肌细胞动作电位、L型钙电流以及延迟整流钾电流的影响。方法:选取10只体重1.5～2.0kg的健康新西兰白兔,酶解法分离兔单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察不同浓度的二乙酰基莲心碱对心室肌细胞动作电位、钙电流和延迟整流钾电流的作用。结果:①10、30μmol·L-1的二乙酰基莲心碱使复极50%的动作电位时程(action potential duration at50%repolarization,APD50)和复极90%的动作电位时程(action potential duration at90%repolarization,APD90)明显延长(P<0.05),而100μmol·L-1的二乙酰基莲心碱使APD50和APD90不再继续延长,反而缩短;②二乙酰基莲心碱浓度依赖性减少钙电流和延迟整流钾电流,10、30、100μmol·L-1的二乙酰基莲心碱可分别使峰值钙电流下降56.96%、65.91%及73.61%;使延迟整流钾电流下降17.46%、45.82%及51.06%。结论:二乙酰基莲心碱在低浓度时延长APD,高浓度时缩短APD;二乙酰基莲心碱可浓度依赖性阻滞兔心室肌细胞的钙电流和延迟整流钾电流。     

炙甘草汤对离体心肌生理特性的影响

本实验结果表明灸甘草汤能明显降低大白鼠右心房自律性；明显抑制肾上腺素诱发的离体豚鼠左心房肌和乳头状肌的自律性和兴奋性；对豚鼠的左心房肌的功能不应期也能明显延长；但对收缩性无明显影响。     

休克血浆对豚鼠乳头状肌的电生理效应及益母草的干预作用

目的探讨益母草对休克血浆所致豚鼠心室乳头肌电生理改变的拮抗作用。方法采用常规玻璃微电极细胞内记录技术,记录离体豚鼠心室乳头肌动作电位,观察休克血浆对豚鼠心室乳头肌动作电位的影响及益母草对其干预作用。结果正常血浆灌流时,与对照组相比,豚鼠心室乳头肌细胞动作电位无明显改变。休克血浆灌流时,豚鼠心室乳头肌细胞动作电位的APA,OS均显著升高,APD50,APD90,APD明显延长,与对照组及正常血浆组比较均有显著性差异(P<0.05);用不同浓度(2.5%,5%,10%)的益母草注射液灌流后,由SP引起的APA,OS升高出现明显降低,动作电位时程明显短于休克血浆组,尤其是APD90,APD缩短更为明显(P<0.01),此作用在浓度为10%时达到最强,且呈浓度依赖性。结论益母草注射液可明显拮抗休克血浆所致豚鼠心室乳头肌动作电位改变,对心肌具有一定保护作用。     

PNS单体Rb_l对豚鼠心脏乳头肌动作电位和收缩力的影响

目的 :了解PNS单体Rbl对豚鼠心脏乳头肌动作电位和收缩力的影响。方法 :运用带有动作电位和收缩力分析软件控制的细胞内微电极技术 ,研究了三七皂苷 (PNS)单体Rbl对豚鼠正常心脏乳头肌动作电位 (AP)各特征参数及收缩力 (FC)的影响。结果 :Rb1 1 0～ 30 μmol·L- 1 分别使APD 2 0 ,APD 90明显缩短 ,FC显著下降 (P<0 .0 1 ,n =5) ,并可降低高钾诱发的豚鼠乳头肌慢反应动作电位的动作电位幅值 (APA)及零相最大上升速率(Vmax) (P <0 .0 5 ,n =5)。但对静息电位 (RP) ,APA ,Vmax及AP的超射值 (OS)无明显影响 (P >0 .0 5 ,n =5)。另外 ,Rbl可浓度依赖性地抑制乳头肌收缩力 (FC) ,RP ,APA不随Rbl剂量增加而产生明显变化 ,呈典型的兴奋 收缩脱藕联。结论 :其效应可能通过阻滞钙通道而产生     

Effects of Cymbopogon goeringii (Steud.) A. Camus volatile oil on physiologic properties of the isolated guinea pig myocardium

In isolated guinea pig papillary muscles and atrium, Cymbopogon goeringii volatile oil (CGCO) markedly inhibited the contraction, prolonged the functional refractory period (FRP) and depressed epinephrine-induced automatically. The results suggested that CGCO may possess antiarrhythmic action.     

桔草挥发油对豚鼠离体心肌生理特性的影响

采用豚鼠离体心乳头状肌和心房肌观察桔草挥发油对其生理特性的影响。结果表明桔草挥发油明显抑制心肌收缩力、抑制肾上腺素诱发的异常自律性、并延长心肌的功能不应期;但对兴奋性无明显影响。提示桔草挥发油可能具有抗心律失常的作用。     

PNS单体Rbl对豚鼠心脏乳头肌动作电位和收缩力的影响

目的 :了解PNS单体Rbl对豚鼠心脏乳头肌动作电位和收缩力的影响。方法 :运用带有动作电位和收缩力分析软件控制的细胞内微电极技术 ,研究了三七皂苷 (PNS)单体Rbl对豚鼠正常心脏乳头肌动作电位 (AP)各特征参数及收缩力 (FC)的影响。结果 :Rb₁ 10～30μmol·L^-1 分别使APD 20 ,APD 90明显缩短 ,FC显著下降 (P<0.01 ,n =5) ,并可降低高钾诱发的豚鼠乳头肌慢反应动作电位的动作电位幅值 (APA)及零相最大上升速率(Vmax) (P <0.05 ,n=5)。但对静息电位 (RP) ,APA ,Vmax及AP的超射值 (OS)无明显影响 (P>0.05 ,n=5)。另外 ,Rb_l可浓度依赖性地抑制乳头肌收缩力 (FC) ,RP ,APA不随Rb_l剂量增加而产生明显变化 ,呈典型的兴奋 收缩脱藕联。结论 :其效应可能通过阻滞钙通道而产生。     

银杏酮酯GBE50对正常及模拟缺血豚鼠乳头肌动作电位的影响

目的:观察银杏酮酯(GBE50)对正常及模拟缺血豚鼠乳头肌动作电位的影响,探讨GBE50的抗心肌缺血作用。方法:运用标准微电极细胞内记录技术观察GBE50对正常及模拟缺血豚鼠乳头肌动作电位参数(RP,APA,OS,APD20,APD50,APD90)的影响。结果:20,50,100 mg.L-1GBE50缩短心室乳头肌APD50和APD90(P0.05),且呈剂量依赖性,而对其他参数没有影响;模拟缺血液灌流使RP,APA,OS分别减小,APD20,APD50,APD90分别缩短,而在缺血液中加入100 mg.L-1GBE50,缺血20 min仅APA缩短,其他参数无变化。结论:在生理状态下,GBE50可轻微缩短APD。在缺血状态下动作电位各项参数均减小,而GBE50通过维持缺血期间膜电位的稳定性,对抗缺血对跨膜电位的抑制效应,从而达到抗心肌缺血作用。     

清肺康肤合剂对激素依赖性皮炎豚鼠模型作用的实验研究

目的研究清肺康肤合剂对激素依赖性皮炎豚鼠模型的作用。方法取健康豚鼠50只,雌雄各半,随机取10只豚鼠为空白对照组,另外40只应用0.05%丙酸氯倍他索酊剂制造豚鼠激素依赖性皮炎动物模型。造模成功后,分为模型组、清肺康肤合剂低剂量组、清肺康肤合剂高剂量组及阳性药物组,每组10只,对各组豚鼠采取相应的干预措施28天。观察实验前后各组豚鼠的皮损、病理改变、血清总IgE含量变化情况。结果与空白对照组比较,其余各组豚鼠的皮损明显,血清IgE升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),说明造模成功。与模型组比较,清肺康肤合剂低剂量组、清肺康肤合剂高剂量组皮肤外观好转,血清总IgE水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与清肺康肤合剂低剂量组比较,清肺康肤合剂高剂量组血清IgE降低,差异有统计学意义(P<0.05)。病理常规切片HE染色后镜下观察,各组均未见明显变化。结论清肺康肤合剂对豚鼠激素依赖性皮炎有一定缓解作用。     

Forskolin- and diacylglycerol-like potentiation of isoproterenol-induced positive inotropic effect in guinea pig papillary muscles by the musk component,musclide

Musclide (ML) is a glycerol-rich mixed component extracted from musk, a dried secretion from the preputial follicle of musk deer, Moschus moschiferus Linn. ML (50 μg/mL) that caused no direct inotropic effect potentiated isoproterenol (Isp)-induced positive inotropic effect in isolated guinea pig papillary muscles. This cardiotonic action has been attributed to β-adrenergic potentiation. The mechanisms were further investigated using pertussis toxin (IAP), cholera toxin (CTX), forskolin (FK) and dioctanoylglycerol (DOG). IAP pretreatment (50 μg/kg, i.p., the 3rd day before tissue isolation) and/or DOG (200 μM, preliminarily applied for 5 min) increased the maximal response of the concentration-response curve for isoproterenol. CTX pretreatment (0.1 μM, for 3 h) increased the affinity. ML (50 μg/mL) or FK (82.9 nM) preliminarily applied for 5 min caused increases in both the maximal response and affinity. The extent of potentiation produced by ML or DOG was not changed in normal muscles or IAP-pretreated muscles. The extent of potentiation by ML was greater in CTX-pretreated muscles than in normal ones. ML or DOG, when combined with FK, caused only the increase in the maximal response. These results suggest that the potentiation mechanisms of ML are partially FK (adenylate cyclase activator)-like and partially DOG (protein kinase C activator)-like.     

复方川贝颗粒含药血清对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能影响随机平行对照研究

[目的]观察复方川贝颗粒含药血清对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能影响。[方法]使用随机平行对照方法,将清洁级豚鼠12只按随机数字表法随机分为6组,用于制作含药血清：模型组,复方川贝颗粒低、中、高剂量组,二陈丸组,氨茶碱组,2只/组,雌雄各半。其余10只准备取气管制作气管螺旋条的豚鼠,根据抽签结果决定先后顺序。制作新鲜的豚鼠离体气管螺旋条,将其放入克氏液中,使用磷酸组胺（His）引发豚鼠气管螺旋条收缩。观测加入复方川贝颗粒含药血清后1,3,5min的解痉百分率。[结果]复方川贝颗粒含药血清中剂量组解痉率与模型组比较均有明显上升（P〈0.05）,复方川贝颗粒含药血清对His引起的气管平滑肌收缩反应具有拮抗作用,药物与标本接触5min后作用较好。[结论]复方川贝颗粒含药血清对His引起的气管平滑肌收缩反应具有一定拮抗作用。