电针联合饮食调控对非乙醇性脂肪肝病大鼠肝脏内质网应激的影响

目的:观察电针联合饮食调控对非乙醇性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝脏内质网应激的影响,探讨电针治疗NAFLD的作用机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为普食组(15只)和以高脂饲料喂养建立NAFLD模型的造模组(45只)。造模成功后,随机抽取10只普食组大鼠作为正常对照组,选取造模组40只大鼠随机分为高脂饮食组、低脂饮食组、电针1组和电针2组,每组10只。造模成功后第2d,高脂饮食组和电针1组继续以高脂饲料喂养,低脂饮食组和电针2组改为普通饲料喂养。电针1组和电针2组以毫针针刺单侧"足三里""三阴交""太冲",电针连接"足三里""三阴交",每日治疗1次,左右侧交替,每次治疗20min,连续4周。余组大鼠每日以同样方法固定。治疗结束后取大鼠肝组织制成超薄切片做透射电镜观察各组大鼠肝细胞内质网形态,分别采用Western blot和实时荧光定量PCR法检测肝脏内质网应激标志性蛋白葡萄糖结合蛋白78(GRP78)的蛋白和基因表达。结果:电镜下观察,正常对照组大鼠胞质内可见大量粗面内质网,排列整齐,隐约可见核糖体附着;高脂饮食组大鼠粗面内质网明显扩张、断裂,呈小空泡样改变,无规则排列于胞质内;低脂饮食组和电针1组大鼠粗面内质网扩张程度减轻,无明显断裂,排列无明显紊乱;电针2组大鼠粗面内质网排列有序,未见明显扩张。正常对照组大鼠肝组织GRP78的蛋白表达极少,其余4组肝组织GRP78的蛋白表达、GRP78mRNA表达量升高(均P0.01);低脂饮食组和电针1组GRP78的蛋白表达、GRP78mRNA表达量明显低于高脂饮食组(均P0.01);电针2组GRP78的蛋白表达、GRP78mRNA的表达量较低脂饮食组和电针1组均降低(均P0.01)。结论:电针能有效改善NAFLD大鼠肝脏内质网应激状态,这可能是电针治疗NAFLD的机制之一,且联合饮食调控效果更佳。     

复方楂金颗粒剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠PPAR-α影响的实验研究

目的:探讨复方楂金颗粒剂(FZJG)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为6组,正常组(正常饮食),模型组、阳性对照组和复方楂金颗粒高中低剂量组给予高脂饲料喂养10周诱发脂肪性肝炎后分别以生理盐水、易善复、复方楂金颗粒剂高、中、低剂量灌胃,每天1次,共10周。处死大鼠,分别进行如下检测:1计算肝指数;2HE染色,光镜下观察各组大鼠肝组织的病理改变;3免疫组织化学染色和RT-PCR法检测大鼠肝组织PPAR-α蛋白和mRNA的表达。结果:模型组大鼠肝指数较正常组明显增加(P0.01);FZJG中剂量组、低剂量组大鼠的肝指数低于模型组,有统计学意义(P0.05,P0.01)。模型组NAFLD活动度积分明显高于正常组(P0.05);FZJG中剂量组NAFLD活动度积分与模组比较则明显降低(P0.05)。PPAR-α蛋白和mRNA表达均明显低于正常组(P0.05);FZJG高、中、低剂量组PPAR-α蛋白和mRNA表达均高于模型组,但只有FZJG中剂量组PPAR-α蛋白和mRNA表达相对模型组有统计学意义(P0.05)。结论:复方楂金颗粒剂能明显增强NASH大鼠肝组织PPAR-α的基因表达,抑制脂质在大鼠肝脏内沉积,防治NASH形成及发展。     

电针背俞穴对非酒精性脂肪肝病大鼠肝肿瘤坏死因子-α的表达及脂质过氧化的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)发病机制中的作用并观察电针背俞穴的疗效及作用途径。方法:将Wistar大鼠随机分为正常组(11只)和造模组(32只),造模组饲以高脂饮食复制NAFLD大鼠模型,8周后随机处死正常组1只和造模组2只,病理组织学检查以验证造模成功。然后将余下的造模组大鼠随机分为3组:NAFLD模型组(10只)、电针组(10只)、药物组(10只)。药物组将1%的东宝肝泰混悬液按照0.28g/kg(20mL/kg)灌胃,1次/d;电针组选取双侧背俞穴"脾俞""肾俞""膈俞"进行电针治疗,1次/d,每次20min。连续治疗4周后处死所有动物,HE染色观察肝组织病理学变化情况;全自动生化分析仪测定肝内游离脂肪酸(FFA)含量,比色法检测肝内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;免疫组化法检测肝组织中TNF-α的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠均出现中度至重度的肝细胞脂肪变性,肝组织TNF-α表达上调,FFA、MDA升高(P0.01),SOD活性降低(P0.01);与模型组比较,电针组和药物组肝组织脂肪变性得到不同程度的减轻,肝组织TNF-α表达下调,FFA、MDA均有不同程度的降低(P0.01,P0.05),SOD活性升高(P0.01,P0.05)。结论:电针背俞穴可抑制非酒精性脂肪肝大鼠TNF-α表达的上调,降低FFA的释放和减轻脂质过氧化反应,这可能是其治疗NAFLD的作用机制之一。     

丹皮酚对非酒精性脂肪肝大鼠炎症因子表达的影响

目的研究丹皮酚对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠炎症因子白介素2(IL-2)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及核转录因子κB(NF-κB)表达的影响。方法将高脂饮食诱导的NAFLD大鼠随机分成模型对照组,阳性对照组,丹皮酚高、中、低剂量组,另设正常组。观察大鼠造模及用药期间的活动情况;显微镜观察肝脏病理学变化;ELISA法检测大鼠血清中IL-2、IL-6、TNF-α和NF-κB的含量;qRT-PCR法检测肝脏中炎症因子IL-2、IL-6、TNF-α和NF-κB的基因表达量。结果正常组大鼠肝细胞无脂肪变性,模型组大鼠肝细胞存在显著脂肪变性,丹皮酚各剂量组肝细胞脂肪变性减轻,仅见到少量脂滴空泡。丹皮酚各剂量组血清IL-2、IL-6、TNF-α、NF-κB的含量及其在肝组织中mRNA的表达量均比模型组明显下降(P0.05),呈一定的量效关系。结论丹皮酚可能通过下调大鼠炎症因子IL-2、IL-6、TNF-α以及NF-κB的表达以治疗高脂饮食诱导的NAFLD。     

平糖方促进非酒精性脂肪肝大鼠肝脏PPAR-α和CPT-1 mRNA表达

目的：观察中药复方平糖方对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠模型的治疗作用。方法：通过高脂喂养诱导NAFLD大鼠模型,观察平糖方对NAFLD大鼠模型血脂、转氨酶、肝脏形态学及肝脏PPAR-α（过氧化物酶体增殖物激活受体α）及CPT-1（肉毒碱棕榈酰基转移酶1）mRNA表达的影响。结果：与NAFLD组相比,平糖方组的血脂及转氨酶水平显著下降（P〈0.05）,脂肪变性肝细胞数目显著下降,肝脏PPAR-α及CPT-1 mRNA的表达显著增高。结论：平糖方对NAFLD大鼠模型具有良好的治疗作用,其机制可能与促进肝脏PPAR-α及CPT-1 mRNA的表达有关。     

电针“丰隆”穴对高脂血症大鼠的调控及其作用机制

目的:探讨电针“丰隆”穴治疗高脂血症的作用机制.方法:将40只健康SD大鼠随机分为正常对照组、高脂饲料组、高脂饲料治疗组、高脂+普通饲料组及高脂+普通饲料治疗组,每组8只.两治疗组电针“丰隆”穴,每日1次.治疗30 d后,检测各组大鼠血脂水平,即总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法(Western Blotting)检测各组大鼠肝脏组织中ATP结合盒转运子A1 (ABCA1)、过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)、肝X受体α(LXR-α)和视黄酸X受体α(RXR-α)基因表达的变化.结果:高脂饲料组大鼠血浆TC、LDL-C较正常对照组明显上升(均P＜0.01);高脂+普通饲料组大鼠血浆TC、LDL-C与高脂饲料组比较明显下降(均P＜0.01),较正常对照组仍升高明显(均P＜0.01);电针“丰隆”穴治疗后,大鼠血浆TC、LDL-C明显下降(均P＜0.01);TG、HDL-C变化不明显(均P＞0.05).与正常对照组比较,高脂饲料组大鼠肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量均显著降低(均P＜0.01);高脂+普通饲料组大鼠肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量与高脂饲料组比较有所上升,较正常对照组仍降低明显(均P＜0.01);电针治疗后,大鼠肝脏组织中ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量均显著升高(均P＜0.05).结论:电针“丰隆”穴能够明显下调高脂血症大鼠血脂中TC、LDL-C水平,上调肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α、RXR-α的基因表达,从而促进由其介导的胆固醇逆转运,对高脂血症具有一定的治疗作用.     

电针“丰隆”穴对高脂血症大鼠的调控及其作用机制

目的:探讨电针“丰隆”穴治疗高脂血症的作用机制.方法:将40只健康SD大鼠随机分为正常对照组、高脂饲料组、高脂饲料治疗组、高脂+普通饲料组及高脂+普通饲料治疗组,每组8只.两治疗组电针“丰隆”穴,每日1次.治疗30 d后,检测各组大鼠血脂水平,即总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇( LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,实时定量聚合酶链反应( RT-PCR)及免疫印迹法(Western Blotting)检测各组大鼠肝脏组织中ATP结合盒转运子A1(ABCA1)、过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)、肝X受体α(LXR-α)和视黄酸X受体α( RXR-α)基因表达的变化.结果:高脂饲料组大鼠血浆TC、LDL-C较正常对照组明显上升(均P＜0.01);高脂+普通饲料组大鼠血浆TC、LDL-C与高脂饲料组比较明显下降(均P＜0.01),较正常对照组仍升高明显(均P＜0.01);电针“丰隆”穴治疗后,大鼠血浆TC、LDL-C明显下降(均P＜0.01);TG、HDL-C变化不明显(均P＞0.05).与正常对照组比较,高脂饲料组大鼠肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量均显著降低(均P＜0.01);高脂+普通饲料组大鼠肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量与高脂饲料组比较有所上升,较正常对照组仍降低明显(均P＜0.01);电针治疗后,大鼠肝脏组织中ABCA1、PPARα、LXR-α及RXR-α的mRNA和蛋白含量均显著升高(均P＜0.05).结论:电针“丰隆”穴能够明显下调高脂血症大鼠血脂中TC、LDL-C水平,上调肝脏ABCA1、PPARα、LXR-α、RXR-α的基因表达,从而促进由其介导的胆固醇逆转运,对高脂血症具有一定的治疗作用.     

电针对非酒精性脂肪肝胰岛素抵抗及肝细胞色素P450 2E1表达的影响

目的:研究电针对非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)胰岛素抵抗及肝细胞色素P450 2E1(cyto-chrome P450 2E1,CYP 2E1)表达的影响。方法:SD大鼠33只随机分组,正常对照组(11只)、造模组(22只)。后者高脂饲料喂养8周后处死3只(正常对照组1只,造模组2只),验证造模成功后将造模组分为NAFLD模型组(10只)和电针治疗组(10只),后者施以电针"治疗"。12周末处死所有动物,检测血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)、血清游离脂肪酸(FFA),测定肝内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)以及谷胱甘肽(GSH)含量,观察肝组织病理形态的变化和肝CYP 2E1表达。结果:与NAFLD模型组比较,电针组的肝组织脂肪变性和炎性损伤得以改善。免疫组化证明电针治疗能抑制脂肪肝肝细胞色素CYP 2E1的表达,电针组大鼠的血糖、血清胰岛素、血清游离脂肪酸指标均显著低于模型组(均P0.05),肝内MDA、TG、TC显著降低(P0.01),SOD、GSH活性升高(P0.01)。结论:电针通过改善胰岛素抵抗状态和抑制肝CYP 2E1表达,从而减轻脂质过氧化反应,增强抗氧化能力,使肝组织的脂肪变性和炎性损伤得以改善。     

清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞脂肪沉积的影响及其机制探讨

目的探讨清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝细胞脂肪沉积的影响及其对固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein,SREBP-1c)的调控作用。方法将雄性SD大鼠60只分为正常组、模型组、治疗组各20只,除正常组,其余各组均采用高脂饮食复制NAFLD大鼠模型;造模8周后,每组取10只,验证造模成功后,治疗组予清肝化痰活血中药干预,模型组及正常组予生理盐水。观察各组大鼠肝脏脂肪变性程度,检测血清ALT、AST、γ-GT和肝组织中TC、TG、FFA水平。实时定量PCR法检测肝细胞SREBP-1c mRNA表达水平。结果灌胃治疗4周后,正常组大鼠肝组织正常,模型组大鼠均发生不同程度脂肪变性,治疗组大鼠肝脏脂肪变性程度明显轻于模型组。与正常组比较,模型组血清ALT、AST及γ-GT显著上升,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,治疗组血清ALT、AST、γ-GT活性显著下降(P0.05),肝组织中TC、TG、FFA含量显著降低(P0.01)。与正常组比较,模型组肝细胞SREBP-1c基因表达水平明显升高(P0.01);与模型组比较,治疗组SREBP-1c基因表达水平明显下调(P0.01)。结论清肝化痰活血方可能通过调控肝细胞SREBP-1c基因表达,减轻NAFLD大鼠肝细胞脂肪沉积。     

消瘀化痰饮对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞凋亡及相关调控基因的影响

目的通过观察消瘀化痰饮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝细胞凋亡及相关调控基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,探讨其治疗NAFLD的作用机制。方法采用高脂饮食喂饲大鼠复制NAFLD模型,以东宝甘泰作为阳性对照药,运用流式细胞仪观察各组大鼠肝细胞凋亡及相关调控基因Bcl-2和Bax蛋白表达的变化,同时采用HE染色观察各组大鼠肝组织形态学变化。结果光镜下可见模型组大鼠肝脏中度以上脂肪变性,并有少量的肝细胞坏死;流式细胞术分析可见其细胞凋亡率明显增高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达FI值降低(P<0.01),Bax蛋白表达FI值增高(P<0.01)。与模型组比较,各用药组肝脂变程度显著改善,肝细胞的凋亡率明显下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达FI值增高(P<0.01),Bax基因表达FI值降低(P<0.05或P<0.01)。结论消瘀化痰饮能使Bcl-2蛋白表达上调、Bax蛋白表达下降,抑制细胞凋亡趋势,起到抗脂肪肝的作用。     

消瘀化痰方对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞凋亡和Caspase3蛋白表达的影响

目的 观察中药消瘀化痰方对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝细胞凋亡和肝组织caspase 3蛋白表达的影响,探讨其防治NAFLD的部分作用机理.方法 采用高脂饮食喂饲大鼠复制NAFLD模型,以东宝肝泰为对照药,运用流式细胞仪观察各组大鼠肝细胞凋亡及肝组织caspase 3蛋白表达的变化,同时采用HE染色观察各组大鼠肝组织形态学变化.结果 镜下可见模型组大鼠肝脏中度以上脂肪变性,并有少量的肝细胞坏死;流式细胞术分析可见其细胞凋亡率明显增高(P＜0.01),caspase 3蛋白表达FI值增高(P＜0.01).与模型组比较,各用药组肝脂变程度显著改善,肝细胞的凋亡率明显下降(P＜0.01),caspase 3蛋白表达FI值降低(P＜0.01).结论 消瘀化痰方通过抑制caspase 3蛋白的表达,抑制肝细胞的凋亡,以达到抗脂肪肝作用.     

乔松素对高脂饲养诱导的非酒精性脂肪性肝病大鼠的保护作用及机制研究

目的:探究乔松素对高脂饲养诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的保护作用及机制。方法:40只SD大鼠适应性饲养1周后随机分为对照组、模型组、乔松素10mg·kg~(-1)组(10mg·kg~(-1)·d~(-1))和乔松素30mg·kg~(-1)组(30mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组10只。HE染色观察肝脏病理变化,蛋白质印迹(Western blot)法检测固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)及过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)蛋白水平,实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)法检测SREBP-1c miRNA及PPAR-αmiRNA水平。结果:与模型组比较,乔松素治疗组可降低NAFLD大鼠FPS、INS、HOMA-IR、TC、TG、肝脏指数、AST、ALT、MDA、SREBP-1c miRNA及SREBP-1c水平(P0.05),升高SOD、GSH、CAT、PPAR-αmiRNA及PPAR-α水平(P0.05),且乔松素30mg·kg~(-1)组改善程度优于乔松素10mg·kg~(-1)组(P0.05)。结论:乔松素对高脂饲养的NAFLD大鼠有一定保护作用,其机制可能与调节SREBP-1c及PPAR-α水平有关。     

肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏组织PPARα表达的影响

目的验证肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠肝脏组织PPARα表达的影响。方法观察肝脂溶颗粒对实验性大鼠肝脏肝脏组织PPARα表达的影响。结果 PPARαm RNA水平,高剂量组最接近正常组,显著高于其它药物干预组(P0.05);中剂量组与对照组相比无差异(P0.05);低剂量组低于高、中剂量组及对照组(P0.05)。结论肝脂溶颗粒具有提高NAFLD大鼠肝脏组织PPARα基因表达的作用。     

电针“丰隆”穴对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织固醇调节元件结合蛋白-1c的影响

目的:观察电针"丰隆"穴对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的影响,探讨电针治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:SD大鼠随机分为普食组、高脂对照组、手针丰隆组、电针丰隆组、电针足三里组,每组12只。除普食组外其余各组大鼠均用高脂饲料喂养复制非酒精性脂肪肝模型。手针丰隆组采用毫针针刺"丰隆",电针丰隆组及电针足三里组予以电针刺激双侧"丰隆"及"足三里"穴,每次20 min,每日1次,治疗4周。HE染色观察肝组织病理学改变,比色法检测血清游离脂肪酸(FFA)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量,反转录-聚合酶链反应、蛋白印迹法检测大鼠肝脏组织SREBP-1c基因与蛋白的表达。结果:HE染色结果显示,高脂对照组肝细胞排列紊乱,呈弥漫性大泡型脂肪空泡改变;手针丰隆组出现小泡型脂肪变性;电针丰隆组、电针足三里组肝细胞排列有序,脂肪变性减轻。高脂对照组大鼠血清FFA、ALT、AST含量及肝组织SREBP-1c基因与蛋白表达水平显著高于普食组(P0.01);手针及电针各组血清FFA、ALT、AST含量及肝脏组织SREBP-1c基因与蛋白表达水平明显低于高脂对照组(P0.01),且电针丰隆组较手针丰隆组降低更为明显(P0.01,P0.05)。电针丰隆组血清FFA含量及肝脏组织SREBP-1c基因与蛋白表达水平均低于电针足三里组(P0.05)。结论:电针"丰隆""足三里"穴对非酒精性脂肪肝病大鼠有良性调节作用,其作用机制可能为下调SREBP-1c基因与蛋白表达,改善内质网应激,调节脂质代谢紊乱,从而减轻肝脏组织炎性损伤,且电针"丰隆"穴效果更优。     

黄连素配合高脂饮食控制对NAFLD大鼠肝组织PPARα mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察黄连素对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)mRNA和蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:66只雄性SD大鼠随机分为高脂饮食组56只和正常对照组10只。12 w时,从高脂饮食组中随机抽取6只进行肝脏病理切片,证实造模成功后,将造模组大鼠随机分为5组:黄连素高剂量组、黄连素低剂量组、东宝甘泰组、模型组、自然恢复组。除模型组继续给予高脂饲料外,其余各组均以基础饲料喂养。同时各治疗组给予相应药物灌胃,其余各组灌胃相应剂量蒸馏水。8 w后,所有大鼠腹主动脉取血及肝组织,全自动生化分析仪检测肝脂、血脂及肝功能;光镜观察肝组织病理形态变化;RT-PCR方法检测肝组织PPARαmRNA表达;免疫组织化学方法检测肝组织PPARα蛋白表达。结果:与模型组比较,药物治疗各组及自然恢复组肝脏脂变程度明显减轻;血脂、肝脂及肝功能指数显著降低(P0.01),肝组织PPARαmRNA和蛋白表达均有不同程度的上调(P0.05),尤以黄连素高剂量组最明显。结论:黄连素配合高脂饮食控制可显著促进肝组织PPARαmRNA及蛋白的表达,这可能是其防治NAFLD的重要机制之一。     

大黄素抑制NAFLD大鼠肝脏TLR4信号表达的研究

目的探讨大黄素改善非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型肝脏脂质沉积的机制。方法大鼠随机分为正常对照组,NAFLD模型组,大黄素低、中、高(20,40,80 mg·kg~(-1))剂量组,每组8只。采用高脂诱导的方法建立NAFLD大鼠模型,采用HE染色法检测肝脏病理变化,酶联免疫法检测血清TNF-α、IL-1含量,实时定量PCR法和免疫组化染色法检测TLR4信号的表达。结果 NAFLD组大鼠呈现典型的肝细胞脂滴空泡,部分肝细胞有单核细胞浸润,与正常对照组比较,血清TNF-α、IL-1增高(P0.05),肝脏TLR4、My D88、TRAF-6的基因表达增高(P0.05)。与NAFLD模型组比较,大黄素各剂量组对NAFLD大鼠肝脏脂滴空泡均有显著改善,抑制血清TNF-α、IL-1分泌(P0.05),并抑制肝脏TLR4的表达(P0.05),大黄素中、高剂量组抑制肝脏My D88和TRAF-6的表达(P0.05)。结论大黄素改善NAFLD模型肝脏脂质沉积的机制与抑制肝脏TLR4信号有关。     

电针对单纯性肥胖大鼠胰岛素抵抗及下丘脑刺鼠基因相关蛋白、神经肽Y的影响

目的观察电针对饮食诱导的单纯性肥胖大鼠体质量、胰岛素抵抗及下丘脑刺鼠基因相关蛋白(AGRP)、神经肽Y(NPY)基因表达的影响,探讨电针治疗肥胖症的相关机制。方法 50只SD雄性大鼠随机分为低脂组10只和高脂组40只,高脂组大鼠造模成功后,随机分为模型组、电针组、西药组,每组10只。电针组电针"后三里"和"曲池",每日1次,每次20 min,连续28 d;西药组予奥利司他灌胃,低脂组和模型组不做治疗。每日记录大鼠体质量,检测空腹血糖和胰岛素,RT-q PCR检测下丘脑AGRP和NPY基因表达水平,HE染色观察脂肪组织和肝脏形态。结果治疗后电针组和西药组体质量、胰岛素抵抗指数、AGRP、NPY、脂肪细胞直径均低于模型组(P0.05),2组比较差异无统计学意义。电针组和西药组肝脏脂变情况均得到改善。结论电针通过改善胰岛素抵抗,抑制NPY和AGRP神经元的表达,达到控制体质量增长的目的。     

疏肝健脾方药对LXRα/FAS信号通路介导非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞脂肪沉积的影响

目的探讨疏肝健脾方药对LXRα/FAS信号通路介导非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝细胞脂肪沉积的影响。方法选用SPF级雄性SD大鼠75只,共分5组,每组15只,分别为:正常组,模型组,疏肝组,健脾组及合方组;除正常组,其余均各组采用高脂饮食复制NAFLD大鼠模型,给药各组分别给予疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)、合方(柴胡疏肝散和参苓白术散合方)进行干预,采用全自动生化分析肝脂改变,分离出肝细胞,Typan blue染色和流式细胞术(FCM)对肝细胞的活性及纯度进行鉴定。采用实时定量PCR法检测肝细胞LXRαmRNA、FAS mRNA的表达,采用Western blot法检测LXRα、FAS蛋白在肝细胞中的表达。结果 (1)油红O染色后模型组的NAFLD大鼠病理结构显示肝细胞肿胀,细胞核位于细胞边缘,细胞浆内可见大小不等的小空泡,部分肝细胞小空泡融合成大泡等特征性改变,提示成功建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠实验动物模型。各组中药对NAFLD病理结构改变均有不同程度的修复作用,尤以疏肝组明显。(2)与正常组比较,模型组肝细胞LXRα、FAS基因及蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,健脾方和疏肝方组的表达水平下调明显(P<0.01,P<0.05)。结论 LXRα/FAS通路是介导NAFLD脂质平衡代谢紊乱重要的信号通路,疏肝健脾方药能够调控肝细胞LXRα/FAS通路使NAFLD大鼠肝细胞脂肪沉积趋于恢复,这可能是疏肝健脾方药抗实验性大鼠脂肪肝的作用机制之一。     

电针“丰隆”穴对高脂血症大鼠腹腔巨噬细胞炎性反应因子表达的影响

目的:观察电针"丰隆"穴对高脂血症大鼠腹腔巨噬细胞炎性反应因子表达的影响,探讨电针治疗高脂血症的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、高脂组、高脂+普通组、高脂+电针组及高脂+普通+电针组,每组8只。采用高脂饮食饲料饲喂法造模,造模28d后,高脂+普通组、高脂+普通+电针组改用普通饲料喂养,高脂+电针组及高脂+普通+电针组电针"丰隆"穴,治疗30min,每天1次,连续治疗28d。治疗结束后,检测各组大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,流式细胞术及酶联免疫吸附法检测各组大鼠腹腔巨噬细胞中单核趋化因子-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、白细胞介素-1γ(interleukin-1γ,IL-1γ)的表达。结果:高脂组大鼠血浆TC、LDL-C较正常对照组明显上升(P0.01);高脂+普通组大鼠血浆TC、LDL-C与高脂组比较明显下降(P0.01);电针治疗后,高脂+电针组及高脂+普通+电针组大鼠血浆TC、LDL-C明显下降(P0.01),TG、HDL-C变化不明显(P0.05)。高脂组大鼠腹腔巨噬细胞内MCP-1、ICAM-1及IL-1γ的表达较正常对照组显著升高(P0.01);高脂+普通组大鼠腹腔巨噬细胞内MCP-1、ICAM-1及IL-1γ的表达较高脂组明显下降(P0.05);高脂+普通+电针组大鼠腹腔巨噬细胞内MCP-1、ICAM-1及IL-1γ的表达较高脂+普通组显著下降(P0.01)。结论:电针"丰隆"穴能够明显下调高脂血症大鼠血脂中TC、LDL-C水平,可能与其下调高脂血症大鼠巨噬细胞中MCP-1、ICAM-1及IL-1γ的表达有关。     

牛樟芝滴丸对大鼠非酒精性脂肪肝相关基因表达的影响

目的:研究牛樟芝滴丸对大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)相关基因表达的影响。方法:SD大鼠48只,随机分成6组:正常对照组,模型组,水飞蓟素组(20 mg·kg-1),牛樟芝滴丸高、中、低剂量组(320、160、80 mg·kg-1),造模成功后给药6周。实验结束后,分别测定大鼠肝组织脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)、固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)的mRNA和蛋白表达。结果:与模型组比较,牛樟芝滴丸低剂量组SREBP-1c mRNA和蛋白表达以及FAS蛋白表达显著降低(P 0. 05,P 0. 01),但FAS mRNA表达无显著差异; PPAR-α蛋白表达显著升高(P 0. 01),PPAR-αmRNA表达与ACC mRNA和蛋白表达均无统计学意义;中、高剂量组SREBP-1c、FAS mRNA和蛋白表达均显著降低(P 0. 05,P 0. 01),而PPAR-α、ACC mRNA和蛋白表达均显著升高(P 0. 01)。结论:牛樟芝滴丸对大鼠NAFLD的相关基因表达具有明显的影响。