巴戟天对骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程Cbfα1表达的影响

目的:探讨巴戟天对骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程Cbfα1表达的影响.方法:采用经典成骨诱导方法培养BMSCs,分别在3、6、9、12、15、18天通过RT-PCR方法进行半定量分析Cbfα1的表达,然后分A组(巴戟天水提物组)、B组(巴戟天醇提物组)、C组(对照组)、D组(经典成骨诱导)、E组(巴戟天水提物 经典成骨诱导组)、F组(巴戟天醇提物 经典成骨诱导组)培养,在Cbfα1 mRNA的表达最强的时间检测上述各组Cbfα1 mRNA的表达.结果:经典成骨诱导方法诱导至第3天的时间点开始观察到Cbfα1 mRNA的表达,并逐渐加强,至第12天达到高峰,15天、18天有所减弱,在Cbfα1 mRNA的表达最强的时间点(第12天),A组、B组、D组、E组、F组均较C组的表达强,均有显著性差异,其表达强弱顺序是:F组＞E组＞D组＞B组＞A组＞C组.结论:巴戟天水提物、巴戟天醇提物能使Cbfα1的表达加强,且巴戟天醇提物表达强于巴戟天水提物.     

丹皮酚对急性心肌梗死大鼠心室重构及NF-κBp65,IL-1mRNA表达的影响

目的：观察草珊瑚多糖对巨噬细胞RAW264.7体外释放一氧化氮,膜表面分子和共刺激分子的影响和细胞因子mRNA的影响。方法：实验分为空白对照组,γ干扰素（IFN-γ）诱导的模型组,草珊瑚多糖低、中、高剂量组,浓度分别为25,50,100 mg·L^-1。药物作用于RAW264.7 巨噬细胞株24 h后,用流式细胞术检测RAW264.7膜分子CD16/32,CD40,CD14,Toll样受体4（TIR4）的表达,实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测炎症因子mRNA表达量;巨噬细胞诱导为M1后给予草珊瑚多糖干预,检测膜蛋白表达量和mRNA表达的差异,Griess方法检测一氧化氮释放的影响。结果：草珊瑚多糖可以有效的增加巨噬细胞RAW264.7膜蛋白CD16/32的表达,由空白的31.0±1.2上升到81.5±3,CD40由空白的5.2±0.9上升到81.5±2.6,CD14 28.5±1.6上升到86.7±5.4,TLR4的表达。对极化为M1亚型的巨噬细胞膜蛋白没有影响;草珊瑚多糖可以提高白细胞介素1β（IL-1β）,IL-10,肿瘤坏死因子α（TNF-α）,诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）mRNA 表达,而且存在剂量依赖性（P<0.01）,能提高M1亚型的因子mRNA的表达。能提高巨噬细胞一氧化氮的分泌。结论：草珊瑚多糖显著促进巨噬细胞相关免疫分子的表达,提高相关免疫因子RNA的表达,调节巨噬细胞促炎和抗炎性细胞因子的表达,对免疫平衡功能的调节具有潜在的应用价值。     

补肾中药对成骨细胞维生素D受体与核心结合因子α1蛋白表达的影响

为探讨补肾中药影响骨形成的机制，将SD大鼠随机分为正常组、生理盐水组、单味补阳组（固本壮骨胶囊）、复方补阳组（金匮肾气丸）、复方平补组（补肾益精方）、复方补阴组（知柏地黄丸）和西药对照组（萌格旺）7组，各组的含药血清分别干预16月龄大鼠成骨细胞，采用免疫组织化学方法检测药物干预后大鼠成骨细胞维生素D受体（vitamin Dreceptor，VDR）、核心结合因子仅α1（core binding factor α1，Cbfα1）蛋白的表达。结果：在大鼠成骨细胞中，单味补肾阳组、复方补肾阳组、复方平补组、西药对照组明显上调VDR、Cbfα1蛋白表达，复方补肾阴组明显下调VDR、Cbfα1蛋白表达。结论：补肾中药中，补阳中药和平补中药可能是通过上调成骨细胞VDR、Cbfα1蛋白表达，促进骨形成。     

肾素通过肾素（原）受体促进大鼠血管平滑肌细胞TGFβ1、Cbfα1表达

目的观察肾素是否通过肾素（原）受体诱导转化生长因子β1（TGFβ1）、核结合因子1（Cbfα1）表达上调,促进大鼠血管平滑肌细胞钙化.方法利用 Lipofectamine TM 2000将（P）RR微小RNA （miRNA）干扰质粒瞬时转染入大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）,然后予肾素刺激.倒置荧光显微镜下观察转染情况,RT-PCR检测各组细胞中肾素（原）受体[（P）RR]、TGFβ1 、Cbfα1mRNA的表达,用Western blotting法检测Cbfα1蛋白的表达情况.结果肾素可使血管平滑肌细胞TGFβ1、Cbfα1 mRNA及Cbfα1蛋白表达显著增多（P＜0.05）.沉默（P）RR基因后再予肾素刺激,（P）RR、TGFβ1、Cbfα1 mRNA及Cbfα1蛋白表达显著减少（P＜0.01）.结论肾素可能通过肾素（原）受体诱导TGFβ1、Cbfα1的表达上调,促进大鼠血管平滑肌细胞钙化;特异性miRNA沉默（P）RR,可以抑制肾素诱导的TGFβ1、Cbfα1 的表达,在一定程度上抑制细胞钙化.     

葶苈子提取液对CHF大鼠血流动力学和血浆AngⅡ、ALD水平的影响

目的：探讨葶苈子水提液和醇提液对CHF大鼠血流动力学及神经内分泌因子AngⅡ、ALD的影响。方法：腹主动脉缩窄法制作CHF大鼠模型。用十六导生理记录仪测量大鼠左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张末期内压（LVEDP）；左室内压最大上升速率和下降速率（&#177;dp／dtmax）；放免法测定血清血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血清醛固酮（ALD）的水平。结果：模型组大鼠与空白组相比LVSP、&#177;dp／dtmax显著降低（P〈0．01）；LVEDP显著升高（P〈0．01）；AngⅡ、ALD显著升高（P〈0．01）。各给药组与模型组相比血流动力学参数和血浆AngⅡ、ALD水平改善均有显著性差异（P〈0．01）。结论：葶苈子水提夜和醇提液可改善CHF时心肌收缩和舒张功能，其中醇提组的改善效果优于水提组。葶苈子水提夜和醇提液还能改善CHF神经内分泌因子AngⅡ和ALD的过度分泌，水提液减轻水钠潴留的作用优于醇提组。     

京尼平苷对光老化HaCaT细胞的保护作用及机制

目的：研究京尼平苷对光老化HaCaT细胞的保护作用及其机制。方法：取对数生长期的HaCaT细胞,调整其密度为1×10⁶个/mL接种于6孔板、5×10⁴个/mL接种于96孔板,用总剂量64 mJ·cm^-2（照射强度0.61 mW·cm^-2×照射时间105 s）的紫外线B（UVB）照射细胞建立光老化模型,以5×10^-5,5×10^-6,5×10^-7mol·L^-1的京尼平苷处理光老化细胞24 h,分别检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、丙二醛（MDA）含量,RT-PCR法检测细胞中P38、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素6（IL-6）mRNA的表达量,酶联免疫法检测细胞上清液中TNF-α和IL-6的含量。结果：UVB照射HaCaT细胞后,SOD活性、GSH-Px活性明显降低,MDA含量、p38 mRNA表达量、TNF-α和IL-6 mRNA及蛋白的表达量明显升高（P<0.01）;5×10^-5,5×10^-6mol·L^-1京尼平苷处理细胞后,SOD活性升高为（34.72±2.03）,（38.96±3.56） U·mg^-1;GSH-Px活性升高为（28.11±2.76）,（40.02±3.63）U·mg^-1;MDA含量下降为（4.82±0.42）,（4.60±0.41）nmol·mg^-1,p38 mRNA的相对含量下降为（0.97±0.09）,（0.94±0.09）;TNF-α mRNA的相对含量下降为0.57±0.05,0.53±0.05;IL-6 mRNA的相对含量下降为0.65±0.06,0.64±0.06;TNF-α蛋白的表达量降低为（34.05±2.43）,（25.55±1.84） ng·L^-1,IL-6蛋白的表达量降低为（28.51±1.95）,（19.32±1.55） ng·L^-1,与模型对照组相比,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论：京尼平苷能抵抗UVB对HaCaT细胞的损伤,其机制可能与抑制氧化损伤,调控p38信号通路,调节TNF-α和IL-6的表达有关。     

鳖甲水提物和醇提物对单胺氧化酶活性影响的研究

目的：评价鳖甲水提物和醇提物总氨基酸及寡肽类成分含量及两种提取物对单胺氧化酶（MAO）活性影响的比较研究,考察两种化学成分与药效的关系,探讨鳖甲提取工艺及有效组分。方法：分别采用水提和醇提制备鳖甲药材的提取物,分别以谷氨酸和鳖甲七肽为标准物质建立总氨基酸和寡肽类含量测定标准曲线,测定鳖甲水提物和醇提物总氨基酸和寡肽类含量,并按照单胺氧化酶试剂盒说明书测定两种提取物对体外MAO活性作用。结果：水提法和醇提法的浸膏得率分别为20.6%和5.4%;鳖甲水提物和醇提物中寡肽类含量分别（48.13±3.27）%和（20.17±2.49）%;总氨基酸含量分别为（23.68±1.76）%和（55.88±2.41）%;水提物和醇提物均具有抑制MAO活性作用,MAO抑制率分别为（65.12±1.34）%和（50.95±1.13）%。结论：鳖甲水提物浸膏得率及寡肽含量均大于醇提法;总氨基酸含量则是醇提物高于水提物。二者均有抑制MAO活性效果,且水提物的MAO抑制效果略优于醇提物;提示鳖甲中寡肽类成分和总氨基酸类成分都具有抑制MAO活性作用,且水提物效果更佳,因此鳖甲以水提为佳,推测寡肽类成分和氨基酸类成分可能均为其有效物质。     

小檗碱对肝细胞核因子4α表达及葡萄糖激酶活性的影响

目的：观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子4α（HNF4α）表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶（GK）活性的影响，探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制。方法：采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞，用不同浓度的小檗碱（0，1，3，10，30，100μmol&#183;L^-1）和1mmol&#183;L^-1二甲双胍干预24h后，采用RT-PCR方法检测HNF4αmRNA表达；采用Westernblot方法检测HNF4α蛋白的表达，同时检测GK的活性。结果：与阴性对照组相比，小檗碱在10，30，100μmol&#183;L^-1时能够明显促进HNF4α mRNA及蛋白的表达，二者同时在30μmol&#183;L^-1时达到最大值（HNF4αmRNA相对吸光度为0．48&#177;0．20，蛋白相对吸光度为3．47&#177;0．86，P〈0．01）；在10，30μmol&#183;L^-1时明显上调GK活性，同时在30μmol&#183;L^-1时达到最大值（0．080&#177;0．073，P〈0．05）；而二甲双胍对HNF4α mRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异。结论：小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4仅的表达进而调节GK活性有关。     

清脑宣窍滴丸对大鼠局灶脑缺血再灌注炎症因子含量的影响

目的：探讨清脑宣窍滴丸对大鼠局灶脑缺血再灌注组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）含量的影响。方法：21只大鼠随机均分假手术组、缺血再灌注组、清脑宣窍滴丸组，采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型，缺血1．5h，再灌注12h，Zealonga法评定神经功能缺损状况，光镜观察脑片病理形态改变，ELISA方法测定脑组织TNF-α、IL-1β、ICAM-1的含量。结果：脑缺血再灌注12h模型组病变侧大脑皮层结构层次破坏严重，神经细胞肿胀，核碎裂、溶解、固缩或消失，神经功能明显缺损，模型组中TNF-α、IL-1β、ICAM-1含量分别为（5．77±0．30），（0．91±0．14），（5．45±0．60），其异常升高与假手术组比较有显著意义（P〈0．01或P〈0．05），清脑宣窍滴丸组中TNF-α、IL-1β、ICAM-1含量分别为（3．59±0．24），（0．70±0．20），（3．75±0．46），与模型组比较明显下降（P〈0．01或P〈0．05）。结论：脑缺血再灌注TNF-α、IL-1β、ICAM-1的异常升高与组织损伤密切相关；清脑宣窍滴丸对其异常升高具有下调作用，从而有效的抑制了炎症反应，减轻脑缺血再灌注损伤。     

巴戟天水提物对人精子膜功能氧化损伤的保护作用

目的：观察巴戟天水提物对人精子膜结构和功能氧化损伤的干预作用,探讨巴戟天治疗弱精子症男性不育的作用机制。方法：采用Percoll梯度离心法优选具有正常功能的精子悬液分为正常组,模型组,阳性药对照组（维生素C组）和巴戟天水提物小、中、大剂量组,应用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶（HX-XO）体系产生活性氧（ROS）,在有氧环境下,ROS、不同剂量（0.125,0.25,0.5 g·mL^-1）的巴戟天水提物与精子悬液共同孵育后,检测精子膜脂质过氧化损伤程度,通过精子低渗膨胀试验评估精子膜功能,并与已知的抗氧化剂维生素C对照。结果：巴戟天水提物小、中、大剂量组（0.125,0.25,0.5 g·mL^-1）在相同的条件下均可提高精子悬液SOD活力,降低MDA含量,对ROS所致精子膜的氧化损伤均具有不同程度的干预作用,对精子膜功能具有一定的保护作用。其中0.125 g·mL^-1的巴戟天水提物组与维生素C组（0.25 mg·mL^-1）无明显差别,0.25,0.5 g·mL^-1的巴戟天水提物组明显优于维生素C组（P＜0.01,P＜0.001）。且巴戟天水提物的作用呈剂量依赖性,大剂量（0.5 g·mL^-1）时对精子膜功能的保护作用最显著。结论：巴戟天水提物对人精子膜的脂质过氧化损伤具有明显的干预作用,对精子膜结构和功能具有明显的保护作用。     

学《黄帝内经》辨证论治——浅谈“中风”的中医药辨证论治体会

《黄帝内经》是中医学最早，最完善的中医基础理论书籍，几千年来一直指导中医临床，特别辨证论治观点贯穿着中医学始终，有广泛的临床应用价值。中风好发于中老年人群中，临床上较为常见，多与现代医学的心、脑、血管疾病相关。适宜的中医药治疗，有着广泛的临床应用价值。     

丹参素在大鼠体内代谢产物的鉴定分析

应用UHPLC-LTQ-Orbitrap技术对丹参素在大鼠血浆和尿液中的代谢产物进行鉴定。SD大鼠灌胃给药丹参素CMC-Na混悬液后,收集其血浆和尿液,应用固相萃取法进行样品前处理。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾负离子模式下采集生物样品的质谱数据。根据精确相对分子质量以及多级质谱裂解信息,结合对照品及文献报道结果比对,最终鉴定了丹参素以及21个丹参素Ⅰ相和Ⅱ相代谢产物,同时分析了丹参素主要的体内代谢反应,如脱水、甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化、去羟基化以及相关的复合反应等。该文应用高分辨液质联用技术快速阐明了丹参素在大鼠体内的代谢产物,为今后药效物质基础和作用机制研究奠定了基础。     

米非司酮在妇科临床中的应用

米非司酮是一种合成类固醇,结构类似炔诺酮,是一种强有力的抗孕激素药物,对终止早孕、抗着床、诱发月经及促进宫颈成熟有明显作用。随着基础研究的进展及临床经验的积累,米非司酮已推广应用于各类妇科疾病及计划生育领域,取得了满意效果。现总结如下。     

药物体外肝代谢研究进展

 目的介绍药物体外肝代谢方法的最新进展。方法根据近几年的文献资料进行分析、综合、归纳。分别按肝微粒体体外温孵法及基因重组P450酶系、肝细胞体外温孵法、离体肝灌流及器官组织切片法等进行介绍。结果与结论介导药物体外代谢酶系的研究是药物体外肝代谢的研究热点，其在新药研究与开发及正确指导临床合并用药有着巨大的推动作用。     

复方柔肝中姜黄素类成分大鼠药代动力学特征

目的研究复方柔肝(黄芪、姜黄、丹参和熊胆粉)中姜黄素和双去甲氧基姜黄素在大鼠体内药代动力学特征。方法将SD大鼠随机分为3组,分别灌胃姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物、姜黄提取物、复方柔肝提取物,并采集血浆样本。利用UPLC-TQ/MS测定大鼠血浆中姜黄素和双去甲氧基姜黄素,以多反应监测方式进行正离子检测,应用DAS 3.2计算并比较各组药动学参数。结果姜黄素在姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物、姜黄提取物和复方柔肝提取物中T1/2、Tmax并无显著性差异,而复方柔肝提取物中Cmax、AUC0^T明显高于姜黄提取物、姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物,姜黄素在姜黄提取物和复方柔肝提取物中MRT0T明显高于姜黄提取物、姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物,姜黄素在姜黄提取物和复方柔肝提取物中MRT0^T略小于姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物,双去甲氧基姜黄素Tmax其他药动学参数均无显著性差异。结论复方柔肝配伍显著提高姜黄素Cmax,增加了其生物利用度,并加快双去甲氧基姜黄素体内吸收速度,但对其生物利用度影响不大。     

原儿茶酸在大鼠体内代谢产物的分析

目的分析原儿茶酸在大鼠体内的代谢产物。方法大鼠灌胃原儿茶酸-0.5%羧甲基纤维素钠混悬液后,通过超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)法分析该成分在大鼠血浆、尿液、胆汁、粪便中的代谢产物。结果在大鼠血浆、尿液、胆汁中,分别发现了9、4、1个原儿茶酸代谢产物,而粪便中未发现。结论原儿茶酸在大鼠体内吸收入血代谢,不经粪便原形排出。     

高校推进马克思主义大众化战略地图的绘制

将平衡计分卡(通过绘制战略地图)运用于高校推进马克思主义大众化这一具体实践成效的评估.在对高校推进马克思主义大众化现状和途径文献研究的基础上,提出高校推进当代中国马克思主义大众化的使命、核心价值观、愿景、战略和各层面的主要构成要素,确定高校推进当代中国马克思主义大众化的4个战略主题,且其成果主要体现为3个方面.     

生物芯片技术及在中药研究中的应用展望

生物芯片是近几年来发展起来的一种尖端技术,可用于中药药理的分析,新药的研制开发、中药鉴定,毒理观察等方面,有利于在分子生物学水平上阐明中医药治病的机制,促进中药的现代化,具有重要的科学意义和广泛的应用前景。     

蛋白质组学在中医"证"实质研究中的应用

从中医证候和蛋白质组学的特点及研究方法着手,分析了蛋白质组学引入"证"实质研究的优势与可行性,认为蛋白质组的整体性、动态性、时空性、复杂性与同样具有整体性、动态性、时相性、复杂性等特点的中医"证"有着惊人的相似,其中可能存在某种内在联系和对应关系。因此,与"证"实质研究中一般的微观指标相比,蛋白质组学有着特殊的优势,也更加符合"证"自身的特点。文章将近几年中医证候蛋白质组学的有关研究成果从技术条件、思路方法以及具体证型与蛋白质组的相关性等几个方面进行综述归纳,展示了蛋白质组学在中医"证"实质研究中的美好前景。     

植物环烯醚萜类化合物生物活性研究进展

环烯醚萜类化合物是一类重要的植物次生代谢产物,具有广泛的生物活性,作者对此类化合物的分布、生物活性进行综述。总结了环烯醚萜类化合物在糖尿病治疗、保肝、抗炎、抗菌、抗肿瘤等方面的应用,为相关药用植物的开发及该类化合物在医药领域上的进一步应用提供参考。