银杏叶提取物对大鼠肺纤维化的影响及其机制的研究

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对博莱霉素(BLM)所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法:将SD大鼠随机分对照组、BLM+NS组和BLM+GbE组,每个时间点每组6只。各组分别于给药后14,30 d处死动物。光镜下观察肺组织损伤(HE染色)和肺组织纤维化(M asson染色)的程度;采用生化法测定肺组织中胶原蛋白含量及血浆MDA含量;采用免疫组织化学法和免疫细胞化学法观察肺组织和支气管肺泡灌洗液细胞(BALF)中TGF-β1蛋白表达的变化。结果:与对照组大鼠相比,BLM+NS组大鼠各时间点各指标呈明显变化,提示模型制作成功。与BLM+NS(14 d)组大鼠相比,BLM+GbE(14 d)组大鼠血浆MDA含量,支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞TGF-β1蛋白表达显著减少;与BLM+NS(30 d)组大鼠相比,BLM+GbE(30 d)组大鼠肺组织损伤、肺组织纤维化显著减轻,肺胶原含量和血浆MDA含量显著减少,肺组织TGF-1β蛋白表达显著减少,但BALF细胞TGF-β1蛋白表达无明显变化。结论:银杏叶提取物具有抗BLM诱导的大鼠肺纤维化作用,其机制可能与减少纤维化早期(14 d)肺泡巨噬细胞和纤维化期(30 d)肺非炎症细胞TGF-β1蛋白表达及减轻BLM所致的氧化应激有关。     

中药软肺汤对肺间质纤维化大鼠细胞因子及细胞外基质的影响

目的　观察中药软肺汤对肺间质纤维化大鼠肺泡灌洗液 (BALF)中细胞因子及细胞外基质的影响。方法　用气管内注射博来霉素的方法建立大鼠肺间质纤维化模型 ,以强的松为对照 ,检测软肺汤灌胃大鼠肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF α)、转化生长因子β1 (TGF β1 )、层粘连蛋白 (LN)和透明质酸 (HA)的含量。结果　中药组BALF中TNF α、TGF β1、LN和HA的含量低于模型组 (P <0 .0 1 ) ,而且HA和LN含量少于激素组 (P <0 .0 5 )。结论　软肺汤可能是通过抑制肺纤维化细胞因子、降低细胞外基质含量而发挥治疗作用。     

凉血活血法对肺纤维化小鼠羟脯氨酸和转化生长因子-β1含量的影响

目的研究凉血活血法防治肺纤维化的作用，并探讨其作用机制。方法将雄性ICR小鼠随机分为4组：阴性对照组、肺纤维化模型组、凉血活血法组、强的松阳性对照组。经鼻滴入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型，造模8h开始常规灌胃给药。应用凉血活血法（犀角地黄汤）防治28d后进行取材及实验指标检测：用酶联免疫吸附法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子-β1（TGF—β1）含量变化，用样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸（HYP）的含量。结果肺组织病理形态学观察发现模型组小鼠肺泡炎及纤维化程度明显高于阴性对照组；与模型组比较，凉血活血法组肺组织中HYP含量显著降低（P〈0．01），BALF中TGF-β1含量显著降低（P〈0．01）。结论凉血活血法能明显减轻博莱霉素所致的小鼠肺纤维化程度，降低肺组织中HYP含量。其机制可能是通过抑制TGF—β1蛋白表达，减少胶原蛋白的产生，使肺纤维化病变减轻。     

十枣汤对肺纤维化大鼠血清TNF-α和TGF-β1浓度的影响

目的：通过检测博莱霉素所致肺纤维化大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和转化生长因子-β1（TGF-β1）浓度,探讨十枣汤对肺纤维化大鼠的治疗作用及疗效机制。方法108只雄性健康Wistar大鼠随机分为6组：空白对照、模型对照、强的松、十枣汤低剂量、十枣汤中剂量、十枣汤高剂量组,每组18只。空白对照组以气管内注入生理盐水的方法设立对照,余各组气管内注入博莱霉素建立肺纤维化模型,造模第2天始进行药物干预,第14天、28天各处死9只大鼠,采集血清,取右肺,光镜下观察肺组织病理变化,ELISA法检测血清中TNF-α和TGF-β1浓度。结果给药后第14、28天,与空白对照组相比,模型对照组出现典型肺纤维化改变,血清TNF-α和TGF-β1的浓度明显升高（P＜0.01）;与模型对照组相比,各药物治疗组肺纤维化程度明显改善,血清TNF-α和TGF-β1的浓度显著降低（P＜0.01）;十枣汤高剂量组血清TNF-α和TGF-β1的浓度较其余各组显著降低（P＜0.01）。给药第14d时,强的松组与十枣汤低、中剂量组大鼠血清TNF-α浓度无显著差异（P＞0.05）,与十枣汤中剂量组血清中TGF-β1浓度无显著差异（P＞0.05）;28天时,强的松组大鼠血清TNF-α含量较十枣汤低剂量组低,有显著差异（P＜0.05）,与十枣汤中剂量组无显著差异（P＞0.05）;强的松组与十枣汤低剂量组大鼠血清中TGF-β1浓度无显著性差异（P＞0.05）,十枣汤中剂量组比强的松组大鼠血清中TGF-β1低,有显著差异（P＜0.05）。结论十枣汤可减轻博来霉素所致肺纤维化大鼠血清中TNF-α、TGF-β1的含量,延缓肺纤维化进展,减轻肺纤维化程度。     

补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β_1表达影响的研究

目的:观察补肺汤对博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织中转化生长因子(TGF-β1)表达的影响。方法:SD大鼠96只,随机分成正常组、模型组、补肺汤治疗组和强的松组,每组24只。除正常对照组给予生理盐水外,其余各组均予气管内注射博莱霉素诱导肺纤维化。各组在造模后第2天分别予生理盐水、生理盐水、补肺汤流浸膏、强的松混悬液灌胃,并于造模后第7、14、28天分批分组处死8只大鼠。取右肺行HE染色,观察肺组织形态学变化,免疫组化观察各组大鼠肺组织中TGF-β1蛋白的表达。结果:与模型组比较,补肺汤组和强的松组的病理形态学变化明显减轻,肺泡炎及纤维化积分明显降低;肺组织TGF-β1蛋白表达明显降低(P0.01)。结论:抑制肺组织TGF-β1的表达可能是补肺汤抗肺纤维化作用的机制之一。     

黄芪多糖对继发性胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型TGF-β_1的影响

目的：观察黄芪多糖对大鼠胆管结扎肝纤维化模型TGF-β1的影响。方法：40只SD雄性大鼠采用随机分为假手术对照组（Sham,n=15）及胆汁淤积性肝纤维化模型对照组（M,n=20）及药物干预组（Y,n=20）。M及Y组采用胆总管结扎（bile duct ligation,BDL）制备胆汁淤积性肝纤维化模型,Sham组仅作胆总管分离,不作胆总管结扎。Y组于术后1周开始经灌胃给予黄芪多糖,1日1次,共4周。所有大鼠均于术后第5周处死取材。统计分析实验过程大鼠死亡率及腹水发生率,观察实验大鼠肝功能、肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量及肝组织学;采用Western blot及免疫组化观察实验大鼠肝组织TGF-β1蛋白表达。结果：与Sham组比较,M组大鼠肝功能显著异常,肝组织纤维增生程度、Hyp含量及TGF-β1蛋白表达量均显著增加（P〈0.01）;与M组比较,Y组大鼠死亡率、腹水发生率显著下降（P〈0.05）,肝功能显著改善（P〈0.01）,肝组织纤维增生程度、Hyp含量及及TGF-β1蛋白表达量显著下降（P〈0.01）。结论：黄芪多糖可有效地抑制BDL大鼠肝纤维化模型肝组织TGF-β1表达,这可能也是黄芪汤组分干预胆汁淤积性肝纤维化的主要效应机制之一。     

人工冬虫夏草联合糖皮质激素对大鼠肺纤维化的干预作用

目的:探讨人工冬虫夏草(虫草菌液)联合糖皮质激素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用.方法:50只SD大鼠,随机分为5组:正常对照组、模型组、虫草菌液组、强的松组、虫草菌液联合强的松组(联合组).采用气管内注射博莱霉素建立模型,次日起分别给药灌胃治疗,正常组和模型组给予生理盐水.第28天处死动物,肺组织标本行HE染色及MASSON染色进行病理形态学观察、Ashcroft纤维化评分,碱水解法检测肺组织HYP含量,免疫组化检测肺组织CTGF蛋白表达,酶联免疫法检测肺泡灌洗液上清TGF-β1含量.结果:与模型组相比,虫草菌液、强的松组能够降低肺组织纤维化评分,减少肺组织胶原沉积、HYP含量,下调肺组织CTGF蛋白表达,降低BLAF中TGF-的含量;联合组分别与虫草菌液组、强的松组比较,能够进一步减少肺纤维化评分、胶原面积、HYP含量,进一步下调CTGF蛋白、TGF-蛋白表达.结论:虫草菌液、强的松对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有治疗作用,且虫草菌液联合强的松能产生协同治疗效果.     

黄芪后处理对大鼠肝纤维化中的影响及TGF-β1/Smad2、p38MAPK 作用

目的：研究黄芪对CCl4 诱导的大鼠肝纤维化肝组织中TGF-β1、Smad2 和p38MAPK 表达的影响,探讨TGF-茁信号通路在黄芪后处理中可能的抗纤维化机制。方法：60 只Wistar 大鼠被随机分成对照组、模型组、黄芪后处理组及鳖甲软肝片组,其中黄芪后处理组又分为小剂量组、常规剂量组和大剂量组,大鼠背部皮下注射CCl4 构建肝纤维化模型,分别用HE 和VG 染色法染色,肝纤维化程度直接在光学显微镜下观测。同时采用SABC 免疫组化方法检测各实验组TGF-β1、Smad2 和p38MAPK 的表达情况。结果：与对照组比较,模型组TGF-β1、Smad2 表达明显增强（P < 0.05）,而p38MAPK 表达显著下降（P <0.05）。与模型组比较,黄芪后处理各组中大鼠肝组织中TGF-β1 表达均有减弱（P < 0.05）,且随着黄芪剂量的增加而减少;随着黄芪剂量增加逐步下调Smad2 的表达（P < 0.05）、上调p38MAPK 的表达（P <0.05）。此外,黄芪组大鼠肝脏病理变化显著改善。结论：黄芪后处理明显影响大鼠肝组织TGF-β1 信号表达,且对CCl4 诱导的大鼠肝纤维化的作用呈剂量依赖性增强,其可能的机制为负性调节TGF-β1,减少Smad2 及增强p38MAPK 的表达。     

黄芪提取物对肺纤维化小鼠肺泡炎症影响及抗纤维化作用研究

目的:研究黄芪多糖、黄芪总黄酮、和黄芪总皂苷对博莱霉素(BLM)诱导肺纤维化KM小鼠肺泡炎症影响及抗肺纤化的作用。方法:KM小鼠随机分为假手术组、模型组、药物处理组(黄酮组、多糖组、皂苷组、皂苷+黄酮组)共6组,模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注BLM,假手术组予等量生理盐水,造模后予相应药物或生理盐水灌胃,第28天取材;分别行肺泡灌洗液细胞计数分类,肺组织HE、Masson染色,免疫组化及western blot测TGF?β1、TNF?α表达水平。结果:1与对照组比较,模型组肺泡灌洗液(BALF)单核细胞和巨噬细胞明显增多(P<0.05),黄芪黄酮治疗组改善较明显,且优于其他成份组(P<0.05);2 Masson结果和HE结果具有高度一致性,炎症反应强度和纤维化程度成正比。黄芪总黄酮能明显改善肺纤维化炎症反应,抑制早期纤维化结节出现,黄芪多糖和黄芪皂苷改善作用不如黄芪黄酮;3模型组TNF?α、TGF?β1免疫组化阳性颗粒明显比对照组增多,与模型组比较,黄芪黄酮能有效降低TNF?α、TGF?β1水平,黄芪多糖组和黄芪皂苷组与模型组比较虽有一定改善,但是效果不如黄芪黄酮;黄芪皂苷+黄酮联合应用无协同作用;4蛋白印迹结果与免疫组化结果具有一致性。结论:黄芪黄酮能有效抑制肺纤维化炎症反应及后期的纤维化过程,该抑制作用与抑制TNF?α、TGF?β1表达具有密切关系。     

虎杖对肺纤维化大鼠肺泡灌洗液TNF-α和PDGF影响的研究

目的：动态观察虎杖对肺纤维化大鼠肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和血小板衍化生长因子（PDGF）两种细胞因子表达及肺组织病理变化的影响。方法：雄性SD大鼠,随机分成4组：正常对照组、模型组、地塞米松组、虎杖预防组。除正常对照组外,其余3组均采用博莱霉素（BLM）制作肺纤维化大鼠模型,每日灌胃给药,造模后3、7、14、28、42天取材。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测BALF中TNF-α和PDGF的含量,采用光学显微镜观察肺组织病理变化。结果：与模型组相比,地塞米松、虎杖预防组肺泡炎与肺纤维化病理程度显著降低;与模型组比较,地塞米松、虎杖预防组BALF中TNF-α和PDGF水平在早期明显下降。结论：虎杖能够降低肺组织肺泡炎和肺纤维化病理程度,下调BALF中TNF-α和PDGF水平,从而抑制或延缓博莱霉素致大鼠肺纤维化的发生和发展。     

龙血竭对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β_1 mRNA及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的观察龙血竭对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和I型胶原蛋白表达的影响,探讨其防治肺纤维化的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为模型组、治疗组和正常组各10只。模型组和治疗组大鼠气管内注入博来霉素(5mg/kg)诱导肺纤维化;正常组经气管内注入等容积0.9%氯化钠注射液。从第2d起,治疗组大鼠给予龙血竭180mg/kg灌胃;模型组和正常组以等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。所有大鼠于第29d处死。苏木素-伊红(HE)及胶原纤维(VG)染色观察肺组织病理改变和胶原沉积情况;免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连结(SP)法检测I型胶原蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-CR)检测肺组织TGF-β1mRNA的表达。结果正常组I型胶原蛋白在气管周围弱表达,模型组Ⅰ型胶原蛋白分布于支气管上皮下组织、肺间质及血管周围,且表达较对照组增加(P0.01);治疗组较模型组Ⅰ型胶原蛋白表达减弱(P0.01)。模型组TGF-β1mRNA的表达较正常组明显增高(P0.01),治疗组TGF-β1mRNA的表达较模型组明显降低(P0.01),而与正常组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论龙血竭可能通过抑制大鼠肺组织TGF-β1mRNA的表达,阻止I型胶原蛋白过度沉积,从而有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度。     

加味清营颗粒对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤模型炎性因子的影响

目的 观察加味清营颗粒对急性肺损炎性因子的影响.方法 144只wistar大鼠随机分为空白对照组,模型组,加味清营颗粒低、中、高剂量组,地塞米松组,每组24只,连续灌胃6d,尾静脉注射LPS（5 mg/kg）后于1,3,5h不同时相处死大鼠.采用ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）中炎症介质白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-10的含量变化;用Bradford检测BALF蛋白含量;HE染色观察病理切片.结果 模型组各时相炎症因子均明显高于其他各组;与模型组比较,各治疗组均可显著降低的炎症介质IL-1β、TNF-α、IL-10的表达（P＜0.05）;与地塞米松组比较,加味清营颗粒低、中、高剂量组在1h、3h时相降低IL-1β、TNF-α的表达有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比较,各治疗组均可显著降低的BALF蛋白的表达（P＜0.05）;与地塞米松组比较,加味清营颗粒各时相剂量组在降低BALF蛋白的表达方面有统计学意义（P＜0.05）;肺组织HE染色病理结果示肺泡结构破坏或实变,肺泡隔增厚显著,毛细血管充血明显,肺泡腔内、细动脉周围和细支气管壁可见成堆炎症细胞浸润,而加味清营颗粒各剂量组肺组织病理均有较大程度的改善.结论 加味清营颗粒可降低急性肺损伤时炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-10的释放,降低BALF中蛋白的含量,从而减轻肺部炎症细胞浸润,对损伤的肺组织起到修复保护的作用.     

小青龙汤对0505大鼠TGF-β1／Smad3信号通路的影响

目的：探讨小青龙汤对哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路的影响。方法：将24只SPF级sD雄性大鼠随机分为正常对照组（A组）,支气管哮喘组（B组）和小青龙汤组（c组）,每组各8只。以卵清白蛋白（OVA）致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型。小青龙汤干预支气管哮喘大鼠后,HE染色观察各组气道壁嗜酸性粒细胞浸润及气道平滑肌增生情况;应用图像分析技术测定各组肺内支气管Wat、Wam等重塑指标;免疫组织化学法检测各组肺组织TGF-β1、Smad3蛋白的表达;酶联免疫吸附（ELISA）法测定各组血清中TGF-β1的浓度。结果：B组、C组大鼠Wat、warn较A组明显增加,差异均有统计学意义（P〈0．01）,C组Wat、Warn较B组低,差异具有统计学（P〈0．01）;免疫组织化学显示B组和C组TGF-β1及Smad3蛋白的表达明显高于A组,差异具有统计学（P〈0．01）,B组高于c组,差异具有统计学（P〈0．01）;血清中TGF-β1的浓度比较,B组和c组明显高于A组,差异具有统计学（P〈0．01）,B组高于c组,差异具有统计学（P〈0．01）。结论：小青龙汤可能通过影响支气管哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路来拮抗气道重塑,从而起到治疗作用。     

苦参碱对肝纤维化大鼠转化生长因子β1表达的影响

目的：通过研究苦参碱对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1表达的影响,探讨苦参碱对肝纤维化的抑制作用。方法：CCl4诱导大鼠肝纤维化动物模型,免疫组化方法观察苦参碱对肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1表达的变化,并分别检测血清学及肝脏组织学变化。结果：与肝纤维化模型组相比,苦参碱组大鼠血清谷草转氨酶、丙氨酸转氨酶水平明显降低（P＜0.05）,HE染色未见假小叶形成,在汇管区周围,免疫组化染色显示部分肝细胞胞浆及纤维间隔区及炎性细胞浸润区转化生长因子β1的表达明显减少（P＜0.05）。结论：苦参碱可以抑制纤维化的肝组织转化生长因子β1的表达,明显改善肝纤维化大鼠的肝组织结构,抑制肝纤维化的进展。     

肠必清栓对UC模型大鼠肠黏膜内COX-2 NF-κB及TGF-β1的影响

目的：通过检测肠必清栓治疗后UC模型大鼠肠组织中COX-2、NF-κBp65、TGF-β1表达的变化,研究肠必清栓对UC的治疗机制。方法：用2,4-二硝基氯苯免疫加醋酸局部灌肠法建立的UC模型大鼠48只随机分为5组：A模型对照组（8只）、B肠必清栓低剂量组（10只）、C肠必清栓中剂量组（10只）、D肠必清栓高剂量组（10只）、E柳氮磺吡啶药物对照组（10只）另设F正常对照组（6只）。给药治疗14天后处死,留取结肠组织检测组织中细胞因子COX-2、NF-κBp65、TGF-β1的表达。结果：模型组大鼠肠组织中COX-2、NF-κBp65和TGF-β1的表达明显增高（P〈0.01）;与模型组比较,用肠必清栓治疗后,给药各组大鼠的COX-2、NF-κBp65和TGF-β1表达显著降低（P〈0.01）,肠必清栓低剂量组与中、高剂量组的COX-2、NF-κBp65和TGF-β1表达差异显著（P〈0.01）,SASP组的COX-2、NF-κBp65评分与肠必清栓低剂量组间差异无显著性意义,而TGF-β1评分与肠必清栓中、高剂量组相当无统计学差异。结论：肠必清栓可有效下调结肠组织中TGF-β1的表达并通过抑制NF-κBp65的活性而下调COX-2的表达,这可能为其治疗UC的作用机制。     

大黄素对肺纤维化大鼠TGF-β_1及smad_（3/7）信号通路的影响

目的：观察大黄素抗博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的作用机制。方法：选用健康Wistar大鼠60只,随机分为空白组、模型组、强的松组、大黄素高、中、低剂量组,采用博莱霉素气管内吹入法,制备肺纤维化模型,于实验第29天留取标本,用免疫组化技术检测转化生长因子β1（TGF-β1）及smad3、smad7的表达。结果：大黄素中、低剂量组大鼠TGF-β1、smad3表达减弱,smad7表达明显增强。结论：大黄素的中、低剂量组能够减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,其作用机制与调控TGF-β1的smad3/7信号转导蛋白表达有关。     

抗纤灵对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏纤维化基因与蛋白表达的影响

目的：利用基因芯片研究抗纤灵治疗肾小管间质纤维化的机理。方法：将18只SPF级SD大鼠中12只行unilateral ureteral occlusion（UUO）模型,随机分为模型组（UUOG）和抗纤灵组（KXLG）,另外6只为假手术组。UUO和假手术组给予生理盐水灌胃;抗纤灵组给予抗纤灵灌胃。所有大鼠均在14天处死留取左肾组织。运用定制芯片检测基因变化结果。结果：与假手术组比较。UUO组TGF-β1、smad2、smad3基因显著上调,和假手术组比较上调超过1.5倍,P〈0.01,Smad7基因显著下调,和假手术组比较下调超过1.5倍,P〈0.01。而抗纤灵组TGF-β1、smad2、smad3基因显著下调,和UUO组比较下调超过1.5倍,P〈0.01,Smad7基因显著上调,和UUO组比较上调超过1.5倍,P〈0.01。结论：发现抗纤灵能显著降低组织内TGF-β1、Smad2、Smad3基因水平,免疫组化结果也表明抗纤灵能明显降低TGF-β1/Smads介导的基因转录活性。结果提示抗纤灵能抑制性调节TGF-β1/Smads信号通路,抑制肾纤维化的发生。