地黄益智方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠细胞凋亡相关基因表达的影响

目的:观察地黄益智方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠脑细胞凋亡相关基因表达的影响。方法:120只大鼠随机分为空白组、模型组、地黄益智方小、中、大剂量组。采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-40复制老年性痴呆模型,造模24h后开始灌胃给药,连续4周。Real-Time PCR动态检测各组大鼠大脑皮层CDK6、Bax、Caspase-3表达变化;ELISA法动态检测Tau磷酸化。结果:Aβ1-40造模2周后CDK6、Bax、Caspase-3表达升高,Tau磷酸化升高;小、中、大剂量(1.2g、2.4g、4.8g浸膏/kg)地黄益智方可改善Aβ1-40诱导Tau磷酸化,以及CDK6、Bax、Caspase-3表达。结论:Aβ1-40可致老年性痴呆模型大鼠脑细胞Tau蛋白异常磷酸化,促使细胞周期调控基因CDK6、细胞凋亡调控基因Bax、caspase3表达,地黄益智方可以改善Aβ1-40导致的细胞周期、细胞凋亡基因表达。     

补肾填精方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠行为学及病理学的影响

目的:观察补肾填精方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠行为学及病理学影响。方法:84只SD大鼠随机分为空白组,模型组,补肾填精方小剂量组、中剂量组、大剂量组,双益平组。采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-40复制老年性痴呆模型。造模24h后开始连续给药3周。Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力,透射射电镜观察大鼠海马CA1区神经元、突触的变化。结果:补肾填精方可改善大鼠的学习记忆能力、改善海马CA1区神经元结构、减少突触的丧失。结论:补肾填精方能改善Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠行为学及脑组织的病理损害。     

补肾填精方对Aβ_（1-40）所致老年性痴呆模型大鼠行为学及病理学的影响

目的：观察补肾填精方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠行为学及病理学影响。方法：84只SD大鼠随机分为空白组,模型组,补肾填精方小剂量组、中剂量组、大剂量组,双益平组。采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-40复制老年性痴呆模型。造模24h后开始连续给药3周。Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力,透射射电镜观察大鼠海马CA1区神经元、突触的变化。结果：补肾填精方可改善大鼠的学习记忆能力、改善海马CA1区神经元结构、减少突触的丧失。结论：补肾填精方能改善Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠行为学及脑组织的病理损害。     

豆根管食通口服液对食管癌造模大鼠细胞周期调控因子p16、Rb、cyclin D1、CDK4的影响

目的观察豆根管食通口服液对食管癌造模大鼠细胞周期调控因子的影响,从细胞分子水平探讨该药的作用机制.方法选用健康Wistar大鼠,采用皮下注射甲基戊基亚硝胺（MANA）5mg/kg,随机分为正常组,模型对照组（模型组）,豆根管食通高、中、低剂量组,西药替加氟组（化疗组）,分别灌服生理盐水及受试药物,处死大鼠进行下列指标检测：①各组大鼠的体重及存活率变化;②各组大鼠肉眼及镜下病理组织学变化;③应用S-P免疫组化法检测大鼠食管组织p16、Rb、cyclin D1、CDK4、PCNA蛋白的表达.结果与化疗组比较,豆根管食通口服液能降低食管癌大鼠的死亡率并可恢复大鼠体重,以高剂量组最为明显（P＜0.01）.②各药物治疗组p16、Rb表达率均有不同程度的升高,以豆根管食通高剂量组升高最不明显,与模型组比较有统计学意义（P＜0.05）.③cyclin D1、CDK4在食管癌模型组表达率明显提高,与正常组比较有显著性差异（P＜0.01）.结论豆根管食通口服液对食管癌具有较好的防治作用,其抗癌作用的分子机理可能是通过上调抑癌基因p16、Rb,下调癌基因cyclin D1、CDK4的表达,阻断细胞由G1期→S期过渡,从而抑制大鼠食管癌细胞生长.     

海马注射β-淀粉样蛋白对APP mRNA的影响及加减地黄饮子的干预作用

目的:探讨SD大鼠海马立体定向注射A1β-40后APP mRNA表达的变化及加减地黄饮子对其干预作用。方法:选用100只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术对照组、模型对照组、盐酸多奈哌齐对照组、加减地黄饮子组共5组,每组20只。通过海马立体定向注射A1β-40诱导老年性痴呆动物模型。药物干预4w,第5周处死大鼠,应用实时定量PCR法检测海马组织APP mRNA表达。结果:模型组APP mRNA 2-ΔΔCt值显著高于假手术组,表明模型组APP mRNA表达上调;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和加减地黄饮子组APP mRNA 2-ΔΔCt值显著降低,表明APP mRNA表达下调。结论:大鼠大脑海马注射Aβ1-40后海马组织APP mRNA表达水平明显增高,加减地黄饮子提取物可以抑制海马组织APP mRNA的表达,从而发挥抗老年性痴呆的作用。     

补肾益智方对老年性痴呆大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞的影响

目的：比较补肾益智方与多奈哌齐对老年性痴呆大鼠的治疗作用，观察中药对老年性痴呆大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞的影响，探讨中药治疗老年性痴呆的机理：方法：在老年大鼠海马内注射凝聚态A131-42，建立老年性痴呆大鼠模型，并观察药物对该大鼠模型的学习记忆能力、海马CA1区锥体细胞的形态及数量的影响。结果：①补肾益智方、多奈哌齐可以改善老年性痴呆大鼠学习记忆能力。②补肾益智方有减轻缺血对海马CA1区锥体细胞损伤的作用。结论：①中药补肾益智方为治疗老年性痴呆大鼠的有效方；②补肾益智方治疗老年性痴呆大鼠的机理可能与减轻大鼠海马CA1区椎体细胞的损伤有关。     

加减地黄饮子对AD大鼠海马NF-κB和CRP表达的干预作用

目的:观察加减地黄饮子对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导的AD模型大鼠大脑海马组织NF-κB和CRP表达的影响。方法:采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆动物模型,分组并经加减地黄饮子和盐酸多奈哌齐治疗后,采用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术测定各组海马区NF-κB和CRP表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马区NF-κB和CRP蛋白表达显著升高;与模型组比较,加减地黄饮子组NF-κB和CRP蛋白表达明显下降。结论:加减地黄饮子可下调AD模型大鼠海马组织NF-κB和CRP表达,这可能是其抗AD的机制之一。     

豆根管食通口服液对食管癌造模大鼠细胞周期调控因子cyclin D1 CDK4 PCNA的影响

目的：观察豆根管食通口服液对食管癌造模大鼠细胞周期调控因子cyclin D1、CDK4、PCNA的影响．从细胞分子水平探讨该药的作用机制。方法：选用健康Wistar大鼠，除随机分出的空白对照组（正常组）外，其余大鼠均腹部皮下注射甲基戊基亚硝胺（MANA）5ms／kg连续20周，末次注射后将造模大鼠随机分为模型对照组（模型组）、豆根管食通高中低剂量组、西药替加氟组（化疗组），1次／天，4周后停止。应用S—P免疫组化法检测大鼠食管组织cyclin D1、CDK4、PCNA蛋白的表达。结果：①cyclin D1、CDK4在食管癌模型组表达率明显提高，与正常组比较有显著性差异（P〈0．01）。各药物治疗组cyclin D1、CDK4表达率均有不同程度的降低，管食通高剂量组和化疗组其阳性率降低更为明显，与模型组比较有统计学意义（P〈0．05）。②PCNA阳性指数在食管癌模型组明显升高，与正常组比较有显著性差异（P〈0．01）。各药物治疗组PCNA阳性指数均有不同程度的降低。尤以化疗组及管食通高刑量组降低最明显（P〈0．01）。结论：豆根管食通口服液通过下调癌基因cyclin D1、CDK4的表达，阻断细胞由G1期向S期过渡，PCNA阳性指数下降，从而抑制大鼠食管癌细胞生长。     

加减地黄饮子对Aβ-40所致痴呆大鼠学习记忆、脑酶活性的影响

用大鼠海马注射β淀粉样蛋白诱导的老年性痴呆模型,并以正常老龄鼠为空白对照,西药脑复康为阳性对照,对加减地黄饮子预防组和治疗组从行为学、单胺氧化酶(MDA)改变等方面进行了初步的实验观察,以探讨加减地黄饮子对Aβ-40所致痴呆大鼠学习记忆及MDA活性影响.实验证明造模大鼠较好地模拟了老年性痴呆行为学表现和MDA改变;加减地黄饮子可改善老年性痴呆大鼠行为学功能,并能降低单胺氧化酶的活性.     

复方地黄防治AD大鼠海马CA1区神经元突触超微结构改变的实验研究

目的:研究复方地黄对AD大鼠海马CA1区神经元突触超微结构改变的影响.方法:在腹腔注射D-半乳糖造成大鼠衰老的基础上,海马注射Aβ1-40造成拟老年性痴呆学习记忆损害模型,灌胃复方地黄水溶液,观察突触超微结构变化.结果:大鼠跳台筛选模型,统计复方地黄对老年性痴呆大鼠海马神经元突触超微结构的影响.结论:复方地黄能够保护神经元突触超微结构,对老年性痴呆大鼠学习记忆能力有增强和提高作用.     

Aβ1-40脑内注射对大鼠海马AchE和NOS1表达的影响及加减地黄饮子的干预作用

目的:观察加减地黄饮子对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导的AD模型大鼠大脑海马组织AchE和NOS1表达的影响。方法:采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)动物模型。采用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术测定海马区AchE和NOS1表达。结果:模型组(6.42±0.38)AchE表达与假手术组(6.74±0.47)比较无显著性差异。与模型组比较,加减地黄饮子组(3.77±0.29)AchE表达明显减少,作用效应较盐酸多奈哌齐(2.25±0.20)弱。与假手术组(5.74±0.39)相比,模型组大鼠海马区NOS1表达下降(2.38±030),与模型组比较,地黄饮子组NOS1的表达增加(4.43±0.40),作用优于盐酸多奈哌齐(3.56±0.27)。结论:加减地黄饮子可通过抑制AD模型大鼠海马组织AchE和上调AD模型大鼠海马组织NOS1表达而发挥抗AD的作用。     

益智醒脑方对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及炎症因子的影响

目的:评估益智醒脑方对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及对白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:将90只老年Wistar大鼠随机分为六组含高剂量益智醒脑方组(高剂量组)、中剂量益智醒脑方组(中剂量组)、低剂量益智醒脑方组(低剂量组)、正常组、模型组及西药组,每组15只,除了正常组其余各组均进行Aβ_1-42造模制备成阿尔茨海默病大鼠。观察各组大鼠学习记忆力、海马APP、VPS35、SorLA的表达及海马炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平。结果:高剂量组及正常组穿越平台次数高于模型组、西药组、中剂量组及低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05); 高剂量组逃避潜伏期低于模型组、正常组、西药组、中剂量组及低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常组APP、VPS35、SorLA的表达均高于高剂量组、模型组、西药组、中剂量组及低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常组IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于高剂量组、模型组、西药组、中剂量组及低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益智醒脑方能够改善阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力,降低IL-1β、IL-6、TNF-α水平。     

地黄益智方对APP/PS1双转基因小鼠海马神经元凋亡和Nrf2通路蛋白的影响

目的观察地黄益智方对APP/PS1转基因小鼠海马神经元凋亡及Nrf2/ARE通路蛋白表达的影响。方法以APP/PS1双转基因小鼠为阿尔茨海默病模型动物,给予盐酸多奈哌齐（西药组）和地黄益智方干预12周,TUNEL染色检测细胞凋亡,试剂盒检测Caspase-3活性,ELISA检测血清核因子E₂相关因子2（Nrf2）,血红素加氧酶1（HO-1）和醌氧化还原酶1（NQO1）。结果 TUNEL染色发现模型组细胞核皱缩,神经元凋亡多于正常组（P<0.001）;西药组及地黄益智方各剂量组凋亡神经元均少于模型组（P<0.01）。模型组Caspase-3活性高于正常组（P<0.001）,西药组及地黄益智方各剂量组Caspase-3活性较模型组降低（P<0.05）。模型组Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达均低于正常组,西药组及地黄益智方各剂量组Nrf2、HO-1和NQO1水平升高（P<0.05）。结论地黄益智方可以抑制APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠海马神经元凋亡,其机制可能与调控Nrf2/ARE信号通路,上调HO-1和NQO1,抑制Caspa...     

乌芩健脑方对痴呆模型大鼠海马CDK5和GSK-3表达的影响

目的:考察乌芩健脑方对Aβ海马注射致痴呆模型大鼠海马细胞周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinases-5,CDK5)和糖原合成激酶3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)表达的影响。方法:用聚集状态的Aβ25-35大鼠双侧海马注射建立AD模型,药物干预后,采用Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力,采用免疫组化的方法检测大鼠海马CDK和GSK-3的表达和平均光密度。结果:乌芩健脑方18.48g/kg、9.24 g/kg和4.63 g/kg三个剂量组能显著缩短逃跑潜伏期和第三象限时间,延长第一相限时间和平台停留时间的作用,与模型对照组比较有显著的统计学意义;乌芩健脑方18.48g/kg和9.24 g/kg剂量组海马区CDK5表达较模型对照组显著降低,18.48g/kg、9.24 g/kg和4.63 g/kg三个剂量海马GSK-3的表达均较模型对照组表达显著降低,有显著的统计学意义。结论:乌芩健脑方具有较好的改善痴呆大鼠模型学习记忆功能的作用,并能显著抑制海马区CDK5和GSK-3的异常高表达,提示其抗AD的作用机制可能与通过抑制异常高表达的cdk5和GSK-3,阻止tau蛋白的过度磷酸化有关。     

加减地黄饮子对老年性痴呆模型大鼠Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)大鼠海马双侧注射后大脑组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的变化及加减地黄饮子的干预作用。方法采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组Bax2-ΔΔCt显著升高,而Bcl-22-ΔΔCt显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、加减地黄饮子组Bax2-ΔΔCt显著降低(P<0.05),而加减地黄饮子组Bcl-22-ΔΔCt显著升高(P<0.05)。结论海马注射Aβ1-40可诱导大鼠脑组织BaxmRNA表达上调和Bcl-2表达下调,而加减地黄饮子可通过抑制海马组织BaxmRNA的表达和促进Bcl-2mRNA表达,进而起到减少神经细胞凋亡的作用。     

截断逆挽方对慢加急性肝衰竭大鼠cyclin D-E2F1信号通路及转录因子活化的机制研究

目的探寻"截断逆挽方"对cyclin D-E2F1信号通路上相关转录因子的作用及该通路对慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)模型大鼠的作用机制。方法将105只Wistar大鼠随机分为正常组5只(生理盐水注射)、造模组100只予人血清白蛋白诱导肝纤维化联合D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)/脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)急性攻击,建立ACLF成模大鼠30只。将成模大鼠随机分为模型5、10、15天组(24小时后予生理盐水连续灌胃)和截断逆挽方5、10、15天组(24小时后予截断逆挽方连续灌胃),每组5只。检测各组大鼠血浆凝血酶原活动度(prothrombinase activity,PTA)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)水平,用HE染色观察肝脏病理学变化,用蛋白免疫印迹法检测转录因子DP1蛋白表达,用Real-time PCR检测cyclin D1、cyclin D2、cyclin D3、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase4,CDK4)及细胞周期蛋白依赖性激酶6(cyclin-dependent kinase6,CDK6) mRNA的表达。结果与正常组相较,模型组大鼠血浆PTA水平显著降低,ALT、AST、TBIL水平明显升高;与同一时间模型组相较截断逆挽方10天、15天组血浆PTA明显升高,ALT、AST有所降低,cyclin D1、cyclin D2、cyclin D3、CDK4、CDK6 mRNA、DP1蛋白表达均有不同程度的上调(P<0.05)。结论截断逆挽方减轻ACLF模型大鼠肝损伤,恢复肝脏功能的作用机制可能与其上调了cyclin D-E2F1信号通路上肝细胞再生相关转录因子介导的肝细胞增殖有关。     

截断逆挽方含药血清对D-氨基半乳糖诱导的人正常肝细胞LO2细胞增殖影响

目的研究截断逆挽方含药血清通过调控E2F1介导的细胞增殖途径减轻D-氨基半乳糖(D-Galactosamine,D-GlaN)诱导的人正常肝细胞LO2的损伤。方法体外培养LO2细胞,以D-GlaN进行造模,将细胞分为正常组、模型组、2.5%截断逆挽方含药血清组(2.5%JDNWF)、5%截断逆挽方含药血清组(5%JDNWF)、10%截断逆挽方含药血清组(10%JDNWF)。采用Cell Counting Kit-8(CCK8)法检测细胞活力;Real-time PCR检测转录因子E2F1、细胞周期蛋白E(cyclin E)、细胞周期蛋白A(cyclin A)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)、细胞分裂周期因子25A(cell division cyclin 25A,CDC25A)mRNA的表达;流式细胞术检测细胞周期;Western Blot检测分化调控因子DP1蛋白表达。结果截断逆挽方含药血清能显著促进LO2细胞进入S期(P<0.01),上调E2F1、cyclin E、cyclin A、CDK2、CDC25A mRNA的表达(P<0.01),并且能增加DP1蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论截断逆挽方减轻肝细胞损伤的作用机制可能与其促进肝细胞增殖有关。     

补肾活血方对精索静脉曲张大鼠生精功能的影响

目的：基于细胞周期调控因子细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(cdk4)的表达探讨补肾活血方改善精索静脉曲张大鼠生精功能的机制。方法：将30只大鼠随机均分为假手术组，模型组，补肾活血方低、中、高剂量组，每组各6只。建立左侧精索静脉曲张模型，造模成功后补肾活血方低、中、高剂量组分别灌胃补肾活血方药液6、12、24 g/kg·d^-1,其余2组灌胃10 ml/kg·d^-1的0.9%氯化钠注射液，灌胃30 d。检测精子浓度、活力、畸形率及DNA碎片率，HE染色观察睾丸组织形态，免疫组化分析睾丸cyclin D1、cdk4表达。结果：在大鼠浓度、精子活力、精子畸形率、精子DNA碎片率、睾丸病理评分及cyclin D1、cdk4表达方面模型组与假手术组比较，补肾活血方低、中、高剂量组与模型组比较，差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);补肾活血方低、中、高剂量组精子浓度、活力、畸形率、DNA碎片率组间比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。结论：补肾活血方可能通过调控cyclin D1、cdk4表...     

针刺对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡的影响

目的：观察针刺对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后海马神经元内细胞周期因子（cyclin D1，CDK4）和神经元凋亡的影响。方法：大脑中动脉线栓法建立脑缺血再灌注损伤模型，应用免疫印迹法和流式细胞计数分别检测细胞周期因子和细胞凋亡。结果：再灌注48小时后海马细胞周期因子（cyclin D1，CDK4）表达升高，凋亡细胞增多，针刺组cyclin D1，CDK4表达和凋亡细胞明显减少（P〈0．01）。结论：针刺对脑缺血再灌注损伤有防护作用，其机制可能与调控细胞周期因子从而抑制凋亡有关。     

清心开窍方有效成分对AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达的影响

目的:探讨清心开窍方有效成分对AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达的影响。方法:动物实验采用对照观察法。雄性SD大鼠112只,称体质量后按随机数字表分为7组:正常组、假手术组,模型组、安理申组,皂苷组、挥发油组、多糖组,每组16只。采用双侧海马注射Aβ1-40制造AD大鼠模型,造模后第2天开始灌胃,连续灌胃2周(每天上午10点开始),清心开窍方皂苷组、清心开窍方挥发油组、清心开窍方多糖组剂量分别是9、3.33、8.33 m L/(kg·d),安理申组给药剂量为1.67 mg/(kg·d),予对照组和模型组等体积生理盐水。2周后,采用免疫组化、实时定量荧光PCR及WB法检测AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达。结果:清心开窍方各有效成分组大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达水平降低,与对照组比较差异非常显著(P0.01,P0.05)。结论:清心开窍方有效成分可能是通过降低海马区IL-1β、GFAP及Aβ的表达发挥抗AD的作用。